... (PMWaV) thực chất phức hợp loại virus PMWaV-1 PMWaV-2 Dựa vào đặc điểm di truyền, hai loại virus xếp vào họ Closterovirus, loài Ampelovirus, giống Vinivirus Các phân tích phát sinh loài trình tự gene ... ngoài, phát triển bình thường, gây khó khăn việc nhận dạng phát bệnh Hiện nay, phương pháp RT -PCR (Reverse Trascription – Polymerase Chain Reaction) TBIA (Tissue Blot Immunoassay) sử dụng để phát ... TP HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT -PCR PHÁTHIỆNVIRUS PMWaV-1 (Pineapple mealybug wilt associated virus- 1) GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE LUẬN VĂN KỸ...
... (PMWaV) thực chất phức hợp loại virus PMWaV-1 PMWaV-2 Dựa vào đặc điểm di truyền, hai loại virus xếp vào họ Closterovirus, loài Ampelovirus, giống Vinivirus Các phân tích phát sinh loài trình tự gene ... ngoài, phát triển bình thường, gây khó khăn việc nhận dạng phát bệnh Hiện nay, phương pháp RT -PCR (Reverse Trascription – Polymerase Chain Reaction) TBIA (Tissue Blot Immunoassay) sử dụng để phát ... TP HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT -PCR PHÁTHIỆNVIRUS PMWaV-1 (Pineapple mealybug wilt associated virus- 1) GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE LUẬN VĂN KỸ...
... (PMWaV) thực chất phức hợp loại virus PMWaV-1 PMWaV-2 Dựa vào đặc điểm di truyền, hai loại virus xếp vào họ Closterovirus, loài Ampelovirus, giống Vinivirus Các phân tích phát sinh loài trình tự gene ... ngoài, phát triển bình thường, gây khó khăn việc nhận dạng phát bệnh Hiện nay, phương pháp RT -PCR (Reverse Trascription – Polymerase Chain Reaction) TBIA (Tissue Blot Immunoassay) sử dụng để phát ... TP HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT -PCR PHÁTHIỆNVIRUS PMWaV-1 (Pineapple mealybug wilt associated virus- 1) GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE LUẬN VĂN KỸ...
... ca PCR a mi xỏc nh Salmonella trc tip t phõn Xỏc nh c hiu ca PCR a mi xỏc nh Salmonella trc tip t phõn 10 CHUN ON BNH GIA SC, GIA CM BNG SINH HC PHN T u im ca PCR a mi: Thnh phn PCR - PCRPCR ... sn phm PCR X lý s liu IV KT QU NGHIấN CU Xỏc nh nhy ca PCR a mi CHUN ON BNH GIA SC, GIA CM BNG SINH HC PHN T Xỏc nh c hiu ca PCR a mi V BN LUN nhy ca PCR a mi Xỏc nh c hiu ca h thng PCR a ... mỏy múc dựng PCR Phng phỏp nghiờn cu 3.1 nhy ca PCR a mi xỏc nh Salmonella trc tip t phõn a.Qui trỡnh tỏch chit ADN trc tip t phõn b Xỏc nh nhy ca h thng PCR a mi 3.2 c hiu ca PCR a mi 3.3...
... ca PCR a mi xỏc nh Salmonella trc tip t phõn Xỏc nh c hiu ca PCR a mi xỏc nh Salmonella trc tip t phõn 10 CHUN ON BNH GIA SC, GIA CM BNG SINH HC PHN T u im ca PCR a mi: Thnh phn PCR - PCRPCR ... sn phm PCR X lý s liu IV KT QU NGHIấN CU Xỏc nh nhy ca PCR a mi CHUN ON BNH GIA SC, GIA CM BNG SINH HC PHN T Xỏc nh c hiu ca PCR a mi V BN LUN nhy ca PCR a mi Xỏc nh c hiu ca h thng PCR a ... mỏy múc dựng PCR Phng phỏp nghiờn cu 3.1 nhy ca PCR a mi xỏc nh Salmonella trc tip t phõn a.Qui trỡnh tỏch chit ADN trc tip t phõn b Xỏc nh nhy ca h thng PCR a mi 3.2 c hiu ca PCR a mi 3.3...
... mồi không đặc hiệu với hệ gen vật chủ (iii) đối chứng dương chứng tỏ phản ứng PCR có mạch khuôn đặc hiệu với mồi Trên sở qui trình RT -PCR (Cowley et al., 2000) phát GAV tôm qui trình RT -PCR phát ... trình mRT -PCR phát đồng thời GAV Beta–actin Hình 3: Kết chạy PCR theo qui trình mRT -PCR phát GAV Beta–actin tôm Giếng M: thang đo; giếng 1: đối chứng âm; Giếng 2: mẫu chạy theo qui trình RT -PCR (Cowley ... phút; giữ 20 C 10 phút KẾT QUẢ 3.1 Thực qui trình RT -PCR phát GAV tôm sú theo phương pháp Cowley Hình 1: Kết PCRphát GAV theo qui trình RT -PCR (Cowley et al., 2000) M: Thang đo; 1: Đối chứng...
... 2.1 Kết phát DNA HBV pháp đo mật độ quang (OD) bớc sóng 260nm, 280nm, tiến hành phản ứng PCR, kiểm tra xác định PCR điện di thạch Agarose Bảng 2: PCRphát DNA huyết đối tợng có HBsAg(-) Phát DNA ... HBsAg(+) n Bảng 1: PCRphát DNA huyết đối tợng HBsAg(+) PCR n DNA HBV (+) DNA HBV (-) 30 30 Nhận xét: 30 trờng hợp HBsAg(+) phát đợc DNA HBV Phát DNA HBV mẫu huyết có HBsAg(-) PCR DNA HBV (+) DNA ... đạo đến khám sức khỏe máu có HBsAg(-) iv Bàn luận PCR kỹ thuật sinh học phân tử có độ xác cao để phát genom virus HBV, nghĩa phát đợc có mặt virus ngời bị nhiễm lúc cha có kháng nguyên kháng...
... chủng virut phân lập năm 2002 cặp mồi đặc hiệu với chủng virut có ký hiệu 02VN208 (sản phẩm PCR khoảng 400 bp) 15 TCNCYH 29 (3) - 2004 Ghi cột gen kiểm tra sản phẩm PCR Agarose 1%: 1: Thang chuẩn ... and human isolates were confirmed positive by the primer pair indicating the virus to be a new Arbovirus Nam Dinh virus was named after patients locality Further study on serology, ultramorphology ... TCNCYH 29 (3) - 2004 Cặp mồi đặc hiệu với chủng virut có ký hiệu 02VN208 đợc thiết kế từ chuỗi kéo dài để tổng hợp sản phẩm PCR khoảng 400 bp Hoá chất cho kỹ thuật nhuộm...
... quy trình RT -PCR xây dựng được, tiến hành giám định PMWaV-1 90 mẫu chồi giống dứa Cayenne thương phẩm thuộc giống Thái Lan, Trung Quốc, Lâm Đồng, giống gồm 30 chồi thực phản ứng RT -PCR đọc kết ... cấp giống chủ yếu cho chiến lược phát triển dứa Cayenne năm gần Tỷ lệ nhiễm PMWaV-1 cao hai nguồn giống cho thấy nguy lớn bệnh héo đỏ đầu tiềm ẩn vùng dứa vừa phát triển Nguy tạo áp lực lớn cho ... cho phát triển bền vững ngành dứa Việt Nam 58 Phần4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Với kết ghi nhận sau thực đề tài, đến kết luận sau: Đã ly trích RNA tổng số từ mẫu dứa Quy trình RT-PCR...
... chu kỳ RT -PCR thích hợp Chú thích: L: Ladder Giếng 1: sản phẩm RT -PCR với 41 chu kỳ Giếng 2: sản phẩm RT -PCR với 42 chu kỳ Giếng 3: sản phẩm RT -PCR với 43 chu kỳ Giếng 4: sản phẩm RT -PCR với 44 ... hoàn toàn đặc hiệu phù hợp cho phản ứng RT -PCR phát PMWaV-1 4.2.2 Kết xác định chu trình nhiệt tối ưu Ở bước đầu thực phản ứng RT -PCR, thực quy trình RT -PCR theo Sether cộng sự, (2001) (chu trình ... giá xác diện PMWaV-1 Như vậy, kết luận quy trình RT -PCR xây dựng hoàn toàn đủ độ tin cậy việc phát PMWaV-1 Hình 4.5: Sơ đồ phản ứng RT -PCR phát PMWaV-1 ...
... quan sát đèn cực tím 39 3.2.3 Xây dựng quy trình RT -PCR 3.2.3.1 Kiểm tra độ đặc hiệu primer Trước dùng làm mồi đặc hiệu cho phản ứng RT -PCR phát PMWaV-1, cặp primer 225, 226 kiểm tra cấu trúc ... chu kỳ phản ứng tối ưu Phản ứng RT -PCR thực mức 41, 42, 43, 44, 45 chu kỳ để xác định số chu kỳ cho hiệu khuếch đại tối ưu 3.3.4 Điện di sản phẩm RT -PCR Sản phẩm PCR đem điện di gel agarose 1.5% ... Đoạn khuếch đại 589bp Hình 3.2: Sơ đồ phản ứng RT -PCR khuếch đại đoạn gene HSP 70 PMWaV-1 cặp primer 225, 226 Các hóa chất khác thuộc kit Access RT -PCR System (Promega) gồm: - AMV / Tfl Buffer (5X)...
... cộng phát minh 1985 liên tục hoàn thiện phát triển thời gian gần Kỹ thuật PCR cho phép khuyếch đại đoạn DNA mong muốn lên nhiều lần để phục vụ cho nhiều mục đích khác Nguyên tắc phương pháp PCR ... (đoạn mồi) Primer yếu tố quan trọng nhất, ảnh hưởng trực tiếp đến hiệu độ chuyên biệt phản ứng PCR Chọn primer giai đoạn định phản ứng PCR cần tuân theo số nguyên tắc sau: - Primer cho phản ứng PCR ... chế phản ứng - Các vừa tổng hợp không kết hợp với mồi mà bắt cặp với (Phan Cự Nhân, 2001) 2.9 Phương pháp RT -PCR (Reverse Transcription PCR) RT -PCR kỹ thuật cho phép ta khuếch đại đoạn mRNA (RNA...