... 108 Chương 8: TẾBÀOCHỦ VÀ VECTOR 109 §1 TẾBÀOCHỦ 109 §2 VECTOR 111 §3PHƯƠNGPHÁPCHUYỂNVECTORTÁITỔHỢPVÀOTẾBÀOCHỦ 122 THẢO LUẬN ... phân tử chu kì tếbào M Pha phân chia G1: Pha sau phân chia, chuẩn bị tổng hợp chất, chuẩn bị tổng hợp ADN S: Pha tổng hợp diễn trình tái ADN G2: Pha trước phân chia tế bào, diễn tổng hợp tubulin ... plasmid (vi khuẩn) Các quan tử tham gia vào trình sinh tổng hợp protein tếbàoTếbào đơn vị cấu trúc chức thể sống, tếbào đơn vị di truyền Hệ gene toàn hộ gene tếbào thể sinh vật, hệ gene hứa toàn...
... Kháng thể táitổhợp ứng dụng Công nghệ kháng thể táitổhợpbao gồm việc thu nhận gene kháng thể từ tếbào nguồn, nhân tách dòng gene vector thích hợp, biến nạp vectorvàotếbàochủ để biểu ... chúng thích hợp y học ứng dụng khác Một ưu khác kháng thể táitổhợp biểu thể chủ Một thể chủ để tổng hợp kháng thể táitổhợp E.coli Do ưu điểm bật nó: tếbào phát triển nhanh rẻ Nhiều vector sử ... nhập vàotếbào vi khuẩn, mượn máy tếbào vi khuẩn để tạo nhiều giống hệt vector ban đầu Vector gọi phương tiện vận chuyển gene Như vậy, phân tử DNA mạch kép có khả tự chép tếbào vật chủ, gắn vào...
... đoạn ADN vàovector để tạo vectortáitổhợp (4) Biến nạp vectortáitổhợpvàotếbàochủ (5) Tếbàochủ nuôi cấy môi trường đặc hình thành nên dòng 128 Hình 9.2 Tách dòng ADN táitổhợp Ứng ... plasmid (2) Tếbàochủ nhận plasmid gene ngoại lai xen vào; (3) Tếbàochủ nhận dược vectortáitổhợp Chính kĩ thuật tách dòng cần phải xác định dược dòng tếbàochủ chứa vectortáitổhợp Có thể ... thư viện cADN: (1) Chọn vector (2) Tách chiết mARN (3) Tổng hợp cADN nhờ enzyme mã ngược (4) Tạo vectortáitổhợp gồm plasmid cADN (5) Biến nạp vectortáitổhợpvàotếbào vi khuẩn (6) Nuôi cấy...
... novW vo vector pET-32a(+) thit k vector biu hin ta dựng vector pET-32a(+) l vector biu hin Quỏ trỡnh chuyn gen novW vo vector pET -32a c thc hin theo s hỡnh 15 tỏch c gen novW, Ta ct vector ... thit k vector biu hin ti c thc hin theo cỏc bc c bn sau: Thc hin phn ng PCR gen novW Chuyn gen novW vo vector pGEM 7+ Gii trỡnh t gen novW Thit k vector biu hin ta s dng vector pET-32a(+), l vector ... LB cú b sung thờm khỏng sinh( 1mg/1l) 2.3.2 Vector v plasmids tỏi t hp Nhng vector v plasmids tỏi t hp c s dng nghiờn cu l: Vector pGEM7 +, dựng lm vector cloning sn phm PCR, xut x t hng Promega,...
... dụng lại, kích hoạt Avira Antivirus lên cách kích đúp chuột vào biểu tượng chương trình khay hệ thống Từ giao diện chính, bạn truy cập vào menu Update>Manual Update duyệt đến thư mục lưu file vdf ... thành cài đặt Offline, giúp cải thiện tốc độ cập nhật đáng kể Sau tải về, bạn giải nén kích đúp vào tập tin thực thi để kích hoạt chương trình mà không cần cài đặt Từ giao diện chương trình, khung...
... nâng cao khả sinh tổng hợp chủng tự nhiên cách tạo chủng vi sinh vật táitổhợp đƣợc tập trung nghiên cứu, số công bố tạo thành công chủng Escherchiasa coli, Pichia pastoris táitổhợp mang gen mã ... nạp vào nấm men P pastoris X33 xung điện Tách plasmid từ chủng táitổhợp P pastoris X33/pPICZA::chi để thực phản ứng kiểm tra tính xác vector đƣợc biến nạp 2.2.11 Biến nạp vectortáitổhợpvào ... lai chứa plasmid táitổhợp có khả tích hợpvào hệ gen P pastoris nhờ trình tiếp hợp trao đổi chéo, vậy, làm tăng tính ổn định gen tếbàochủ P pastoris có khả tiết protein ngoại bào lớn đƣợc sử...
... ba enzyme ny kim tra on xen vector tỏch dũng Ngoi vector pTZ57R/T cũn cú mt s thnh phn khỏc, cỏc thnh phn ca vector pTZ57R/T c th hin bng: Bng 6: Cỏc thnh phn ca vector pTZ57R/T Thnh phn Vai ... phộp khuch i chớnh xỏc trỡnh t ca gene gltA t h gene ca vi khun E coli 3.1.3.2 Vector tỏch dũng Vector pTZ57R/T l vector tỏch dũng TA, cú kớch thc 2886 pb, c thit k da vo hot tớnh terminal transferase ... dũng gene gltA - Gn gene vo vector tỏch dũng pTZ57R/T bng enzyme T4 - DNA ligase - Bin np vector tỏi t hp vo chng E coli DH5 kh bin - Tỏch chit DNA plasmid - Ct kim tra vector tỏi t hp bng enzyme...
... TTAACGATGAGTCGTCATAATGG3 - Vector tỏch dũng pLUGđ TA-cloning (Intronbiotechnology) Vector tỏch dũng pLUGđ TA-cloning l mt nhng vector c s dng ph bin tỏch dũng gene hin Vector pLUGđ TA-cloning cú ... thc nh (Dng, 2003) Vector tỏi t hp c gn sn phm PCR nờn kớch thc ln hn vector gc (t úng vũng) khụng mang on xen Vỡ vy, khong cỏch di chuyn gel in di ca vector i chng xa hn vector tỏi t hp Kt qu ... mang gene crtY 31 Trong thit k vector pLUG cú v trớ HindIII nm sỏt u treo T, ú sn phm ct vector tỏi t hp ớch s cho bng DNA, mt bng cú kớch thc gn 3kb tng ng vi vector pLUG v mt bng cú kớch thc...
... NGHỆ SINH HỌC chuyểnvàovector có chứa promotor mạnh ( ermE*), sau chuyểnvàotếbào vật chủ để tạo chủng táitổhợp tăng khả sinh tổng hợp Doxorubicin cao gấp 3-4,3 lần so với tếbào ban đầu ... gen điều hòa chuyểnvàovector có chứa promotor mạnh ( ermE*), sau chuyểnvàotếbào vật chủ để tạo chủng táitổhợp tăng khả sinh tổng hợp Doxorubicin cao gấp 3-4,3 lần so với tếbào ban đầu ... nhận ADN táitổhợp chọn lọc phát môi trường chọn lọc riêng biệt.Để biến nạp vector mang ADN đích vàotếbào vật chủ cần phải thực tạo tếbào khả biến biến nạp vàotếbào vật chủphươngpháp sốc...
... mạch chủ hay xảy vào buổi sáng từ – 10 giơ Mùa lạnh tần suất bóc tách động mạch chủ cao 70- 80 % trường hợp bóc tách động mạch chủ có cao huyết áp CÁc bệnh lý động mạch chủ van động mạch chủ lá, ... lớp nội mạc động mạch 65% trường hợp chỗ rách lớp nội mạc xảy động mạch chủ lê, 25% trường hợp xảy động mạch chủ xuống, 10% động mạch chủ bụng % cung động mạch chủ Có băng chứng thuyết phục cho ... mạch chủ xuống Type IIIa khu trú động mạch chủ ngực xuống Type IIIb lan tới động mạch chủ bụng Phân loại Stanford đưa năm 1970 dựa đoạn động mạch chủ bò bóc tách Type A: Bóc tách động mạch chủ...
... –65% trường hợp chỗ rách lớp nội mạc xảy động mạch chủ lên, –25% trường hợp xảy động mạch chủ xuống, –10% động mạch chủ bụng –5 % cung động mạch chủ Lớp nội mạc bò rách vò trí động mạch chủ có độ ... thúc đẩy động mạch chủ bò bóc tách Tổn thương tưới máu 31% trường hợp Triệu chứng lâm sàng Đau: 93% trường hợp có đau ngực, 85% trường hợp đau xuất đột ngột Đa số trường hợp đau lan sau lưng, ... •Thường xảy vào buổi sáng từ – 10 •Mùa lạnh tần suất bóc tách động mạch chủ cao 70- 80 % trường hợp bóc tách động mạch chủ có cao huyết áp Dòch tễ •Nguyên nhân người trẻ: •Van động mạch chủ lá,...
... thích hợp cho lai ghép đoạn DNA sau vector trì đợc khung dịch mã vector đoạn DNA đợc chèn vàoVectortáitổhợp pRSET đợc chuyểnvào E coli TOP 10F để nhân dòng trì Muốn biểu protein táitổhợp ... thiết cho tổng hợp protein táitổ hợp, có mặt IPTG tếbào đợc cảm ứng để biểu T7 RNA polymerase mức độ cao làm tăng tổng hợp protein táitổhợp 15 1.3.1.3 Vectorchuyển gen thực vật 1.3.1.3.1 ... biết cho trình chuyển T-ADN vàotếbào thực vật đoạn đầu biên bên phải có chứa yếu tố cis, cần thiết cho trình chuyển T-ADN vàotếbàochủ Đoạn đầu biên bên trái giữ vai trò để trình chuyển T-ADN...
... vàotếbào chủ: Chuyển phơng pháp biến nạp, với mục đích qua tếbàochủ vectơ táitổhợp đợc nhân lên với số lợng lớn Các tếbàochủ đợc chọn phù hợp với vectơ táitổ hợp, thờng tếbào E.coli + ... vectơ táitổ hợp: Trộn vectơ tách dòng đoạn ADN cần gắn với tỉ lệ xác định, có tham gia ADN ligase để tạo vectơ táitổhợp ADN gắn vào vectơ hai đầu tơng ứng + Chuyển vectơ táitổhợpvàotếbào chủ: ... với số lợng lớn Đầu tiên, gắn gen mong muốn vào vectơ tách dòng để tạo nên vectơ táitổhợp sau chuyển vectơ táitổhợpvàotếbàochủ Trong tếbào chủ, vectơ tách dòng đợc nhân lên số lợng lớn...
... dụng máy tếbàochủ để chép vectơ táitổhợp thành số lợng lớn Tuỳ vào mục đích sử dụng, ngời ta chọn tếbàochủtếbào E coli hay tếbào nấm men - Chọn dòng Chọn lọc vi khuẩn táitổhợp theo ... đợc nối vào vectơ nhằm tạo ADN táitổhợp Vectơ sử dụng plasmit thích ứng vi khuẩn E coli Sau vectơ táitổhợp đợc biến nạp vàotếbàochủ 12 tếbàochủ đợc nuôi cấy môi trờng thích hợp để nhân ... ligase 7,5 0,5 Tổng 20 Hỗn hợp đợc ủ nhiệt độ phòng sau đợc biến nạp vàotếbào khả biến E.coli DH5 2.2.5 Biến nạp vectơ tái tổi hợpvàotếbào E.coli DH5 + Chuẩn bị tếbào khả biến: Tếbào E.coli...
... thích hợp cho lai ghép đoạn DNA sau vector trì đợc khung dịch mã vector đoạn DNA đợc chèn vàoVectortáitổhợp pRSET đợc chuyểnvào E coli TOP 10F để nhân dòng trì Muốn biểu protein táitổhợp ... thiết cho tổng hợp protein táitổ hợp, có mặt IPTG tếbào đợc cảm ứng để biểu T7 RNA polymerase mức độ cao làm tăng tổng hợp protein táitổhợp 15 1.3.1.3 Vectorchuyển gen thực vật 1.3.1.3.1 ... biết cho trình chuyển T-ADN vàotếbào thực vật đoạn đầu biên bên phải có chứa yếu tố cis, cần thiết cho trình chuyển T-ADN vàotếbàochủ Đoạn đầu biên bên trái giữ vai trò để trình chuyển T-ADN...
... vàotếbào chủ: Chuyển phơng pháp biến nạp, với mục đích qua tếbàochủ vectơ táitổhợp đợc nhân lên với số lợng lớn Các tếbàochủ đợc chọn phù hợp với vectơ táitổ hợp, thờng tếbào E.coli + ... vectơ táitổ hợp: Trộn vectơ tách dòng đoạn ADN cần gắn với tỉ lệ xác định, có tham gia ADN ligase để tạo vectơ táitổhợp ADN gắn vào vectơ hai đầu tơng ứng + Chuyển vectơ táitổhợpvàotếbào chủ: ... với số lợng lớn Đầu tiên, gắn gen mong muốn vào vectơ tách dòng để tạo nên vectơ táitổhợp sau chuyển vectơ táitổhợpvàotếbàochủ Trong tếbào chủ, vectơ tách dòng đợc nhân lên số lợng lớn...
... đu kinh tế nớc ta hoà nhập với kinh tế nớc khu vực giới Kinh tế quốc tế phát triển dẫn đến phát triển toán quốc tế chất lẫn lợng tất yếu khách quan để đáp ứng nhu cầu thơng mại quốc tế nh toán ... biện pháptài 4.3 Vai trò Ngân hàng toán quốc tế II ảnh hởng số đồng tiền tới hệ thống toán quốc tế ảnh hởng đồng USA 1.1 Đối với đầu t nớc vấn đề đôla hoá kinh tế 1.2 Thanh toán quốc tế bị ... ta dựa vào ngoại tệ nhiều nớc để đảm bảo giá trị thực tế khoản thu nhập ngoại tệhợp đồng Cách đảm bảo gọi đảm bảo hối đoái theo rổ ngoại tệ đợc chọn d Điều kiện đảm bảovào tiền tệ quốc tế: SDR...