... biệt nested PCR kiểm tra qua kỹthuật cắt phân đoạn đa hình (RFLP) • sản phẩm cắt với enzyme giới hạn HaeIII • Điện di gel 1.85% agarose 13 2.3 Real-time PCR địnhlượng DNA PrV • Địnhlượng DNA ... khuếch đại nested PCR tạo từ ba gene (gB, gE, gG) PrV kiểm tra enzyme HaeIII 18 • Nested PCR xác định cho gene gB, gE, gG PrV 19 2.4.2 Real-time PCR địnhlượng DNA PrV • Số lượng DNA PrV tiềm ... Sự địnhlượng DNA PrV tiềm ẩn mô thần kinh nhiều heo qua kỹthuật real-time PCR 21 2.4.2 Real-time PCR địnhlượng DNA PrV • Real-time PCR từ gene gE PrV cho màu thuốc nhuộm huỳnh quang cấp độ...
... Lokensgard ctv., 1991) Đặc biệt, kỹthuật PCR dự đoán trước gia tăng đáng kể khả xác định tồn địnhlượng virus mà điều gặp trở ngại nuôi cấy mô Việc sử dụng kỹthuật này, kết này, tiếp tục gia ... 2004) Trong báo cáo sử dụng kỹthuật nested PCR real-time PCR xác định tần số thực tế số lượng lây nhiễm PrV mô thần kinh nhiều heo chọn ngẫu nhiên Từ đó, áp dụng kỹthuật việc phát virus PrV tiềm ... ứng kháng thể với virus Hơn nữa, điều nêu lên vài heo lây nhiễm tiềm ẩn với PrV biến thể huyết âm tính (Jacobs và ctv, 1996; McCaw ctv, 1997) Những kỹthuật khác phát triển để phát định lượng...
... display Đã xây dựng phương pháp địnhlượngkhángnguyênkỹthuật - Real-time PCR kỹthuật phage display - Đã ứng dụng kỹthuậtđịnhlượngkhángnguyên để xác định nồng độ Cyfra2 1-1 số mẫu huyết nhận ... 1.2 KhángnguyênCyfra 21-1 1.2.1 Khángnguyên 1.2.1.1 Định nghĩa Khángnguyênđịnh nghĩa chất tương tác với phân tử kháng thể thụ thể khángnguyên tế bào lympho Một chất gây miễn dịch khángnguyên ... dòng lực với khángnguyênCyfra 21-1 giếng Do đó, giá trị OD có ý nghĩa xác định bán địnhlượng nồng độ khángnguyênCyfra 21-1 Như vậy, giếng khay ELISA có nồng độ khángnguyênCyfra 21-1 ban...
... Đã thu nhận kháng thể phage có khả nhận biết gắn kết với khángnguyênCyfra 21-1 kỹthuật phage display - Đã xây dựng phương pháp địnhlượngkhángnguyênkỹthuật Real-time PCR kỹthuật phage ... 1.2 KhángnguyênCyfra 21-1 1.2.1 Khángnguyên 1.2.1.1 Định nghĩa Khángnguyênđịnh nghĩa chất tương tác với phân tử kháng thể thụ thể khángnguyên tế bào lympho Một chất gây miễn dịch khángnguyên ... phải đồng nghĩa với có mặt khángnguyên hay kháng thể Chính vậy, giải pháp đưa là: enzyme gắn với khángnguyên hay kháng thể Kỹthuật gắn kết enzyme với khángnguyên hay kháng thể phát triển Stratis...
... Kỹthuật đánh dấu khángnguyên gián tiếp: Nguyên tắc kỹthuật trớc tiên khángnguyên kết hợp với kháng thể đặc hiệu thời gian định Sau rửa để loại kháng thể đặc hiệu thừa không kết hợp, cho kháng ... nhỏ khác đánh dấu miễn dịch sử dụng kỹthuật Về mặt kỹthuậtkhángnguyên mặt vi sinh vật hay khángnguyên nằm mặt tế bào khángnguyên quan sát dễ dàng nhất, kháng thể phần tử đánh dấu đến cách ... nghiên cứu quan sát 18 3.3 Kỹthuật đánh dấu miễn dịch gắn vàng với nhuộm âm - Kỹthuật GINS Kỹthuật đánh dấu miễn dịch gắn vàng nhuộm âm (kỹ thuật GINS) xuất phát từ kỹthuật đơn giọt (Hayat Miller...
... real-time PCR[9] 4.2 Real-time PCR ứng dụng địnhlượng tác nhân vi sinh vật mẫu thử Có hai cách địnhlượng tác nhân đích dựa vào mục đích địnhlượng mà người làm thử nghiệm quan tâm 14 Địnhlượng ... phương pháp địnhlượng tương đối Ví dụ địnhlượng HIV, HBV hay HCV mẫu mô sinh thiết Địnhlượng tương đối sử dụng nghiên cứu ung thư để địnhlượng biển gene đó, hay sử dụng địnhlượng sản phẩm ... Giá trị địnhlượng HIV1RNA cặp mẫu co thêm chất ức chế Giá trị địnhlượng HIV1RNA mẫu 103 107 thực lần cách tháng giá trị CV Giá trị địnhlượng HIV1RNA 44 mẫu HIV1-RNA dương tính địnhlượng với...
... giá chất lợng kit định lợng HBV có thị trờng [7,8] Khoảng định lợng Khoảng định lợng dãy nồng độ mà định lợng HBV xác tin cậy Nồng độ ngỡng dới ngỡng dãy xác định giới hạn định lợng kit Các nồng ... NanoQuant realtime HBV tơng đơng với giá trị LOD kit thơng mại [7,8] Độ đặc hiệu Độ đặc hiệu định lợng HBV kỹthuật real-time PCR đợc biểu qua hai tiêu: khả nhân chọn lọc DNA HBV khả định lợng ... độ tuyến tính nồng độ từ 102 đến 109 IU/mL đợc khẳngđịnh Khoảng định lợng kit NanoQuant real-time HBV tơng đơng với khoảng định lợng kit định lợng HBV khác có thị trờng [7,8] Giới hạn phát Giới...
... bp Hình: Một số thiết bị điện di Kỹthuật RAPD-PCR Các kỹthuật phân tử PCR biến thể sử dụng cho việc chẩn đốn bệnh ký sinh nhận dạng ký sinh trùng, phát triển kháng ngun đặc hiệu cho xét nghiệm ... thiệu kỹthuật PCR PCR (Polymerase chain reaction) phản ứng nhân trình tự DNA quan tâm test tube (Nguyễn Thái Thủy, 2004) Phản ứng PCR thực máy ln nhiệt, lập lại khoảng 30 – 50 chu kỳ Phản ứng PCR ... PCR cho phép để phân biệt có lồi quan hệ gần gũi cách so sánh DNA chúng DNA prode PCR primer dựa khu vực biến động chuỗi DNA ribosome phát triển để phát định loại lồi Fasciola Kỹthuật RAPD-PCR...
... REAL-TIME PCR ĐỊNHLƯỢNG HCV 4.1 Kỹthuật Real-Time PCR 4.1.1 Nguyên tắc SVTH: BÙI QUANG THIỆU Trang 21 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Real-time PCR dựa PCR thường, phương pháp địnhlượng hàm lượng DNA/RNA ... cho địnhlượng Real-Time PCR nơi thiết bị chuyên dụng cho Real-Time PCR 3.2.3 PCR địnhlượng cạnh tranh Phương pháp nhân eppendorf trình tự mục tiêu cần địnhlượng trình tự gọi chứng địnhlượng ... địnhlượng dựa kỹthuật PCR PCR ELISA, PCR địnhlượng cạnh tranh,… ngày phát triển Tuy nhiên, nhà nghiên cứu sử dụng phương pháp phải giải hai vấn đề lớn, là: ảnh hưởng pha bão hòa phản ứng PCR...
... cDNA, sau dùng PCR để khuếch đại trình tự đích cDNA cặp mồi đặc hiệu cho trình tự n|y Vì phải thực hai giai đoạn RT đến PCR, nên kỹthuật n|y gọi l| kỹthuật RT-PCR Kỹthuật RT-PCR gồm hai giai ... c{c kỹthuật ph}n tử kh{c l| PCR-miễn dịch, RT-LAMP v| real-time-PCR, kỹthuật nhanh v| nhạy phương ph{p RT-PCR chuẩn, gần đ}y c{c phương ph{p real-time RT-PCR ph{t triển để ph{t nhanh NoV số lượng ... Kỹthuật Real-time PCR qua hai bước giống RT-PCR: tạo cDNA, v| sau sử dụng cDNA n|y để thực phản ứng real-time PCR 5.3 Tạo dòng Mục đích việc tạo dòng l| nhằm thu lượng lớn trình tự DNA x{c định...
... ngẫu nhiên số mẫu âm tính với khángnguyên VNNB khángnguyên virut Nam định đợc kiểm tra với khángnguyên virut West Nile Tiêu chuẩn nhận định kết theo nguyên lý kỹthuật MAC-ELISA [6]: OD chứng ... với khángnguyên virut VNNB 46,1 % Trong số 522 mẫu âm tính, có 239 mẫu dịch não tuỷ đợc xét nghiệm với khángnguyên virut Nam địnhkỹthuật MAC-ELISA, xác định có 32 mẫu dơng tính, tỷ lệ xác định ... đợc xác định 27 tỉnh thành miền bắc, tỉnh thuộc Tây nguyên; bệnh nhân bị HCNC virut Nam định đợc xác định 12 tỉnh thành miền Bắc Gia lai, Tây nguyên IV Bàn luận Kỹthuật MAC-ELISA kỹthuật có...
... chất lượng: 03200/2001/CBTCTĐC) Phương pháp trích biệt thực theo hướng dẫn nhà sản xuất Phát địnhlượng HBV-DNA: 10ul trích biệt DNA cho vào 40ul HBV SYBR PCR mix (PCR mix để địnhlượng HBV-DNA kỹ ... điện di xác định có sản phẩm khuếch đại đặc hiệu dài 567bp, sản phẩm PCR tinh với thử nghiệm tinh sản phẩm PCR (PCR cleanup kit) Promega sản xuất (Cat #A9281) Sản phẩm PCR sau tinh địnhlượng nồng ... ứng miễn dịch kháng thể bảo vệ kháng thể khángkhángnguyên bề mặt virus Tuy nhiên có tỷ lệ người nhiễm HBV cần phải điều trị đặc hiệu thuốc kháng virus có dấu hiệu viêm gan mạn tính lượng virus...
... Thứ nhất, khángnguyên H - Y khángnguyên tương đối yếu kháng thể sinh chuyên biệt cách đầy đủ Kết gây phản ứng chéo kháng thể với khángnguyên bề mặt tế bào khác Thứ hai, biểu khángnguyên H ... (histocompatibility Y antigen – khángnguyên Y tương thích mô) Kháng thể khángnguyên phân lập từ huyết ghép mảnh da đực loại thải mảnh da Phương pháp dựa khángnguyên H – Y tiến hành qua cách: ... tiêu theo dõi tỷ số OD hàm lượng DNA thu hồi 19 3.4.3 Multiplex PCR xác định giới tính 3.4.3.1 Xây dựng qui trình PCR xác định giới tính bò Để tìm qui trình PCR xác định giới tính phù hợp, thử...
... Kỹthuật PCR 13 2.2.1 Lịch sử PCR 13 2.2.2 Nguyên tắc PCR 14 2.2.3 Các thành phần phản ứng PCR 14 2.2.4 Ƣu điểm nhƣợc điểm PCR 17 2.2.5 Nguyên ... Sử dụng PCR để phân tích trực tiếp gen cho phép xác định xác khác mặt di truyền các thể Ngoài ra, kỹthuật PCR đơn giản kỹthuật khác nhƣ DAF RAPD Đó sở ứng dụng phƣơng pháp PCR việc xác định giới ... XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH CÂY ĐU ĐỦ (Carica papaya L.) BẰNGKỸTHUẬT PCR VỚI CÁC CẶP PRIMER ĐƢỢC THIẾT KẾ DỰA VÀO VÙNG DNA LIÊN KẾT VỚI GEN QUY ĐỊNH GIỚI TÍNH TRÊN NGHIỄM SẮC THỂ GIỚI TÍNH LUẬN VĂN KỸ...
... môi trƣờng tế bào MARC- 145 xác định virus kỹthuật RT- PCR” 1.2 Mục đích – Yêu cầu 1.2.1 Mục đích Xác định diện virus PRRS môi trƣờng tế bào MARC- 145 kỹthuật RT- PCR góp phần hoàn thiện dần trình ... Immunhofloresence Assay) 22 Giống nhƣ kỹthuật IPMA, kỹthuật IFA (kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp) sử dụng nuôi cấy tế bào Quá trình thực IFA giống với IPMA, khác khángkháng thể heo sử dụng không ... pháp xác định diện virus kỹthuật RT-PCR Phản ứng RT- PCR đƣợc thực theo sơ đồ 3.2 với mẫu thu hoạch đƣợc sau hai lần gây nhiễm Mẫu (Dịch tế bào) Xử lý mẫu Ly trích RNA virus Kỹthuật RT-PCR bƣớc...
... môi trƣờng tế bào MARC- 145 xác định virus kỹthuật RT- PCR” 1.2 Mục đích – Yêu cầu 1.2.1 Mục đích Xác định diện virus PRRS môi trƣờng tế bào MARC- 145 kỹthuật RT- PCR góp phần hoàn thiện dần trình ... Immunhofloresence Assay) 22 Giống nhƣ kỹthuật IPMA, kỹthuật IFA (kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang gián tiếp) sử dụng nuôi cấy tế bào Quá trình thực IFA giống với IPMA, khác khángkháng thể heo sử dụng không ... pháp xác định diện virus kỹthuật RT-PCR Phản ứng RT- PCR đƣợc thực theo sơ đồ 3.2 với mẫu thu hoạch đƣợc sau hai lần gây nhiễm Mẫu (Dịch tế bào) Xử lý mẫu Ly trích RNA virus Kỹthuật RT-PCR bƣớc...
... ñoán ∧ ∧ Hình 3.9 Sơ ñ kh i thu t toán d ñoán m u LPC Trong trình d ñoán m u c a gói b m t, h s LPC c a frame b m t v n dùng nguyên l i h s LPC c a frame nh n t t trư c ñó Quá trình d ñoán m u ... interpolation LPC info Gc trình t i ưu hóa bình phương ñ tìm thông s ak [13] Gp 2.4.2 Xác ñ nh Voiced/Unvoiced xác ñ nh chu kỳ pitch Synthesis filter + Adaptive codebook 2.4.3 B mã hóa LPC -10 LPC info ... filtering LPC info Encoded bit stream of payload bytes d u hi u xác ñ nh voiced/unvoiced chu kỳ pitch c a khung ti ng nói Divide into N frames Perceptual weighting Fixed codebook search b l c LPC 10...