... restriction enzyme Ví dụ : mạch kép cDNA, DNA có đầu (blunt ends) 13 Hình 2.4: Phươngphápdùng đoạn nối linkers tạo DNA tái tổ hợp 2.4.3 PhươngphápdùngenzymeterminaltransferaseEnzymeterminaltransferase ... pháp gen 2.4 Tạo plasmid tái tổ hợp Có ba phươngpháp tạo plasmid tái tổ hợp phươngpháp sử dụng đầu dính (cohesive ends), phươngpháp sử dụng đoạn nối (polylinkers) phươngphápdùngenzymeterminal ... 2.4: Phươngphápdùngenzymeterminaltransferase gắn DNA lạ vào vector Vector chuyển gen DNA lạ cần gắn cắt exonuclease restriction enzyme (Ví dụ: Pst I) Sau vector ủ với enzymeterminal transferase...
... V2O3 VO2 Chọn đáp án A Phương phápdùng giá trị trung bình phươngpháp đường chéo -II Phươngpháp đường chéo: [2], [14] Phươngpháp đường chéo thường ... muối phản ứng đơn bazơ đa axit: Phươngphápdùng giá trị trung bình phươngpháp đường chéo -Dạng tập giải theo phươngpháp đại số thơng thường cách đặt ... m 60 480 m2 ⇒ 504 480 - 420 = 60 Đáp án D Thơng thường, phươngphápdùng giá trị trung bình phươngpháp đường chéo kết hợp với phươngpháp bảo tồn nhằm làm phong phú tập TNKQ, cách kết hợp nhằm...
... thêm đầu dính vào đầu 3' số nucleotide bổ sung cách sử dụngenzyme end -transferase, sau đoạn DNA nối với DNA ligase vi khuẩn Cơ sở phươngpháp kết hợp DNA thực lần DNA virus SV40 với DNA phage l ... Hình Hai phân tử DNA khác cắt enzyme giới hạn EcoRI tạo đầu dính bổ sung nhau, cách khâu nối thành phân tử DNA tái tổ hợp in vitro nhờ xử lý với DNA ligase Phươngpháp nối trực tiếp tổng hợp đầu ... lý với DNA ligase Phươngpháp nối trực tiếp tổng hợp đầu bổ sung Đối với đoạn DNA tạo cách xử lý enzyme giới hạn cắt thẳng HindII chẳnghạn, việc nối đoạn DNA có đầu tạo thực theo hai cách sau:...
... hoạt phươngpháp dạy học tích cực sau đây: - Phươngpháp nêu vấn đề, phát giải vấn đề - Phươngpháp dạy học tự học - Phươngpháp hoạt động nhóm dạy học dự án (phương pháp Project) Phƣơng pháp ... dục đổi phươngpháp dạy học theo định hướng nêu 1.1.3 Phươngpháp dạy học tích cực Không có phươngpháp giảng dạy cho lý tưởng Mỗi phươngpháp có ưu điểm người thầy nên xây dựng cho phươngpháp ... Trong phươngpháp học cốt lõi phươngpháp tự học Phươngpháp tự học có sở khoa học thực tiễn Phươngpháp dạy học tự học cách thức tác động giáo viên vào trình tự học học sinh Hệ phươngpháp dạy...
... thông tin truyền thông tin đến não tế bào thần kinh sinh học 2.2 Phơng pháp học giảm gradient (giảm dốc nhất) Bản chất phơng pháp cực tiểu hoá hàm lỗi (sai số trung bình bình phơng) kết xuất zk ... báo thứ i, obsi quan trắc thứ i tơng ứng Kết thử nghiệm Sau số kết dự báo lợng ma ngày phơng phápdùng MTKNT hiệu chỉnh sản phẩm mô hình HRM Số liệu luyện dự báo bao gồm 314 trạm Việt Nam sau ... = p k b jk y j (1 y j ).xi a ij k =1 (19) (20) (21) Thử nghiệm dự báo lợng ma ngày phơng pháp Nếu g(x) hàm hybepol hay tang hypebol đạo hàm E theo trọng số khác Các trọng số aij bjk đợc...
... đồng - Với phƣơng pháp dạy học khám phá dạy học trọng rèn luyện phƣơng pháp tự học Phƣơng pháp dạy học khám phá xem việc rèn luyện phƣơng pháp học tập cho học sinh không biện pháp nâng cao hiệu ... http://www.lrc-tnu.edu.vn 11 Có thể so sánh phươngpháp dạy học cổ truyền phươngpháp dạy học khám phá sau: Quan niệm Bản chất Mục tiêu Nội dung Phƣơng pháp Dạy học cổ truyền Học qúa trình tiếp ... pháp dạy học, năm vừa qua có nhiều phƣơng pháp dạy học đƣợc nghiên cứu vận dụng vào thực tiễn dạy học trƣờng phổ thông nƣớc ta, có phƣơng pháp dạy học khám phá Nhiều nghiên cứu rằng, phƣơng pháp...
... hoạt phươngpháp dạy học tích cực sau đây: - Phươngpháp nêu vấn đề, phát giải vấn đề - Phươngpháp dạy học tự học - Phươngpháp hoạt động nhóm dạy học dự án (phương pháp Project) Phƣơng pháp ... tiêu biểu đổi phươngpháp dạy học hoạt động nhóm nhiều chứng tỏ phươngpháp dạy học đổi 1.3.3.2 Phươngpháp Project Theo Nguyễn Thị Phương Hoa [6, tr 17-19]: - Nguồn gốc đời phươngpháp Project: ... dụngphươngpháp dạy học tích cực Bởi học sinh có hội học tập tích cực, chủ động sáng tạo Một số phươngpháp dạy học tích cực vận dụngphươngpháp phát giải vấn đề, phươngpháp dạy học tự học, phương...
... phƣơng pháp chiết tách DNA plasmid nhƣ: Phƣơng pháp sử dụng nhiệt độ cao, phƣơng pháp SDS – kiềm Nhƣng chọn phƣơng pháp SDS – kiềm để chiết tách plasmid sử dụng cho khóa luận Nguyên tắc phƣơng pháp ... phƣơng pháp tiến hành nhanh chóng, tế bào sau xử lý có hiệu suất biến nạp cao 2.3.3.2 Phƣơng pháp hoá học Là phƣơng pháp sử dụng hoá chất xử lý tế bào (có thể kết hợp với nhiệt độ) Phƣơng pháp ... theo phƣơng pháp cụ thể ngƣời ta sử dụng tác nhân khác công đoạn trình tách chiết Có nhiều phƣơng pháp tách chiết plasmid từ tế bào chủ, chẳng hạn nhƣ: Phƣơng pháp nhiệt độ cao Phƣơng pháp Lythium...
... khác enzyme xúc tác cho phản ứng thủy phân liên kết peptide theo chế chung sau: E+S enzyme – S enzyme – S + P1 enzyme + P2 Hình 1.4 Cơ chế xúc tác TTHĐ Enxyme Trong đó: E: enzyme, S: chất, enzyme ... Vũ Xuân Tạo 14 K5 Công nghệ sinh học Công nghệ enzyme GV: ThS Trịnh Đình Khá - Để chiết dịch enzyme cần phá vỡ tế bào dùngphươngpháp siêu âm Enzyme, máy nén, sốc nhiệt - Có thể cô đặc dich ... sản phẩm enzyme Protease tái tổ hợp Sử dụngphươngpháp lên men: lên men bề mặt hay lên men chìm Bước 7: Tách chiết tinh thu chế phẩm enzyme Protease tái tổ hợp - Tiến hành chiết dịch enzyme bằn...
... - Sợi đ bacteriophage (cDNA library) Phân lập đoạn DNA phươngpháp PCR Ngoài hai phươngpháp trên, người ta sử dụng phổ biến phươngpháp PCR để phân lập trình tự nucleotide (gen) từ genome ... trường hợp định thay phươngpháp tạo dòng truyền thống phươngpháp PCR, PCR cho phép sản xuất lượng lớn đoạn DNA mong muốn sau tạo dòng đoạn DNA vector plasmid phage thích hợp Phương thức tạo dòng ... Phươngpháp điện biến nạp có số ưu điểm sau: - Hiệu suất biến nạp cao - Có thể dùng thể tích dịch tế bào nhỏ Thể tích dịch tế bào khoảng 20 µL cho hiệu suất khoảng 109 thể biến nạp - Phương pháp...
... nâng dần lên để chọn lọc số lượng vector tái tổ hợp tế bào Một phươngpháp thay khác dùng gene trao đổi chất dấu chọn lọc trội Enzyme glutamine synthetase bảo vệ tế bào khỏi chất độc tương tự ... cho tế bào động vật có vú, tế bào nhân chuẩn đột biến enzyme sử dụng cho mục đích chọn lọc Khi đó, plasmid mang hoạt động gene đột biến Phươngpháp không thuận tiện sử dụng tế bào nấm men tế bào ... môi trường việc tinh dễ dàng (d) Nấm men chuyển gene vào dễ dàng nhờ nhiều phươngpháp khác sau phân hủy thành tế bào enzyme hay chất hóa học, hay tạo lỗ nhờ sung điện (e) Nấm men có plasmid micron...
... 3- ngày toàn cá nuôi bể bị nhiễm bệnh, biện pháp chăm sóc quản lý hệ thống nuôi Do cần áp dụng biện pháp phòng bệnh tích cực cách đồng Cho đến biện pháp phòng chữa bệnh chủ yếu sử dụng thuốc sát ... ruột, phần da mô vị trí tiêm, cố định mẫu formaline 10% Các mẫu sau xử lý, cắt, nhuộm, phân tích Phươngpháp mô học bao gồm: nhuộm Hematoxyline – Eosin (Ferguson 2006) nhuộm hóa mô miễn dịch (Evensen ... khoảng 20 cá thể nhóm thời điểm 10, 20, 30, 40, 11 50, 80, 110, 140 170 ngày sau tiêm vaccine Phươngpháp vi ngưng kết kháng nguyên - kháng thể đĩa 96 giếng Roberson (1990) Tỉ lệ chết tich luy...
... tắc, làm lỗ thủng màng tế bào vi khuẩn để đưa đoạn DNA vào tế bào Thường dùngphương pháp là xung điện và phương pháp hóa học và shock nhiệt • Xung điện: Ở một điện cao thời gian ngắn ... chọn lọc gen nptII (neomycin phosphotransferase II) kháng kanamycin; gen hygB (hygromycin phosphostransferase) kháng hygromycin B và gen streptomycin phosphotransferase kháng streptomycin; gen ... (1993) chứng minh enzyme hình thành từ gen này bị bất hoạt nhanh chóng acid dày và bị phân hủy các enzyme tiêu hóa, đó khả kháng kháng sinh đưa vào thể bị bất hoạt enzyme gen ntpII...
... hay gọi đơn giản enzyme hạn chế (restriction enzyme, RE) Các enzyme hạn chế type II Cách gọi tên enzyme hạn chế dựa qui ước quốc tế Tên chi tên loài sinh vật, mà tìm thấy enzyme, dùng để đặt cho ... Các enzymedùng tạo dòng phân tử sinh vật prokaryote, chúng bacteriophage để , người ta tìm thấy từ khoảng 250 chủng vi sinh vật Các enzyme hạn chế có ba loại (type): I, II III Các enzymedùng ... cDNA (cDNA library) phươngpháp lai mẫu dò có đánh dấu [ -32P]dCTP với vết tan (trường hợp dùng bacteriophage λ làm vector tạo dòng cho xâm nhiễm vào vi khuẩn E coli) khuẩn lạc (dùng plasmid làm...
... thứ phải nhờ đến enzyme phiên mã ngược (reverse transcriptase) giai đoạn gọi phiên mã ngược (RT), sau trình tổng hợp sợi DNA thứ hai lại nhờ enzyme khác DNA polymerase I (thường dùng đoạn Klenow) ... nhiễm virus vi khuẩn để chẩn đoán bệnh viêm nhiễm - Xét nghiệm phân biệt allele Là phươngpháp xét nghiệm đầu cuối dùng để xác định kiểu gen mẫu vật (đồng hợp tử: có allele có allele 2, dị hợp tử: ... (10 pmol/ L) 2,5 L Thêm H2 40 L 53 Taq pol: 10 L Taq pol (5 units/ L) L Thêm H2 20 L Enzyme hạn chế 5’ DNA biết Enzyme hạn chế Y X 3’ 3’ 5’ Tạo vòng DNA ligase PCR X 3.6 Sơ đồ Y ược 2.3 Bổ sung...
... ligase, kinase, polym khối lượng < , khối lượng ) Có nhiều phươngpháp thu hồi tinh DNA từ agarose gel, vài phươngpháp chính: 2.4.1 Dùng agarose có nhiệt độ nóng chảy thấp (low melting temperature) ... acid yếu dùng formaldehyde khử có chọn lọc ion bạc thành bạc kim loại điều kiện kiềm Nhìn chung, phươngpháp diamine kiềm nhạy Công nghệ DNA tái tổ hợp 39 thích hợp gel dày, phươngpháp acid ... vào khoảng pg/mm2 mặt cắt ngang băng DNA, nhạy gấp 1.000-10.000 lần phươngpháp nhuộm EtBr Mức độ phát so sánh với phươngpháp đánh dấu đồng vị phóng xạ huỳnh quang Quá trình nhuộm bao gồm bước...
... Phươngpháp điện biến nạp có số ưu điểm sau: - Hiệu suất biến nạp cao - Có thể dùng thể tích dịch tế bào nhỏ Thể tích dịch tế bào khoảng 20 µL cho hiệu suất khoảng 109 thể biến nạp - Phươngpháp ... khuẩn lạc không màu khử hoạt tính enzyme cách chèn đoạn DNA ngoại lai Phươngpháp chuẩn bị bảo quản tế bào khả biến hóa biến nạp đơn giản Hiệu suất biến nạp phươngpháp khoảng 104-106 thể biến nạp/µg ... hợp cho phương thức tạo dòng truyền thống Đối với phương thức cần hiệu suất biến nạp cao (ví dụ: xây dựng thư viện cDNA, xây dựng thư viện phân tích trình tự DNA ) tốt hết dùngphươngpháp điện...
... vector chuyển gen loại enzyme giới hạn Trộn chung vector DNA xử lý enzyme giới hạn gắn chúng với nhờ enzyme nối ligase - Phươngphápdùngenzymeterminal transferase: Đây phươngpháp gắn đuôi oligo, ... chuyển gen để tạo plasmid tái tổ hợp Có nhiều phươngpháp gắn đoạn DNA, cDNA vào plasmid, vector chuyển gen khác - Phươngphápdùng đầu dính: Theo phươngpháp này, cần xử lý DNA chứa đoạn gen mong ... hạn nêu Bước dungenzyme nối ligase để gắn đoạn cần nối với Phươngpháp ứng dụng rộng rãi việc tạo plasmid tái tổ hợp - Phươngphápdùng đoạn nối: Các đoạn DNA hay ARN ngắn khoảng 10-20 nucleotit...