... Bắt cặp mồi vào sợi khuôn: 45-60oC, 30-60 giây Phản ứng kéo dài chuỗi: 72oC, 60 giây/1kb bước hình thành chu kỳ Phản ứng PCR tiến hành khoảng 25-40 chu kỳ Trong kỹ thuật PCR thông thường người ... trước bước vào chu kỳ Bước thư ờng thực 94-95oC, 2-3 phút Phản ứng PCR - bước bắt cặp mồi vào sợi khuôn 3 45 - 60C 3 Phản ứng PCR - bước kéo dài chuỗi 3 72C 5 5 Phản ứng PCR - sản phẩm hình thành ... ca mu khụng cn cao; V CC NG DNG CA K THUT PCR Nhõn phõn t RNA bng k thut PCR Cn cú cỏc on mi kt hp c vi khuụn RNA, sau ú tng hp cỏc phõn t DNA nh enzyme reverse trancriptase theo k thut PCR...
... đây, bàn đến vài kỹ thuật số 1.1 Đột biến xen/mất đoạn Hội chứng Waardenburg bệnh di truyền trội nhiễm sắc thể thường, đặc trưng tật điếc hình thành sắc tố không bình thường Khoảng 2% số người điếc ... Các protocol trước thường có giai đoạn biến tính 94oC, phút để đảm bảo ADN khuôn hoàn 14 toàn tách Hiện thườngkhông việc xử lí nhiệt độ cao, lâu thường gây vết đứt ADN khuôn Chiều dài sản phẩm ... phản ứng không thành công polymerase không hoạt hóa thích hợp Nếu nồng độ magie cao, phản ứng tính đặc hiệu nhiều sản phẩm tạo Nồng độ magie tối ưu xác định dựa vào kinh nghiệm với mồi thường khoảng...
... NGUYÊN LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 34 2.1 ð i tư ng, ñ a ñi m nghiên c u 34 2.2 N i dung nghiên c u 34 2.3 Nguyên li u dùng nghiên c u 34 2.4 Phương pháp nghiên ... LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 ð i tư ng, ñ a ñi m nghiên c u 2.1.1 ð i tư ng nghiên c u - Các ch ng vi khu n ñ i ch ng dương âm - Các ch ng vi khu n E coli phân l p ñư c 2.1.2 ð a ñi m nghiên ... iv DANH M C BI U, HÌNHHình 1.1: Cơ ch tác ñ ng c a ñ c t VT .16 Hình 3.1: Các s n ph m c a ph n ng PCR v i ch ng vi khu n ñ i ch ng dương âm sau trình ñi n di 48 Hình 3.2: K t qu...
... (23,73%) 3.2.2 Hình ảnh mẫu gen bình thường khảo sát RT-PCR 3,2,1 DRADNATS SUG ng (không có nhi m s c th Philadelphia) ắ ễ i bình th ể ờư Hình M u gen c a ng ờư ủ ẫ Ở hình thấy diện đường chuẩn: ... phản ứng RT-PCR thực thành công Không phát diện gen BCR-ABL 3.2.3 Hình ảnh mẫu gen có chuyển đoạn dạng b2a2 BN .số 58 b2a2 = 291.000 copies /ml 3,2,1 DRADNATS Hình M u có phát hi n nhi m s c th ... trí b3a2 hình 3.2.5 Hình ảnh mẫu gen có chuyển đoạn dạng kết hợp b2a2+b3a2 BN số: 60 b2a2 = 552 copies /ml 3,2,1 DRADNATS b3a2 = 195.600 copies /ml SUG 2a3b 2a2b c hai v trí b2a2 b3a2 ị Hình M...
... sau ú li c dựng tip cho chu trỡnh tip theo, bao gm cỏc bc gn on mi, tng hp ADN v tỏch ri cỏc on Kt qu cui cựng ca phn ng PCR l sau n chu k phn ng, tớnh theo lý thuyt ta s cú 2n-2 bn cỏc phõn ... polymerase I c tớnh ca on ny l xỳc tỏc s tng hp ADN theo chiu 53 v cú hot tớnh exonuclease (thy gii dn liờn kt gia cỏc nucleotide t u phõn t ADN) theo chiu 3-5 Tuy nhiờn enzyme ny khụng chu c nhit ... ng PCR PCR t: t c mc nhy cm cao PCR, ngi ta cú th thc hin PCR liờn tip Trờn mt in di , cỏc on t c sau PCR th nht, ngi ta quan sỏt c mt vt chớnh, nhng cng kốm theo cỏc vt nh khỏc iu ny l cỏc...
... Tình hìnhnghiêncứu bệnh cầu trùng gà nước giới 2.9.1 Tình hìnhnghiêncứu giới Cầu trùng ký sinh trùng đơn bào có hình thái đa dạng tùy thuộc vào loài cụ thể như: hình tròn, hình trứng, hình ... cầu trùng sống vào thể Cách giúp cho gà chống lại bệnh cầu trùng hiệu [20] Theo Chapman (1996), việc nghiêncứu chế tạo sử dụng vaccine cầu trùng theo hai hướng chủ yếu [22] Nghiêncứu chế tạo ... thường xảy từ tháng – Sau nhiều năm, Việt Nam công tác thú y phục vụ sản xuất nghiêncứu bệnh nhà nghiêncứu cho rằng: Bệnh xảy quanh năm, mang tính dịch cao, tỷ lệ gà mắc bệnh đặc biệt lớn vào...
... pháp PCR PCR sữ dụng nghiêncứu ADN, ARN có số lượng thấp định lượng phương pháp cổ điển Về nguyên tắc người ta xác định số lượng mẫu ban đầu qua tính toán dựa vào sản phẩm cuối số chu kỳ tiến hành ... độ cao) dùng PCR không bị phá vỡ hỗn hợp nung nóng để tách sợi ADN Từ đó, không cần phải thêm ADN-polymerase vào chu kỳ, trình chép ADN đơn giản tự động Một ADN-polymerase chịu nhiệt phân lập ... gắn vào khuôn Việc qua nhiệt độ mà không tái có xu dẫn đến phân hủy mồi làm cho thí nghiệm không hiệu Để giải khó khăn này, để ngăn ngừa sản phẩm PCR không đặc hiệu, bổ sung Taq ADN polymerase vào...
... đây, bàn đến vài kỹ thuật số 8.1.1 Đột biến xen/mất đoạn Hội chứng Waardenburg bệnh di truyền trội nhiễm sắc thể thường, đặc trưng tật điếc hình thành sắc tố không bình thường Khoảng 2% số người ... gắn vào khuôn Việc qua nhiệt độ mà không tái có xu dẫn đến phân hủy mồi làm cho thí nghiệm không hiệu Để giải khó khăn này, để ngăn ngừa sản phẩm PCR không đặc hiệu, bổ sung Taq ADN polymerase vào ... phản ứng không thành công polymerase không hoạt hóa thích hợp Nếu nồng độ magie cao, phản ứng tính đặc hiệu nhiều sản phẩm tạo Nồng độ magie tối ưu xác định dựa vào kinh nghiệm với mồi thường khoảng...
... perfringens nhóm A gây độc tố đường ruột mà vi khuẩn tiết dinh hình thành bào tử màng ruột Bào tử c perfringens nhiễm vào thịt tươi, rau sống Việc đun nấu thức ăn bình thườngkhông diệt bào tử vi khuẩn ... bình cộng tổng số khuẩn lạc ống nghiệm theo công thức 35 Với N số khuẩn lạc/g hay số khuẩn lạc/ml mẫu n , n số ống nghiệm R R R R đậm độ pha loãng liên tiếp chọn thứ 1, thứ 2, d hệ số pha loãng ... tế xã hội phát triển nay, đời sống vật chất tinh thần người dân nâng cao Điều kéo theo yêu cầu chất lượng vệ sinh thực phẩm khắt khe Người tiêu dùng không đòi hỏi cao chất lượng dinh dưỡng, cảm...
... MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1 Thang DNA 100bp 37 Hình 2.2 Các bước phản ứng PCR 38 Hình 2.3 Số DNA tăng theo chu kỳ phản ứng PCR .39 Hình 2.4 Đưa mẫu vào máy PCR 48 Hình 3.1 ... ứng với thay đổi nhiệt độ phản ứng, theo đó, số lượng DNA ngày tăng Q trình minh họa Hình 2.2 Hình [57] Hình 2.2 Các bước phản ứng PCR Hình 2.3 Số DNA tăng theo chu kỳ phản ứng PCR - Bước 1: (biến ... chiên kem marino Phạm vi nghiêncứuNghiêncứu thực phẩm đường phố thuộc nhóm sữa, nước giải khát kem Quận: 3, 5, 8, 10 quận Tân Bình thuộc địa bàn TP HCM Nhiệm vụ nghiêncứu - Phân tích tiêu vi...
... phải dùng phản ứng RT-PVR Một sốnghiêncứu ARN thông tin cần đến phản ứng RT-PCR để chuyển đổi sợi ARN thành ADN cho trình đồng hoá để giải trình tự tái tổ hợp nghiêncứu biểu thị protein Trớc tiến ... Mồi dài đồng nghĩa với việc nhiệt độ gắn mồi caokhông ngăn ngừa đợc bắt cặp sai gắn mồi không đặc hiệu 3.2 Một số nguyên tắc thiết kế trình tự mồi (theo Innis GelfDNA, 1991) i Mồi nên dài 17 - ... tối u phải đợc xác định cho phản ứng qua nhiều thử nghiệm Một số enzyme không cần protein bổ sung, số khác lại phụ thuộc vào chúng Một vài enzyme hoạt động tốt rõ rệt có mặt chất tẩy (detergent),...
... nhân giảm nhiều tạo sản phẩm không đặc hiệu Số lượng chu kỳ: không vượt 40 Ứng dụng phương pháp PCR - Tạo số lượng lớn DNA dòng hóa gene, giải trình tự, lập đồ di truyền, sản xuất mẫu dò… ... cấu trúc “kẹp tóc” Tm mồi không cách biệt xa Mồi đặc trưng cho trình tự DNA cần khuếch đại không bắt cặp với trình tự khác gen Các thành phần khác phản ứng: dNTP: thường sử dụng nồng độ 20 ... chuỗi nhiều chu kỳ, chu kỳ gồm bước: Bước 1: Biến tính (denaturation) DNA biến tính nhiệt độ cao, thường 94 – 950C, thời gian 30s – phút Bước 2: Bắt cặp mồi (hybridization) Nhiệt độ cần cho bắt...