... trước bước vào chu kỳ Bước thư ờng thực 94-95oC, 2 -3 phút Phản ứng PCR - bước bắt cặp mồi vào sợi khuôn 3 45 - 60C 3 Phản ứng PCR - bước kéo dài chuỗi 3 72C 5 5 Phản ứng PCR - sảnphẩm hình thành ... dNTPs Dung dịch đệm Ion Mg++ III TIN HNH PHN NG Biến tính ADN: 94-95oC, 30 -60 giây Bắt cặp mồi vào sợi khuôn: 45-60oC, 30 -60 giây Phản ứng kéo dài chuỗi: 72oC, 60 giây/1kb bước hình thành chu ... 72C 5 5 Phản ứng PCR - sảnphẩm hình thành sau bước Biến tính Bắt cặp & kéo dài chuỗi 5 5 5 5 Sảnphẩm cuối phản ứng PCR IV LI CH CA PHN NG PCR Thi gian thc hin rt nhanh Ch cn khong gi khuch...
... hiệu caosảnphẩm PCR Điều không xảy với phân tử ADN đầu tù Polylinker Cắt R1 (ví dụ: EcoRV) R1 ADN ligase Taq ADN polymerase + dNTP T- ’ 3- T ’ Vectơ T Sảnphẩm Plasmid + 3 –A– Sảnphẩm PCR –A 3 ... ADN đặc hiệu phản ứng PCR AAA – 5’ 3 Mồi RT RT mARN 5’’ ’ 5’ AAA – 3 5’ ADN Mồi ’ 3 ’ PCR: Chu kỳ 5’ Taq 3 ’ 5’ ’ Mồi PCR: Chu kỳ 5’’ 5’ 33 5’’ 3 Mồi Sảnphẩm nhân bội Sơ đồ phản ứng RT – ... ghép vào sảnphẩm cuối Như vậy, thay đổi bazơ giưã mồi ADN khuôn đưa vào sảnphẩm Vì gây tạo đột biến đầu ’ nên vị trí thích hợp để biến đổi đầu 5’ mồi Mồi 5’ – GAATTCATGAAGCTACTGTCTTCT – 3 5’...
... nghiên c u 34 2.2 N i dung nghiên c u 34 2 .3 Nguyên li u dùng nghiên c u 34 2.4 Phương pháp nghiên c u 35 PH N III - K T QU VÀ TH O LU N 44 3. 1 Thi t l p chu ... ñánh s t O1 ñ n O1 73 (tr nhóm ñã b lo i : O31, O47, O67, O72, O 93, O94, O122) Cũng ñã có 1 03 kháng nguyên K 56 kháng nguyên H ñư c xác ñ nh 1 .3 ð c tính c a vi khu n E coli 1 .3. 1 ð c tính hình ... VT .16 Hình 3. 1: Các s n ph m c a ph n ng PCR v i ch ng vi khu n ñ i ch ng dương âm sau trình ñi n di 48 Hình 3. 2: K t qu ñ m s ch ng FD 636 th ch máu 51 Hình 3. 3: Các s n ph m...
... ả ơư ố Độ tuổi B ng M i t Số lượng Tỷ lệ % < 30 12 / 60 20,00 30 - 40 11 / 60 18 ,33 41 - 50 12 / 60 20,00 51 - 60 17 / 60 28 ,33 61 - 74 08 / 60 13, 33 Những kết ghi nhận cho thấy đa số bệnh nhân ... đoạn Của nhiễm sắc thể Philadelphia Mẫu nghiệm dương tính với BCR-ABL (N = 59) Số lượng phát Tỷ lệ % BCR-ABL b2a2 19 32 ,20 BCR-ABL b3a2 26 44,07 BCR-ABL b2a2 + b3a2 14 23, 73 83 Bằng kỹ thuật RT-PCR, ... người mang BCR-ABL b2a2 (32 ,20%); 26 người mang BCRABL b3a2 (44,07%) 14 người mang dạng kết hợp b2a2 + b3a2 ( 23, 73% ) 3. 2.2 Hình ảnh mẫu gen bình thường khảo sát RT-PCR 3, 2,1 DRADNATS SUG ng (không...
... thấy tỷ lệ biểu bệnh tích manh tràng cao hai giống gà (77,78% giống gà Ai Cập 63, 63% giống gà Lương Phượng), tỷ lệ biểu bệnh tích trực tràng thấp (3, 47% 11 6 ,36 % tương ứng) [ 13] Mỗi loài cầu ... tử (Sporogony) Giai doạn sinh sản vô tính (Schyzogonie) [7] Sau bào tử nang xâm nhập vào thể qua đường tiêu hóa vào tế bào biểu mô thích hợp Dưới tác dụng enzyme đường tiêu hóa làm cho vỏ noãn ... TTCATTTCGCTTAACAATATTTGGCCTCA R – ACAACGCCTCATAACCCCAAGAAATTTTG Kích thước (bp) 811 539 460 35 4 272 200 3. 2.2.5 Phương pháp kiểm tra sảnphẩm PCR Sảnphẩm bảo quản ºC sử dụng Điện di Šmmmm®agarose 1% để kiểm tra...
... ADN đặc hiệu phản ứng PCR AAA -3' 5’ 3 5’ Mồi RT RT mARN AAA -3' 5’’ 3 5’ ADN Mồi 5’ 3 ’ PCR: Chu kỳ 5’ Taq ’ 3 ’ 5’ Mồi ’ PCR: Chu kỳ ’ ’ 5’ 3 5’’ 3 Mồi Sảnphẩm nhân bội Sơ đồ phản ứng RT ... type1 hay type qua độ dài sảnphẩm PCR: HSV-1 có độ dài 503bp HSV-2 có độ dài 435 bp - Hoặc HSV - PCR riêng biệt cho type HSV-1 cho sảnphẩm 39 5bp HSV-2 cho sảnphẩm 30 2bp Chẩn đoán bệnh rối loạn ... vật gây bệnh: thực phẩm, bệnh phẩm, mỹ phẩm, nước, phát pháp y Tách dòng sảnphẩm PCR Chúng ta thấy, tách dòng sảnphẩm PCR cách xen thêm trình tự cho enzym giới hạn nhận biết vào đầu ’ mồi Cũng...
... đài Sảnphẩm khuếch đại giữ ổn định 4°C điện di phân tíchsảnphẩm - Phân tíchsảnphẩm khuyếch đại: Sảnphẩm sau khuếch đại điện gel agarose 1,2% điện 110V 30 phút Sau điện đi, sảnphẩm nhuộm ... bước: 90°C 30 giây, 55°C 40 giây ,72°C 45 giây - Giãi đoạn ổn định 72°C 10 phút Sảnphẩm PCR giữ ỏ 4°C diện di phân tíchsảnphẩm 2.2.11.Phân tíchsảnphẩm PCR điện di gelagarose Sảnphẩm phản ... 1 .3. 1.Lịch sử phát [2], [10] 12 T T 1 .3. 2.Đặc điểm sinh học 13 T T 1 .3. 2.1.Hình thái sinh tí tế bào [l1] [2] 13 T T 1 .3. 2.2.Đặc điểm nuôi cấy [1] 13 T T 1 .3. 2 .3. Đặc...
... thống kê Bảng 1 .3 Bảng 1 .3 Ngun nhân gây ngộ độc thực phẩm Việt Nam năm 2005 2006 Ngun nhân 2005 2006 Do vi sinh vật 64 vụ (50,4%) 53 vụ (38 ,1%) Thực phẩm độc 36 vụ (28 ,3% ) 33 vụ ( 23, 7%) Do hóa ... bệnh thực phẩmđường phố địa bàn TP HCM 2.2 .3. 1 Mục tiêu Ứng dụng quy trình kit PCR để phân tích nhanh ngun nhân gây ngộ độc nhóm thực phẩmđường phố địa bàn TP.HCM so sánh với kết theo phương ... 63 Biểu đồ 3. 2 Tình hình nhiễm vi sinh vật nước giải khát địa bàn TP HCM 66 Biểu đồ 3.3 Tình hình nhiễm vi sinh vật nhóm kem địa bàn TP HCM 68 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Theo...
... GelfDNA, 1990) Các sảnphẩm dài cần thời gian lâu hơn: phút cho sảnphẩm 3kb hay dài Việc kéo dài thời gian cần thiết chu trình cuối mà nồng độ sảnphẩm vợt nồng độ enzyme (>1nM), dNTP và/ hoặc suy giảm ... ứng (plateau effect) gây nên Đây giảm tốc độ tăng tích luỹ sảnphẩmtheo cấp số mũ giai đoạn cuối PCR, mà nồng độ sảnphẩm đạt đến 0 ,3 - 1,0 nM Có thể phân rã chất phản ứng (dNTPs, enzyme), depletion ... phản ứng (mồi, dNTPs - đầu trục trặc sảnphẩm ngắn, sau trục trặc sảnphẩm dài), ức chế đầu sảnphẩm (end-product) (sự hình thành Pyrophosphate), cạnh tranh sảnphẩm không đặc hiệu với chất tham...
... lượng): xác định hàm lượng sảnphẩm PCR tạo thời điểm Nguyên tắc: xác định hàm lượng sảnphẩm dựa tín hiệu huỳnh quang - PCR nested: sử dụng nhiều cặp mồi thu nhận sảnphẩm đặc hiệu ... nhân giảm nhiều tạo sảnphẩm không đặc hiệu Số lượng chu kỳ: không vượt 40 Ứng dụng phương pháp PCR - Tạo số lượng lớn DNA dòng hóa gene, giải trình tự, lập đồ di truyền, sản xuất mẫu dò… - ... pháp PCR - Ngoại nhiễm: Xử lí: Khử trùng khu vực thao tác Việc thiết lập phản ứng PCR phân tíchsảnphẩm tiến hành khu vực khác - Nhân không đặc hiệu: - Các sai sót Taq polymerase Các dạng khác...