... AOX1-R (cặp mồi - bảng 2) Mồi Prot xác định đƣợc có mặt genmãhóaprotease HIV- 1, mồi AOX1-R xác định genmãhóaprotease HIV- 1 đƣợc chèn chiều vào pPIC9 Theo tính tốn, genmãhóaprotease HIV- 1 ... CRF 01- AE Việt Nam Ecoli [54] Trong nghiên cứu này, genmãhóaprotease HIV- 1 đƣợc thu nhận từ bệnh nhân nhiễm HIV Việt Nam, tác giả biểu thành cơng genmãhóaprotease HIV- 1Ecoli vector pET32a, ... protease HIV- 1 vào vector biểu Đoạn genmãhóaprotease HIV- 1 vector biểu đƣợc gắn với sau tinh sạch, việc gắn đoạn genmãhóaprotease HIV- 1 vector nhờ hoạt động enzym nối T4 DNA ligase Phản...
... LUẬN…………………………………………37 3 .1 NHÂN DÒNG ĐOẠN GENMÃHÓAPROTEASE HIV- 1 ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 3 .1. 1 Nhân đoạn genmãhóaprotease HIV- 1 PCRError! Bookmark not defined 3 .1. 2 Tinh plasmid pPIC9 từ Ecoli Error! ... Bookmark not defined 1. 2 TỔNG QUAN VỀ PROTEASE HIV- 1 .ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED 1. 2 .1 Protease HIV- 1 Error! Bookmark not defined 1. 2.2 Chức proteaseHIV – Error! Bookmark not defined 1. 2.3 Sơ ... Cereghino J., and Cregg J M (20 01) , “Expression of foreign gens in the yeast P pastoris”, Gent End 23, pp 15 7 -16 17 Cuba reports modest progress in HIV -1 (2 013 ), Xinhua via NewsPoints Desk 18 ...
... protease MBP maltose binding protein His6 maltose binding protein IL -11 Interleukin 11 Trần Thị Thanh Tuyền Lớp 11 02 K18 Nghiên cứu thiết kế vector biểubiểugenmãhóaprotease SENP2 Escherichia Coli ... Genes Amp Genomics, 36(2), 19 1 19 6 14 Grodberg J and Dunn J.J (19 88) ompT encodes the Escherichia coli outer membrane protease that cleaves T7 RNA polymerase during purification J Bacteriol, 17 0(3), ... chất cảm ứng IPTG Ecoli genome: hệ gen Escherichia Ecoli Repressor: ức chế Inactive: bất hoạt Target gene: gen đích Host cell: tế bào chủ Trong vector pET22b(+) có trình tự tiết pelB dài 22 axit...
... tự CEQ-8000 hãng Beckman Coulter 2.2.7 Biểugenmãhóaprotease HIV- 1Ecoli Để gắn đoạn genmãhóaprotease HIV- 1 vào vector biểu pET32a, plamid tái tổ hợp pGEM-Prot vector pET32a cắt hai enzyme ... đoạn genmãhóaprotease vector pCR2 .1- Prot Kết (khơng nêu đây) khẳng định phần genmãhóa cho protease có trình tự trùng khớp 10 0% với đoạn gen vector pCR2 .1- Prot 3.2.3 Đưa genmãhóaprotease HIV- 1 ... immunodeficiencyl virus HIV- 1 , FEBS Lett, 262 (1) , pp 11 9 -12 2 13 Graves, M C., Lim J J., Heimer, E P (19 88) “An 11 -kDa form of human immunodeficiency virus protease expressed in Escherichia coli...
... Principle of Protein-Dye Binding Anal Biochem 72:248-254 [4] Towbin, H et al (19 79) Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications ... LIỆU THAM KHẢO [1] Seidman C E. , Struhl K., Sheen J., Jessen T (19 97), Current Protocols in Molecular Biology,pp .1. 8 .1- 1.8 .10 [2] Sambrook J., Fritsch E. F., and Maniatis T., 19 89: Molecular cloning: ... nguyên lõi HIV- 1 Type AE 3.2 Biểu tế bào E. coli BL 21 DE3 Vector pET32a+.p24 biến nạp vào E. coli BL 21 DE3 ni cấy biểu Để tối ưu hóa điều kiện biểu hiện, tiến hành nuôi biểu khảo sát thông số nhiệt...
... Ngoài DNA hệ genEcoli BL 21 (DE3) Star™ có chứa genmãhóa cho T7 RNA polymerase, có nguồn gốc từ bacteriophage λ DE3 Gen đưa vào hệ genEcoli BL 21 (DE3) Star™ đặt điều khiển promoter lacUV5 nên ... protein) Pol (polymerase): mãhóa tổng hợp protease, enzyme phiên mã ngược intergrase Env (envelope): mãhóa tổng hợp kháng nguyên bề mặt gp160 với hai tiểu phần gp 41 gp120 Nhóm gen điều hòa ... QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3 .1 Tách dòng gen p24 HIV 3 .1. 1 Khuếch đại genmãhoá protein p24 virus HIV phương pháp Nested- PCR Để khuếch đại genmãhóa p24 HIV, sử dụng phương pháp Nested–PCR Khuôn cho phản...
... Lên men lần I Lên men lần II 16 .35 16 . 51 12 l Amy IL-2 24 h 48 h 0h 24 h 48 h 0h 24 h 48 h 18 .47 20. 21 15.96 18 .64 20.43 14 . 91 18.79 19 .26 18 .67 19 .79 16 .55 18 . 51 19.65 16 . 51 18. 91 20.09 3.5 Real-time ... 1, 29 1, 11 48h 0,35 1, 19 1, 03 0,92 - 13 72h 96h 0,36 0, 31 1,20 1, 04 1, 04 0,90 0,93 0,80 1, 01 0,87 0,86 Tỷ lệ khác biệt gene MF(ALPHA )1 theo thời gian chủng P pastoris mang gene mãhóa cho amylase ... Real-time PCR biểu gene MF(ALPHA )1 3.5 .1 Kết Real-time PCR đoạn gene MF(ALPHA )1 Kết cho thấy phụ thuộc tuyến tính mức độ biểu gene MF(ALPHA )1 với mức độ biểu gene ngoại lai (il-2 amylase) Cuối...
... (đoạn gen gp120B_EX) Tinh DNA plasmid ĐC1-3: Tương ứng với dòng plasmid tái tổ hợp số 4, 10 , 12 Gen gp120B_EX vector biểu pET32a(+) giải trình tự Kiểm tra khung đọc gen gp120B vector pET32a(+) Biểu ... Western Blot 2+ KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Thiết kế vector biểu pET32a(+) mang gen gp120B Khuếch đại gen gp120B_EX cặp mồi biểu ĐC1: Thang DNA chuẩn 1kb ĐC2: sản phẩm PCR Tạo vector tái tổ hợp pET32a(+) ... hợp pET32a(+) mang gen gp120B_EX ĐC 1: Plasmid gốc vector pET32a(+) ĐC1: Thang DNA chuẩn kb ĐC 2 -12 : DNA plasmid có khả mang gen gp120B_EX ĐC2-6: Các dòng plasmid 3, 4, 8, 10 , 12 cắt BamH I Xho...
... hợp genmãhóa cho thụ thể với genmãhóa cho NK1 biểu chúng hai hệ vector pCDNA3 .1 pEGFP-N1 cho kết tốt Đây tiền đề cho lựa chọn thiết kế vector biểu pCDNA3 pEGFP-N1 đề tài pCDNA3 pEGFP-N1 vector ... nghiện rượu [13 ], … 1. 5 VECTOR BIỂUHIỆNGENMÃHÓA CHO THỤ THỂ NEUROKININ -1 Genmãhóa cho thụ thể liên kết với G protein dung hợp vào nhiều hệ vector nhiều dòng tế bào khác Người ta thử biểu ... 3’-NK1, Giếng M: thang chuẩn SY100 3 .1. 4 Tách dòng đoạn 5’-NK1 3’-NK1 cDNA mãhóa cho thụ thể neurokinin -1 Sau tinh sạch, đoạn 5’-NK1 3’-NK1 đưa vào vector pJET1.2 phản ứng nối sử dụng kit Gene JET...
... suốt Vector pET32a(+) mang gen gp120B_EX đặt tên pETgp120B 3.2 Biểugen gp120B vi khuẩn 3.2 .1 Biểugen gp120B vi khuẩn E. coli chủng BL 21 StarTM (DE3) Chúng sử dụng chủng biểu E. coli BL 21 StarTM ... trình tự đoạn gen đích hồn tồn thơng suốt, khơng xuất mã kết thúc (stop codon) gen gắn vào hệ vector pET32a(+) 31 61 91 1 21 M E I K H S W D V H 15 1 L G 18 1 211 2 41 2 71 3 01 3 31 E N V N N Q P V ... biểu pET32a(+) – gp120B Quy trình thiết kế vector biểu thực theo sơ đồ (Hình 3 .1) Đoạn genmãhóa protein GP120 phân type B virus HIV tiến hành biểu kí hiệu gp120B_EX 3 .1. 1 Khuếch đại gen gp120B...
... nấm nem S cerevisiae[8] GeneMFALPHA gồn gene là geneMF(ALPHA )1 và gene MF(ALPHA)2 mãhóa pheromone lai alpha-factor tế bào alpha nấm men Tuy nhiên, phần lớn pheromone lai alpha đƣợc tạo geneMF(ALPHA )1 ... histidinol dehydrogenase (GS 115 ); chủng có đợt biến gây gene liên quan tới trình sử dụng methanol (KM 71, MC 10 0-3); chủng khuyết protease (SMD 116 3, SMD 116 5, SMD 116 8) [19 ] Bảng 1. 1: Các chủng biểu hiệnP ... khoảng 12 .000 bô ̣ mẫu dò đă ̣c hiê ̣u cho các gen ̣ genome của S cerevisiae và Schizosaccharomyces pombe cho thấy có gene có khác biệt biểugen chủng nghiên cứu có gene mãhóa pheromone lai...
... Plant Cell Environ 31( 1): 16 5-76 elegans Nature 3 91: 806- 811 10 Geigenberger P, Reimholz R, Deiting U, Sonnewald U and Stitt M (19 99) Decreased expression of sucrose phosphate Synthase Strongly ... pyrocarbonat DNA Deoxyribonucleic Acid dNTP deoxynucleosit triphotphat (deoxynucleoside triphosphate) EDTA Ethylene diamine tetraacetic acid EtBr đEtBrEthiium bromide E. coli Escherichia coli gus β-glucuronidase ... liệu gen NCBI trình tự gen Invertase đƣợc công bố (www.ncbi.nlm.nih.gov) Kết thu đƣợc sáu trình tự genmãhóa cho enzyme Invertase mía, có trình tự mãhóa cho enzyme Invertase hòa tan (soluble acid...
... http://www.lrc-tnu.edu.vn 26 2.2.2.8 Biểu protein staphylococcal enterotoxin B tế bào vi khuẩn Escherichia coli chủng BL 21( DE3) Nguyên lý: Ecoli BL 21( DE3) chủng biểu mang genmãhóa enzym T7 RNA polymerase genome ... vector biểu pET21a+ mang gen seb đột biến 3.2 .1 Xử lý enzym hạn chế tạo đầu cắt so le gen pET21a+ - Chuẩn bị vector biểu pET21a+ Muốn gen đích biểu thành protein cần thiết kế gen vào vector mang ... Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Vibrio chlolera, Samonella aureuslmonella, Campylobacterer, Yersinia enterocolitica v.v [12 ] Ở nước châu Á, tụ cầu vàng (S aureus) nguyên...
... Plant Cell Environ 31( 1): 16 5-76 elegans Nature 3 91: 806- 811 10 Geigenberger P, Reimholz R, Deiting U, Sonnewald U and Stitt M (19 99) Decreased expression of sucrose phosphate Synthase Strongly ... pyrocarbonat DNA Deoxyribonucleic Acid dNTP deoxynucleosit triphotphat (deoxynucleoside triphosphate) EDTA Ethylene diamine tetraacetic acid EtBr đEtBrEthiium bromide E. coli Escherichia coli gus β-glucuronidase ... liệu gen NCBI trình tự gen Invertase đƣợc công bố (www.ncbi.nlm.nih.gov) Kết thu đƣợc sáu trình tự genmãhóa cho enzyme Invertase mía, có trình tự mãhóa cho enzyme Invertase hòa tan (soluble acid...