Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa

... dung nghiên cứu3 .2.1. Đánh giá các chỉ tiêu chất lượng gạo của một số giống lúa địa phương: nhiệt hoá hồ, độ bền gel, và hàm lượng amylose. 3.2.2.Sử dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm ... phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa Mục đích và yêu cầu- Khảo sát đánh giá một số chỉ tiêu cơ bản liên quan đến hàm lượng amylose của các giống địa phương.- Xác định gen waxy quy ... giống ứng dụng vào nghiên cứu và chọn tạo các giống mới có năng suất, chất lượng với hàm lượng amylose hợp lý. Dựa trên cơ sở đó chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân...

... nghiên cứu 3.2.1. Đánh giá các chỉ tiêu chất lượng gạo của một số giống lúa địa phương: nhiệt hoá hồ, độ bền gel, và hàm lượng amylose. 3.2.2.Sử dụng chỉ thị phân tử phát hiện gen quy định hàm ... phân tử phát hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa Mục đích và yêu cầu - Khảo sát đánh giá một số chỉ tiêu cơ bản liên quan đến hàm lượng amylose của các giống địa phương. - Xác định gen ... giống ứng dụng vào nghiên cứu và chọn tạo các giống mới có năng suất, chất lượng với hàm lượng amylose hợp lý. Dựa trên cơ sở đó chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị...

... ĐầU1.1.Đặt vấn đề: Cây lúa (Oryza sativa L.) là một trong ba cây lương thực chủ yếu trên thế giới (lúa mì ,lúa gạo,ngô),có tầm quan trọng sống còn với hơn nửa dân số thế giới .Hiện nay với sự gia tăng dân số nhanh và sự giảm dần diện tích đất nông nghiệp đặc biệt là đất canh tác lúa mỗi năm thì vấn đề đảm bảo an ninh lương thực là yêu cầu cấp thiết cần quan tâm trước mắt cũng như lâu dài.Do đó,để tăng năng suất lúa gạo,một trong những hướng  đặt ra có hiệu quả cao đó là sử dụng ưu thế lai. Các giống lúa lai hiện nay cho có thể cho năng suất cao hơn 20­30% so với các giống lúa thường .Hiện nay,chúng ta đang sử dụng  hai hệ thống:hệ thống lúa lai hai dòng và hệ thống lúa lai ba dòng.Nhưng lúa lai hai dòng vượt trội hơn hẳn như:cơ hội chọn tạo các dòng bố lớn thuận lợi cho việc cải tạo chất lượng gạo,không có hiệu ứng đồng tế bào chất nên ít bị sâu hại hơn,năng suất cao hơn lúa lai ba dòng từ 5­10% ,chỉ cần hai dòng khác nhau về bản chất di truyền(một là dòng TGMS hoặc PGMS,hai là dòng cho phấn) nên giá thành giảm,tính trạng bất dục đực mẫn cảm với điều kiện môi trường(EGMS) chủ yếu do một cặp gen lặn điều khiển thuận lợi cho việc tạo giống mới. Để chọn tạo lúa lai hai dòng thành công thì dòng TGMS phải nhiều và phong phú,từ đó mới tạo ra được tổ hợp cho ưu thế lai cao .Hiện nay các dòng TGMS đang được sử dụng như:103S,T1S­96,64S,287S,36S2,Kim 76S,Pair 64S và 25S.Các nhà khoa học đã tìm được 6 gen TGMS(tms1, tms2, tms3, tms4, tms5, tms6).Mỗi gen này có ngưỡng chuyển hóa hữu dục và bất dục khác nhau,trong đó ,gen tms2 có ngưỡng chuyển hóa hữu dục ổn định. Nhà chọn tạo giống đã sử dụng các gen TGMS này lai chuyển vào các dòng,giống lúa triển vọng để tạo dòng TGMS tốt,có khả năng phối hợp cao,tạo ra nhiều tổ hợp lai mới cho ưu thế lai cao như TH3­3,Việt Lai 20,TH3­4,… Bằng  việc sử dụng ADN marker (chỉ thị phân tử)  thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút ngắn.Các chỉ thị liên kết chặt  với các tính trạng kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn vật liệu nghiên cứu.  Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi tiến hành đề tài:  Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các dòng TGMS mới”.1.2.Mục đích và yêu cầu:1.2.1.Mục đích:­Xác định gen tms2 trong tập đoàn các dòng TGMS bằng chỉ thị phân tử. Nghiên cứu di truyền gen tms2. 1.2.2 Yêu cầu : ­Khảo sát một số đặc điểm nông sinh học của các tổ hợp lai F1­Chiết tách AND để tiến hành phản ứng PCR­Đánh giá được khả năng hữu – bất dục bằng phương pháp truyền thống của các tổ hợp lai F2. Phát hiện gen tms2 ở các dòng TGMS và thế hệ F2 .PHầN ... LIệU2.1. Hiện tượng ưu thế lai 2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng­ Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng ­ Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng­ Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai dòng(EGMS).       + Phương pháp truyền thống        + Chỉ thị phân tử và ứng dụng 2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt NamPHầN ... LIệU2.1. Hiện tượng ưu thế lai 2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng­ Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng ­ Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng­ Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai dòng(EGMS).       + Phương pháp truyền thống        + Chỉ thị phân tử và ứng dụng 2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt NamPHầN III : VậT LIệU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CứU3 .1. Đối tượng , vật liệu , địa điểm và thời gian nghiên cứu  3.1.1. Đối tượng nghiên cứu             Gồm một số tổ hợp lai F1­­­ , quần thể F2 3.1.2. Vật liệu nghiên cứu  * Thí nghiệm trong phòng:Thiết bị :+ Máy PCR , máy chạy điện di ,  máy chụp ảnh điện di ,  máy li tâm , máy votex ,  tủ lạnh , lò vi sóng .           + Các loại ống effendof , các loại pipet và đầu tiếp đi kèm . Thành phần cho phản ứng  PCR           + Cặp mồi phát hiện gen bất dục đực tms2 theo M.T.Lopez và cộng sự (2003)có trình tự là :              RM11_F:5’­TCTCCTCTTCCCCCGATC­3’            RM11_R:5’­ATAGCGGGCGAGCTTAG­3’Hóa chất chạy PCR : dNTD , MgCl2 , Taq ADN polymerase , PCR mastermix , nước cất Hóa chất dùng để chiết tách ADN hệ gen :Thành phần...

... ĐầU1.1.Đặt vấn đề: Cây lúa (Oryza sativa L.) là một trong ba cây lương thực chủ yếu trên thế giới (lúa mì ,lúa gạo,ngô),có tầm quan trọng sống còn với hơn nửa dân số thế giới .Hiện nay với sự gia tăng dân số nhanh và sự giảm dần diện tích đất nông nghiệp đặc biệt là đất canh tác lúa mỗi năm thì vấn đề đảm bảo an ninh lương thực là yêu cầu cấp thiết cần quan tâm trước mắt cũng như lâu dài.Do đó,để tăng năng suất lúa gạo,một trong những hướng  đặt ra có hiệu quả cao đó là sử dụng ưu thế lai. Các giống lúa lai hiện nay cho có thể cho năng suất cao hơn 20­30% so với các giống lúa thường .Hiện nay,chúng ta đang sử dụng  hai hệ thống:hệ thống lúa lai hai dòng và hệ thống lúa lai ba dòng.Nhưng lúa lai hai dòng vượt trội hơn hẳn như:cơ hội chọn tạo các dòng bố lớn thuận lợi cho việc cải tạo chất lượng gạo,không có hiệu ứng đồng tế bào chất nên ít bị sâu hại hơn,năng suất cao hơn lúa lai ba dòng từ 5­10% ,chỉ cần hai dòng khác nhau về bản chất di truyền(một là dòng TGMS hoặc PGMS,hai là dòng cho phấn) nên giá thành giảm,tính trạng bất dục đực mẫn cảm với điều kiện môi trường(EGMS) chủ yếu do một cặp gen lặn điều khiển thuận lợi cho việc tạo giống mới. Để chọn tạo lúa lai hai dòng thành công thì dòng TGMS phải nhiều và phong phú,từ đó mới tạo ra được tổ hợp cho ưu thế lai cao .Hiện nay các dòng TGMS đang được sử dụng như:103S,T1S­96,64S,287S,36S2,Kim 76S,Pair 64S và 25S.Các nhà khoa học đã tìm được 6 gen TGMS(tms1, tms2, tms3, tms4, tms5, tms6).Mỗi gen này có ngưỡng chuyển hóa hữu dục và bất dục khác nhau,trong đó ,gen tms2 có ngưỡng chuyển hóa hữu dục ổn định. Nhà chọn tạo giống đã sử dụng các gen TGMS này lai chuyển vào các dòng,giống lúa triển vọng để tạo dòng TGMS tốt,có khả năng phối hợp cao,tạo ra nhiều tổ hợp lai mới cho ưu thế lai cao như TH3­3,Việt Lai 20,TH3­4,… Bằng  việc sử dụng ADN marker (chỉ thị phân tử)  thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút ngắn.Các chỉ thị liên kết chặt  với các tính trạng kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn vật liệu nghiên cứu.  Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi tiến hành đề tài:  Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các dòng TGMS mới”.1.2.Mục đích và yêu cầu:1.2.1.Mục đích:­Xác định gen tms2 trong tập đoàn các dòng TGMS bằng chỉ thị phân tử. Nghiên cứu di truyền gen tms2. 1.2.2 Yêu cầu : ­Khảo sát một số đặc điểm nông sinh học của các tổ hợp lai F1­Chiết tách AND để tiến hành phản ứng PCR­Đánh giá được khả năng hữu – bất dục bằng phương pháp truyền thống của các tổ hợp lai F2. Phát hiện gen tms2 ở các dòng TGMS và thế hệ F2 .PHầN ... LIệU2.1. Hiện tượng ưu thế lai 2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng­ Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng ­ Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng­ Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai dòng(EGMS).       + Phương pháp truyền thống        + Chỉ thị phân tử và ứng dụng 2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt NamPHầN ... LIệU2.1. Hiện tượng ưu thế lai 2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng­ Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng ­ Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng­ Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai dòng(EGMS).       + Phương pháp truyền thống        + Chỉ thị phân tử và ứng dụng 2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới ­ Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt NamPHầN III : VậT LIệU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CứU3 .1. Đối tượng , vật liệu , địa điểm và thời gian nghiên cứu  3.1.1. Đối tượng nghiên cứu             Gồm một số tổ hợp lai F1­­­ , quần thể F2 3.1.2. Vật liệu nghiên cứu  * Thí nghiệm trong phòng:Thiết bị :+ Máy PCR , máy chạy điện di ,  máy chụp ảnh điện di ,  máy li tâm , máy votex ,  tủ lạnh , lò vi sóng .           + Các loại ống effendof , các loại pipet và đầu tiếp đi kèm . Thành phần cho phản ứng  PCR           + Cặp mồi phát hiện gen bất dục đực tms2 theo M.T.Lopez và cộng sự (2003)có trình tự là :              RM11_F:5’­TCTCCTCTTCCCCCGATC­3’            RM11_R:5’­ATAGCGGGCGAGCTTAG­3’Hóa chất chạy PCR : dNTD , MgCl2 , Taq ADN polymerase , PCR mastermix , nước cất Hóa chất dùng để chiết tách ADN hệ gen :Thành phần...

... thể ñược phát hiện bằng các chỉ thị như: chỉ thị sinh hóa, chỉ thị hình thái, chỉ thị phân tử Những chỉ thị này từ lâu ñã là những công cụ hữu hiệu trong chương trình chọn giống. Chỉ thị sinh ... cho từng phân tử ADN. Ở thực vật, chỉ thị này lần ñầu tiên ñược áp dụng trong nghiên cứu gen tổng hợp ARN ribosome trong vùng cấu trúc nhân của lúa mỳ. Từ ñó chỉ thị này ñược ứng dụng ñể lập ... giữa các chỉ thị hình thái và chỉ thị phân tử là yêu cầu cấp thiết. Trên cơ sở ñó chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài ″″″″ Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử SSR ñánh giá nguồn bố mẹ phục...

... trạng số lượng, chọn lọc nhờ sự trợ giúp của các chỉ thị phân tử. Chỉ thị phân tử là những chỉ thị có bản chất là đa hình ADN. Thông qua việc phát hiện những đoạn ADN liên kết chặt với gen đích ... mặn”. 2. Mục tiêu nghiên cứu của đề tài 2.1. Mục tiêu chung Nghiên cứu ứng dụng phương pháp chọn giống bằng chỉ thị phân tử và lai trở lại để cải tiến giống lúa trồng đại trà quy mô lớn trong ... và xác định giống lúa trồng phổ biến sử dụng làm giống được cải tiến (nhận gen) . - Ứng dụng phương pháp chọn giống bằng chỉ thị phân tử và lai trở lại (MABC) quy tụ locus gen Saltol chịu mặn...

... LIỆU NGHIÊN CỨU 31.1. Bạch đàn urô và giá trị sử dụng 31.2. Kết quả nghiên cứu cải thiện giống Bạch đàn urô tại Việt Nam 51.3. Chỉ thị phân tử ADN 71.4. Ứng dụng chỉ thị phân tử trong ... ứng dụng chỉ thị phân tử trong nghiên cứu cây lâm nghiệp Thời gian: 2007 Kinh phí: 3.000.000 Địa điểm:Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt N am N ội dung: Hội thảo về ứng dụng chỉ thị phân tử ... 26/9/2008 - Đề tài thực hiện chậm, phải xác định được chỉ thị phân tử liên quan đến tính trạng chọn giống (sinh trưởng nhanh, cải thiện chất lượng gỗ) và ứng dụng các chỉ thị này trong chọn...

... các giống lúa thơm và không thơm sử dụng chỉ thị L05 và chỉ thị BADH 2chỉ thị L05 và chỉ thị BADH2 Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và BADH2 trong Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và ... ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ ADN ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ ADN XÁC ĐỊNH GENXÁC ĐỊNH GENPHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG LÚA PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG LÚA THƠMTHƠMĐẶT VẤN ĐỀĐẶT VẤN ĐỀCây lúa là cây ... dụng chỉ thị phân tử để xác định các Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử để xác định các dòng lúa mang gen thơm từ các thế hệ sớmdòng lúa mang gen thơm từ các thế hệ sớm Việc sử dụng chỉ thị...

... dòng, giống lúa thơm và không thơm cho thấy:+ Các chỉ thị phân tử RG28, RM342 không phân biệt được các giống lúa mang gen thơm và không mang gen thơm.+ Chỉ thị phân tử L05 có thể phân biệt được ... thấy việc sử dụng chỉ thị BADH2 đã xác định được toàn bộ các giống lúa thơm có mang gen thơm fgr với các giống lúa không thơm. Điều đó cho thấy chỉ thị phân tử BADH2 có độ ... chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơmSử dụng chỉ thị phân tử BADH2 để xác định các dòng lúa mang gen thơm từ các thế hệ sớm Mỗi dòng được xác định trên...

... giống lúa mang gen thơm và giống lúa không mang gen thơm. Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử BADH2 ... gen thơm và không mang gen thơm. Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và BADH2: Đối với chỉ ... Xác định chỉ thị phân tử ADN liên kết với gen thơm fgr trong lúa - Kết quả đánh giá sự đa hình của sản phẩm điện di ADN của các giống lúa thơm và không thơm bằng chỉ thị...