Giáo trình học môn công nghệ DNA tái tổ hợp

... Exonuclease 5’ pNOH dsDNA lai RNA :DNA + 5’pN(pN)npNOH + ssDNA Mg2+ làm mẫu dò E coli 3’ 5’ Công nghệ DNA tái tổ hợp ) C 5’ 3’ DNA polymerase DNA enzyme DNAOH + ndNTP DNA- (pdN)n + nPPi 2+ Mg ... ₫ược can thiệp Quá trình công nghệ trình kỹ thuật nằm dây chuyền công nghệ => quan tâm tới trình vật chất lượng Â Trong nội dung môn học, khái niệm trình ₫ược hiểu trình công nghệ Chương 1: Mở ... có khả chịu nhiệt cao phù hợp với điều kiện phản ứng PCR, tổng hợp sợi DNA dài kb vòng 30 giây 72oC Công nghệ DNA tái tổ hợp 11 - Một hạn chế Taq pol xác không cao trình chép bị chế đọc sửa (hoạt...

565
1,539
0

Giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp

... cạnh giáo trình như: sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp giúp sinh viên tiếp cận thêm lĩnh vực khác công nghệ ... Lời nói đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) phận quan trọng công nghệ chìa khóa (key technology) lĩnh vực công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái tổ hợp đời sở ... thực vật (công nghệ sinh học truyền thống) Theo nghĩa phổ biến trình sản xuất sử dụng giống sinh vật mới, tạo công nghệ DNA tái tổ hợp (công nghệ sinh học hiện đại) Trong công nghệ sinh...

171
1,848
15

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Phụ lục ppt

... vật (công nghệ sinh học ) Theo nghĩa phổ biến trình sản xuất sử dụng giống sinh vật mới, tạo công nghệ DNA tái tổ hợp (công nghệ sinh học ) Trong công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái tổ hợp ( ... đầu trình tổng hợp polypeptide, trình tự dẫn đầu không dịch mã thành trình tự amino acid Công nghệ DNA tái tổ hợp 199 Trình tự điều hòa (regulatory sequence) Một trình tự DNA tham gia vào trình ... polymerase để tổng hợp mRNA từ khuôn mẫu DNA Phiên mã ngược (reverse transcription) Quá trình tổng hợp DNA từ khuôn mẫu mRNA nhờ enzyme phiên mã ngược (reverse transcriptase) Công nghệ DNA tái tổ hợp 193...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 1 ppsx

... 5 .1 Các loại đệm dùng phản ứng cắt DNA : - (H) - (M) - (L) Công nghệ DNA tái tổ hợp ( o - -2 0 o 1. 2 NaCl MgCl2 Dithiothreitol (mM) (mM) (mM) (mM) 10 10 50 10 10 10 0 Cao Tris.HCl pH 7,5 50 10 ... BstXI : 1Công nghệ DNA tái tổ hợp o /50 C XbaI /37oC EcoRI /37oC 10 mM L( - - hai -2 0oC (hoặc -8 0oC (ice bath) II Các enzyme trùng hợp DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase ... ssDNAOH + ndNTP - DNA- (pdN)n + nPPi 2+ Mg 2+ Mn : DNA 3’-OH - Ứng dụng Công nghệ DNA tái tổ hợp 14 + Thêm đuôi đồng trùng hợp (homopolymer) để tạo đầu so le cho phân tử DNA dùng tạo dòng (xem chương...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2 potx

... tách DNA loại gel vào (B 2. 3), kích thước điện tích DNA tách DNA polyac Acrylamide (% w/v) ch (nucleotide) 3,5 1.00 0 -2 .000 5,0 8 0-5 00 8,0 6 0-4 00 12, 0 4 0 -2 00 15,0 2 5-1 50 20 ,0 6-1 00 20 cm - DNA ... thích hợp với gel 2% Công nghệ DNA tái tổ hợp 27 A B C 2 Hình 2. 3 Điện di mẫu DNA giống nồng độ agarose khác A: 1%, B: 1,5% C: 2% - - Nhìn chung, DNA plasmid mạch vòng dịch chuyển nhanh DNA plasmid ... vòng đứt Dạng vòng đóng DNA mạch vòng DNA mạch thẳng Hình 2. 4 Điện di plasmid có cấu hình khác Công nghệ DNA tái tổ hợp 28 4oC đến 30o Tr - - - thường dùng - - Các đoạn DNA dịch chuyển với tốc...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 3 doc

... kỳ sau: - Start program - “Hot start”: Khoảng 80oC/10 giây «pause» - sung L aq pol - Restart - 94oC/5 phút 59 - : 94oC /30 giây, 54o 72oC/1 phút - 72oC/10 phút - 4oC - Chạy -2 0oC - Tm (non-specific) ... 3 5 -3 ) Nguyên tắc PCR trình bày hình 3. 2 3. 3 T DNA polymerase (gọi tắt Taq pol) bắt đ tổng hợp (synthetic oligonucleotide) có khoảng 1 0-2 0 nucleotide Nếu biết trình tự đoạn gen ... kỳ sau: 54 - Start program - 95oC/5 phút : 95oC /30 giây, 50o - 72oC/1 phút - 72oC/10 phút 4oC - Chạy điện di để h 3. 7) -2 0oC đ - thực tham khảo Taq pol, sau chia tube cho DNA Taq pol - Thao tác...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 4 pot

... CM + IPTG Khuẩn lạc trắng-thể tái tổ hợp Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp Bảo quản riêng rẽ dòng tái tổ hợp Hình 4. 16 Tạo dòng BAC vector Công nghệ DNA tái tổ hợp 97 - BAC vector cắt enzyme ... ori: trình tự khởi đầu chép, số vị trí nhận biết cho RE - L Đ Công nghệ DNA tái tổ hợp 76 polylinkers (vùng như: + Ap r lacZ’ 2.600 bp, mang gen 4. 2 a gen lacZ’ :  lacZ’  40 0 tiện 42 0 44 0 46 0 ... bacteriophage M13 tru : - E coli - galactosidase (Z ) gen -thiogalactoside (IPTG) -gal Công nghệ DNA tái tổ hợp 93 -gal Hình 4. 14 Dạng tự nhiên bacteriophage M13 Các gen từ 1-1 0 có chức khác liên...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 5 pps

... broth Công nghệ DNA tái tổ hợp 108 nucleic acid quan tâm (mẫu dò) , thường 32 5. 2) (smear) gel (Hình 5. 3) ( 2-1 0 Hind - Southern blot Công nghệ DNA tái tổ hợp 109 A B E E C E E E - E - EcoRI ... dấu (Hình 5. 9) Công nghệ DNA tái tổ hợp 118 (a) 5 HO 3’ HO (b) PNK 3’ 5 HO OH OH 5 3’ HO OH 5 OH 3’ ATP Hình 5. 9 Đánh dấu đuôi đoạn DNA nhờ enzyme polynucleotide kinase (PNK) (a) DNA dephosphoryl ... Northern blot, screening…) Công nghệ DNA tái tổ hợp 120 (a) 5 3’ (b) 5 3’ 5 HO DNA polymerase I Đoạn mồi (c) Đoạn mồi Hình 5. 11 Đánh dấu DNA cách kéo dài đoạn mồi (a) DNA biến tính để tạo phân...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 6 pps

... nguyên Công nghệ DNA tái tổ hợp 150 trình tự vector : thân mRNA (pre-mRNA) hoàn phiên mã ngược hóa hoàn - mRNA Các bước trình xây dựng thư viện cDNA sau: bỏ 27 Công nghệ DNA tái tổ hợp 151 ... 5’…CTGCAG…3’ t PstI Pst 6. 5) :dG E coli 3’ - ) (Hình 6. 6) Công nghệ DNA tái tổ hợp 137 PstI AAAAAA Tổng hợp sợi thứ oligo (dT)-primer Plasmid AAAAAA TTTTTT Cắt PstI Tổng hợp sợi cDNA thứ hai CTGCA ... tái tổ hợp có số thuận lợi sau: 140 - Không cần - - E coli đ 6. 8) promoter vector phát triển -adapter - 6. 9) Công nghệ DNA tái tổ hợp 141 cDNA sợi đôi Sửa chữa cách xử lý với đoạn Klenow Bổ...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 7 pptx

... Protein dung hợp có ưu điểm sau: Công nghệ DNA tái tổ hợp 156 - Protein dung hợp thường sản xuất với hàm lượng lớn khởi đầu phiên mã dịch mã điều khiển trình tự tiêu chuẩn E coli - Dung hợp trình tự ... điểm, thân protease tinh Công nghệ DNA tái tổ hợp 174 sắc ký lực glutathione-Sepharose Nếu protein đích biểu dung hợp với glutathione-S-transferase tinh cột glutathione-Sepharose Sau xử lý với ... SDS-PAGE, cố định đó) thông Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 67 qua kỹ thuật Western blot (hoặc immunoblot) (Hình 7. 9) Cơ chế phản ứng liên kết kháng nguyên-kháng thể trình bày hình 7. 10 Sau protein màng...

Nguyễn Huy Hoàng-sinh học phân tử-công nghệ DNA tái tổ hợp

... tạo phân tử DNA tái tổ hợp từ loài khác nhau, có nhiều ưu điểm biến nạp tế bào chủ Và từ đây, công nghệ DNA tái tổ hợp đời Hình 2.1 Quy trình tạo phân tử DNA tái tổ hợp Công Tài liệuDNA tái tổ hợp ... ADN tái tổ hợp Công Tài liệuDNA tái tổ hợp thành nghệ chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn tựu đạt 2.1 Khái niệm DNA tái tổ hợp phân tử DNA nhỏ, lắp ráp từ đoạn DNA lấy từ thể truyền gen cần chuyển ... nghệ DNA tái tổ hợp gì? Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) phận quan trọng công nghệ chìa khóa (key technology) lĩnh vực công nghệ sinh học Công nghệ DNA tái...

Cong nghe DNA tai to hop

... enzyme trùng hợp DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase dùng để tổng hợp DNA thể điều kiện in vitro 1.1 DNA polymerase I E coli Enzyme dịch chuyển điểm đứt (nick) DNA, nick điểm ... tự DNA Sau đó, DNA cắt RE vị trí tương ứng để tạo DNA đích, hoạt động theo chu trình có tính chất monomer DNA khuếch đại lên primer tương đồng hai đầu sợi đơn DNA có trình tự biết Công ngh DNA ... đoạn Klenow + Đánh dấu đoạn DNA để làm mẫu dò + Biến đổi đầu sole DNA sợi đôi thành đầu 1.4 Taq DNA polymerase (Thermus aquaticus) Taq DNA polymerase (Taq pol) loại DNA polymerase chịu nhiệt (M...

135
2,588
77

Công nghệ DNA tái tổ hợp

... thương mại phát triển công nghệ DNA tái tổ hợp dược phẩm dùng điều trị bệnh rối loạn người Năm 1979, Tổ hợp Eli Lilly bắt đầu sản xuất thương mại insulin người công nghệ DNA tái tổ hợp Trước thời điểm ... thời gian dài trước dùng kết phát tín hiệu lai nhanh 32 VI Các ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp có nhiều ứng dụng đời sống Các ứng dụng bao gồm sản xuất dược phẩm loại ... sinh thái học Công nghệ DNA tái tổ hợp ứng dụng để tạo nhiều sản phẩm thương mại, chẳng hạn: thuốc, hormone, enzyme giống trồng-vật nuôi Một công nghiệp hoàn toàn mới, công nghiệp công nghệ sinh...

Đại cương về Công nghệ DNA Tái tổ hợp

... trường hợp đó, tế bào chuyên sản xuất insulin trì tái sử dụng với hiệu kinh tế cao IV Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp với việc nghiên cứu gene Việc tách dòng tái tổ hợp ... truyền 2.1 DNA tái tổ hợp gì? DNA tái tổ hợp (recombinant DNA) phân tử DNA tạo ống nghiệm cách kết hợp DNA từ nguồn (loài) khác nhau, theo quy trình kỹ thuật định, gọi kỹ thuật tái tổ hợp DNA Thông ... coli DNA ''ngoại lai'' plasmid khác Chính kiện đặt móng mở triển vọng to lớn cho kỹ thuật DNA tái tổ hợp sau DNA xen vào DNA cắt với EcoRI Các đầu dính Tái tổ hợp DNA + DNA ligase Nối sai DNA tái...

20
3,315
47

Tài liệu Công nghệ DNA tái tổ hợp pptx

... dòng mang DNA tái tổ hợp Trong thí nghiệm tạo vector tái tổ hợp, hỗn hợp vector lượng lớn phân tử DNA cắt enzyme hạn chế gắn lại với enzyme DNA ligase Kết quả, hỗn hợp có plasmid tái tổ hợp lẫn ... Nhập môn Công nghệ sinh học 32 (physical mapping) Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA Đoạn DNA tổng hợp dựa khuôn mẫu mRNA gọi cDNA (complementary DNA) ba sau: - (Mg2+ - mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th ... mang đoạn DNA ngoại lai (foreign DNA) dùng kỹ thuật tái tổ hợp DNA Các vector dùng để tạo dòng đoạn DNA in vitro 5’-PO4 Trong thực tế, đoạn DNA gắn với để tạo phân tử DNA tái tổ hợp thường...

Xem thêm