... 3.1 Thiếtkếvector trung gian (pKS_xylB_hph) mang hai cấu trúc biểu xylB hph 3.1.1 Lắp ghép xylB vào vector trung gian Để thiếtkếvector trung gian pKS_xylB_hph, xylB hph lắp ghép vào vector ... 3.1.2.1 Thiếtkếvector tái tổ hợp pJET_hph Hph lắp ghép trực tiếp vào vector trung gian theo chiến lược thiếtkếvector đề ra, cấu trúc biểu gen mã hóa xylanase gen kháng hygromycin B nằm vector ... cấu trúc biểu xylB hph nấm mốc lại nằm vector pAN7.1 – GluA Do vậy, hai cấu trúc đưa vào vector trung gian Trước hết tiến hành thiếtkếvector trung gian mang cấu trúc biểu xylB dựa vector pAN7.1...
... gen mã hóa legumain vector chứa biểu pET- 32c(+), quy trình thiếtkếvectorbiểu mang gen mã hóa legumain tiến hành sau: • Bước 1: Cắt tinh đoạn gen mã hóa legumain vectorbiểu pET- 32c(+) • Bước ... phân liên kết peptide tạo thành peptide phân tử thấp, amino acid Các peptide hydrolase khác có tính đặc hiệu khác liên kết peptide Một số enzyme phân giải liên kết peptide chuỗi mạch polypeptide ... EcoRI Legumain 900bp pBTlegumain HindIII pET3 2c+ 6800bp Legumain 900bp EcoRI + pET3 2c 5900bp HindIII Hình 3.1: Sơ đồ thiếtkếvectorbiểu 3.1.1 Kết xử lý vector tách dòng pBT-legumain với enzyme...
... ( 1mg/ml) 2.1.4 Vectorbiểuvector tách dòng Vector pGEM -3Z dùng làm vector tách dòng pET -32a (+) dùng làm vectorbiểu 2.1.4.1 Vector tách dòng pGEM -3Z (hình 4) pGEM®-3Z vector tách dòng ... Nghiệp K13 Viện Đại Học Mở Hà Nội Hình 4: vector pGEM -3Z 2.1.4.2 VectorbiểupET -32 a(+) (hình 5) Vector pET- 32 có kích thước 5899bp thiếtkế cho biểu protein vi khuẩn E.Coli Vị trí tách dòng ... 4445-5302 Điểm khởi đầu f1 5434-5889 Hình 5: Vectorbiểu pET- 32 a(+) 2.2 Phương Pháp nghiên cứu Các bước để tách dòng, giải trình tự gen, thiếtkếvectorbiểu gen novS tóm tắt theo sơ đồ sau: Phạm...
... Hình 16: Sơ đồ thiếtkế mồi NK1 F3/R3 để khuếch đại cDNA-NK1 từ vector pNK1-3 Mặt khác, sử dụng mã mở đầu trình tự cDNA NK1 thay mã mở đầu thiếtkế sẵn vectorbiểu nên trình thiếtkế mồi chúng ... biểu chúng hai hệ vector pCDNA3.1 pEGFP-N1 cho kết tốt Đây tiền đề cho lựa chọn thiếtkếvectorbiểu pCDNA3 pEGFP-N1 đề tài pCDNA3 pEGFP-N1 vectorbiểu tế bào động vật với đặc điểm trình bày phụ ... Thiếtkế mồi Để biểu cDNA mã hóa cho thụ thể neurokinin-1 người, sử dụng hai vectorbiểu tế bào động vật pCDNA3 pEGFP-N1 Bước cần chuyển đoạn cDNA tách dòng vector pJET1.2 sang hai hệ thống vector...
... QSLRPHSSTT TTTTEIRLLT KPERKLSWLL 501 PPLSNN* KẾT LUẬN - Đã thiếtkế thành công vectorbiểu mang đoạn gen mã hóa legumain - Đoạn gen gắn vào vector pET- 32c(+)vào vị trí nhận biết enzyme giới hạn ... EcoRI HindIII Giếng pET- 32c(+) gốc không xử lý với enzyme Giếng pET- 32c(+) sau xử lý với enzyme giới hạn EcoRI HindIII 4 Kết biến nạp sản phẩm gắn kết pET- 32c(+) gen legumain Đĩa Petri chứa khuẩn ... phân liên kết asparaginyl + Hoạt động tối đa pH=5,5 + Tồn động vật thực vật + Legumain biểu cao số loại khối u như: tuyến tiền liệt, đại tràng ung thư vú Mục đích đề tài Thiếtkếvectorbiểu gen...
... vectorbiểu pcDNA3.1()Myc-His: pcDNA3.1(-) Myc-His (Invitrogen) vector 5.5 kb thiếtkế để biểu protein tái tổ hợp tế bào động vật có vú Vector có vị trí đọc để gắn đoạn gen đích với đầu C tận polypeptide ... Fectamin-2000, SuperFect ) KẾT LUẬN Đã tách dòng gen hFGF-10 từ ARN tổng số não người phản ứng RT-PCR Đã thiếtkếvectorbiểu pcDNA3.1(-)Myc-His có gắn đoạn gen hFGF-10 để biểu tế bào động vật có ... nghiên cứu, tìm hiểu tính chất FGF-10 biến đổi liên kết với mạch carbohydrate , sử dụng thiếtkếvector pcDNA3.1(-) Myc-His (Invitrogen) để biểu hFGF-10 tế bào động vật có vú VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG...
... OPHC2opt 43 3.1.3 Kết tổng hợp mồi gen OPHC2opt 43 3.2 THIẾTKẾVECTOR CHUYỂN GEN OPHC2opt 45 3.2.1 Thiếtkếvector tái tổ hợp pBI121 mang gen OPHC2opt 45 3.2.2 Kết tạo dòng A tumefaciens ... tài: Thiếtkếvectorbiểu gen organophosphorus hydrolase (OPHC2) phục vụ tạo chuyển gen phân hủy thuốc trừ sâu” Mục tiêu nghiên cứu Thiếtkế đƣợc cấu trúc mang gen OPHC2opt tối ƣu phù hợp với biểu ... tóm tắt q trình thí nghiệm thiếtkếvector chuyển gen pBI121/OPHC2opt trình chuyển gen OPHC2opt vào thuốc thông qua A tumefaciens 2.2.1 Thiếtkế cấu trúc OPHC2opt Thiếtkế cấu trúc gen OPHC2opt...
... 42 3.2 Thiếtkếvectorbiểu gen thực vật pCB301 chứa Sus1 promoter gen cryIA(c) 45 3.2.1 Chuyển promoter Sus1 vào vector trung gian pRTRA7/3 46 3.2.2 Chuyển kết cấu biểu chứa ... hành nghiên cứu đề tài: “Phân lập Sus1 promoter từ ngô thiếtkếvectorbiểu chứa Sus1 promoter gen cryIA(c)” 1.1 Mục tiêu đề tài Tạo vectorbiểu thực vật mang đồng thời Sus1 promoter phân lập từ ... gen, gắn gen vào vectorbiểu - Tạo đƣợc chủng Agrobacterium tumefaciens chứa Sus1 promoter gen cryIA(c) 1.3 Nội dung đề tài - Phân lập Sus1 promoter từ ngô - Thiếtkếvectorbiểu thực vật pCB301...
... nhẹ [30] 1.2 Vectorbiểu cài nhập gen vào nhiễm sắc thể vi khuẩn 1.2.1 Vectorbiểu E colì Nhiều hệ vector nhân dòng biểuthiết lập cải biến dựa loại vector tự nhiên V ector biểuvector mang đoạn ... dụng vectorbiểuthiếtkế nehiên cứu Mặt khác muốn tận dụng vị trí enzyme giới hạn có trons, gen la c Z đe bổ suna thêm vị trí cat đa điểm vectorthiếtkế Dựa cấu trúc vector thương phẩm pET 28b ... phổ biến có pETvector Dựa đặc điểm cua vector pULl thiếtkế thấy ràng, vector cỏ đầy du yếu tố cần thiết đôi với vectorbiêu 3.1.2 Tách dòna gen mã hóa cho Ị3-ealactosidase trơne, vector pUL...
... cho thụ thể neurokinin-1 49 3.2 THIẾTKẾVECTORBIỂUHIỆN GEN MÃ CHO THỤ THỂ NEUROKININ-1 .49 3.2.1 Thiếtkế mồi 49 3.2.2 Tách dòng vectorbiểu mang cDNA mã hóa cho th ụ ... với gen mã hóa cho NK1 biểu chúng hai hệ vector pCDNA3.1 pEGFP-N1 cho kết tốt Đây tiền đề cho lựa chọn thiếtkếvectorbiểu pCDNA3 pEGFPN1 đề tài pCDNA3 pEGFP-N1 vectorbiểu tế bào động vật với ... cDNA-NK1 hồn chỉnh vector Chuyển cDNA-NK1 vào vectorbiểu pCDNA3, pEGFP-N1 Tách dòng vectorbiểu pCDNA3, pEGFPN1 mang cDNA-NK1 Hình 5: Sơ đồ nghiên cứu tách dòng thiếtkếvectorbiểu cDNA mã hóa...
... cứu thiếtkếvectorbiểu mang gen OsNAC1 đặt điều khiển promoter cảm ứng điều kiện bất lợi RD29A Thiếtkếvectorbiểu pCAMBIA1301 mang promoter điều khiển RD29A Trong nghiên cứu này, để thiếtkế ... 4; hình 5C, giếng 1) Thiếtkếvectorbiểu pCAM-Rd mang gen OsNAC1 Để đưa trình tự mã hóa nhân tố phiên mã OsNAC1 vector pJET/OsNAC1 vào vectorbiểu pCAM-Rd, xử lí vector với enzyme BamHI (pCAM-Rd) ... RD29A Trong nghiên cứu này, để thiếtkếvectorbiểu gen OsNAC1 dựa hệ vector thương mại pCAMBIA1301, sử dụng vector pCAM-Ubi phòng Bệnh học phân tử thiếtkế làm nguyên liệu cho thí nghiệm (hình...
... Nội dung nghiên cứu - Nội dung 1: Thiếtkếvectorbiểu pET2 8-iEIB Cắt với XbaI EcoRI Cắt với XbaI EcoRI Hình 3.2 Sơ đồ thiếtkếvector pET2 8-iEIB 24 • Biến nạp vector tái tổ hợp vào chủng E coli ... gen iEIB vào vectorpET 28 Để gắn gen vào vectorbiểu phải tiến hành nhiều thao tác, trải qua nhiều bước khác Quy trình thực theo quy trình sau: 25 VectorpET 28 Vector pR-iEIB Thiếtkế Cắt với ... Hình 3.1: Cấu trúc vectorbiểu pET2 8 20 Hình 3.2 Sơ đồ thiếtkếvector pET2 8-iEIB .23 Hình 3.3 Quy trình gắn nối gen 25 Hình 3.4 Sơ đồ biến nạp plasmid pET2 8-iEIB vào E.coli...
... 2: Thiếtkếvectorbiểu mang polycistron operon chứa gen gltA, ech, fcs dựa tảng vector pET2 2b(+) - Gắn gen gltA vào vectorbiểu pET2 2b+ tạo tổ hợp vector pET2 2-G - Gắn gen ech vào vector pET2 2-G ... 4.2 Thiếtkếvectorbiểu chứa gen gltA, ech, fcs dựa tảng vector pET2 2b(+) 55 4.2.1 Kết gắn gen gltA vào pET2 2b+ tạo tổ hợp pET2 2-G .55 4.2.2 Kết gắn gen ech vào vector pET2 2-G ... hạn pET2 2-gen Hình 3.5: Sơ đồ quy trình thiếtkếvectorbiểu chứa gen * Kiểm tra chiều gắn gen vectorbiểu Các gen gắn theo thứ tự gltA→ech→fcs tương ứng với thứ tự cuả vị trí cắt giới hạn vector...
... Trong báo này, chúng tơi trình bày kết nhân dòng promoter terminator HSP 18.2 từ Arabidopsis nhằm tạo nguồn nguyên liệu di truyền để thiếtkếvector tăng cường biểu protein tái tổ hợp thực vật ... cung cấp Phương pháp Thiếtkế cặp mồi đặc hiệu để phân lập promoter terminator HSP 18.2 Sử dụng phần mềm Bioedit [11] trình tự nucleotide ngân hàng gen quốc tế NCBI để thiếtkế cặp mồi đặc hiệu ... HSP18.2 thiếtkế lý thuyết Trên Hình 2B, đường chạy số 1, xuất hai băng có kích thước 262 bp 2705 bp, kích thước tương ứng với kích thước terminator HSP 18.2 kích thước vector tách dòng pBT Kết phân...
... tiến hành nghiên cứu đề tài Thiếtkếvectorbiểu bước đầu định hướng biệt hóa tế bào gốc cuống rốn thành tế bào gan” để hồn thiện quy trình thiếtkếvectorbiểu chuyển vector vào tế bào gốc cuống ... Hình Cấu trúc vectorbiểu pCMV-GFP Những vector sử dụng chủ yếu việc biểu tế bào động vật vector adenovirus loạt vector thuộc dòng vector pSV pCMV Trong số vectorbiểu này, dòng vector pCMV sử ... 3.7.2 Kết phân tích trình tự gen 49 3.8 Thiếtkếvector chuyển gen biểu TBGTM 50 3.9 Đánh giá hiệu trình chuyển gen 51 PHẦN IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 4.1 Kết luận...
... học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ sinh học 1.2.3 VectorbiểupET 32a(+) Để biểu gene E coli vectorbiểu dùng plasmid, phage, cosmid Vectorbiểu plasmid thiếtkế nhằm mục đích sản xuất protein với lượng ... học thiếtkế * Chủngvisinhvật -ChủngE coli DH 10b đượcsửdụnglàmchủngtáchdòng gen - ChủngE coli BL 21 đượcsửdụng làmchủngbiểuhiện gen * Plasmid - Plasmid pET- 32a(+) đượcsửdụnglàm vector biểuhiện ... gầnn protein tái tổ hợp biểu hầu hếtt pha tan Hoàng Thị Hương 30 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công nghệ sinh học KẾT LUẬN - Đã thiếtkế thành công vectorbiểu pET3 2-xbx - Đã biểu thành công gen xbx...
... 26 3.2 Thiếtkếvectorbiểu pET2 2b(+)-senp2 28 3.2.1 Tinh sản phẩm cắt senp2, pET2 2 kit QIAGEN 29 3.2.2 Nối ghép gen senp2 vào vectorbiểu pET2 2b(+) 30 3.2.3 Cắt kiểm tra pET2 2b(+)-senp2 ... cứu: Thiếtkếvectorbiểubiểu gen mã hóa SENP2 Escherichia Coli Trần Thị Thanh Tuyền Lớp 1102 K18 MỤC TIÊU Mục tiêu thực đề tài: - Thiếtkế thành công vector pET2 2b(+) mang gene senp2 - Biểu ... 3.2 Thiếtkếvectorbiểu u hi pET2 2b(+)-senp2 Vector pUC57 chỉỉ thiếtkế cho mục đích tách dòng, òng, khơng có kh khả biểu protein ngoạii lai Do đó, chúng tơi tiến hành chuyển gen senp2 từ vector...
... nên tơi khơng thể thiếtkếvectorbiểu tảng vector pQE 30 Do tơi chuyển sang thiếtkếvectorbiểu tảng vectorpET 28 21 Plasmimid pLUG-crtY VectorpET 28 Đoạn gene crtY Vector pET2 8 mở vòng Plasmid ... PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 kết thiếtkếvectorbiểu mang polycistronic operon chứa gene idi-crtE-crtI-crtB-crtY tảng vector pET2 8 4.1.1 Kết gắn crtY vào vector pET2 8 tạo vector tái tổ hợp pET- Y ... PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 kết thiếtkếvectorbiểu mang polycistronic operon chứa gene idi-crtE-crtI-crtB-crtY tảng vector pET2 8 28 4.1.1 Kết gắn crtY vào vector pET2 8 tạo vector...
... dung 2: Thiếtkếvectorbiểu mang policistron gồm gene idi-crtE-crtI-crtB- crtY tảng vectorbiểu pET2 2b(+) tạo vector tái tổ hợp pET2 2-iEIBY Gắn gene crtY vào vectorbiểu pET2 2b(+) tạo vector ... tảng vectorbiểu pET2 2b(+) tạo vector tái tổ hợp pET2 2-iEIBY 46 4.2.1 Kết gắn gene crtY vào vector pET2 2b(+) tạo vector tái tổ hợp pET2 2-Y 46 4.2.2 Kết gắn cụm gene idi-crtE-crtI-crtB vào vector ... Hình 3.2: Cấu trúc vectorbiểu pET2 2b(+) 28 Hình 3.3: Quy trình thiếtkếvector pR-iEIBY 33 Hình 3.4: Quy trình thiếtkếvector pET2 2iEIBY 34 Hình 4.1: Kết điện di kiểm tra...