phát triển qui trình mpcr 2 multiplex polymerase chain reaction phát hiện đồng thời wssv white spot syndrome virus hpv hepatopancreatic parvovirus và gen βactin của tôm sú penaeus monodon
... tôm lớn, X10 53 IV .2 Kết tômsú P monodon IV .2. 1 Kết thí nghiệm theo quy trình kit để ổn định phƣơng pháp Quy trình lai chỗ ISH đƣợc thử nghiệm để kiểm tra virusWSSVtômsú Viện Nghiên Cứu Nuôi ... l, 50 l III.6 .2. 2 Phương pháp ISH để chẩn đoán virus đốm trắng WSSVtômsúPenaeusmonodon A Bố trí thí nghiệm theo quy trình kit ổn định phƣơng pháp Chúng thực chẩn đoán theo quy trình kit khuyến ... công trình nghiên cứu loại mô đích virus gây bệnh đốm trắng Lo ctv thực Họ gây nhiễm nhân tạo virus gây bệnh đốm trắng WSBV (White spot baculovirus) tômsú đạt tỷ lệ nhiễm 100% Sau 40 nhiễm, họ phát...
... KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 QuitrìnhmPCRphátđồngthời E ictaluri A hydrophila QuitrìnhmPCRphátđồngthời E ictaluri A hydrophila từ máu cá tra thực dựa hai quitrình PCR đơn mồi phát E ictaluri ... vi khuẩn E ictaluri 2. 25x108-1 CFU/ml, mật độ cho vi khuẩn A hydrophila 4.5 x108-1 CFU/ml 3 .2 QuitrìnhmPCRphátđồngthời E ictaluri F columnare QuitrìnhmPCRphátđồngthời E ictaluri F columnare ... Giếng 2- 9: DNA chiết tách từ 100l máu với mật độ cho loại vi khuẩn (E ictaluri F columnare) 2. 25x108-1 CFU/ml 3.3 QuitrìnhmPCRphátđồngthời F columnare A hydrophila QuitrìnhmPCRphátđồng thời...
... 20 08 PháttriểnquitrìnhmPCR (multiplex PolymeraseChain Reaction) phátWSSV (White SpotSyndrome Virus) , HPV (Hepatopancreatic Parvovirus) gen nội chuẩn β-actin tômsú (Penaeus monodon) Luận ... WSSVgen β-actin tôm Trên sở quitrình PCR phátWSSV OIE (20 06) quitrình RTPCR phát β-actin Oanh (20 08), quitrìnhmPCRphátWSSVgen β-actin thực với nồng độ hóa chất theo quitrìnhphátWSSV ... sở đạt trước qui trình: (1) QuitrìnhmPCRphátđồngthờiWSSV nội chuẩn, sản phẩm PCR cho kết đồngthời hai vạch WSSV vị trí 1447 bp 21 6 bp (β-actin) (2) QuitrìnhmPCRphátđồngthời MBV nội...
... thực nhờ vào dạng biến hóa PCR kỹ thuật phức hợp PCR (mPCR) (Del Cero et al., 20 02, Panicker et al., 20 04) Để rút ngắn thời gian chẩn đoán chi phí phân tích, quitrìnhmPCRphátđồngthời E ictaluri, ... giây; 72 C 30 giây; lặp lại chu kì 30 lần; 72 C 10 phút Kết điện di sản phẩm PCR giếng đồngthời vạch 20 9 bp, 407 bp 504 bp (Hình 1) Hình Kết điện di sản phẩm PCR quitrìnhmPCRphátđồngthời ... hydrophila (AhyCA1.2T) F columnare (CAF-09-Fcol-M1) Kết điện di sản phẩm mPCR với hàm lượng DNA từ pg đến 100 ng chiết tách từ vi khuẩn cho thấy quitrìnhquitrìnhmPCRphátđồngthời E ictaluri...
... lượng gấp lần tăng thời gian lên lần, không pháttriển 8,5% NaCl (Jay, 20 00) 2. 4 Kỹ thuật PCR 2. 4.1 Khái niệm Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) Kary Mullis cộng phát minh năm 1985 ... Broth), không pháttriển pH -2, 5 nhiệt độ 37oC môi trường canh Luria có điều chỉnh pH HCl (trích dẫn Jay, 20 00) Đặc tính kháng acid gen rpoS qui định Có hệ thống AR khác (Foster, 20 04): (1) Hệ ... nhanh đòi hỏi khối lượng mẫu tối thiểu Các quitrình chẩn đoán thường tập trung vào việc phát Stx, đặc biệt Stx phân Do quitrình khác tính phức tạp, thời gian, độ nhạy, tính chuyên biệt giá thành,...
... thuộc vào hệ thống kín Mục tiêu công trình thiết kế multiplex PCR mix phátđồngthời hai tác nhân C trachomatis N gonorrhoeae, hai tác nhân diện lúc bệnh Kết nghiên cứu cho thấy phátđồngthời ... DNA gen 103 ngưỡng phát N gonorrhoeae 10 DNA gen mẫu thử, C trachomatis có lượng DNA gen 1 02 ngưỡng phát N gonorrhoeae 1, C trachomatis có lượng DNA gen 10 ngưỡng phát N gonorrhoeae 0.1 gen mẫu ... cho vào tube phản ứng G4 G5 G6 G3 C1 C1 C1 C2 C2 C2 C2 C3 G4 G5 G6 C3 C3 C3 Hình 3: Kết xác định độ nhạy cảm Multiplex CHL-GNC PCR mix 50 phát lúc hai tác nhân C trachomatis (vạch khuếch đại 24 1bp)...
... hemolytic uremic syndrome caused by dry fermented sausage contaminated with Shiga-like toxin-producing Escherichia coli J Clin Microbiol 34: 1 622 – 1 627 42 Paton J C And Paton A W., 1998 Pathogenesis ... diarrhea Science 22 6: 694–696 40 Oswald E., Schmidt H., Morabito S., Karch H., Marches O., Caprioli A., 20 00 Typing of Intimin Genes in Human and Animal Enterohemorrhagic and Enteropathogenic Escherichia ... - 163 23 Gyles C L 19 92 Escherichia coli cytotoxins and enterotoxins Can J Microbiol 38: 734 - 746 24 Jay J M., 20 00 Modern food Microbiology An Aspen publication, Maryland p 531 - 543 25 Jerse...
... 1998) Theo Stephan Hoelzle (20 00), STEC mà không mang gen ehxA độc lực giảm chí không độc người Tần số diện gen stx1 stx2 9/36 mẫu (25 %) 8/36 mẫu (22 ,2% ) Không phátgen eae uid mẫu khảo sát Điều ... 87,5 0,0 100,0 87,5 12, 5 0,0 0 0 0 (%) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 36 16 27 (%) 44,4 75 25 22 ,2 Bề mặt thịt bò Tổng cộng N: số lượng mẫu khảo sát (+): số lượng mẫu phát có mang gen độc lực E coli nhóm ... (4) mẫu bề mặt thịt bò chưa phátgen độc lực E coli (5) Chưa phátgen uid eae 27 mẫu phân tiêu chảy bò, bê heo; mẫu bề mặt thịt 5 .2 Tồn đề nghị Tồn Do điều kiện thời gian kinh phí có hạn, đề...
... theo ống NA Multiplex- PCR Sơ đồ 3.1 Quitrình phân lập, định tính phátgen độc lực E coli 22 3.3.4 Quitrìnhmultiplex – PCR (1) Trình tự đoạn mồi sử dụng multiplex – PCR Bảng 3.1 Trình tự đoạn ... HM) thạch MAC, multiplex - PCR phátgen stx2 Tương tự, khuẩn lạc hồng thạch SMAC khuẩn lạc trắng thạch SMAC mang gen stx2 Tương tự, gen ehxA diện cho khuẩn lạc riêng lẻ (2) Ở mẫu số 2, chọn khuẩn ... chọn khuẩn lạc hồng rời rạc thạch MAC, multiplex - PCR phátgen ehxA không phátgen stx Tương tự, khuẩn lạc trắng thạch SMAC phát mẫu mang gen ehxA lẫn stx2 (3) Đối với mẫu phân số 3, chọn khuẩn...
... 15 [2] nhân [2] Hình I.7 [81] I.3 .2. 1.3 Cofactor: Mg2+ I.3 .2. 1.4 [ 12] 16 [ 12] [2] Enzyme [2] Taq DNA polymerase Pfu DNA [2] [2] có trùng [2] nucleo 17 2+ [2] [ 12] [ 12] S [ 12] 103 [2] I.3 .2. 1.5 ... nh I.3 .2 I.3 .2. 1 [2] [ 12] I.3 .2. 1.1 PCR (Polymerase ChainReaction in vitro [ 12] [2] I.3 .2. 1 .2 in vitro olymerase [ 12] pri [ 12] [2] thành ph o C 95oC vòng 30 giây phút [2] o C 70o y phút [2] o ... ng [25 ] 12 I.3 .2 K thu t sinh h c phân t hi i 15 I.3 .2. 1 I.3 .2. 2Multiplex PCR [ 12] 19 I.3 .2. 3 19 I.3 .2. 4 I.4 K thu t PCR [2] [ 12] 15 20 CÁC CÔNG TRÌNH...
... II: LC KHO TI LIU 2. 1.1 S lc v tỡnh hỡnh nuụi tụm trờn th gii 2. 1 .2 Vit Nam .2 2 .2 S lc v bnh m trng ..3 2. 2.1 Du hiu bnh lý 2.2 .2 Ph loi cm nhim 2. 2.3 Phng thc lan truyn 2. 2.4 Phng phỏp chn ... 4 .2 Xỏc nh s nhim WSSV cỏc mu thc n 19 4 .2. 1 S nhim WSSV mu c mn hn 19 4 .2. 2 S nhim WSSV mu mc .21 4 .2. 3 S nhim WSSV trờn tụm tớt . 22 4 .2. 4 Xỏc nh s nhim WSSV cỏc mu thc n ti sng vi kớt WSSVIQ2000 ... phỏt hin virus m trng (WSSV) trờn tụm sỳ (Penaeus monodon) bng k thut PCR Lun tt nghip i hc 21 Lý Ngc H, 20 08 Tỡm hiu s bin i ca vựng lp li thuc ORF94 v ORF 125 ca WSSV (White spotsyndrome virus) ...