Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 4 pot

... - . - tru: - E. coli - galactosidase (Z - ) gen - - -thiogalactoside (IPTG) -gal. - - - - Công nghệ DNA tái tổ hợp 97 Hình 4. 16. ... - (ori). - - khởi đầu . - (promoter) để tiến hànhlai. - . - chỉ thị thể tái tổ hợp. như là: - được . - tách goại lai. - : RBS (ribosome binding sites-vùng). Công nghệ DNA tái ... NotI Khuẩn lạc trắng-thể tái tổ hợp Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp 79 : 4. 4. Plasmid vector pBluescript II SK (+ /-) . Vector này mang vùng...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2 potx

... nóng chảy nó. - - t - - - - . Công nghệ DNA tái tổ hợp 42 - -tube (eppendorf tube). - 1-2 th(0,5 M ammonium acetate, 10 mM magnesium acetate, 1 -tube. - 37o(< - - . ... - 4 o - . - - hai i nhau. - hai 4 o 4 oC. Hình 2.8. Hình ảnh điện di DNA có đánh dấu 32P trên polyacrylamide gel ở phim X-quang Công nghệ DNA tái tổ hợp 39 1 Pasteur ... Công nghệ DNA tái tổ hợp 29 4 oC đến 30o. thường được dùng Tr - - - - - - - . Các đoạn DNA sẽ dịch chuyển với các tốc độ hơi khác nhau...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 1 ppsx

... gen xác định. Bên cạnh các giáo trình như: sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp ... riêng biệt bao - : enzyme Ecohexanucleotide (6 nucleotide): Công nghệ DNA tái tổ hợp 8 XbaI /37oC EcoRI /37oC 10 mM. - 1 L ( - - . - hai một . - sẽ . - -2 0oC (hoặc -8 0oC(ice ... trong phản ứng cắt DNA : - (H). . - (M). . - (L). . Công nghệ DNA tái tổ hợp 5 3. Isochizomer 1.1 (4 nucleotide) . : - Mbo Sau3AI cùng : 5’ GATC 3’ 3’ CTAG 5’ - Bam trình tự: 5’...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 3 doc

... 50o72oC/1 phút - 72oC/10 phút - 4 oC - Chạy điện di để h 3.7) - -2 0oC - đ ưbằng thực tham khảo. - và Taq pol, sau đó chia ra từng tube rồi cho DNA và Taq pol . - Thao tác trong ... dùng sợi này làm khuôn mẫu để tổng hợp sợi DNA thứ hai (tương tự như giai đoạn thứ nhất và thứ hai của quá trình tổng hợp cDNA-xem chương 6). Giai đoạn thứ hai. Dùng DNA sợi đôi làm khuôn mẫu ... - 2 primer (F và R) PA DNA khuôn mẫu Biến tính Taq polymerase PB (PA) và (PB) là các primer đặc hiệu 60 - : 94 oC/30 giây, 54 o72oC/1 phút. - 72oC/10 phút - 4 oC -...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 5 pps

... làm mẫu dò E E - EcoRI - chèn - - - quang - Cố định DNA trên màng lai - - Trung hòa - - EcoRI - Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 04 1 5-2 3 kb), cosmid (45 kb) hay BAC (>100 ... Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, Germany. Công nghệ DNA tái tổ hợp 106 Cosmid đầu cos (chương 4 . Sau khi x vào đầu cos tiếp chèn 4 0 -4 5 kb, khả năng của phage . 4. Các ... 5.3). ( 2-1 0 . - Hind - Southern blot. Công nghệ DNA tái tổ hợp 105 (marker gene - chèn. (kb) . vector . Bacteriophage có nguồn gốc virus E. coli (xem chương 4) . Trong...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 6 pps

... (complementary DNA) tổng hợp cDNA do. . QcDNA qua ba enzyme reverse transcriptase. (2) Biến tính và c -cDNA Công nghệ DNA tái tổ hợp 153 hóa 0,5 . - Vector gt10. E. coli . - Vector ... (DNA E. coli. - c đoạn nối (synthetic linkers) c DNA cùng một enzyme. 1.1. Đuôi dA:dT deoxyrinucleotide triphosphate - Công nghệ DNA tái tổ hợp 141 - Không cần . - . . - E. ... hoàn. - bởi của mRNA . . Các bước chính của quá trình xây dựng thư viện cDNA như sau: bỏ 27. Công nghệ DNA tái tổ hợp 143 Tổng hợp cDNA sợi thứ hai bằng primer-adapter...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 7 pptx

... lacZ). Protein dung hợp có những ưu điểm sau: Gen dung hợp Protein dung hợp C N Met SD SD Promoter ATG ATG mRNA Gen B Gen A DNA Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 64 3. Promoter bacteriophage ... trong phức hợp kháng nguyên- kháng thể bắt màu với cơ chất Đĩa ELISA (microtiter plate) có 96 giếng Công nghệ DNA tái tổ hợp 166 : - 16S rRNA. - eukaryote định vị. - . 1 (Hình ... thể được kiểm soát bằng những thay đổi trong hoạt tính của β-galactosidase. Công nghệ DNA tái tổ hợp 155 Chương 7 gen tái tổ hợp trong Escherichia coli VEscherichia coliE. coli hoặc...

Giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp

... chính. 1) Tách chiết DNA từ những sinh vật khác nhau; 2) Cắt và nối DNA ở những điểm đặc hiệu để tạo ra DNA tái tổ hợp (DNA mang các gen có nguồn gốc khác nhau), ví dụ: DNA plasmid có mang gen ... điện di thích hợp cho DNA sợi đôi thường được dùng là Tris-acetate-EDTA (TAE), Tris-borate-EDTA (TBE) và Tris-phosphate-EDTA (TPE) ở nồng độ khoảng 50 mM và pH 7, 5-7 ,8 (Bảng 2.2). Thường ... Đoạn mồi (primer). Một trình tự DNA hay RNA ngắn, bắt cặp với một mạch của DNA khuôn mẫu và có mang một đầu 3’-OH tự do giúp DNA polymerase bắt đầu tổng hợp một chuỗi DNA mới.Đoạn nhồi (stuffer...

171
1,848
15

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Phụ lục ppt

... viện cDNA (cDNA library). DNA khuôn mẫu (template DNA) .(sao chép) hoặc khuếch đại DNA (PCR) . DNA polymerase. mẫu . Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 84 (palindrome). Đoạn DNA mạch kép có trình ... Southern blot ) Công nghệ DNA tái tổ hợp 180 ) phương pháp như … , gen công nghệ DNA ta thích hợp hơn, có thể bằng công nghệ sinh học trước đây vị trí cao hơn công nghệ sinh học. ... phân tử DNA. Linker. Một oligonucleotide tổng hợp có hai đầu bằng, Công nghệ DNA tái tổ hợp 200 Trình tự điều hòa (regulatory sequence). Một trình tự của DNA tham gia vào quá trình điều...

Cong nghe DNA tai to hop

... gen xác định. Bên cạnh các giáo trình như: sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp cận ... t. h.p 46 Lời nói đầu Công nghệ DNA tái tổ hợp (còn gọi là kỹ thuật di truyền hay kỹ thuật gen) là một bộ phận quan trọng và là công nghệ chìa khóa (key technology) của lĩnh vực công nghệ sinh ... khoáng Công ngh. DNA tái t. h.p 36đầu 3’.+ Tổng hợp sợi thứ hai của cDNA trong tạo dòng cDNA.+ Tổng hợp DNA sợi đôi từ các khuôn mẫu sợi đơn trong phát sinh đột biến in vitro.1.3. DNA polymerase...

135
2,588
77

Xem thêm