... ngược, dNTPs (dATP, dCTP, dGTP,dTTP), dung dịch đệm cho phảnứng PCR, MgCl2 , Taq polymerase 24 2.10.3 Quy trình phảnứngPCRPhảnứngPCRchuỗi nhiều chu kỳ nối tiếp nhau, chu kỳ gồm ba bước chu ... Chúng ứng dụng quy trình phảnứngPCR để chẩn đoán loài cầu trùng phổ biến gây nhiễm gà số địa phương khác Thừa Thiên Huế với cặp mồi đặc hiệu cho loài Kiến nghị Ứng dụng quy trình phảnứngPCR ... nghiệm phảnứngPCR vào 200 mẫu phân thu tối ưu hóa quy trình phảnứngPCR cho riêng loài cầu trùng gây bệnh phổ biến gà, kết trình bày bảng 5.1 sau: Bẳng 5.1 Kết tỷ lệ nhiễm loài cầu trùng mẫu...
... PCR (Polymerase Chain Reaction) PCRphảnứng tổng hợp dây chuyền dùng để khuyếch đại trình tự DNA đích dựa bắt cặp đặc hiệu mồi với DNA mạch khn hoạt tính kéo dài cuả enzyme polymerasePhảnứng ... dùng cho phảnứngPCR + Đệm TE (10mM, Tris-HCl, 1mM EDTA): dùng cho q trình tách chiết DNA khn cho phảnứngPCR + PCR mix cho tiêu: B cereus, C perfringens, E coli, Salmonella, S aureus Taq polymerase ... trường, nhiệt độ thời gian phản ứng, kích thước trình tự lai lực ion mơi trường 1.3.2.4 Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) Phương pháp PCR phương pháp in vitro để tổng hợp DNA dựa khn trình...
... Chomczynski [2] Khuếch đại týp gene tổ hợp BCR-ABL b2a2 b3a2 kỹ thuật RT -PCR (Reverse Transcription -Polymerase Chain Reaction) sau tiến hành xét nghiệm định lượng Real-Time PCR nhờ 03 nồng độ chuẩn gen ... samples from 60 Chronic Myeloid Leukemia patients were tested by RT -PCR (Reverse Trancription -Polymerase Chain Reaction) and Real-Time PCR to detect Philadelphia chromosome containing BCR-ABL fusion ... S1, S2, S3 Sự xuất GUS (gen bạch cầu bệnh nhân) nói lên trình phiên mã ngược khuếch đại từ phảnứng RT -PCR thực thành công Không phát diện gen BCR-ABL 3.2.3 Hình ảnh mẫu gen có chuyển đoạn dạng...
... monocytogenes phảnứngPCRPhảnứngPCR DNA khuôn từ L monocytogenes 0704 thu nhận cho phảnứngPCR cách tách làm DNA với chloroform [4] xử lý nhiệt tế bào 1000C 10 phút Tối ưu hoá điều kiện PCR nồng ... ưu cho PCR Nồng độ Mg2+ PhảnứngPCR thực nồng độ cuối Mg2+ từ 1,5 mM đến 4,0 mM Kết thể hình cho thấy phảnứngPCR với nồng độ Mg2+ từ 1,5 mM cho kết dương tính Nồng độ dNTPs PhảnứngPCR thực ... trường hòa tan 100 µl TE, xử lý nhiệt thu DNA cho phảnứngPCR µl dịch tế bào qua xử lý nhiệt sử dụng làm khuôn cho phảnứngPCR Đánh giá kết phảnứngPCR nhờ phân tích sản phẩm điện di agarose 1%...
... phảnứng nối đôi, cụ thể phảnứngtrùnghợp Axit acrylic dẫn xuất dễ tham gia phảnứng cộng (cộng hydro, halogen, HX ), dễ tham gia phảnứngtrùnghợp tạo polime Một số phảnứng ta quan tâm phản ... dụng chiếu xạ phù hợpPhảnứng theo chế trùnghợp gốc hay ion, phương pháp nghiên cứu áp dụng vào thực tiễn nhiều trùnghợp gốc[5] * Đồng trùnghợp theo chế gốc Trùnghợp gốc phảnứng mà trung tâm ... chế phảnứng đồng trùnghợp ghép [11, 12, 13] Để tổng hợp copolyme ghép (sản phẩm trình đồng trùnghợp ghép monome với loại polyme có sẵn), ta dùng phương pháp: đồng trùnghợp gốc tự do, đồng trùng...
... “Nghiên cứu phảnứng đồng trùnghợp ghép acrylamit lên sợi sử dụng tác nhân khơi mào (NH4)2S2O8” làm luận văn Thạc sĩ Mục tiêu nghiên cứu Tìm điều kiện tối ưu cho trình đồng trùnghợp ghép acrylamit ... trình xử lý sợi 1.4 ĐỒNG TRÙNGHỢP GHÉP 1.4.1 Cơ chế chung 1.4.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình đồng trùnghợp ghép 1.5 TỔNG QUAN VỀ MONOME VÀ TÁC NHÂN KHƠI MÀO 1.5.1 Khả phảnứng acrylamit 1.5.2 ... đồng trùnghợp ghép lên loại sợi khơi mào (NH4)2S2O8 Việc thay đổi monome làm thông số ghép thay đổi Trùnghợp ghép axit acrylic cho kết cao hơn, nguyên nhân nhóm –COOH axit acrylic có khả phản ứng...
... bền nhiệt cao Phảnứng đồng trùnghợp đươc áp dụng rộng rãi công nghiệp sản xuât polyme Phảnứng đồng trùngPhảnứng đồng trùnghợphợpPhảnPhảnứngứng đồng đồng trùngtrùnghợphợp theo theo ... hợphợp theo theo chế gốc chế gốc PhảnPhảnứngứng đồng đồng trùngtrùnghợphợp theo theo chế ion chế ion PhảnPhảnứngứng đồng đồng trùngtrùnghợp rời hợp rời chuyển chuyển hay hay phân ... -A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-AHopolyme Phảnứng đồng trùnghợp sảy theo chế gốc hay ion 3.2 Phảnứng đồng trùnghợp gốc 3.2 Phảnứng đồng trùnghợp gốc – Phảnứng đồng trùnghợp gốc nghiên cứu kỹ có nhiều...
... độ xuống nhiệt độ phảnứng giữ nhiệt độ không đổi Khí N2 sục vào hỗn hợpphảnứng để đuổi khí O2 Sau đó, cho (NH4)2S2O8 có nồng độ định acrylamit vào Hỗn hợp khuấy để chất phảnứng tiếp xúc tốt ... độ phảnứng tăng Điều giải thích nhiệt độ tăng gốc tự tạo thành nhiều thúc đẩy trình phảnứng làm tăng hiệu suất ghép Tuy nhiên, nhiệt độ tăng cao 500C tốc độ phảnứng ngắt mạch lớn tốc độ phản ... số lượng gốc tự hydroxyl nên phảnứng đồng trùng ghép diễn khó khăn Khi pH thấp ion bền nên phảnứng tạo gốc tự hydroxyl khó xảy hiệu suất ghép giảm Do vậy, phảnứng sau chọn pH = 3.2 Đặc tính...
... Đây máy đun nóng làm nguội ống phảnứng nhiệt độ xác cho phảnứng Để ngăn ngừa bay hỗn hợpphản ứng, phần nắp đậy máy PCR đun nóng, trường hợp lượng dung dịch phảnứng ít, người ta cho lớp dầu ... ADN polymerase hoạt động chức phảnứngPCR cụ thể cần nồng độ ion magie khác Nếu nồng độ magie thấp, phảnứng không thành công polymerase không hoạt hóa thích hợp Nếu nồng độ magie cao, phảnứng ... dài sản phẩm PCR xác định thời gian giai đoạn tổng hợpphảnứng Hầu hết polymerase sử dụng phảnứngPCR tái in vitro với tốc độ khoảng 500 – 1000 bp/ phút Thời gian giai đoạn tổng hợp thay đổi...
... cụ cho PCRPhảnứngPCR thực máy chu trình nhiệt Đây máy đun nóng làm nguội ống phảnứng nhiệt độ xác cho phảnứng Để ngăn ngừa bay hỗn hợpphản ứng, phần nắp đậy máy PCR đun nóng, trường hợp lượng ... ADN polymerase hoạt động chức phảnứngPCR cụ thể cần nồng độ ion magie khác Nếu nồng độ magie thấp, phảnứng không thành công polymerase không hoạt hóa thích hợp Nếu nồng độ magie cao, phảnứng ... ADN chép Ngày nay, kết hợp Taq Pfu cung cấp độ tin cậy cao lẫn nhân xác ADN Phần II: NỘI DUNG Khái niệm chung Kỹ thuật PCR (phản ứngchuỗitrùnghợp - PolymeraseChain Reaction) phương pháp in...
... PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) NGUYÊN TẮC VÀ ỨNG DỤNG TS BS Đỗ Thị Thanh Thủy MỤC TIÊU BÀI GIẢNG Trình bày nguyên tắc PCR Trình bày cách chống ngoại nhiễm PCR Trình bày ứng dụng PCRPCRPOLYMERASE ... động UDG bị bất hoạt To cao PCR CÁC LOẠI PCR RT -PCR One-step RT -PCR Two-step RT -PCR Multiplex PCR Nested PCR, hemi-nested PCR Non-stop nested PCR Touch-down PCR RT -PCR RNA cDNA Reverse Transcription ... enzym polymerase, thực ống nghiệm, có độ nhạy cao PCR POLYMERASECHAINREACTIONPCR NGUYÊN TẮC PHẢNỨNG Amplicon 35-40 chu kì nhiệt Số copies = 2n.y n: Số cycle y: số copies ban đầu PCR POLYMERASE...
... phảnứngPCR Nếu phảnứngPCR cho kết (+) tiếp tục lấy 0,5ml dịch pha loãng bậc để trích khuôn DNA cho phảnứngPCR Lặp lại tương tự phảnứngPCR cho kết âm tính Mật độ tế bào tối thiểu cho phản ... 2.2.17.Kiểm chứng điều kiện tối ưu phảnứng Một phảnứngPCR thường chịu nhiều ảnh hưởng thành phần điều kiện phảnứng Trong khóa luận chọn kiểm chứng số điều kiện tối ưu phảnứngPCR như: nhiệt ... Thực phảnứngPCR lặp lại lo lần dịch mẫu xử lý, thời điểm, điều kiện với thành phầnphảnứng không thay đổi thực người Phối hợp thành phầnphảnứngPCR cho 10 phảnứng (trừ khuôn DNA Taq DNA polymerase) ...
... khuôn cho phảnứngPCR - Thực phảnứng PCR: PhảnứngPCR thực với thể tích 25µl eppendorf 0,5ml 0,2ml gồm thành phần Bảng 49 Bảng Thành phần sử dụng phảnứngPCR phát C Perfringens PhảnứngPCR thực ... sát điều kiện tối ưu phảnứngPCRPhảnứngPCR thường chịu nhiều ảnh hưởng thành phần điều kiện phảnứng Trong phần thực nghiệm này, kiểm chứng số điều kiện tối ưu 39 phảnứngPCR như: nhiệt độ ... 3.1.4.Khảo sát độ nhạy phảnứngPCR phát C perfringens Độ nhạy phảnứngPCR phát C perfringens số tế bào C perfringens nhỏ phảnứng mà phương pháp phát Thí nghiệm thực với phảnứngPCR độ pha loãng...
... dụng nhiều thực tế ĐỒNG TRÙNGHỢP GỐC _ Phảnứngtrùnghợp hai hay nhiều loại monome khác Sản phẩm trình đồng trùnghợp gọi copolyme _ Phương trình phảnứng đồng trùnghợp cách tổng quát: nM1 ... phảnứng với monomer M2 _ Các gốc tự có xu hướng ưu tiên phảnứng với monomer loại, trường hợp khả đồng trùnghợp xảy Trong hệ đồng thời xảy trình đồng trùnghợptrùng hợp, sản phẩm thu hỗn hợp ... KHẢ NĂNG PHẢNỨNG CỦA MONOME VÀ GỐC TỰ DO: _ Ảnh hưởng hiệu ứng cảm ứng hiệu ứng liên hợp _ Ảnh hưởng hiệu ứng không gian _ Ảnh hưởng độ phân cực Ảnh hưởng hiệu ứng cảm ứng hiệu ứng liên hợp _ Họat...
... phảnứngPCR Nếu phảnứngPCR cho kết (+) tiếp tục lấy 0,5ml dịch pha loãng bậc để trích khuôn DNA cho phảnứngPCR Lặp lại tương tự phảnứngPCR cho kết âm tính Mật độ tế bào tối thiểu cho phản ... 2.2.17.Kiểm chứng điều kiện tối ưu phảnứng Một phảnứngPCR thường chịu nhiều ảnh hưởng thành phần điều kiện phảnứng Trong khóa luận chọn kiểm chứng số điều kiện tối ưu phảnứngPCR như: nhiệt ... Thực phảnứngPCR lặp lại lo lần dịch mẫu xử lý, thời điểm, điều kiện với thành phầnphảnứng không thay đổi thực người Phối hợp thành phầnphảnứngPCR cho 10 phảnứng (trừ khuôn DNA Taq DNA polymerase) ...
... CỦA PHẢNỨNG Phảnứng làm tăng khối lượng phân tử polyme nên phảnứng theo chế phân bậc, phảnứngtrùng ngưng, phảnứng không tách sản phẩm thấp phân tử giống trùnghợpchuỗiphảnứng xem phản ... phảnứngtrùnghợp theo chế dời chuyển hay phân bậc (phản ứngtrùnghợpphân bậc có định luật động học phảnứngtrùng ngưng nên có xếp vào loại phảnứngtrùng ngưng) Ví dụ: Phảnứngtrùnghợp diisoxyanat ... tương tự trùnghợp chiều Khác với phảnứngtrùng ngưng, phảnứng không cân khác với phảnứngtrùnghợpchuỗi olefin không tạo liên kết C-C mắc xích mà tạo thành dị mạch Chẳng hạn phảnứng phát...
... Đây máy đun nóng làm nguội ống phảnứng nhiệt độ xác cho phảnứng Để ngăn ngừa bay hỗn hợpphản ứng, phần nắp đậy máy PCR đun nóng, trường hợp lượng dung dịch phảnứng ít, người ta cho lớp dầu ... ADN polymerase hoạt động chức phảnứngPCR cụ thể cần nồng độ ion magie khác Nếu nồng độ magie thấp, phảnứng không thành công polymerase không hoạt hóa thích hợp Nếu nồng độ magie cao, phảnứng ... xảy chuỗi ADN chép Ngày nay, kết hợp Taq Pfu cung cấp độ tin cậy cao lẫn nhân xác ADN I Khái niệm chung Kỹ thuật PCR (phản ứngchuỗitrùnghợp - PolymeraseChain Reaction) phương pháp in vitro...
... Bertani MR Methyl Red m-TSB modified Trypticase Soy Broth NB Nutrient Broth PCRPolymerasechainreaction (Ph n ng chu i trùng h p) TTP Thrombotic thrombocytopenic purpure (Ban xu t huy t gi m ti ... nghiên c u thí nghi m thành công, ph m vi báo cáo này, ch ñ c p t i k thu t Polymerasechainreaction (PCR) S ñ i c a k thu t PCR ñã ñưa l i m t cu c cách m ng vi c nghiên c u, phân tích gen h gen ... “Xây d ng quy trình xác ñ nh vi khu n Verotoxigenic Escherichia coli th t b ng k thu t PCR (Polymerase chain reaction) ” Nghiên c u cho phép xác ñ nh nhanh xác tiêu chu n vi sinh ñ i v i vi khu n...