... nghệ Tếbào Thực vật Phòng Thí nghiệm Trọng điểm Công nghệ gen, Viện Công nghệ sinh học 2. 3 PHƯƠNGPHÁP2. 3.1 Phươngphápnuôicấytếbào BY- 2Tếbào thuốc BY- 2nuôi lỏng môi trường BY- 2 biến ... Chuẩn bị tếbào thuốc BY- 2 Ba ngày trước chuyển đổi, bắt đầu cấy chuyển: chuyển ml tếbào BY- 2 sang 100 ml môi trường mới, nuôi tử lắc 28 ˚C tối Đồng nuôicấy Lấy ml tếbào BY- 2 vào đĩa petri ... trình chuyển gen vào tếbào thuốc BY2 sau: - Thiết lập tếbào thuốc BY- 2 cách chuyển ml tếbào BY- 2 sang 100 ml môi trường mới, nuôi tử lắc 28 ˚C tối ngày trước đồng nuôicấy - Tạo dịch huyền...
... trước mắt bơm số tếbào gốc phôi (khoảng 5-10 tế bào) vào xoang phôi nang tếbào động vật -Thứ hai, xen số tếbào gốc phôi vào bào thai thời kỳ tếbào -Thứ ba, nuôicấy chung tếbào gốc phôi với ... tính ưu việt phươngphápPhươngpháp vi tiêm Phươngpháp vi tiêm phươngpháp sử dụng vi kim kính hiển vi để đưa DNA tái tổ hợp vào tếbào định Đây trình lai ghép cho tếbào bậc cao tếbào hợp tử ... phân tử mong muốn tếbào chúng sử dụng cho nghiên cứu Phươngpháp sử dụng gần tất loại tếbào loài Lúc đầu phươngpháp sử dụng để chuyển gen vào tếbào động vật có vú, sau cho tếbào thực vật dạng...
... đến tháng 03 /20 10 diện tích trồng đậu tương nước ta thời điểm 123 ,9 nghìn [ 12] , sản lượng bình quân 20 tạ/ha [11] Tuy hàng năm nước ta phải nhập số lượng lớn đậu tương 23 00 nghìn (20 09) [11], ... phép trồng rộng rãi năm 20 11 Xuất phát từ thực tế thời gian thực tập tốt nghiệp, tiến hành thực đề tài “Bước đầu xây dựng quy trình chuyển gen gus vào giống đậu tương ĐT26 thông qua vi khuẩn Agrobacterium ... triệu kg, ứng với 8,4% tổng lượng thuốc trừ sâu sửu dụng nông nghiệp Chỉ tính riêng năm 20 08, lượng khí CO2 biến đổi gen hấp thụ 14,4 tỷ kg, tương đương với lượng khí thải mà triệu oto thải Nước...
... hình nghiên c u th gi i 16 ð I TƯ NG, N I DUNG VÀ PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN C U 22 3.1 V t li u 22 3 .2 N i dung nghiên c u 23 3.3 Phươngpháp nghiên c u 24 3.4 ð a ñi m th i gian nghiên c u 35 K T QU VÀ ... ñó là: Phươngpháp chuy n gen tr c ti p phươngpháp chuy n gen gián ti p 2. 2.1 Phươngpháp chuy n gen tr c ti p phươngpháp chuy n gen tr c ti p, gen ñư c chuy n tr c ti p vào t bào th c v t thông ... nhi u lo i vitamin khác A, B1, B2, E, [22 ], [24 ] - R t d nuôi tr ng; ch c n nư c, ánh sáng, CO2 ñ c bi t không ph thu c vào th i v (Landolt Kandeler, 1987) [22 ], [23 ] - Sinh s n vô tính ch y u...
... qua màng tếbào Thông số điện biến nạp dòng tếbào khác Thường gây chết tếbào !!! 25 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp điện biến nạp 26 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp điện ... phủ DNA hạt di chuyển vào tếbào chất tếbào Thường áp dụng cho tếbào thực vật (Bắp, Lúa mạch, Đậu nành, …) 28 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp bắn gen 29 Ứng dụng Bệnh SCID – ... virus Phươngpháp Cationic lipid (Liposome) 23 Chuyển gen không sử dụng virus Phươngpháp vật lý Thường sử dụng phươngpháp chuyển gen hóa học hiệu Không phụ thuộc vào loại tếbào Không...
... tế bào, mô thực vật để tiến hành trình chuyển gen sang mô, tếbào đích 5- Chọn lọc mô, tếbào biến nạp thành công 6- Tái sinh mô, tếbào biến nạp thành biến nạp hoàn chỉnh Sau đó, từ chuyển gen ... tương tự T-DNA đoạn có kích thước 25 kb chứa gen tổng hợp opine đoạn chuyển vào tếbào thực vật gắn vào nhiễm sắc thể tếbào chủ gây bệnh u Ngoài T-DNA, Ti-plasmid có vùng vir (vir region) chịu trách ... truyền qua hệ, sử dụng phươngpháp lai hữu tính để thu mang gen mong muốn Đồng thời đánh giá tác động môi trường chuyển gen để đưa sản xuất cung cấp cho thị trường Các bước nuôicấy Chuyển gen nhờ...
... độ vi khuNn, thời gian đồng nuôicấy loại mẫu cấy 48 gi 2 60 gi 1 T ng s m u tái sinh 13 35 Hi u su t bi n n p (%) ch t 2, 63 1 ,20 1,00 4, 32 2 ,24 Các chồi phát triển cấy chuyển sang môi trường ... trệ, tếbào bề mặt tiếp xúc với môi trường có xu hướng đổi mầu, có mẫu đổi sang mầu thẫm Hiện tượng biểu mô tếbào chưa mang gen ngoại lai hpt, môi trường nuôicấy chứa Hygromycin, mô tếbào bị ... Hồng, 20 00 Cơ sở khoa học công nghệ chuyển gen thực vật Nhà xuất Nông nghiệp, 20 00 guyễn Đức Thành, 20 00 Nuôicấy mô tếbào thực vật - nghiên cứu ứng dụng NXB Nông nghiệp Hu W, Philips GC., 20 01...
... GS0 12 30 2. 3 Phươngpháp nghiên c u 30 2. 3.1 Phươngphápnuôi c y mô 30 2. 3 .2 Phươngpháp chuy n gen nh vi khu n Agrobacterium tumefaciens 34 CHƯƠNG K T QU VÀ TH O LU N 36 3.1 Nghiên c u nuôi ... nghi p iv 2.2 N i dung nghiên c u 29 2. 2.1 Nghiên c u nuôi c y tái sinh in vitro gi ng ñ u cove 29 2.2 .2 Nghiên c u xác ñ nh nh hư ng c a m t s thông s c a quy trình chuy n gen ñ u cove 2. 2.3 30 ... (http://www.patentlens.net) 11 1 .2 C u trúc c a H+ V – ATPase (Kawasaki Nishi Forgac, 20 03) 21 2. 1 Các gi ng ñ u cove 27 2.2 Plasmid pBin 19 28 2. 3 Plasmid pPS1 28 2. 4 M u chuy n gen: ñ t m m (1)...
... có 2- 3 mầm ngủ thường tập trung nhiều đỉnh củ [7] 1 .2 Nhân giống nuôicấy mô tếbào 1 .2. 1 Cơ sở khoa học kỹ thuật nuôicấy mô, tếbào thực vật 1 .2. 1.1 Tỉnh toàn tếbào Cơ sở tảng nuôicấy mô, tế ... 30 2.2 .2 Nghiên cứu tải sinh chồi 30 2. 3 Phươngpháp nghiên cứu 31 2. 3.1 Phươngpháp thiết kế thí nghiệm 31 2. 3 .2 Phươngpháp chuân bị mâu thực vật 32 2.3.3 ... À PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN cứu 29 2. 1 Vật liệu nghiên cứu 29 V 2. 1.1 Vật liệu thực vật 29 2.2 .2 Vật liệu di truyền 29 2.2 Nội dung nghiên cứu 30 2. 2.1...
... T l biu hin tm (phỳt) SP nguyờn cõy (%) thi callus SP (%) 8,65 6,11 12, 71 18,76 10 19, 42 15 ,23 15 22 ,27 12, 54 20 20 ,96 8, 32 Thi gian ly tõm chõn khụng cng nh hng ti t l biu hin tm thi ca gen ... S polyrrhiza 24 3 .2. 2 Quan sỏt v xỏc nh t l biu hin tm thi gen gus 27 3 .2. 3 Phng php tch chit DNA bốo tm .27 3 .2. 4 Phng phỏp phõn tớch PCR .28 3.3 Ni dung nghiờn cu 29 3.4 Cỏc ch tiờu ... biu hin tm thi ca gen gus dao ng t 12, 71 n 22 ,27 % T l biu hin tm thi ca gen gus thi gian ly tõm chõn khụng 15 v 20 phút sai khỏc khụng ỏng k (ln lt l 22 ,27 % v 20 ,96%), nhiờn thi gian ly tõm 15...
... có 2- 3 mầm ngủ thường tập trung nhiều đỉnh củ [7] 4 1 .2 Nhân giống ni cấy mơ tếbào 1 .2. 1 1 .2. 1.1 Cơ sở khoa học kỹ thuật ni cấy mơ, tếbào thực vật Tỉnh tồn tếbào Cơ sở tảng ni cấy mơ, tếbào ... loại tếbào khác Tuy nhiên tếbào bắt nguồn từ tếbào hợp tử ban đầu Tebào hợp tử lúc đầu phân chia thành khối tếbào chưa chun hố Các tếbào chưa chun hố tiếp tục phân chia biến đổi thành tếbào ... tây biến đối gen Phươngpháp nghiên cứu ■ Phươngpháp ni cấy mơ tếbào (theo quy trình Yee shirley cộng sự, 20 01) ■ Phươngpháp chuyến gen (theo quy trình De Block, 1988) ■ Phươngpháp đánh giá...
... có 2- 3 mầm ngủ thường tập trung nhiều đỉnh củ [7] 1 .2 Nhân giống nuôicấy mô tếbào 1 .2. 1 Cơ sở khoa học kỹ thuật nuôicấy mô, tếbào thực vật 1 .2. 1.1 Tính toàn tếbào Cơ sở tảng nuôicấy mô, tế ... 2.2 .2 Nghiên cứu tái sinh chồi 30 2. 3 Phƣơng pháp nghiên cứu 31 2. 3.1 Phươngpháp thiết kế thí nghiệm 31 2. 3 .2 Phươngpháp chuẩn bị mẫu thực vật 32 2.3.3 Phương ... thống nuôicấy sử dụng để biến nạp gen đạt hiệu cao Cây chuyển gen phát triển từ tếbào callus không bị thể khảm [2] Nuôicấytếbào huyền phù: Là kỹ thuật nuôicấytếbào đơn cụm nhỏ tếbào môi...
... 20 07 - 20 13 20 07 20 08 20 09 20 10 20 11 20 12 * 20 13 * Crop area (thousand ha) 190,1 197, 0 02 173, 1,46 23 0 1,45 146, 1,46 20 0 Crop yield (MT/ha) 1 92, 1,39 1,5 1, 52 Total production (TMT) 27 5,5 26 7, ... (%) 50 50 50 100 100 100 92 ( 92% ) 93 (93%) 90 (90%) 363 22 8 26 5 78 31 42 2,5 84,78 33,33 46,67 ĐT 22 DT2008 DT84 DT 22 DT 84 Hình 3.3 Phát sinh tạo đa chồi đậu tương 48 DT 20 08 Số hóa trung tâm học ... màng tếbào [57] Protein Vir E2 chứa đựng hai tín hiệu định vị nhân tếbào thực vật protein Vir D2 [21 ] Thực tế cho thấy hai protein có vai trò quan trọng việc dàn xếp hấp thụ phức vào nhân tế bào...