... enzyme gii hn thớch hp cchoa k thut PCR - RFLP xỏc nh kiu genHBV ỏnh giỏ c hiu v s phự hp ca k thut PCR - RFLP xỏc nh kiu genHBV so vi k t hut c trỡnh t gen CHNG TNG QUAN TI LIU 1.1 Tỡnh hỡnh ... ng v trớ ct trờn b genHBV ca enzyme EcoRI (Hỡnh 1.2) Chiu di ca b gen thay i tựy theo tng kiu gen khỏc nhau, [11], [23] 12 Hỡnh 1.2 S cu trỳc cỏc genb gen ca HBV B gen ca HBV c t chc thnh n ... kiu gen C Khi so sỏnh vi phng phỏp PCR - RFLP thỡ cú mu l kiu gen A, 11 mu kiu gen B v 37 mu kiu gen C Kt qu c trỡnh t v phõn tớch loi cho thy ch cú mu l kiu gen A, 14 mu kiu gen B v 37 mu kiu gen...
... trình kỹ thuật PCR – RFLPxácđịnhkiểu gene HBV Bước đầu xácđịnhphân bố kiểu gene HBV nhóm bệnh nhân nghiên cứu TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NHIỄM VI RÚT VIÊM GAN B 1.1 Tình hình nhiễm HBV giới Trên ... trình tự gene xem có nhiều ưu điểm bật bên cạnh việc xácđịnh trình tự chuỗi Nucleotids genHBV để từ so sánh với thư viện genxácđịnhHBV genotypes mà dựa vào kết giải trình tự xácđịnh số dạng ... phân bố kiểu gene HBV phụ thuộc vào vùng địa lý khác + Kiểu gene A chủ yếu Mỹ, bắc trung Âu + Kiểu gene B C chủ yếu châu Á + Kiểu gene D chủ yếu Nam Âu, vùng Địa Trung Hải Ấn Độ + Kiểu gene E...
... Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật PCR – RFLPxácđịnhkiểu gene vi rút viêm gan B” với mục tiêu: Hoàn thiện qui trình kỹ thuật PCR – RFLPxácđịnhkiểu gene HBV Bƣớc đầu xácđịnhphân bố kiểu gene HBV nhóm ... xácđịnhkiểu gene vi rút viêm gan B 2.3 Các phƣơng pháp xácđịnhkiểu gene HBV Có nhiều phương pháp nghiên cứu dùng việc xácđịnhHBV genotypes giải trình tự chuỗi (sequencing), PCR - RFLP (Restriction ... phầnphảnứngPCR Tạo hỗn hợp phảnứng Nhân gen theo chu trình nhiệt tối ưu hoá Điện di kiểm tra vạch đặc hiệu www.khotrithuc.com 12 Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật PCR – RFLPxácđịnhkiểu gene...
... rút viêm gan B” với mục tiêu: Hoàn thiện qui trình kỹ thuật PCR – RFLPxácđịnhkiểu gene HBV Bước đầu xácđịnhphân bố kiểu gene HBV nhóm bệnh nhân nghiên cứu Footer Page of 113 Header Page ... trình tự gene xem có nhiều ưu điểm bật bên cạnh việc xácđịnh trình tự chuỗi Nucleotids genHBV để từ so sánh với thư viện genxácđịnhHBV genotypes mà dựa vào kết giải trình tự xácđịnh số dạng ... phân bố kiểu gene HBV Có cách phân loại HBV: Kiểu huyết (Serotype) kiểugen (Genotype) Trước người ta phânHBV thành kiểu huyết adr, adw, ayr ayw dựa vào kháng nguyên kháng nguyên bề mặt HBV (HBsAg)...
... ca 1,8% có ca 9,1% đồng nhiễm hai kiểugen B C Tỷ lệ nhiễm kiểugen B/C vào khoảng 2/1 Ch ng không phát đư c kiểu g n khác hai kiểugen vừa đ cập Kết phátkiểugen nghiên cứu ph h p với nhận đ ... sát kiểugenHBV đư c th c b ng phương pháp PC -giải trình t cỡ mẫu 894 bệnh nhân, tác giả ghi nhận có kiểugen B, C D, nhiên kiểugen D có mẫu chiếm 0,11%, lại kiểugen B với 678 mẫu kiểugen ... HBV khu v c tỉnh Đắk-lắk ghi nhận kiểugen B 63 mẫu, kiểugen C chiếm 21 mẫu nghĩa tỷ lệ nhiễm kiểugen B/C vào khoảng /1 ; đồng thời có 16 mẫu nhiễm hai kiểugen B C[1] 200 bệnh nhân nhiễm HBV...
... 2 Xácđịnh qui trình phảnứngPCR phù hợp Thực phảnứngPCR mẫu ly trích đƣợc Xử lý enzyme mẫu có diện gen PRLR Xácđịnh tần số xuất kiểugen PRLR mẫu PHẦN 2: TỔNG QUAN ... định tỉ lệ nồng độ primer DNA mẫu phảnứngPCR vô quan trọng Để xácđịnh nồng độ thích hợp primer phảnứngPCRphátgen PRLR tiến hành thực ba qui trình phảnứngPCR theo nồng độ primer khác (bảng ... Ứng dụng phƣơng pháp PCR – RFLP khảo sát đa hình gen PRLR 3.4.2.4.1 Xây dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn Xây dựng qui trình phảnứngPCR o Xácđịnh nhiệt độ thời gian phản ứng...
... Đà Lạt kỹ thuật ELISA - Phát virus PLRV kỹ thuật RT -PCR - Giải trình tự đoạn gen có đƣợc sau thực phảnứng RT -PCR để xácđịnh nguồn gốc đoạn gen 1.3 Yêu cầu - Thực phảnứng ELISA để kiểm tra mẫu ... 24 Chu kỳ nhiệt phảnứng tổng hợp cDNA 25oC phút 42oC 30 phút 85oC phút Giữ 4oC cDNA đƣợc tổng hợp (20 µl) đem sử dụng phảnứngPCR cất 4oC để chạy PCR sau Bƣớc 2: Thực phảnứngPCR khuếch đại ... thực tiếp phảnứng RT -PCR Trong đề tài thực phảnứng RTPCR đối tƣợng virus PLRV Tiêu chuẩn chọn mẫu để thực RT -PCR - Dƣơng tính - Trị số dƣơng tính từ máy đọc phải cao 21 - Triệu chứng đƣợc quan...
... 2 Xácđịnh qui trình phảnứngPCR phù hợp Thực phảnứngPCR mẫu ly trích đƣợc Xử lý enzyme mẫu có diện gen PRLR Xácđịnh tần số xuất kiểugen PRLR mẫu PHẦN 2: TỔNG QUAN ... định tỉ lệ nồng độ primer DNA mẫu phảnứngPCR vô quan trọng Để xácđịnh nồng độ thích hợp primer phảnứngPCRphátgen PRLR tiến hành thực ba qui trình phảnứngPCR theo nồng độ primer khác (bảng ... Ứng dụng phƣơng pháp PCR – RFLP khảo sát đa hình gen PRLR 3.4.2.4.1 Xây dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn Xây dựng qui trình phảnứngPCR o Xácđịnh nhiệt độ thời gian phản ứng...
... 2 Xácđịnh qui trình phảnứngPCR phù hợp Thực phảnứngPCR mẫu ly trích đƣợc Xử lý enzyme mẫu có diện gen PRLR Xácđịnh tần số xuất kiểugen PRLR mẫu PHẦN 2: TỔNG QUAN ... định tỉ lệ nồng độ primer DNA mẫu phảnứngPCR vô quan trọng Để xácđịnh nồng độ thích hợp primer phảnứngPCRphátgen PRLR tiến hành thực ba qui trình phảnứngPCR theo nồng độ primer khác (bảng ... Ứng dụng phƣơng pháp PCR – RFLP khảo sát đa hình gen PRLR 3.4.2.4.1 Xây dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn Xây dựng qui trình phảnứngPCR o Xácđịnh nhiệt độ thời gian phản ứng...
... việc thực phảnứngPCR 33 4.2.1 Kết thực phảnứngPCR theo qui trình khác 33 4.2.1.1 Qui trình phảnứngPCR theo nhiệt độ bắt cặp khác .33 48 4.2.1.2 Qui trình phảnứngPCR theo nồng ... công ba qui trình phảnứngPCR theo nồng độ primer khác 35 4.2.2 Kết thực phảnứngPCR theo hai loại mẫu khác 37 Bảng 4.5: So sánh tỉ lệ thành công phảnứngPCR với hai loại mẫu ... dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn 24 3.4.2.5 Ứng dụng PCRphátgen thụ thể prolactin xácđịnh tần số kiểugen PRLR mẫu phân tích 27 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ...
... phảnứngPCR thu đƣợc 23 mẫu có xuất gen PRLR Xử lý 23 mẫu với AluI theo qui trình bảng 3.3 để xácđịnhkiểugen Kết đƣợc trình bày nhƣ bảng 4.8 sau: Bảng 4.8: Tỉ lệ xuất kiểugen PRLR Kiểugen ... số xuất kiểugen thụ thể prolactin 41 Sự diện gen thụ thể prolactin Bảng 4.7: Tỉ lệ xuất gen PRLR Số mẫu Có diện gen PLRL Không có diện gen PLRL Tỉ lệ % 23 76,67 23,33 Tỉ lệ xuất kiểugen PRLR ... BB: Các kiểugen PRLR 4.4 Tần số xuất kiểugen quần thể Sau xây dựng thành công qui trình thực kỹ thuật PCR qui trình cắt enzyme hiệu tiến hành áp dụng kết đạt đƣợc vào việc xácđịnh diện gen thụ...
... ứngPCR theo nồng độ primer khác Để tiến hành xácđịnh nồng độ primer thích hợp cho phảnứngPCRphátgen thụ thể prolactin, tiến hành thực phảnứngPCR mẫu da tai Mỗi qui trình tiến hành 15 phản ... ±7,46 33 4.2 Kết việc thực phảnứngPCR 4.2.1 Kết thực phảnứngPCR theo qui trình khác 4.2.1.1 Qui trình phảnứngPCR theo nhiệt độ bắt cặp khác Để tiến hành xácđịnh nhiệt độ bắt cặp tối hảo ... tiến hành thực 15 phảnứng mẫu da tai cho qui trình Mẫu da tai đƣợc chọn hàm lƣợng DNA cao, độ tinh tƣơng đối chuẩn, phù hợp với yêu cầu phảnứngPCR Kết hai qui trình phảnứng đƣợc trình bày...
... giống xácđịnh yếu tố gây bệnh trồng Dùng chuẩn đoán bệnh công tác chăn nuôi, chọn giống Dùng phátgen dự tuyển suất sinh sản chăn nuôi heo nhƣ việc xácđịnhgen thụ thể estrogen, gen halothan, gen ... 2.4.2.6 Số chu kỳ phảnứng Số lƣợng chu kỳ phảnứngPCR thực tế không vƣợt qua 40 chu kỳ Số chu kỳ cho phảnứngPCR tùy thuộc vào số lƣợng DNA mẫu ban đầu Nếu chu kỳ sản phẩm PCR thu đƣợc Nếu ... hình thành allen đƣợc định nghĩa lại nhƣ sau: “ Allen 12 dạng khác genđịnh vị locus nhiễm sắc thể qui định tính trạng thể sinh vật” Allen sở để xácđịnh tính đa hình genGen có nhiều allen tính...
... 2 Xácđịnh qui trình phảnứngPCR phù hợp Thực phảnứngPCR mẫu ly trích đƣợc Xử lý enzyme mẫu có diện gen PRLR Xácđịnh tần số xuất kiểugen PRLR mẫu PHẦN 2: TỔNG QUAN ... hormone tế bào mục tiêu 2.2.4 Gen thụ thể prolactin Cùng với phátgen thụ thể estrogen, gen halothan Ngƣời ta phátgen thụ thể prolactin Gen đƣợc nghiên cứu nhƣ gen dự tuyển công tác chọn giống ... bp đƣợc xácđịnh đa hình Những sản phẩm PCR có diện băng 90 bp đƣợc xácđịnh alen A, băng 110 bp đƣợc xácđịnh alen B Gen PRLR có tính đa hình cao Ở dòng heo khác xử lý enzyme AluI gen PRLR đoạn...
... III ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR- RFLPXÁCĐỊNH ĐA HÌNH GEN 2.Quy trình thực Phương pháp PCR- RFLP Thành phần điều kiện phảnứng cắt Enzyme giới hạn DdeI III ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR- RFLPXÁCĐỊNH ĐA HÌNH GEN ... miệng: III ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR- RFLPXÁCĐỊNH ĐA HÌNH GEN Kết thảo luận Khuếch đại vùng exon 16 gene ACTN3 thông qua phảnứngPCR III ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR- RFLPXÁCĐỊNH ĐA HÌNH GEN Kết thảo ... Tinh sản phẩm PCR: III ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR- RFLPXÁCĐỊNH ĐA HÌNH GEN Kết thảo luận Phân tích RFLP -PCR vùng exon 16 gene ACTN3: III ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR- RFLPXÁCĐỊNH ĐA HÌNH GEN B11 Kết thảo...
... Bi ứng yên phóng xạ tạo hạt nhân X phôtôn Biết động hạt thu đ-ợc 6,09MeV Cho khối l-ợng hạt nhân: m Bi = 212.9913u; mx= 208.9830u; m= 4.0015u lấy 1u = 931.5 MeV/c2 Tớnh b-ớc sóng xạ phát...
... mạn 3.2 Tỉ lệ kiểugen HCV kỹ thuật RT -PCR 3.2.1 Mối tương quan kết định lượng với kết định type 3.2.2 Tỉ lệ kiểugen 228 bệnh nhân xácđịnh genotype Bảng 3.4 Tỉ lệ kiểugen HCV Kiểugen Type Type ... hợp, HCV đột biến gen tạo chủng virut mới) 1.3 Các kỹ thuật xét nghiệm xácđịnhkiểugen HCV Hiện kỹ thuật ứng dụng xácđịnhkiểu HCV Việt Nam kỹ thuật Realtime PCR giải trình tự gen ( InoLIPA Sequencing) ... pháp xácđịnh genotype, chọn đề tài: Xácđịnhkiểugen virus viêm gan C huyết bệnh nhân viêm gan C kỹ thuật sinh học phân tử RT -PCR , với mục tiêu sau : 1) Xácđịnh tỉ lệ người mang kiểu gen...