... quy trình c đ nh n m men carrageenan ñ lênmen rư u vang v i thông s k thu t quan tr ng: - T l kh i lư ng h t gel c ñ nh n m men/ d ch lênmen = 1/10 - Nhi t ñ lên men: 30oC - Th i gian lên men: ... Sơ đ quy trình chi t tách carrageenan t rong s n 21 ng d ng carrageenan vi c c ñ nh t bào n m men 3.3 lênmen rư u vang S d ng: ch ng n m men Saccharomyces cerevisiae, môi trư ng lênmen nư c ... m: Chu n b m u lênmendùng n m men t ñ ñ i ch ng, m u lênmendùng n m men c ñ nh h t gel carragenan (%g/ml) khơng tr i qua giai đo n s y m u lênmendùng h t gel c ñ nh n m men carrageenan...
... quy trình c đ nh n m men carrageenan ñ lênmen rư u vang v i thông s k thu t quan tr ng: - T l kh i lư ng h t gel c ñ nh n m men/ d ch lênmen = 1/10 - Nhi t ñ lên men: 30oC - Th i gian lên men: ... Sơ đ quy trình chi t tách carrageenan t rong s n 21 ng d ng carrageenan vi c c ñ nh t bào n m men 3.3 lênmen rư u vang S d ng: ch ng n m men Saccharomyces cerevisiae, môi trư ng lênmen nư c ... m: Chu n b m u lênmendùng n m men t ñ ñ i ch ng, m u lênmendùng n m men c ñ nh h t gel carragenan (%g/ml) khơng tr i qua giai đo n s y m u lênmendùng h t gel c ñ nh n m men carrageenan...
... bào nấm menlênmenrượuvang Sử dụng: chủng nấm men Saccharomyces cerevisiae, môi trường lênmen nước nho chất hỗ trợ cho vi c cố ñịnh nấm men carrageenan KCl Hiệu cố ñịnh nấm men ñược kiểm tra ... kết lực lênmen tương đồng Từ đó, đề xuất quy trìnhcố định nấm men carrageenan ñể lênmenrượuvang với thông số kỹ thuật quan trọng: - Tỉ lệ khối lượng hạt gel cố ñịnh nấm men/ dịch lênmen = ... Chuẩn bị mẫu lênmendùng nấm men tự ñể ñối chứng, mẫu lênmendùng nấm mencố ñịnh hạt gel carragenan (%g/ml) khơng trải qua giai đoạn sấy mẫu lênmendùng hạt gel cố ñịnh nấm men carrageenan...
... thực khuẩn thể xâm nhiễm vào tếbàovikhuẩn sinh sôi nhờ máy sinh tổng hợp vikhuẩn Khi số lƣợng phage tăng lên 16 đến hàng triệu sao, chúng phá vỡ tếbàovikhuẩn Nhƣng số trƣờng hợp, tếbàovi ... đối chứng mọc nhiều khuẩn lạc nhƣng tồn khuẩn lạc trắng, đĩa có trang vikhuẩn biến nạp cókhuẩn lạc xanh khuẩn lạc trắng Điều chứng tỏ nồng độ kháng sinh có mơi trƣờng không đủ đểloạivikhuẩn ... pha loãng tếbào nƣớc muối sinh lý (A) số tếbào đếm thời điểm đo OD 41 Dựa vào đƣờng tƣơng quan tuyến tính giá trị OD mật số tếbào ta thấy để đạt đƣợc mật số tếbào từ x 107 – 108 tế bào/ ml...
... thực khuẩn thể xâm nhiễm vào tếbàovikhuẩn sinh sôi nhờ máy sinh tổng hợp vikhuẩn Khi số lƣợng phage tăng lên 16 đến hàng triệu sao, chúng phá vỡ tếbàovikhuẩn Nhƣng số trƣờng hợp, tếbàovi ... đối chứng mọc nhiều khuẩn lạc nhƣng tồn khuẩn lạc trắng, đĩa có trang vikhuẩn biến nạp cókhuẩn lạc xanh khuẩn lạc trắng Điều chứng tỏ nồng độ kháng sinh có mơi trƣờng không đủ đểloạivikhuẩn ... pha loãng tếbào nƣớc muối sinh lý (A) số tếbào đếm thời điểm đo OD 41 Dựa vào đƣờng tƣơng quan tuyến tính giá trị OD mật số tếbào ta thấy để đạt đƣợc mật số tếbào từ x 107 – 108 tế bào/ ml...
... thực khuẩn thể xâm nhiễm vào tếbàovikhuẩn sinh sôi nhờ máy sinh tổng hợp vikhuẩn Khi số lƣợng phage tăng lên 16 đến hàng triệu sao, chúng phá vỡ tếbàovikhuẩn Nhƣng số trƣờng hợp, tếbàovi ... đối chứng mọc nhiều khuẩn lạc nhƣng tồn khuẩn lạc trắng, đĩa có trang vikhuẩn biến nạp cókhuẩn lạc xanh khuẩn lạc trắng Điều chứng tỏ nồng độ kháng sinh có mơi trƣờng không đủ đểloạivikhuẩn ... pha loãng tếbào nƣớc muối sinh lý (A) số tếbào đếm thời điểm đo OD 41 Dựa vào đƣờng tƣơng quan tuyến tính giá trị OD mật số tếbào ta thấy để đạt đƣợc mật số tếbào từ x 107 – 108 tế bào/ ml...
... Các tếbàodùngđể điều trị tếbào tủy xương toàn phần dòng tếbào riêng biệt truyền tếbào kết hợp với hóa trị liệu để thúc đẩy cư trú tếbào mô tổn thương cần phải phục hồi Ứngdụngtếbào ... tếbào nội mạc, tếbào thần kinh, tếbào biểu mơ gan [19-21] Hướng nghiên cứu ứngdụng dòng tếbào gốc từ nguồn có ý nghĩa thực tiễn quan trọng; 4) Tếbào gốc từ tếbào phôi chuyển gen: Tếbào ... khả ứngdụng khác Chúng ta liệt kể nguồn cung cấp tếbào gốc với đặc điểm sinh học dòng tếbào này: 1) Tếbào gốc phôi: Các tếbào gốc gọi tếbào toàn với khả biệt hóa vơ hạn Các tếbào gốc loại...
... .26 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vikhuẩn E.coly DH5α kiểm tra .27 3.3.3 Xác định mật số vikhuẩn cách đo OD600nm ... tính 39 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn 43 4.2.1 Chọn lọc vikhuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml 43 4.2.2 Chọn lọc vikhuẩn biến nạp với nồng độ ... Kết cấy vikhuẩn biến nạp sốc nhiệt 90 giây 43 Hình 4.4 Kết cấy vikhuẩn biến nạp sốc nhiệt 60 giây .44 Hình 4.5 Kết cấy vikhuẩn biến nạp đối chứng 45 Hình 4.6 Kết cấy vi khuẩn...
... đƣợc quy trình chuyển đoạn DNA vào tếbào chủ DH5α Quy trình sử dụng cho thí nghiệm tạo dòng áp dụng trực tiếp phòng thí nghiêm Các bƣớc quy trình Chuẩn bị khả nạp Dịch tếbào chuẩn bị để làm khả ... 58 Quy trình tách chiết plasmid Bƣớc 1: Hút dịch vikhuẩn từ ống cho vào eppendorf 1.5 ml, ly tâm để thu sinh khối 10000 vòng/phút phút 200C Bƣớc 2: Hút bỏ dịch bên trên, hút dịch vikhuẩn từ ... DNA từ sản phẩm cắt vào tế bào, chuyển gen hoàn chỉnh vào tếbào chủ kiểm soát biểu của gen 59 Nếu trƣờng hợp khơng đủ hố chất để tách chiết plasmid theo quy trình sử dụng SDS - Kiềm nên tách...
... lạc xanh tái đóng vòng plasmid, khuẩn lạc trắng tếbào mang plasmid tái tổ hợp để khẳng định, tiến hành cấy chuyền, chiết tách plasmid, kiểm tra men cắt thựic phản ứng PCR plasmid với cặp primers ... DNA có kých thƣớc 580bp, kết cho khuẩn lạc trắng tổng số 108 khuẩn lạc, để kiểm tra khuẩn lạc trắng thực cấy chuyền, tách chiết plasmid, kiểm tra men cắt thực phản ứng PCR plasmid với cặp primers ... gel Phản ứng tạo đầu cho đoạn DNA enzym Klenow Fragment không kiểm tra đƣợc phƣơng pháp điện di gel agarose, kết đƣợc kiểm tra chèn vào plasmid (đã đƣợc cắt tạo đầu bằng) biến nạp vào vikhuẩn Kết...
... đối chứng mọc nhiều khuẩn lạc nhƣng tồn khuẩn lạc trắng, đĩa có trang vikhuẩn biến nạp cókhuẩn lạc xanh khuẩn lạc trắng Điều chứng tỏ nồng độ kháng sinh có mơi trƣờng không đủ đểloạivikhuẩn ... định giá trị OD 42 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn 4.2.1 Chọn lọc vikhuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml a b c DC Hình 4.3 Kết cấy vikhuẩn biến nạp sốc nhiệt 90 ... ml 4.2.2 Chọn lọc vikhuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 100µg/ ml Hình 4.5 Kết cấy vikhuẩn biến nạp đối chứng Biến nạp cótếbào khả nạp khơng có plasmid ( thể tích 30μl tếbào khả nạp) phục...
... có số khuẩn lạc từ 25 – 300 để đếm Nếu khuẩn lạc mọc dy quỏ thỡ cú th m ẵ hoc ẳ git nhân lên tƣơng ứng a b Hình 4.1 Kết cấy vikhuẩn nồng độ pha loãng khác sau 5, nuôi cấy (a) kết cấy vikhuẩn ... lại khơng theo dõi thực tế chúng tơi cần biết điều kiện làm thí nghiệm này, để đạt đƣợc mật số tếbào 108 tế bào/ ml giá trị OD tƣơng ứngBảng 4.1 Gía trị đo OD số tế bào/ ml theo thời gian nuôi ... sử dụng cột tinh GFX thu lại 3μl elution buffer 3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tếbàovikhuẩn E.coly DH5α khả nạp (theo quy trình Sambrook cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) Thực biến nạp theo quy trình...
... pháp nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn Nhiễm sắc thể + CaCl2 + DNA plasmid Màng tếbào trở nên khả nạp sốc nhiệt ổn định tếbào Màng tếbào hồi phục plasmid bắt đầu ... chiết plasmid,kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tếbàovikhuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vikhuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vikhuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid ... tán chùm sáng tới Tếbàovi sinh vật thực thể nên diện môi trƣờng làm cho môi trƣờng trở nên đục Độ đục huyền phù tỷ lệ với mật độ tếbàoTrong giới hạn định độ đục mật độ tế bào, xác lập đƣợc...
... methyl hố Hình 2.4 : Hiện tƣợng giới hạn vikhuẩn (a) DNA phage bị phân huỷ tếbàovikhuẩn (b) DNA vikhuẩn không đƣôc nhận biết enzym cắt Các kiểu cắt RE loại 2: Cắt tạo đầu (blunt-ends): Một ... sử dụng chủng E.coly khác Kết nghiên cứu ông cho thấy sử dụngtếbào đầu phage log ảnh hƣởng lớn đến thành công vi c chuẩn bị tếbào khả nạp Giá trị OD600 thích hợp dịch ni cấy chuẩn bị tếbào ... sinh sản mạnh phá vỡ vikhuẩn Các vikhuẩn sau đƣợc trải thạch hộp petri 2.7 Các nghiên cứu biến nạp DNA Cohen công (1973), thành công biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tếbàovikhuẩn E.coly phƣơng...
... Nguồn DNA có đƣợc từ tếbào chết hay tếbào bị phân hủy Kết thu đƣợc vikhuẩn thể vài tính trạng mới, tính trạng ổn định có khả di truyền Từ nghiên cứu Griffiths Avery tếbàovikhuẩn phải trạng ... tạo tếbào khả nạp có hiệu biến nạp từ 5x106 đến 2x107 khuẩn lạc/µg plasmid DNA Thơng thƣờng, ngƣời ta xử lý tếbàovikhuẩndung dịch muối lạnh kim loại hoá trị II nhƣ CaCl2, MgCl2, RbCl2 Vi c ... xuất tự nhiên vài loàivikhuẩn mà nồng độ chất dinh dƣỡng oxy môi trƣờng sống chúng giảm xuống thấp Trong thực tế nghiên cứu biến nạp phải tiến hành xử lý tếbàovikhuẩnđể chúng có khả hấp thu...
... n Trongtrình này, vi- rút v a t o thành ph n ñ tái t o h t vi- rút m i (các vi- ri-ôn), v a t o thành ph n không tham gia t o thành h t vi- ri-ơn mà ch đóng vai trò men giúp cho q trình nhân lên ... chú: % phá h y th m t bào ñư c c lư ng b ng quan sát dư i kính hi n viQua k t qu b ng 4.1, th y th i ñi m 96 gi sau nhi m vi rút lên chai t bào, vi rút phá h y ñ n 100% th m t bào k t qu OD l i ... phương pháp trên, có th ni c y mơi trư ng t bào. T t nh t t bào th n bê ho c c u non, n yên c a bò ho c c a l n, ho ccác dòng t bào m n c m t bào BHK (Baby Hamster Kidney) Sau khic y vi rút LMLM...
... hình thái chủng vikhuẩn Các chủng vikhuẩn ria trước 24 h, đưa lên lam kính nhỏ sẵn giọt muối sinh lý Đánh tan sinh khối đậy lam menlên Sau đó, chủng vikhuẩn đem lên kính hiển viđể nhận biết ... dùngđể xác định nhóm vikhuẩn thuộc Gram dương (G+) Đây phương pháp dùng 49 nguồn carbonhydrat đểlênmen (API 50 CHB) nhận biết vikhuẩn Bacillus có phản ứng với chất biết từ trước, thử phản ứng ... chủng vikhuẩncó khả thủy phân keratin mạnh (sinh keratinase cao) 2.2.2.2 Xác định mật độ tếbào Mật độ tếbàovikhuẩn sau pha lỗng cấy trải mơi trường tính cơng thức: Y = a x 20 x 10n Y: Số khuẩn...
... enzyme số vikhuẩn sinh để kháng kháng sinh thuộc họ β-lactam - Một số chủng có khả sinh β-lactamase phát hiện: E.cloacae, S.marcescens, P.aeruginosa, B.subtilis,… I Tổng quan Nguồn gen -Vi khuẩn ... biểu Vector sử dụng Kiểm tra enzyme khơng cắt trình tự gen đích Kiểm tra enzyme khơng cắt trình tự gen đích Kiểm tra enzyme khơng cắt trình tự gen đích Trình tự gen đầu vào ... định trình tự gen đích Xác định trình tự gen mã hóa protein enzyme Thiết kế mồi Thiết kế mồi Kiểm tra bắt cặp mồi với genome Kiểm tra bắt cặp mồi với genome III Xây dựng vector biểu Vector sử dụng...