đưa dna tái tổ hợp vào tế bào vi khuẩn nhận e coli và tiến hành nuôi cấy tạo dòng gen

Tách dòng và xác định trình tự gene kháng thể tái tổ hợp kháng tế bào lympho bệnh ung thư vú

Tách dòng và xác định trình tự gene kháng thể tái tổ hợp kháng tế bào lympho bệnh ung thư vú

Ngày tải lên : 24/04/2013, 22:04
... nạp DNA Plasmid vào tế bào E. coli DH5α Vector pCR 2.1 sau gắn đoạn gene kháng thể tái tổ hợp biến nạp vào tế bào vi khuẩn E. coli chủng DH5α có kít tách dòng “TA cloning kit” hãng Invitrogen Sau ... thể tái tổ hợp E. coli Do ưu điểm bật nó: tế bào phát triển nhanh rẻ Nhiều vector sử dụng để tách dòng biểu gene tách dòng DNA đưa trực tiếp vào E. coli (biến nạp) vi c nhiễm vào thực thể khuẩn ... ứng PCR vào vector tách dòng pCR ™ 2.1 (invitrogen) với mục đích tạo vector tái tổ hợp mang đoạn DNA cần tách dòng sau biến nạp vào tế bào E. coli chủng DH5α Nguyên tắc: Phản ứng dựa vào đặc tính...
  • 37
  • 1.1K
  • 2
Tài liệu HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α pot

Tài liệu HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α pot

Ngày tải lên : 25/02/2014, 15:20
... đƣa DNA tái tổ hợp vào tế bào Trong trƣờng hợp tế bào E coli biến nạp có nghĩa đƣa DNA plasmid vào tế bào Biến nạp đƣợc sử dụng với nghĩa rộng hơn, cụ thể đƣa DNA vào tế bào Lần biến nạp vi khuẩn ... gen đặc tính thuận lợi cho thao tác gen Chủng chủ mang vector tái tổ hợp gọi dòng tái tổ hợp Dòng tái tổ hợp đƣợc phân lập để lƣu trữ DNA tái tổ hợp dùng cho thao tác gen Toàn trình gọi tạo dòng ... xúc DNA lạ với tế bào nhận - Sự xâm nhập DNA vào tế bào nhận - Sự liên kết DNA lạ với đoạn tƣơng đồng nhiễm sắc thể tế bào nhận - Sự đồng hóa phân tử DNA lạ vào DNA tế bào nhận nhờ tái tổ hợp...
  • 68
  • 449
  • 1
Tài liệu CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN potx

Tài liệu CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN potx

Ngày tải lên : 25/02/2014, 15:20
... trƣờng hợp virus tải đoạn nhỏ DNA vi khuẩn cho vào vi khuẩn nhận sau thực tái tổ hợp để gắn DNA vào gen vi khuẩn nhận Tải nạp đặc hiệu: Vi c tải nạp thực gen định Thí dụ: với Prophage tiếp hợp vào ... Bottin, 1998) Yeoung-Seuk Bae Guy R Knudsen, 1999 sử dụng Polyethylene-glycol đồng biến nạp gen tổng hợp β-Glucuronidase (GUS) gen tổng hợp GFP (Fluorescent Protein Genes ) vào nấm Trichoderma harzianum ... đặc tính vi khuẩn cho.Sự tiếp hợp hai vi khuẩn dẫn đến hình thành hợp tử chứa hệ gen vi khuẩn nhận đoạn gen vi khuẩn cho Hai phần kết hợp lại thành nhiễm sắc thể Những vi khuẩn sinh tiếp hợp đƣợc...
  • 81
  • 575
  • 0
Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5

Hoàn thiện quy trình biến nạp đoạn dna vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5

Ngày tải lên : 27/10/2012, 10:53
... đƣa DNA tái tổ hợp vào tế bào Trong trƣờng hợp tế bào E coli biến nạp có nghĩa đƣa DNA plasmid vào tế bào Biến nạp đƣợc sử dụng với nghĩa rộng hơn, cụ thể đƣa DNA vào tế bào Lần biến nạp vi khuẩn ... gen đặc tính thuận lợi cho thao tác gen Chủng chủ mang vector tái tổ hợp gọi dòng tái tổ hợp Dòng tái tổ hợp đƣợc phân lập để lƣu trữ DNA tái tổ hợp dùng cho thao tác gen Toàn trình gọi tạo dòng ... xúc DNA lạ với tế bào nhận - Sự xâm nhập DNA vào tế bào nhận - Sự liên kết DNA lạ với đoạn tƣơng đồng nhiễm sắc thể tế bào nhận - Sự đồng hóa phân tử DNA lạ vào DNA tế bào nhận nhờ tái tổ hợp...
  • 23
  • 1.3K
  • 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α

Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coli DH5α

Ngày tải lên : 31/10/2012, 09:35
... chúng tạo cấu trúc cho phép DNA tiếp cận với ComEA ComEA thể nhận để DNA vào tế bào ComEC tạo kênh vận chuyển dạng dịch qua DNA vào tế bào (Leendert W.Hamoen cộng sự, 1998) ComFA dạng helycase có ... gia vào phản ứng PCR Taq polymerase Taq polymerase enzym tham gia vào trình tổng hợp mạch DNA Enzym có khả phân hủy primer bắt cặp vào mạch DNA tạo điều kiện cho vi c bổ sung nucleotide vào mạch ... E. coly) chuỗi polypeptide với ba hoạt động enzym: DNA polymerase (tổng hợp) 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải) 3’ 5’ 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn...
  • 74
  • 3.3K
  • 15
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α

Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α

Ngày tải lên : 16/11/2012, 16:15
... chúng tạo cấu trúc cho phép DNA tiếp cận với ComEA ComEA thể nhận để DNA vào tế bào ComEC tạo kênh vận chuyển dạng dịch qua DNA vào tế bào (Leendert W.Hamoen cộng sự, 1998) ComFA dạng helycase có ... gia vào phản ứng PCR Taq polymerase Taq polymerase enzym tham gia vào trình tổng hợp mạch DNA Enzym có khả phân hủy primer bắt cặp vào mạch DNA tạo điều kiện cho vi c bổ sung nucleotide vào mạch ... E. coly) chuỗi polypeptide với ba hoạt động enzym: DNA polymerase (tổng hợp) 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải) 3’ 5’ 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn...
  • 74
  • 2.5K
  • 5
Chuyển gen gfp vào tế bào vi khuẩn Pseudomanas fluorescens bằng phương pháp tiếp hợp ba thành phần

Chuyển gen gfp vào tế bào vi khuẩn Pseudomanas fluorescens bằng phương pháp tiếp hợp ba thành phần

Ngày tải lên : 19/11/2012, 15:13
... trƣờng hợp virus tải đoạn nhỏ DNA vi khuẩn cho vào vi khuẩn nhận sau thực tái tổ hợp để gắn DNA vào gen vi khuẩn nhận Tải nạp đặc hiệu: Vi c tải nạp thực gen định Thí dụ: với Prophage tiếp hợp vào ... Bottin, 1998) Yeoung-Seuk Bae Guy R Knudsen, 1999 sử dụng Polyethylene-glycol đồng biến nạp gen tổng hợp β-Glucuronidase (GUS) gen tổng hợp GFP (Fluorescent Protein Genes ) vào nấm Trichoderma harzianum ... đặc tính vi khuẩn cho.Sự tiếp hợp hai vi khuẩn dẫn đến hình thành hợp tử chứa hệ gen vi khuẩn nhận đoạn gen vi khuẩn cho Hai phần kết hợp lại thành nhiễm sắc thể Những vi khuẩn sinh tiếp hợp đƣợc...
  • 81
  • 1.1K
  • 9
Luận văn : CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN part 3 ppt

Luận văn : CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN part 3 ppt

Ngày tải lên : 28/07/2014, 02:21
... Pseudomonas fluorescens through chromosomal integratio of 2,4-diacelphloroglucinol biosynthesis genes.Chinese Science Bulletin 50: 775 – 781 Các Website http://www.emunix.emich.edu/~rwinning/genetics/glossary.htm ... Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh Tài liệu tiếng nƣớc 11 Christine Josenhans, Susanne Friedrich and Sebastian Suerbaum,1998 Green fluorecens protein as a novel marker and reporter system in Helicobacter ... (a) Dòng vi khuẩn E. coli DH5α (λ-pir) chứa plasmid pUT-gfp; (b) Dòng vi khuẩn E. coli DH5α (λ-pir) chứa plasmid pRK600; (c) Dòng vi khuẩn Pseudomonas fluorescens 50 4.1.2 Kết ly trích DNA tổng...
  • 27
  • 318
  • 0
Luận văn : CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN part 2 ppsx

Luận văn : CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN part 2 ppsx

Ngày tải lên : 28/07/2014, 02:21
... Bottin, 1998) Yeoung-Seuk Bae Guy R Knudsen, 1999 sử dụng Polyethylene-glycol đồng biến nạp gen tổng hợp β-Glucuronidase (GUS) gen tổng hợp GFP (Fluorescent Protein Genes ) vào nấm Trichoderma harzianum ... Châu Phi Nos promoter “nopaline Synthase” Agrobacterium tumerfaciens hpr gen kháng hydromycine Streptomuces hygroscopius uidA gen “β-glucurnidase” Escherichia coli Reporter gen đƣợc sử dụng để ... (radiochemical) nhƣ CAT, chloramphenicol acetyltranferase, phƣơng pháp quang hóa học (chemiluminescence) nhƣ lux vi khuẩn luc, lucciferase đom đóm Hệ thống marker gen Marker gen gen dùng để chọn lọc Các...
  • 27
  • 511
  • 0
Luận văn : CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN part 1 ppsx

Luận văn : CHUYỂN GEN gfp (GREEN FLUORESCENT PROTEIN) VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN Pseudomonas fluorescens BẰNG PHƯƠNG PHÁP TIẾP HỢP BA THÀNH PHẦN part 1 ppsx

Ngày tải lên : 28/07/2014, 02:21
... trƣờng hợp virus tải đoạn nhỏ DNA vi khuẩn cho vào vi khuẩn nhận sau thực tái tổ hợp để gắn DNA vào gen vi khuẩn nhận Tải nạp đặc hiệu: Vi c tải nạp thực gen định Thí dụ: với Prophage tiếp hợp vào ... Phƣơng pháp triparental mating tiếp hợp đoạn gen gfp vào vi khuẩn Pseudomonas fluorescens 39 3.3.2 Ly trích genomic DNA từ các dòng vi khuẩn Pseudomonas fluorescens tiếp hợp ... đặc tính vi khuẩn cho.Sự tiếp hợp hai vi khuẩn dẫn đến hình thành hợp tử chứa hệ gen vi khuẩn nhận đoạn gen vi khuẩn cho Hai phần kết hợp lại thành nhiễm sắc thể Những vi khuẩn sinh tiếp hợp đƣợc...
  • 27
  • 380
  • 0
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx

Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx

Ngày tải lên : 28/07/2014, 02:21
... 10µl dịch huyền phù tế bào competent cell đƣợc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 3µl DNA plasmid tái tổ hợp vào, đảo nhẹ, giữ lạnh đá 20 phút - Chuyển nhanh eppendorf vào bồn nhiệt 420C, ... plasmid chưa tái tổ hợp C 47 Kết biến nạp hoàn toàn plasmid tái tổ hợp vào vi khuẩn khuẩn lạc màu trắng tế bào vi khuẩn bị đột biến kháng kháng sinh tạo thành Còn đĩa đối chứng xuất khuẩn lạc màu ... Schumann, 1995, Genetic Engineering Techniques Các website http://www.protocol-online.org/prot/Mmolecular_Biology/ http://brahms.chem.uic.edu/~cgpage/protocol/cloning.html A 51 http://core.eai.edu/biol/foruvellm/farwelebpage/Biotech3100/pvector.200.pfd...
  • 22
  • 492
  • 0
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 2 doc

Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 2 doc

Ngày tải lên : 28/07/2014, 02:22
... biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Vi khuẩn Ecoli Xử lí CaCl2 Sốc nhiệt 420C 45 giây Cấy lên đĩa Sơ đồ 3.2 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn E coli Vi khuẩn E coli sau xử lí CaCl2 ... tế bào thực vật Sau trộn tế bào trần với DNA tái tổ hợp với có mặt CaCl2 polyethylenglycol Tiếp theo ta lại nuôi tế bào trần môi trƣờng thích hợp để tái tạo lại thành tế bào nguyên thủy Khi tế ... 5’ exonuclease 5’ 3’, exonuclease (thủy giải), 3’ Enzym DNA fragment Klenow enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn vị nhỏ (nhờ protease), phần chịu trách nhiệm exonuclease 5’ 3’ Do đó, enzym...
  • 23
  • 492
  • 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx

Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx

Ngày tải lên : 28/07/2014, 06:20
... plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α kiểm tra .27 3.3.3 Xác định mật số vi khuẩn cách đo OD600nm kết hợp với phƣơng pháp đếm khuẩn lạc ... Cơ sở sinh hóa tế bào học hiên tƣợng biến nạp 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 2.3.1 Khái niệm biến nạp nhân tạo 2.3.2 Sự điều hoà gen operon Lac E. coly .5 ... Cách tiến hành 28 3.3.4 Chuẩn bị tế bào khả nạp .29 3.3.5 Biến nạp plasmid pBluescript vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5α phƣơng pháp sốc nhiệt 30 3.3.6 Chọn lọc khuẩn...
  • 8
  • 295
  • 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx

Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx

Ngày tải lên : 28/07/2014, 06:20
... 100mM lạnh vào hòa tan phần kết tủa Thêm 20μl glycerol 98% vào trữ -700C Biến nạp plasmid vào khả nạp Bƣớc 1: Hút 3µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, ... đảo nhe eppendorf Bƣớc 5: Ly tâm 12000 vòng/phút 10 phút 200C Thu hết dịch cho vào eppendorf tƣơng ứng Bƣớc 6: Cho vào eppendorf chứa dịch vừa thu đƣợc 1µl RNAse, ủ 370C Bƣớc 7: Cho vào eppendorf ... Wolgang Schumann, 1995, Genetic Enginereering Techniques Các website http://faculty.plattsbuggh.edu/donald-slysh/transformation.html 12.http://www.mun.ca/Biochem/course/4103/topic/transrormation.html...
  • 8
  • 284
  • 0
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf

Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf

Ngày tải lên : 28/07/2014, 06:20
... đƣợc plasmid tái tổ hợp Biến nạp plasmid tái tổ hợp vào vi khuẩn E. coly DH5α khả nạp, thu đƣợc kết nhƣ sau 52 a b Hình 4.16 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ hợp với đoạn DNA 629 bp môi ... Hình 4.17 Kết cấy vi khuẩn biến nạp plasmid tái tổ hợp với đoạn DNA 580bp môi trƣờng LB/amp/ X-gal/IPTG (a)Biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp plasmid tái tổ hợpvới đoạn DNA 580bp theo thể tích (μl) ... đƣợc cắt với hai enzym BamHI HindIII Hai enzym có trình tự nhận biết nằm trình tự nhận biết enzym EcoRV, cắt mẫu plasmid tái tổ hợp tạo dạng thẳng mang đoạn DNA đƣợc chèn vào theo sơ đồ cắt vùng...
  • 8
  • 333
  • 2
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc

Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc

Ngày tải lên : 28/07/2014, 06:20
... Chiết tách DNA plasmid lẫn DNA gen thêm dung dịch III vào để lâu nên DNA plasmid DNA gen hoàn tính Qua kết tách chiết tính đƣợc tỉ lệ tế bào tiếp nhận plasmid 11/15 Với nhận định tiến hành chiết ... dịch vi khuẩn nuôi cấy để đo OD nhiều lần nên dịch nuôi cấy dễ bị nhiễm vi sinh vật từ bên ngoài, phải cẩn thận thao tác Mật độ tế bào vi khuẩn phụ thuộc vào yếu tố sau Thể tích môi trƣờng nuôi cấy ... nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 4.2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml a b c DC Hình 4.3 Kết cấy vi khuẩn biến nạp sốc nhiệt 90 giây (a) biến nạp với tỉ lệ tế bào khả nạp...
  • 8
  • 339
  • 1
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot

Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot

Ngày tải lên : 28/07/2014, 06:20
... 10µl dịch huyền phù tế bào competen cell đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf 1.5 ml, thêm 3µl DNA plasmid tái tổ hợp vào, đảo nhẹ, giữ lạnh đá 20 phút Chuyển nhanh eppendorf vào bồn nhiệt 420C, giữ ... thêm vào cột lƣợng wash buffer với lƣợng capture buffer cho vào trên, ly tâm 10000 vòng /phút 30 giây 40C Bƣớc 6: Lấy cột đặt vào eppendoft 1.5ml Bƣớc 7: Hút elution buffer nhỏ vào cột GFX, tùy vào ... Từ lượng vector DNA tính lượng DNA chèn Vector (ng) x DNA chèn (kb) X Tỉ lệ DNA chèn (bp) (ng )DNA chèn = Vector (kb) Vector Căn vào tỉ lệ số mol vector DNA chèn dựa vào để tính lƣợng DNA cần sử...
  • 8
  • 308
  • 0

Xem thêm