... dịch mã sinh vật nhân chuẩn [21], mã khởi đầu mã kết thúc gen Cấu trúc gọi hộp gen (gene cassete) Hộp gen m1 thiếtkế phương pháp PCR, sử dụng khn cDNA tổng hợp trên, với cặp mồi đặc hiệu cho gen ... gen m1 tế bào trùng Sf9 PCR Chúng tơi sử dụng cặp mồi dùng đểtáchdòngthiếtkế vector baculovirus trung gian mang hộp gen m1 để kiểm tra có mặt gen nghiên cứu tế bào trùng Sf9 Cặp mồi cho gen ... dụng làm khn để khuếch đại genmãhóa protein M1 2.2.3 Thiếtkế hộp gen m1 virus cúm A/H5N1 Để biểu protein M1 tế bào trùng (Sf9), genmãhóa protein M1 cần phải gắn thêm yếu tố thiết yếu trình...
... Mồi yếu tố quan trọng định thành công PCR Việc thiếtkếmồi đặc hiệu sử dụng mồi thích hợp mang tính định sản phẩm PCR thu 1.3.2 Nguyên tắc thiếtkếmồi yêu cầu mồi 1.3.2.1 Nguyên tắc thiếtkế ... notepad gồm tên mồi, trình tự mồi, Tm, %GC, Q Có nhiều mồiđể lựa chọn cho phản ứng PCR 1.3.3.2.2 Chương trình thiếtkế Primer-3 Primer-3 số chương trình ứng dụng đểthiếtkếđoạnmồi Rozen Skeletsky ... trình thiếtkế Primer-BLAST Hình 1.4: Giao diện trực tuyến chương trình primer-BLAST(5) Primer-BLAST phát triển NCBI để giúp người dùng thiếtkếmồi cho phản ứng PCR Nó dùng Primer-3 đểthiếtkế mồi...
... dịch mã sinh vật nhân chuẩn [21], mã khởi đầu mã kết thúc gen Cấu trúc gọi hộp gen (gene cassete) Hộp gen m1 thiếtkế phương pháp PCR, sử dụng khn cDNA tổng hợp trên, với cặp mồi đặc hiệu cho gen ... gen m1 tế bào trùng Sf9 PCR Chúng tơi sử dụng cặp mồi dùng đểtáchdòngthiếtkế vector baculovirus trung gian mang hộp gen m1 để kiểm tra có mặt gen nghiên cứu tế bào trùng Sf9 Cặp mồi cho gen ... dụng làm khn để khuếch đại genmãhóa protein M1 2.2.3 Thiếtkế hộp gen m1 virus cúm A/H5N1 Để biểu protein M1 tế bào trùng (Sf9), genmãhóa protein M1 cần phải gắn thêm yếu tố thiết yếu trình...
... đoạn DNA dự đoánthiếtkế cặp mồi đặc hiệu 3.4 TÁCHDÒNGGEN VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN 3.4.1 Tạo plasmid tái tổ hợp INV-pENTR Để khẳng định chắn đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng RT-PCR xác đoạngen ... Gel Extraction Kit 2.2.4 Táchdòng xác định trình tự gen Sản phẩm PCR tinh đƣợc gắn vào vector táchdòng pENTR/D hãng Invitrogen (Mỹ) để tạo vector tổ hợp có mang đoạngenmãhóa Invertase mong ... Học liệu – Đại học Thái Nguyên Thiếtkế vector tái tổ hợp INV_RNAi http://www.Lrc-tnu.edu.vn 24 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 THIẾTKẾMỒIĐể nhân đƣợc đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase kỹ...
... đoạn DNA dự đoánthiếtkế cặp mồi đặc hiệu 3.4 TÁCHDÒNGGEN VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN 3.4.1 Tạo plasmid tái tổ hợp INV-pENTR Để khẳng định chắn đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng RT-PCR xác đoạngen ... Gel Extraction Kit 2.2.4 Táchdòng xác định trình tự gen Sản phẩm PCR tinh đƣợc gắn vào vector táchdòng pENTR/D hãng Invitrogen (Mỹ) để tạo vector tổ hợp có mang đoạngenmãhóa Invertase mong ... Học liệu – Đại học Thái Nguyên Thiếtkế vector tái tổ hợp INV_RNAi http://www.Lrc-tnu.edu.vn 24 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 THIẾTKẾMỒIĐể nhân đƣợc đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase kỹ...
... đoạn DNA dự đoánthiếtkế cặp mồi đặc hiệu 3.4 TÁCHDÒNGGEN VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN 3.4.1 Tạo plasmid tái tổ hợp INV-pENTR Để khẳng định chắn đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng RT-PCR xác đoạngen ... Gel Extraction Kit 2.2.4 Táchdòng xác định trình tự gen Sản phẩm PCR tinh đƣợc gắn vào vector táchdòng pENTR/D hãng Invitrogen (Mỹ) để tạo vector tổ hợp có mang đoạngenmãhóa Invertase mong ... Học liệu – Đại học Thái Nguyên Thiếtkế vector tái tổ hợp INV_RNAi http://www.Lrc-tnu.edu.vn 24 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 THIẾTKẾMỒIĐể nhân đƣợc đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase kỹ...
... đoạn DNA dự đoánthiếtkế cặp mồi đặc hiệu 3.4 TÁCHDÒNGGEN VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN 3.4.1 Tạo plasmid tái tổ hợp INV-pENTR Để khẳng định chắn đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng RT-PCR xác đoạngen ... Gel Extraction Kit 2.2.4 Táchdòng xác định trình tự gen Sản phẩm PCR tinh đƣợc gắn vào vector táchdòng pENTR/D hãng Invitrogen (Mỹ) để tạo vector tổ hợp có mang đoạngenmãhóa Invertase mong ... Học liệu – Đại học Thái Nguyên Thiếtkế vector tái tổ hợp INV_RNAi http://www.Lrc-tnu.edu.vn 24 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 THIẾTKẾMỒIĐể nhân đƣợc đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase kỹ...
... đoạn DNA dự đoánthiếtkế cặp mồi đặc hiệu 3.4 TÁCHDÒNGGEN VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN 3.4.1 Tạo plasmid tái tổ hợp INV-pENTR Để khẳng định chắn đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng RT-PCR xác đoạngen ... Gel Extraction Kit 2.2.4 Táchdòng xác định trình tự gen Sản phẩm PCR tinh đƣợc gắn vào vector táchdòng pENTR/D hãng Invitrogen (Mỹ) để tạo vector tổ hợp có mang đoạngenmãhóa Invertase mong ... Học liệu – Đại học Thái Nguyên Thiếtkế vector tái tổ hợp INV_RNAi http://www.Lrc-tnu.edu.vn 24 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 THIẾTKẾMỒIĐể nhân đƣợc đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase kỹ...
... Bảng 3.1 Trình tự thông số cần thiết cặp mồi 3’INV 5’INV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 THIẾTKẾMỒIĐể nhân đƣợc đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase kỹ thuật Mồi Trình tự mồi (5’INV) 5’-CATCTGGGGCAACAAGATC-3’ ... không kháng kháng Để khẳng định chắn đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng RT-PCR xác đoạngenmãhóa enzyme Invertase, tiến hành việc táchdòng xác định trình tự genĐể việc táchdòng đạt đƣợc hiệu ... NHÂN DÕNGĐOẠNGENMÃHÓA ENZYME INVERTASE RNA tổng số sau đƣợc tinh sử dụng làm khuôn cho phản ứng RT-PCR để nhân đoạngenmãhóa cho enzyme Invertase với cặp mồi 5’INV 3’INV thiếtkế Nếu phản...
... vector táchdòngTáchdònggen trình phức tạp, gồm nhiều giai đoạn, giai đoạn phụ thuộc nhiều yếu tố khác Chọn vector táchdòng thích hợp có vai trò định thành công hay thất bại táchdònggenĐể ... genĐể đảm bảo táchdònggen thành công, chọn vector táchdòng cần ý số nguyên tắc: Dựa vào kích thước chất đoạn DNA cần táchdòng làm chọn vector Nếu đoạn cài DNA có nguồn gốc từ gen sinh vật ... việc gắn đoạn DNA có nguồn gốc khác vào vectơ táchdòng Những vector táchdòng mang DNA tái tổ hợp biểu thành protein tái tổ hợp sinh vật I.5.1 Vector táchdòng - Khái niệm vector táchdòng Khoa...
... 600 500 Chiều dài đoạn dốc tối thiểu 150m đủ để bố trí đường cong đứng - Thiếtkế đường đỏ kết hợp với thiếtkế bình đồ trắc dọc để tạo hài hòa cảnh quan chạy xe an toàn - Thiếtkế đường cong đứng ... lũy 10 năm thiếtkế >4.106 (trục) Nett =0.8.106
... chuyển genđểthiếtkế Ti–plasmid tái tổ hợp mang genmãhóaxylanasegen kháng hygromycin B Trên cở sở tạo chủng vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens tái tổ hợp phục vụ công tác chuyển genmãhóaxylanase ... lược thiếtkế vector đặt Để tạo chủng Agrobacterium làm nguyên liệu chuyển gen vào nấm, việc thiếtkế Ti plasmid vector biểu hiện, vector kí hiệu pCB_xylB_hph genmãhóaxylanase (xylB) gen kháng ... protein, gen phải nằm kết cấu hoàn chỉnh gồm đoạn khởi đầu phía trước đoạn kết thúc phía sau gen, đoạn khởi đầu kết thúc điều khiển gen hoạt động tế bào chủ thích hợp [6, 22, 39] Bởi vậy, để xylB...
... liên kết gọi : a) Liên kết phân cực, liên kết lưỡng cực, liên kết cực b) Liên kết đơn giản, liên kết phức tạp c) Liên kết σ (xích ma), liên kết π (pi), liên kết δ (đen ta) d) Liên kết đơn, liên kết ... kết phối trí) c) Liên kết cộng hoá trò có cực d) Liên kết tự – phụ thuộc Liên kết hoá học phân tử hiđro sunfua : a) Liên kết ion; b) Liên kết cộng hoá trò; c) Liên kết phân cực yếu; d) Liên kết ... a.Hai liên kết σ, liên kết cho – nhận b.Một liên kết π, hai liên kết σ c Một liên kết σ, hai liên kết π d.Liên kết cộng hoá trò phân cực 2.Trong phân tử C2H4 có : a.Hai liên kết σ, liên kết cho...
... đích thu đoạngen có kích thước 1600 bp [2] Mồi F1, R2 thiếtkế có vị trí cắt enzyme BamHI XhoI tương ứng Các kết PCR điện di kiểm tra gel agarose 1% sau: Từ kết điện di cho thấy thu đoạngen endo-1,4-betaglucanase ... thuật sinh học phân tử xác định đoạngen tạo dòngđoạngen mong muốn Đồng thời, tiến hành thử hoạt tính đoạngen tạo dòng phương pháp cấy chấm điểm, đường khử để bước đầu xác định hoạt tính chủng ... Vậy tạo dòng bước đầu biểu thành công đoạngenmãhóa enzyme cellulase chủng E.coliBL21(DE3) Kết luận Qua trình nghiên cứu tạo dòng thành công đoạngenmãhóa enyme cellulase từ Bacillus subtillis...
... Penicillium sp DTQ-HK1 l rm Ngun nitrogen: cỏc loi vi sinh vt khỏc cú nhu cu khỏc i vi ngun nitrogen Nhỡn chung, cỏc loi u cú kh nng s dng c ngun nitrogen vụ c v hu c nhng mc ng húa tựy thuc ... l cụng ngh di truyn, cụng ngh gen hay k thut gen) bao gm mt mng li cỏc k thut phõn t c dựng phõn tớch, bin i v tỏi t hp hu nh mi trỡnh t DNA 18 K thut to dũng gen ó cho nhiu phỏt minh quan ... trỳc, chc nng v s iu hũa hot ng ca gen Mc ớch ca vic to dũng v biu hin cỏc gen l nhm to cỏc sn phm ỳng nh c th vi s lng ln v cú giỏ tr thng mi S biu hin ca cỏc gen t bo vi khun nhiu gp tr ngi,...
... dẫn Invitrogen Phản ứng RT-PCR thực để khuếch đại riêng biệt hai đoạn 5’ 3’ cDNA cặp mồi NK1 F: 5’ CGAAATGGATAACGTCCT CCC 3’ NK1 R1: 5’ GCCAGCAGATGGCGA AGG 3’ (nhân đoạn 5’), cặp mồi NK1 F1: ... để sàng lọc plasmid tái tổ hợp mang cDNA-NK1 PCR (Hình 3) Kết 3.1 Phân lập hai đoạn 5’ 3’ cDNA mã cho thụ thể NK-1R Sử dụng hai cặp mồi NK1 F/NK1 R1; NK1 F1/NK1 R phản ứng PCR, phân lập hai đoạn ... sử dụng đểtách chiết ARN tổng số PureLink Kit (Invitrogen) Hai µg RNA tổng số dùng làm khuôn phản ứng phiên mã ngược tổng hợp cDNA sử dụng oligoT enzyme Reverse Transcriptase (Invitrogen) Phản...