...
2. Phân lập đƣợc 2 dòng vikhuẩn có màu khuẩn lạc rất đặc trƣng:
- Khuẩn lạc vikhuẩn màu vàng trứng, tròn, lồi, nhầy, bóng, mép khuẩn lạc tròn nhẵn.
- Khuẩn lạc vikhuẩn màu trắng đục, tròn, ... khuẩn lạc vikhuẩn trên môi trƣờng YDC
sau 24 giờ nuôi cấy (ở nhiệt độ phòng).
b
a. Khuẩn lạc vikhuẩn màu vàng
trứng, tròn, lồi, nhầy, bóng, mép
khuẩn lạc tròn nhẵn.
b. Khuẩn lạc vi ... do vikhuẩn gây ra
cao hơn hẳn (20,17%) so với tỉ lệ nhiễm bệnh do virus (9,5%) và nấm (11,6%).
2. Kết quả phân lập vikhuẩn thu đƣợc 2 dòng vikhuẩn có màu khuẩn lạc rất đặc trƣng:
- Khuẩn...
...
Phạm vi nhiệt độ phát triển là 5-35
o
C, thích hợp 20-30
o
C. Ở nhiệt độ 52
o
C
trong10 phút vikhuẩn chết. Vikhuẩnphát triển và hoạt động trong phạm vi pH 6,1-
8,8, thích hợp ở pH 6,6. Vikhuẩn ...
2.5.2. Tại Vi t Nam 12
2.6. Quytrình định danh Xanthomona sp. . 12
2.6.1. Quytrình định danh Xanthomonas sp. theo phƣơng pháp
nuôi cấy, thực hiện phản ứng sinh hóa 12
2.6.2 Quytrình định ...
DỰNG QUYTRÌNH ĐỊNH DANH VIKHUẨN GÂY BỆNH LOÉT TRÊN CÂY
BƢỞI BẰNG PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ”.
Giáo vi n hƣớng dẫn:
TS. LÊ ĐÌNH ĐÔN
Đề tài đƣợc thực hiện trên đối tƣợng là vi khuẩn...
...
Xây dựng được quytrình RT-PCR pháthiện PMWaV-1 qua vi c xác định
được các yếu tố chu trình nhiệt, nồng độ primer và số chu kỳ tối ưu cho
phản ứng.
¾
Sản phẩm RT-PCR được giải trình tự cho ... PMWaV-1. Như vậy, có thể kết luận quytrình RT-PCR được
xây dựng hoàn toàn đủ độ tin cậy trong vi c pháthiện PMWaV-1.
Hình 4.5: Sơ đồ phản ứng RT-PCR pháthiện PMWaV-1
17
xuất khẩu dứa nhiều ... DỰNG QUYTRÌNHPHÁTHIỆN VIRUS PMWaV-1 GÂY
BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ (Mealybug wilt) TRÊN CÂY DỨA
CAYENNE BẰNG PHƯƠNG PHÁP RT-PCR
Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Niên khóa: 2001 – 2005
Sinh vi n...
... pháthiện Lxx trong dịch chiết nước mía đã được phát
triển bởi Taylor và ctv. (2003).
Năm 2004, Monteiro-Vitorello và ctv. đã thành công trong quá trình nghiên
cứu trình tự genome của vikhuẩn ... ctv., 2003). Vi c pháthiệnvikhuẩn dưới kính hiểnvi đặc biệt
khó khăn đối với cây bị nhiễm Lxx ở giai đoạn đầu, sau khi tưới hoặc trong mùa
mưa; bởi vào các thời điểm này, nồng độ vikhuẩn Lxx ... đoán trực tiếp bằng kính hiểnvi
Kiểm tra trực tiếp dịch chiết nước mía bằng kính hiểnvi đối pha hoặc kính
hiển vi nền tối ở độ phóng đại X-1000 để pháthiệnvikhuẩn nhưng phương pháp
này...
... định vikhuẩn Lxx từ các
dòng vikhuẩn phân lập được
Dịch vikhuẩn nuôi cấy tăng sinh trong môi trường lỏng S8 (thí nghiệm 3) được
sử dụng trong các thử nghiệm sinh hóa pháthiệnvikhuẩn ... Monteiro-Vitorello và ctv. đã thành công trong quá trình nghiên
cứu trình tự genome của vikhuẩn Gram dương Lxx. Cũng trong năm này, vi n khoa
học nông nghiệp Tây Nam Trung Quốc đã pháthiện được vi ... các kĩ thuật huyết thanh để pháthiệnvi
khuẩn này đều dựa vào huyết thanh miễn dịch đa dòng chống lại tất cả các vi
khuẩn. Theo Davis và Dean (1984), giới hạn pháthiện là 10
4
tế bào/ml dịch...
... lập mẫu vi khuẩn.
- Nhân sinh khối các dòng vikhuẩn Erwinia carotovora subsp. carotovora.
- Nắm vững quytrình ly trích DNA vi khuẩn.
36
Điện di và đọc kết quả PCR
Sau khi thực hiện xong ... đoán, pháthiện bệnh một cách nhanh chóng,
chính xác và hiệu quả.
Các phƣơng pháp sinh học phân tử đã phát triển mạnh mẽ và mang lại nhiều thành
tựu to lớn cho vi c chẩn đoán, pháthiệnvikhuẩn ... tăng sinh dịch vikhuẩn thu
đƣợc đem ly tâm để thu sinh khối sau đó tiến hành ly trích.
3.2.6. Ly trích DNA tổng số của vikhuẩn
Phƣơng pháp ly trích DNA đƣợc thực hiện theo quytrình của Sambrook...
... cây có múi từ mức độ nhẹ đến nặng.
Để xác định rõ dòng vikhuẩn gây bệnh này chúng tôi thực hiện đề tài “Xây
dựng quytrình định danh vikhuẩn gây bệnh loét trên cây bƣởi bằng phƣơng
pháp sinh ... DANH VIKHUẨN GÂY BỆNH LOÉT TRÊN CÂY
BƢỞI BẰNG PHƢƠNG PHÁP SINH HỌC PHÂN TỬ”.
Giáo vi n hƣớng dẫn:
TS. LÊ ĐÌNH ĐÔN
Đề tài đƣợc thực hiện trên đối tƣợng là vikhuẩn Xanthomonas spp. Đây là vi ... PGA.
5. Nuôi cấy thuần khiết dòng vi khuẩn: từ đĩa petri phân lập vi khuẩn, chọn một
khuẩn lạc, dùng que cấy khử trùng trên ngọn lửa đèn cồn cấy truyền vi
khuẩn sang đĩa petri mới. Đặt đĩa...
... khuẩn lạc vikhuẩn trên môi trƣờng YDC
sau 24 giờ nuôi cấy (ở nhiệt độ phòng).
b
a. Khuẩn lạc vikhuẩn màu vàng
trứng, tròn, lồi, nhầy, bóng, mép
khuẩn lạc tròn nhẵn.
b. Khuẩn lạc vi ... do vikhuẩn gây ra
cao hơn hẳn (20,17%) so với tỉ lệ nhiễm bệnh do virus (9,5%) và nấm (11,6%).
2. Kết quả phân lập vikhuẩn thu đƣợc 2 dòng vikhuẩn có màu khuẩn lạc rất đặc trƣng:
- Khuẩn ... vikhuẩn có màu vàng trứng, tròn, lồi, nhầy, bóng, mép khuẩn lạc tròn nhẵn.
- Khuẩn lạc vikhuẩn có màu trắng đục, tròn, lồi, nhầy, bóng, mép khuẩn lạc tròn nhẵn.
3. Kết quả chủng bệnh vi khuẩn...
... cây có múi từ mức độ nhẹ đến nặng.
Để xác định rõ dòng vikhuẩn gây bệnh này chúng tôi thực hiện đề tài “Xây
dựng quytrình định danh vikhuẩn gây bệnh loét trên cây bƣởi bằng phƣơng
pháp sinh ... và Vi t Nam 11
2.5.1. Trên Thế Giới 11
2.5.2. Tại Vi t Nam 12
2.6. Quytrình định danh Xanthomona sp. . 12
2.6.1. Quytrình định danh Xanthomonas sp. theo phƣơng pháp
nuôi cấy, thực hiện ... các dòng vikhuẩn gây bệnh loét trên cây bƣởi 17
3.4.2. Chủng bệnh nhân tạo 18
3.4.3. Thực hiện sắc ký bản mỏng định danh vikhuẩn 18
3.4.4. Phƣơng pháp ly trích DNA tổng số của vikhuẩn 20...
...
XÂY DỰNG QUYTRÌNHPHÁTHIỆN ĐỘT BIẾN
rtA181V/T VÀ rtN236T KHÁNG ADEFOVIR CỦA
VIRUS VI M GAN B (Hepatitis B Virus) BẰNG
KỸ THUẬT REAL-TIME PCR
Chuyên ngành: Vi Sinh Vật Học ...
kiểu huyết thanh TTV), virus SENV (phát hiện năm 1999, đến nay đã có 9 kiểu gen), virus SANBAN,
virus nhỏ giống TTV, virus YONBAN, virus Sentinel… [6,7] Trong đó, chỉ có virus A và E là truyền ... của HBV ở những bệnh nhân mạn tính.
1.2 Đại cương về virus gây bệnh vi m gan siêu vi B
1.2.1 Lịch sử pháthiện bệnh vi m gan siêu vi B [6,7]
Lịch sử của các loại VGVR thực ra là lịch sử...
... trùng: là trường hợp vikhuẩn gây bệnh theo thực phẩm vào cơ thể
bằng đường tiêu hóa và tác động tới cơ thể do sự hiện diện của bản thân vikhuẩn hoặc do độc
tố của vikhuẩn .
- Độc tố [7, ... có chứa mật bò chọn lọc vikhuẩn Gram âm, ức chế sự
phát triển của vikhuẩn Gram dương.
- Phân lập: bước này nhằm tách biệt và nhận dạng E. coli từ tập hợp các quần thể vi sinh
vật khác nhau ... đặc điểm của ngoại độc tố và nội độc tố của vikhuẩn [7, 26]
Ngoại độc tố (exotoxin) Nội độc tố (endotoxin)
- Do vikhuẩn còn sống tiết ra
- Có ở vikhuẩn Gram dương và Gram
âm
- Bản chất là...
... của các khuẩn
lạc.
Kết luận
•
Hiện nay phần thực hành có liên quan đến
đối tượng vikhuẩn khó thực hiện được vì
thiếu các chủng vikhuẩn thuần khiết. Vì vậy
đề xuất cách phân lập vikhuẩn ... chế sinh
trưởng của các vi sinh vật đi kèm.
Thu nhận chủng vi khuẩn
thuần khiết
•
Cấy vikhuẩn từ khuẩn lạc mọc
tách rời vào ống môi trường thạch
nghiêng.
•
Nuôi vikhuẩn ở nhiệt độ và thời ... pháp phân lập vikhuẩn
thuần khiết
Quá trình phân lập vikhuẩn ở dạng
thuần khiết gồm các bước cơ bản
sau:
•
Tạo ra các khuẩn lạc riêng rẽ từ quần
thể ban đầu.
•
Phân lập vikhuẩn thuần khiết.
•
Kiểm...
... 1):S10-S13.
32. International Committee on Taxonomy of Viruses Index of Viruses (2009),
Orthomyxoviridae, In: ICTVdB - The Universal Virus Database, version 7.
B#chen-Osmond, C (Ed), Columbia ... tuberculosis,
Chlamydia trachomatis, Neisseria gorrnorhea, Hepatitis B virus, Hepatitis C virus,
Human immunodeficiency virus, Human Papillomavirus), utiplex RT-PCR
. ... growth of avian influenza viruses in
Virus Res, 79(1-2): 177-185.
Arch. Virol.,...
... PCR pháthiệnvi
khuẩn Aeromonas hydrophila phân lập từ cá tra (Pangasianodon
hypophthalmus) bị bệnh xuất huyết” được thực hiện nhằm góp phần vào vi c
chuẩn hóa phương pháp pháthiệnvikhuẩn ...
Hình 4.4 Hình nhuộm gram vikhuẩn A. hydrophila
4.3 Pháthiệnvikhuẩn A. hydrophila bằng phương pháp PCR
PCR là công cụ giúp pháthiện nhanh và chính xác mầm bệnh vi sinh vật trên
tôm, cá. ... thực hiện phản ứng với các hàm lượng DNA khác
nhau của vikhuẩn để xác định hàm lượng thấp nhất có thể pháthiện A.
hydrophila. Thí nghiệm được thực hiện với DNA được chiết tách từ vi khuẩn...