... khẳng định kết quả của những kỹthuật phân biệt giới tính khác.2.3.4 Sử dụng đoạn dò DNA chuyên biệt NST Y để phân biệt giới tính phôiNguyên tắc cơ bản của kỹthuật này là việc lai DNA tổng ... pháp xác định giới tính phù hợp vẫn còn tiếp tục.2.3.5 Phân biệt giới tính bằng kỹthuật polymerase chain reaction (PCR) Vào năm 1985, Karl Mullis và ctv đã phát minh ra phương pháp tổng hợp DNA ... sát thông qua những kỹthuật phân tách và điện di DNA (Hồ Huỳnh Thuỳ Dương , 2002).Theo Schorder và ctv (1990), việc sử dụng đoạn mồi chuyên biệt NST Y trong phản ứng PCR giúp khuếch đại đoạn...
... năm gần đây, kỹthuật sinh học phân tử đã phát triển một cách mạnh mẽ và chứng minh được vai trò ưu việt, trong đó kỹthuậtPCR ngày càng được ứng dụng rộng rãi hơn. Đây là một kỹthuật có độ ... phòng thí nghiệm; kỹ năng và kinh nghiệm của người thực hiện việc phân tích. 2.3. Phƣơng pháp PCR Kỹ thuật nhân DNA đặc hiệu, còn gọi là phản ứng chuỗi trùng hợp hay kỹthuật PCR (polymerase ... 3.5.5. Kỹthuật RT -PCR trên RNA của virus Để thực hiện phản ứng phiên mã ngược và khuếch đại đoạn cDNA sau phiên mã ngược với độ nhạy và độ đặc hiệu cao, chúng tôi sử dụng kỹthuật RT -PCR một...
... O157:H7 122.4. KỹthuậtPCR 142.4.1. Khái niệm 142.4.2. Nguyên tắc 142.4.3. Các thành phần cần thiết của phản ứng PCR 152.4.4. Phân tích kết quả PCR 162.4.5 Multiplex – PCR 162.4.6. Ứng ... được phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy của bò, heo, bê và 9 mẫu bề mặt thịt bò bằng kỹthuật multiplex – PCR. Quan sát và ghi nhận trên môi trường MAC chỉ có một loại khuẩn lạc hồng, trên môi ... sát 32xĐÀM THỊ MINH THƠ, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, tháng 9/2005. “ỨNG DỤNG KĨ THUẬT MULTIPLEX – PCR ĐỂ PHÁT HIỆN MỘT SỐ GEN ĐỘC LỰC CỦA NHÓM E. COLI SẢN SINH ĐỘC TỐ SHIGA (STEC) PHÂN...
... lập.Multiplex – PCR là một cải tiến của kỹthuậtPCR mà trong đó có thể nhân lên đồng thời nhiều đoạn DNA mong muốn bằng cách sử dụng nhiều cặp primer trong một phản ứng. Multiplex – PCR đầu tiên ... việc phát hiện các gen gây độc của E. coli bằng kỹthuậtPCR là bước cần thiết góp phần đánh giá nguy cơ gây bệnh trên vật nuôi và con người. PCR là phương pháp nhanh, đặc hiệu, cho kết quả ... người đã chứng minh được điều này. Khía cạnh này của PCR đã được chứng minh là rất quan trọng trong các phân tích pháp lý, cho phép kỹthuật genetic fingeprinting được sử dụng chỉ với một sợi...
... pháp PCR sẽ giúp chúng ta chẩn đoán chính xác, hiệu quả trong thời gian ngắn hơn so với phương pháp truyền thống (nuôi cấy, phân lập, …). Vì vậy, đề tài tiến hành sử dụng kỹthuật multiplex – PCR ... thời gian lên 2 lần, và không phát triển khi ≥8,5% NaCl (Jay, 2000).2.4. Kỹthuật PCR 2.4.1. Khái niệmPhương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) do Kary Mullis và cộng sự phát minh năm 1985 ... từ phân, thịt trên một số loại môi trường chọn lọc (MAC, SMAC, CT - SMAC).- Ứng dụng kỹthuật multiplex – PCR phát hiện một số gen độc lực của E. coli phân lập được.2Phần 1. MỞ ĐẦU1.1. Đặt...
... đoạn PCR . RT -PCR (Reverse Transcriptase- Polymerase Chain Reaction) Do Taq polymerase không hoạt động đƣợc trên RNA nên ngƣời ta sử dụng kĩ thuật phối hợp là RT -PCR (Reverse transcriptase- PCR) . ... sản phẩm PCR ban đầu bằng cách sử dụng sản phảm PCR đầu tiên này làm khuôn mẫu. Phƣơng pháp nested -PCR cũng có thể thực hiện với một cặp mồi đầu tiên và một mồi đơn cho phản ứng nested -PCR sau ... nguồn cDNA từ mRNA, cDNA này sẽ đƣợc tiếp tục khuếch đại thông qua phản ứng PCR nhƣ trình bày ở phần trên. Kĩ thuật RT -PCR cho phép nghiên cứu các mRNA tồn tại với hàm lƣợng rất thấp không thể...
... triển kỹthuật multiplex. Nhƣ vậy, ở nhiệt độ 550C theo qui trình Single - Step RT - PCR là tối ƣu nhất cho hai mồi MrNV và XSV. 4.3. KẾT QUẢ ỨNG DỤNG QUI TRÌNH SINGLE - STEP RT - PCR KHẢO ... xảy ra trên DNA thật tinh sạch, nhiều kỹthuật chẩn đoán bằng PCR vẫn đạt kết quả tốt với DNA thu nhận trực tiếp từ dịch chiết tế bào. Ngoài ra phƣơng pháp PCR còn có một số ƣu điểm là có thể ... We experimented successful process of Single-Step RT -PCR of Widada and Sahul Hameed. The suitable condition for a Single-Step RT -PCR RT -PCR reaction is 1,5 mM Mg2+, 20 mol primer and 550C...
... năm gần đây, kỹthuật sinh học phân tử đã phát triển một cách mạnh mẽ và chứng minh được vai trò ưu việt, trong đó kỹthuậtPCR ngày càng được ứng dụng rộng rãi hơn. Đây là một kỹthuật có độ ... được kiểm tra để phát hiện tình trạng nhiễm virus PRRS của đàn. 2.2.4. KỹthuậtPCR để phát hiện PRRSV Kỹ thuậtPCR được phát triển để phát hiện RNA của virus PRRS trong các mẫu bệnh phẩm. ... của PCR Chu kỳ I của PCR Chu kỳ I của PCR AA(A)n AA(A)n AA(A)n Primer xuôi Primer xuôi Primer xuôi AA(A)n AA(A)n AA(A)n Chu kỳ II của PCR Chu kỳ II của PCR Chu kỳ II của PCR Primer...
... 82.2. KỹthuậtPCR 112.2.1. Nguyên tắc 112.2.2. Các giai đoạn của phản ứng PCR 122.2.3. Các thành phần của phản ứng PCR 142.2.4. Phân tích kết quả PCR 152.2.5. Những ứng dụng của PCR 152.2.5.1. ... 152.2.5. Những ứng dụng của PCR 152.2.5.1. PCR được sử dụng để nghiên cứu lượng DNA nhỏ 152.2.5.2. PCR được sử dụng trong chẩn đoán lâm sàng 162.2.5.3. PCR được dùng để khuếch đại RNA 16viTÓM ... 16viTÓM TẮTĐOÀN THỊ TUYẾT LÊ, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, Tháng 8/2005. “ỨNG DỤNG KỸTHUẬT MULTIPLEX – PCR ĐỂ PHÁT HIỆN CÁC GEN ĐỘC LỰC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI PHÂN LẬP TỪ PHÂN BÒ,...
... biến tính và bắt cặp. 2.4.2 RT -PCR Kỹ thuật RT -PCR (Reverse transcriptase- PCR) thì tƣơng tự nhƣ kỹthuật PCR, nó cho phép khuếch đại một lƣợng nhỏ RNA. Kỹthuật này thƣờng đƣợc sử dụng để ... mild mosaic virus đều nhiễm SCBV (Lockhart và cộng sự, 1992). 27 2.4 KỹthuậtPCR và RT -PCR 2.4.1 PCR Kĩ thuậtPCR PCR (Polymerase Chain Reaction- phản ứng tổng hợp dây chuyền nhờ polymerase) ... Những bó mạch bình thƣờng sẽ không phát huỳnh quang. 3.6 Phƣơng pháp phát hiện bằng kỹthuật RT -PCR Kỹ thuật RT -PCR đƣợc thực hiện là hai bƣớc (two steps): gồm giai đoạn tổng hợp cDNA và giai...
... xảy ra trên DNA thật tinh sạch, nhiều kỹthuật chẩn đoán bằng PCR vẫn đạt kết quả tốt với DNA thu nhận trực tiếp từ dịch chiết tế bào. Ngoài ra phƣơng pháp PCR còn có một số ƣu điểm là có thể ... nhau. 2.3.6. Phƣơng pháp RT - PCR (Reverse Transcription Polymerase Reaction) Phƣơng pháp RT - PCR là sự kết hợp giữa phƣơng pháp phiên mã ngƣợc và phƣơng pháp PCR. Phƣơng pháp này có thể phát ... lƣợng rất thấp, mà không thể phát hiện bằng phƣơng pháp nhƣ Northern blot. Ngoài ra, RT -PCR kết hợp với kỹthuật RFLP có thể dễ dàng phát hiện ra các đột biến và sự đa hình trong đoạn khuếch đại...
... tái sinh từ ĐST được kiểm tra PMWaV-1 bằng kỹthuật RT -PCR 24 Bảng 3.2 Thành phần mix phản ứng RT -PCR 27 Bảng 3.3 Chu trình nhiệt của phản ứng RT -PCR 28 Bảng 4.1 Kết quả kiểm tra PMWaV-1 trên ... THANH ỨNG DỤNG KỸTHUẬT RT -PCR PHÁT HIỆN VIRUS PMWaV-1 (Pineapple mealybug wilt associated virus-1) GÂY BỆNH HÉO ĐỎ ĐẦU LÁ TRÊN CÂY DỨA CAYENNE LUẬN VĂN KỸ SƢ CHUYÊN NGÀNH ... ii TÓM TẮT BIỆN THỊ LAN THANH – Lớp DH02SH, Đại học Nông Lâm Tp. HCM. Đề tài “Ứng dụng kỹthuật RT -PCR phát hiện virus PMWaV-1 gây bệnh héo đỏ đầu lá trên cây dứa Cayenne” dưới sự hướng dẫn...