... tượng khác nhau: Vi sinh vật, thựcvật
và động vật do đặc điểm riêng biệt của từng loại tế bào.
1. Tếbào động vật và cơ sở của việc nuôicấytếbào động vật
Tế bào động vật trong cơ thể trưởng ... nay kỹthuậtnuôicấytếbào đã được thực hiện trên rất nhiều
đối tượng khác nhau như vi sinh vật, thực vật, động vật thậm chí cả con người.
Mỗi đối tượng khác nhau thì kỹthuậtnuôicấytếbào ... tếbào cho (tế bào soma) và đem cấy
chuyển vào tếbào trứng chưa thụ tinh đã bị lấy hoặc hủy nhân để tạo nên một tế
bào 2n giống như hợp tử chứa nhân của tếbào soma và tếbào chất của tế bào...
... (BA), Kinetin.
•
Kích thích sự phân chia tế bào.
•
Tạo chồi.
•
Được tổng hợp ở rễ.
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Đưa mẫu nuôicấy lên môi trường nuôicấy thích hợp
(mỗi loài, giống cây trồng ... là môi
trường nuôicấy chồi phổ biến nhất.
•
Môi trường Gamborgs B5 được sử dụng phổ biến
cho canh trường huyền phù tếbào (không chứa
NH
4
).
Môi trường
•
Khi cắt mẫu nuôicấy
ra khỏi cây ... kính.
Lựa chọn mẫu nuôi cấy
Các đặc tính mong
muốn:
•
Dễ tiệt trùng
•
Non
•
Phản ứng tốt với môi
trường nuôi cấy
•
Ngọn (mô phân sinh
đỉnh)
•
Chồi nách
•
Hạt
•
Lá
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Tiệt...
... trong chúng được sử dụng làm thuốc nhuộm, chất mùi thực phẩm và dược
phẩm (Lee 2001).
2. Nuôicấytếbàothựcvật
Kỹ thuậtnuôicấytếbàothựcvật tiêu biểu cho tiềm năng cải thiện các hợp chất ... trình sản xuất các
chất trao đổi thứ cấp từ các tếbàothựcvậtnuôicấy in vitro. Các kết quả này cũng đã cho thấy
các hệ thống nuôicấytếbàothựcvật có tiềm năng rất lớn cho việc khai thác ...
nghiên cứu này. Ưu thế về mặt nguyên lý của kỹthuậtnuôicấytếbàothựcvật là có thể cung
4
hợp chất thứ cấp trong quá trình nuôicấytế bào, có thể giúp rút ngắn thời gian và đạt hiệu...
... effects (bệnh
tích tế bào- CPE).
D PRV có thể được nuôicấy trên một phổ rộng các loại tếbào như tế
bào phổi thỏ (rabbit lung-ZP), tếbào thận thỏ (rabbit kidney-
RK13), tếbào thận chuột Hamster ... kidney-BHK21), tế
bào thận heo (porcine kidney-PK15), tếbào thận khỉ xanh (green
monkey kidney-GMK), tếbào phổi chồn Vizon (mink lung-MK),
tế bào thận chồn furo (ferret kidney-FK), tếbào phôi bào ... lọc 0.2 um và đưa vào môi trường tế bào.
• Mẫu huyết thanh cho qua lọc 0.2 um và đưa vào môi trường tế
bào.
b) Chuẩn b
ị môi trường tếbào
D Cả hai loại tếbào PK-15 và BT được phát triển...
... cho thấy vật chất trong tếbào chất dương tính mạnh trong
tế bào chất của mô bào và những tếbàothựcbào hoạt hóa.
Không có sự khác biệt nào về dạng tếbào nhuộm hoặc sự nhuộm nội bào giữa ... cấy được cấy chuyển
bằng cách tách tếbào PK15 sử dụng trypsin versene, tái hòa tan những tếbào tách
này trong 20 ml MEM-G, đưa chúng vào bình nuôicấy 75 ml sạch ở nồng độ 4 x
10
5
tế bào/ ... trong tếbào chất và nhân tếbào của những nang trong hạch lympho
phổi (hình 2)
13
thể vùi riêng biệt hoặc sự tích đọng tếbào chất đến sự hòa nhập chất nhuộm ở tế
bào chất...
... trong chúng được sử dụng làm thuốc nhuộm, chất mùi thực phẩm và dược
phẩm (Lee 2001).
2. Nuôicấytếbàothựcvật
Kỹ thuậtnuôicấytếbàothựcvật tiêu biểu cho tiềm năng cải thiện các hợp chất ... trình nuôi cấy. Tuy
nhiên, các tếbào không phân hóa trong nuôicấy huyền phù thường tạo thành một khối vài
trăm tế bào, các tếbào ở giữa khối có sự tiếp xúc với môi trường khác với các tếbào ... tối ưu hóa hiệu suất nuôi cấy.
Chọn lọc các dòng tếbào cho năng suất cao. Các tếbàothựcvật trong nuôicấy là
một tập hợp các đặc điểm sinh lý độc lập. Chọn lọc tếbào dựa vào khả năng tổng...
... bằng kỹthuậtnuôicấytếbào
a. Giới thiệu về kỹthuậtnuôicấytếbào
Nuôi cấytếbào là là đơn vị nuôicấy nhỏ nhất, là kỹthuật duy trì và phát triển các tếbào
ngoài cơ thể sống, các tếbào ...
3.4.1. Chẩn đoán bằng kỹthuậtnuôicấytếbào 15
• Giới thiệu về kỹthuậtnuôicấytếbào 15
• Chẩn đoán virus lở mồm long móng bằng kỹthuậtnuôicấytếbào 19
3.4.2. Các kỹthuật chẩn đoán khác ... chia, thực hiện
đầy đủ các chức năng biến dưỡng và các chức năng chuyên biệt của tế bào. Nuôicấytếbào
Kỹ thuậtnuôicấytếbào được tiến hành lần đầu vào năm 1907 bởi Harrison với những tế
bào...
... của tế bào.
2.2 Các loại tếbàonuôi cấy: Tếbào biểu mô, Nguyên sợi bào, Tếbào cơ,
Tếbào thần kinh, Lympho bào.
2.3 Một số máy móc thiết bị cần thiết
Tủ cấy vô trùng chuyên nuôicấytế bào, ... Phương pháp nuôicấytế bào.
2.1 Khái niệm
Nuôicấytếbào là kỷthuật duy trì và phát triển các tếbào ở ngoài cơ thể sống,
các tếbào trong điều kiện phòng thí nghiệm vẫn tự phân chia, thực hiện ... Nguyên nhân gây nhiễm trùng trong nuôicấytếbào 18
2.9. Ứng dụng của kỹthuậtnuôicấytếbào 18
3. Chẩn đoán bệnh Newcastle bằng phương pháp nuôicấytếbào 19
1. Thu thập và gởi mẫu đi...
... hợp bào hệ hô hấp. Trong tất cả các nghiên cứu, kỹthuật SVC biểu hiện gia
tăng tốc độ phân lập virus mà không làm giảm độ nhạy. Kỹthuật SVC làm giảm
thời gian so với kỹthuậtnuôicấytếbào ... Nadu State.
¾ Dòng tế bào:
Tế bào thận lợn (PS-Porcine Kidney) lấy từ trung tâm quốc tế về khoa học
tế bào được sử dụng trong nghiên cứu. Tếbào phát triển trong bình nuôicấy mô
plastic và ... pháp nuôicấytếbào thông thường (như đã trình bày ở trên).
Tuy nhiên, ở Việt Nam phương pháp chuẩn đoán Shell vial culture này
chưa thật sự phổ biến bằng những kỹthuật khác như kỹ thuật...
... NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
24
... tế bào
Nạp buồng đếm hồng cầu
Đếm tế bào
Tính tổng số lượng tếbào
Nhuộm tếbào để xác định sức sống của tếbào
Tính số lượng tếbào sống
34
CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN
PHÙ TẾ ...
lượng tế bào.
29
Sử dụng buồng đếm hồng cầu và thuốc nhuộm trypan blue
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5....
... NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
20
CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
Cấy chuyển tếbào lớp đơn là kỹ
thuật ... DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
28
CẤY CHUYỂN ... LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
4
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ...
... (duy trì và/hay tăng sinh)
các tế bào, mô và các cơ quan
• Các kiểu nuôicấy mô
– Nuôicấy cơ quan
– Nuôicấy mô
– Nuôicấytế bào
Experimental Methods 2006 5
Nuôi cấy mô
• Các mảnh của mô được ... trong tếbào (like viral DNA)
Experimental Methods 2006 6
Nuôi cấytế bào
• Mô được tách thành tếbào đơn, hầu hết
là bằng enzyme, thành huyền phù tế bào
được nuôicấy in vitro như monolayer hay
nuôi ... Thường chứa kiểu êế bào đơn
– Có thể tăng sinh liên tục trong nhiều thế hệ
– Có hai kiểu dòng tếbào khi nuôi cấy:
• Dòng tế bào
• Dòng tếbào liên tục
Các kiểu nuôicấytế bào
Experimental Methods...