có hoạt tính xúc tác tổng hợp các đoạn homonucleotide ví dụ gggg hoặc cccc ở đầu 3 oh của chuỗi dna để hình thành đầu dính cho dna lạ và vector chuyển gen hình 2 5
... terminal transferase cóhoạttínhxúctáctổnghợpđoạnhomonucleotide (ví dụ: GGGG CCCC) đầu ’ -OH chuỗiDNAđểhìnhthànhđầudínhchoDNAlạvectorchuyểngen (hình 2. 5) 14 Hình2. 4: Phương pháp dùng ... (Ví dụ: EcoRI) chuyểnthành dạng thẳng có hai đầudính AATT ngược lại Phân tử DNAlạ cắt enzyme EcoRI để tạo thànhđoạnDNAcó hai đầudính Trộn lẫn DNAvectorDNAlạ cắt EcoRI lại với nhau, đầu ... nhau, đầudínhDNAlạvector bổ sung bắt cặp với Enzyme ligase nối DNAlạDNAvector lại với cầu phosphodiester tạo nên phân tử DNA tái tổ hợp (hình 2 .3) 12 Hình2 .3: Gắn DNAlạ vào vector phương...
... với đoạnDNA tạo cách xử lý enzyme giới hạn cắt thẳng HindII chẳnghạn, việc nối đoạnDNAcóđầu tạo thực theo hai cách sau: Nối trực tiếp DNA ligase phage T4 tổnghợp thêm đầudính vào đầu3' ... phân tử DNA khác cắt enzyme giới hạn EcoRI tạo đầudính bổ sung nhau, cách khâu nối thành phân tử DNA tái tổ hợp in vitro nhờ xử lý với DNA ligase Phương pháp nối trực tiếp tổnghợpđầu bổ sung ... nucleotide bổ sung cách sử dụng enzyme end-transferase, sau đoạnDNA nối với DNA ligase vi khuẩn Cơ sở phương pháp kết hợpDNA thực lần DNA virus SV40 với DNA phage l L.Lobban D.Kaiser (19 72) , D.Jackson...
... a có cách chọn b có cách chọn Trong trường hợpcó 1 .5. 4 = 20 số - Nếu c= c = a a c nên a có cách chọn b có cách chọn Trong trường hợpcó2. 4.4 = 32 số Theo quy tắc cộng ta có 20 + 32 = 52 ... 16 35 ,55 24 53 , 33 8,90 2, 22 15 Lớp 31 ,91 18 38 ,29 11 23 , 40 6,40 Thực nghiệm Đối chứng 3.5 Phân tích đánh giá kết thực nghiệm Theo kết kiểm tra trước sau thực nghiệm hai lớp 11B3 11 B2, ta có ... Trung bình Số % lượng Số lượng % Số lượng % 15 Lớp 33 ,33 22 48,89 14 29 ,79 20 42, 55 10 Yếu Số lượng % 15, 56 2, 22 21 ,28 6 ,38 Thực nghiệm Đối chứng Bảng 3.3 : Kết kiểm tra đề sau thực nghiệm Kết Giỏi...
... trắng có cách, chọn cầu đen có cách có 8 +3= 11 cách để lấy cầu b) Có cách chọn cầu trắng cách chọn cầu trắng lại có cách chọn cầu đen có 8 .3= 24 cách chon hai cầu khác màu Lời giải tập (phiếu 1) Có ... a1a2 a3 a4 a5 a6 chọn a1 có cách, chọn a2 có cách, , chọn a6 có cách Vậy theo quy tắc nhân có 66 = 46 656 số b) Gọi số phải tìm là: n a1a2 a3 a4 a5 a6 a1 a2 a6 chọn a1 có cách, chọn a2 có ... + n2 + n3 + … + nk cách + Quy tắc nhân tổng quát: Giả sử công việc bao gồm k công đoạn A1, A2, A3, ,Ak Công đoạn A1 có n1 cách thực hiện; công đoạn A2 có n2 cách thực hiện và công đoạn Ak có...
... có cách chọn b có cách chọn Trong trường hợpcó 1 .5. 4 = 20 số - Nếu c= c = a a c nên a có cách chọn b có cách chọn Trong trường hợpcó2. 4.4 = 32 số 30 Theo quy tắc cộng ta có 20 + 32 = 52 ... 4 .5 = 20 số + TH2: a lẻ, b chẵn nên a b chữ số có cách chọn ( a1 ,3, 5, 7,9 , b0 ,2, 4,6,8 ) nên trường hợpcó5. 5= 25 số Theo quy tắc cộng có tất 20 + 25 = 45 số Phát 5: Có số tự nhiên có m ... hợpcó A3 = 24 số - Nếu a a nên a có cách chọn, số xếp vào vị trí b, c d Mỗi cách chọn số lại xếp vào vị trí lại chỉnh hợp chập phần tử Trong trường hợpcó3.3 A2 = 54 số Theo quy tắc cộng có...
... i có ki u huy t HRV 92, HRV 35, HRV87 HRV-C có tương quan g n v i ch ng NAT001_CA (M ), C 0 25 Hongkong, NAT 0 45_ CA (M ); N4, N10 (Thư ng H i), HRVC - 35 HÌNH TRANG 52 Y HỌC THỰC HÀNH (864) - SỐ 3/ 20 13 ... Fraser- Liggett CM, and Liggett SB, (20 09), “Sequencing and analyses of all known human Rhinovirus genomes reveal structure and evolution”, Science, 32 4 (59 23 ) , 55 -59 53 ... Tác gi Huang T cs, 20 09, tác gi Heidi E Smut cs, 20 11, công b t l HRV-C chi m ưu th tr em b viêm đư ng hô h p c p Thư ng H i (Trung Qu c) Châu Phi [5 ,3] C hai loài A, C đ u có liên quan đ n tính...
... chung RE có khả kết hợpthành thông qua đầudính EcoRI 5 G AATT C 33 C TTAA G 55 G AATT 33 C TTAA G 52.5 .2 Các enzym sửa chữa DNA2.5 .2. 1 DNA polymerase I (DNA pol I) Bản chuỗi axit ... ( 25 mM) 2.5 l 5 primer (20 μM) 1 . 25 μl 3 primer (20 μM) 1 . 25 μl DNA plasmid (10ng/μl) 2 l Thực biến tính 950 C phút, thêm vào 1U Taq polymerase Quy trình: 950 C/1’, 55 0C/1’, 720 C/1’, 30 chu kì , 720 /7’ ... HaeIII 5 GG CC 33 GG CC 35 GG CC 33 CC GG 5 Cắt đầudính (cohesive ends): Ở số RE, vị trí cắt lệch hai mạch Trong trƣờng hợp này, đầudính bổ sung bắt cặp trở lại, hai phân tử 18 DNA có...
... S5 có khả tổnghợp Protease mạnh Cácvi khuẩn thường tổnghợp Protease hoạt động thích hợp vùng pH trung tính kiềm yếu. [2] Các Protease trung tínhvi khuẩn hoạt động khoảng pH hẹp (pH 58 ) có ... phân tử Protease gồm có hai hạt, chúng có khe hở vào khoảng 20 0A Khe hở phần xúctác E, gốc Asp - 35 Asp2 15 xếp đối diện khe - Đối với Protease không chứa cysteine, TTHĐ chúng cótính mềm dẻo cấu trúc ... gen công bố genbank - Xác định trình tự gen bảo thủ - Từ trình tự genebank thiết kế mồi đểtổnghợpđoạn ADN mã hóa cho protease Hai đầu5' mồi bổ sung vị trí enzyme cắt giới hạn để đưa vào vector...
... 35 DNA khuôn mẫu 22 = 23 = 24 = 16 23 6 = 68 tỷ Hình2.2 Sơ đ phản ứng chuỗi polymerase (PCR) - Kéo dài phân tử (extension) 70-72oC Đây khoảng nhiệt độ tối thích cho Taq polymerase tiến hành tổng ... transcriptase 53Tổnghợp sợi cDNA thứ khuôn mẫu mRNA AAAAAA 3 mRNA TTTTTT AAAAAA 3 mRNA TTTTTT 5 sợi cDNA thứ Biến tính nhiệt xử lý RNase H để phá hủy sợi mRNA Đầu3 cDNA tạo thành vòng cặp tóc DNA ... đối xứng để tạo phân tử đầu (Hình 2 .3, A1 B1) Nhập môn Công nghệ sinh học 37 - Cắt vị trí nằm đối xứng quanh đường thẳng đối xứng để tạo phân tử đầu so le (đầu dính) (Hình 2 .3, A2 B2) Vì enzyme...
... plasmid cóđoạn khởi đầu chép p15A giúp tương thích với hầu hết vector biểu hiện, vector thường cóđoạn khởi đầu mã ColE1 TRÁNH CÁCTÁC DỤNG GÂY ĐỘC CỦA VIỆC BIỂU HIỆN NHIỀU PROTEIN TÁI TỔ HỢP Mặc ... Do vector biểu virus, trình xây dựng thực qua hai giai đoạnỞ giai đoạn thứ nhất, vectorchuyển sử dụng để mang cDNA gene cần chuyểnVectorchuyển (transfer vector) plasmid E coli mang đoạnDNA ... chuyên dụng cho việc biểu gene (expression vector) thường sử dụng để tăng cường biểu gene Chúng có promoter mạnh điều khiển biểu gene chuyển vào Cácvector biểu mang gene kháng kháng sinh cho phép...
... a=v&pid=gmail&attid=0.1&thid= 137 e381afba52e 55& mt=application/pdf&url=https://m ail.google.com/mail/u/0/?ui%3D2 %26 ik%3Db 220 d03e4d %26 view%3Datt %26 th %3D 137 e381afba52e 55 %26 attid%3D0.1 %26 disp%3Dsafe %26 realattid %3Df_h3dqibz90 %26 zw&sig=AHIEtbR1S9-HcTw0gdJms8Wb_Qk7JJnjFw&pli=1 ... Thị Thoa Thúy Thủy Tạ Thị Thu Trang MSSV 1 029 8741 1 020 0 721 1 024 658 1 1 028 23 4 1 1 026 1 151 1 02 638 41 1 0 25 23 5 1 Tp HCM, tháng năm 20 12 MỤC LỤC I 4.1 4 .2 II III ĐẶT VẤN ĐỀ Nguyên nhân gây ... thống E coli Bước 2: Sử dụng enzyme cắt đặc hiệu cắt lấy đoạngen Bước 3: Cắt gen thể truyền phage T4 Bước 4: Nối gen kháng nguyên vào gen thể truyền Bước 5: Chuyểngen tái tổ hợp vào thể truyền...
... cs (20 08) chứng tỏ đoạnDNAchuyển nạp không tìm thấy vi khuẩn cỏ tìm thấy dịch cỏ, các mô tế bào và máu cừu Phipps và cs (20 03) cho bò cho sữa ăn đậu tương biến đổi genđể xen DNA ... adenine và guanine đoạnDNA không bảo vệ bị biến tính Người ta tính toán rằng, một bò ăn 24 kg thức ăn khô từ thực vật cho tương đương 54 µg DNA và DNA dễ dàng bị phân hủy DNase Các enzyme ... DNA ngô chuyểngen và cả ngô truyên thống III Kết luận 12 Việc phát tán ngang DNA tái tổ hợp thừ thức ăn vào thể động vật không phát Xác suất chuyển và tổ hợp một cách có chức DNA...
... choDNA Taq pol - Thao tác tủ cấy vô trùng (hoặc không) SM SM Hình3. 7 Điện di sản phẩm PCR SM: Chuẩn kích thước DNA 1, 2, 3, 5: Các khác 55 , genomic dài (20 -24 mer) DNA không h t 50 % GC 3 ... thiết kế sở trình tự RAPD markers 56 Magnesium 2+ pol 2+ - 2+ 2+ hiệu 2+ (Mg 2+ pol ribonucleotide triphosphate (dNTPs) -20 o 10 20 -20 0 Enzyme Taq pol pol 1 -2, 5 unit cho 100 0 ,5 unit / 25 pol pol ... 57 0,1 20 -mer) 25 : gia DNA Thông thường, nồng độ DNA khuôn mẫu sử dụng khoảng từ 10-100 ng / 25 L dung dịch phản ứng - 0 ,5 M ( 12, 5 pmol / 25 -dimers 10 Khởi động nóng PCR (“host-start” PCR) DNA...
... sử dụng tách DNA loại gel vào (B 2 .3) , kích thước điện tích DNA tách DNA polyac Acrylamide (% w/v) ch (nucleotide) 3, 5 1.000 -2. 000 5, 0 80 -50 0 8,0 60-400 12, 0 40 -20 0 15, 0 25 - 150 20 ,0 6-100 20 ... cho phép phân tách đoạnDNA lớn ng agarose gel (%) gel 0 ,3 60 -5 0,6 20 -1 0,7 10-0,8 0,9 7-0 ,5 1 ,2 6-0,4 1 ,5 4-0 ,2 2,0 3- 0,1 Hình2 .3 minh họa dịch chuyển tập hợpđoạnDNA hai mẫu ba nồng độ khác ... định Kết cho thấy, đoạn lớn phân tách tốt gel 1%, đoạn nhỏ thích hợp với gel 2% Công nghệ DNA tái tổ hợp 27 A B C 2Hình2 .3 Điện di mẫu DNA giống nồng độ agarose khác A: 1%, B: 1 ,5% C: 2% - -...
... vớ -gal có màu trắng đoạnDNA ngoại lai xen vào gen lacZ làm genhoạttính Trong đ lacZ không bị hoạttính (Hình 4 .5 4.6) H N Br CH 2OH O Cl HO X-gal OHOH Galactose β-galactosidase Cl OH H N Br ... thích hợp chủ yếu dựa E coli nhận đoạnDNA tương đối nhỏ Cácvectorvi khuẩn có khả lớn nhận đoạnDNA phạm vi kích thước từ 35 - 45 kb Tuy nhiên, YAC vector tạo dòng đoạnDNAcó kích thước từ 100 -2. 000 ... tử DNA phage A: Tự tái DNA từ dạng vòng làm cho trở thành dạng dây thẳng, hìnhthànhđoạn chồng lấp lên nhau, với độ dài khoảng 50 kb B: Mỗi đầu chứa đầy 50 kb đơn vị DNA, trước đuôi tổng hợp...
... tổ hợp ứng dụng Muốn tổnghợp hóa học đoạnDNA hay gen cần phải biết trình tự đoạnDNA hay gen Sử dụng máy tổnghợpDNA tự động (DNA synthesizer) Phương pháp tổnghợpgen đường hóa học, vídụtổng ... vectorchuyểngen nuôi cho tế bào cho (ví dụ tế bào người) để cung cấp DNA Bước 2: Tách chiết DNA plasmid DNA tế bào cho Bước gọi phân lập gen Bước 3: Cắt hai đoạnDNA ( DNA plasmid DNA tế bào cho) ... hàng DNA hệ genVí dụ, việc lập ngân hàng hệ gen người tiến hành sau: Đầu tiên tách hệ gen người thànhđoạnDNA dài 30 0-400kb gắn vào vector YAC, BAC để tạo dòng Từ dòng 30 0-400kb lại lại cắt thành...