... LIệU
2.1. Hiện tượng ưu thế lai
2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng
Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng
Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng
Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai
dòng(EGMS).
+ Phương pháp truyền thống
+ Chỉthịphântử và ứng dụng
2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉthịphân
tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng
Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới
Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt Nam
...
Bc6:Cho600àlhnhpChlorofom:
Isoamylalcohol(24:1),lcuvalytõm7phỳtvitc
13000vũng/phỳtrihỳtphndungdchtrờnvong
eppendorfmióỏnhdutngng.
Bc7:Cho800àlEthanol(96%)(hoc600àl
Isopropanol),trnuvlytõm7phỳtvitc13000
vũng/phỳt.Sauúphndungdchphớatrờngili
phnkttadiỏyngnghim.
Bc8:RakttabngEthanol70%,lmkhụtnhiờn
nhitphũngbngcỏchỳpngcngnghimlờngiy
thm.
Bc9:Hũatankttabng50àldungdchTEribo
qunnhitư20
o
C
+KimtratinhschADNbngcỏchinditrờngel
agarose1%.
+TinhnhphnngPCRvicpmiRM11chogentms2.
Bằng việc sử dụng ADN marker (chỉ thịphân
tử) thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút
ngắn.Các chỉthị liên kết chặt với các tính trạng
kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được
các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen
mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính
xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn
vật liệu nghiên cứu.
Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi
tiến hành đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng chỉthị
phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các
dòng TGMS mới”.
...
Bằng việc sử dụng ADN marker (chỉ thịphân
tử) thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút
ngắn.Các chỉthị liên kết chặt với các tính trạng
kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được
các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen
mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính
xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn
vật liệu nghiên cứu.
Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi
tiến hành đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng chỉthị
phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các
dòng TGMS mới”.
...
... thơm sử dụng
chỉ thị L05 và chỉthị BADH2
chỉ thị L05 và chỉthị BADH2
Kết quả sử dụng chỉthịphântử L05 và BADH2 trong
Kết quả sử dụng chỉthịphântử L05 và BADH2 trong
phân loại các ... xuất
Các chỉthịphântử là RG 28 (F và R), RM342 (F và R),
Các chỉthịphântử là RG 28 (F và R), RM342 (F và R),
L05 (F và R) và chỉthị BADH2 gồm 4 mồi EAP, ESP,
L05 (F và R) và chỉthị BADH2 ... cao; chỉthịphântử
nhưng độ chính xác không cao; chỉthịphântử
BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các giống lúa
BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các giống lúa
thơm và không thơm. Đây là chỉ...
... diện trong hình
Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn
tạo giống lúa thơm
Các chỉthịphântử là RG 28, RM342, L05 và chỉ
thị BADH2 gồm 4 mồi EAP, ESP, IFAP và ... Có thể thấy việc sử
dụng chỉthị BADH2 đã xác định được toàn bộ các
giống lúa thơm có mang gen thơm fgr với các
giống lúa không thơm. Điều đó cho thấy chỉthị
phân tử BADH2 có độ tin cậy và ... bằng hệ
thống chụp và phân tích hình ảnh Gel Doc 2000.
Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn
tạo giống lúa thơm
Kết quả sử dụng chỉthịphântử BADH2 để
xác định...
... nghĩa:
Chọn lọc dựa trên chỉthịphântử
(Marker assisted selection- MAS) là
sử dụng chỉthị DNA liên kết chặt với
locus mục tiêu để thay cho chọn lọc
đánh giá kiểu hình
Giả định: chỉthị DNA (DNA markers) ... PRACTICE
SECTION 2
HỆ THỐNG TẠO GIỐNG MAS (MAS
BREEDING SCHEMES)
1. Lai lại dựa trên chỉthịphântử (Marker-
assisted backcrossing)
2. Quy tụ gen (Pyramiding)
3. Chọn lọc những thế hệ đầu ... sớm, trước khi gieo trồng, có thể chọn
ngay ở thế hệ phân ly F2 hoặc F3
Increased reliability
Không bị ảnh hưởng của môi trường
Có thể phân biệt giữa đồng hợp và dị hợp và chọn lcọ
từng...
... chỉ chứa thịt bò nhƣng kết quả
kiểm tra lại phát hiện có lẫn thịt gia cầm; các mẫu thịt bò tƣơi kết quả kiểm nghiệm
lại cho dƣơng tính với thịt hƣơu và thịt ngựa; thịt bò viên lại có chứa thịt ... khối
lƣợng phân tử) . Phƣơng pháp này có hai giai đoạn phân tách: giai đoạn đầu phân
tách sản phẩm dựa vào điểm đẳng điện của phântử protein mẫu; giai đoạn hai, sản
phẩm đƣợc phân tách theo ... loại thịt đƣợc trộn vào trong
thịt và thịt chế biến. Trên 100 mẫu điều tra, kết quả là: 39,2% xúc xích lên men,
35,7 % xúc xích Ý, 27.2% xúc xích Đức, 22,2% thịt tƣơi, 6,2% thịt viên có chứa
thịt...
... LIệU
2.1. Hiện tượng ưu thế lai
2.2. Hệ thống lúa lai hai dòng
Khái niệm hệ thống lúa lai hai dòng
Ưu điểm của hệ thống lúa lai hai dòng
Các phương pháp chọn tạo dòng mẹ lúa lai hai
dòng(EGMS).
+ Phương pháp truyền thống
+ Chỉthịphântử và ứng dụng
2.3. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chỉthịphân
tử trong chọn tạo lúa lai hai dòng
Tình hình nghiên cứu và ứng dụng trên thế giới
Tình hình nghiên cứu và ứng dụng ở Việt Nam
... *Nghiên cứu ưu thế lai của các tổ hợp lai F
1
so với bố
+Bố trí thí nghiệm:
Thí nghiệm được bố trí theo phương pháp khảo sát tập đoàn,các con lai F
1
trồng cạnh bố tương ứng.Các tổ hợp lai được bố trí tuần tự không nhắc lại.
Ô thí nghiệm được bố trí theo hình chữ nhật,mỗi ô là 5m
2
.
+Các biện pháp kỹ thuật:
Làm đất cày bừa
Thời vụ: Vụ chiêm xuân 2010
Ngày gieo mạ :01/2010
Ngày cấy: 02/2010
Cấy 1 dảnh/khóm,cây x cây 11cm,hàng x hàng 20cm.
Mật đọ cấy 45 khóm/m
2
.
Lượng phân bón cho 1 ha:
Phân đạm 120 kg
Phân lân 90kg
Phân kali 60kg
+Kỹ thuật bón phân:
Bón lót:100%lân + 30%đạm,bón sau khi bừa.
Bón thúc lần 1:50% phân đạm +40% phân kali,bón vào thời kì bắt đầu đẻ
nhánh.
Bón thúc lần 2:bón hết số đạm,kali còn lại,bón khi lúa làm đòng.
... 3.1.3. Địa điểm nghiên cứu:tại phòng công nghệ sinh học
ứng dụng và khu thí nghiệm đồng ruộng khoa nông học –
Trường Đại Học Nông Nghiệp Hà Nội .
3.1.4. Thời gian nghiên cứu :
Đề tài được thực hiện từ tháng 1/2010 đến tháng 5/2010.
Bằng việc sử dụng ADN marker (chỉ thịphân
tử) thời gian chọn tạo ra các dòng mới được rút
ngắn.Các chỉthị liên kết chặt với các tính trạng
kiểu hình.Do đó,chúng ta có thể xác định được
các tính trạng dựa trên sự có mặt của các gen
mong muốn.Kỹ thuật này không chỉ có độ chính
xác cao mà còn xác định được trên một lượng lớn
vật liệu nghiên cứu.
Để đáp ứng được mục tiêu chọn giống chúng tôi
tiến hành đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng chỉthị
phân tử DNA chọn lọc gen tms2 để tạo ra các
dòng TGMS mới”.
...
... nghiên cứu
3.2.1. Đánh giá các chỉ tiêu chất lượng gạo của một số giống lúa địa phương:
nhiệt hoá hồ, độ bền gel, và hàm lượng amylose.
3.2.2.Sử dụng chỉthịphântử phát hiện gen quy định hàm ... hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu ứng dụng chỉthịphântử phát
hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa”
Mục đích và yêu cầu
- Khảo sát đánh giá một số chỉ tiêu cơ bản liên quan đến hàm lượng ... lúa gạo ở mức phân
tử, đặc biệt hàm lượng amylose. Hiểu rõ bản chất cấu trúc chức năng của các yếu tố
quy định sự hình thành và biến đổi của amylose trong hạt gạo ở cấp độ phântử sẽ cho
phép...
... và không mang gen thơm.
+ Chỉthịphântử L05 có thể phân biệt được giữa các giống lúa
thơm và không thơm, nhưng độ chính xác không cao.
+ Chỉthịphântử BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các ... cậy của các chỉthị
phân tử liên kết với gen quy định mùi thơm fgr đã được tiến
hành trên 40 dòng, giống lúa thơm và không thơm cho thấy:
+ Các chỉthịphântử RG28, RM342 không phân biệt được ... bằng chỉthị RG28 và
RM342 kết quả cho thấy: Đối với chỉthị RG28 và RM342, các
sản phẩm điện di ADN của các giống không cho sự đa hình.
Điều này cho thấy, sử dụng chỉthị RG28 và RM342 chưa phân...
... hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu ứng dụng chỉthịphântử phát
hiện gen quy định hàm lượng amylose ở lúa”
Mục đích và yêu cầu
- Khảo sát đánh giá một số chỉ tiêu cơ bản liên quan đến hàm lượng ... lúa gạo ở mức phân
tử, đặc biệt hàm lượng amylose. Hiểu rõ bản chất cấu trúc chức năng của các yếu tố
quy định sự hình thành và biến đổi của amylose trong hạt gạo ở cấp độ phântử sẽ cho
phép ... nghiên cứu phân biệt các alen trên locus gen waxy cũng như việc xác định tác
9
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
có độ phân huỷ trong kiềm cao, nhiệt độ hoá hồ thấp, chỉ có giống 10115 có độ phân huỷ...
... phép phân tách các phântử DNA sợi đôi,
kích thƣớc 300-10.000 bp. Các nồng độ agarose khác nhau cho phép tăng hiệu quả
phân tách các nhóm phântử có kích thƣớc khác nhau.
Bảng 2.2: Sự phân ... đầu là thu nhận đƣợc các
phân tử này ở trạng thái nguyên vẹn tối đa, ít bị phân hủy do các tác nhân cơ học
(phân tử bị gãy do nghiền, lắc mạnh) hay hoá học (phân tử bị thủy giải do các
enzym ... Trong cùng một điện trƣờng, các phântử sẽ
di chuyển với vận tốc tùy thuộc vào điện tích và kích thƣớc của chúng. Nếu hai
phân tử có cùng khối lƣợng thìphântử nào có điện tích lớn hơn sẽ di...
... thị nh: chỉthị hình thái, chỉthị sinh
hoá và chỉthịphântử ADN. Những chỉthị này từ lâu đ là những công cụ hữu
hiệu trong chơng trình chọn giống.
2.3.1. Chỉthị hình thái
Chỉthị hình ... các chỉthịphântửthìchỉthị SSR đợc đánh giá là có nhiều
u điểm so với các chỉthị khác, có khả năng cho đa hình cao, có bản chất
đồng trội, di truyền theo quy luật Menden. Sử dụng chỉthị ... Khái niệm về chỉthị di truyền 25
2.4. Một số chỉthịphântử ứng dụng trong nghiên cứu đa dạng di truyền
thực vật 31
2.5. Tình hình nghiên cứu đa dạng di truyền sử dụng chỉthịphântử SSR
trong...
... triển của cá thể, nên các chỉthị Protein và Isozym hạn chế về
mặt ứng dụng.
2.3.3. Chỉthịphântử ADN
2.3.3.1. Các chỉthịphântử ADN
Chỉthịphântử ADN là những chỉthị có bản chất đa hình ... thị nh: chỉthị hình thái, chỉthị sinh
hoá và chỉthịphântử ADN. Những chỉthị này từ lâu đ là những công cụ hữu
hiệu trong chơng trình chọn giống.
2.3.1. Chỉthị hình thái
Chỉthị hình ... các chỉthịphântửthìchỉthị SSR đợc đánh giá là có nhiều
u điểm so với các chỉthị khác, có khả năng cho đa hình cao, có bản chất
đồng trội, di truyền theo quy luật Menden. Sử dụng chỉ thị...
... 2007)
G. arboreum phân tán
G. hirsutum
G. ...
: RFLP, RAPD, AFLP, SSR và ngày càng có
...
TÀI
1.1 Câ
1.1.1 Ngun gc, xut x và phân loi ngun gen bông (Gossypium L.)
...
... d: mu sc, kớch thc, hm lng.
ã
R, d thc hin nhng chu s ảnh hưởng của
môi trường
Phân loại chỉthịphân tử
RAPD
ã
u im: n gin, nhanh, r
ã
Nhc điểm:
-
Tính lặp lại kết quả thấp
-
Một ...
RFPL
+
-
A: dạng cơ bản
B: dạng trèn
C:
D:
E:
F:
Dụng cụ cần thiết
RAPD: ứng dụng
RFPL
CHỈ THỊPHÂN TỬ
Lê Quang Hòa
Viện Công nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm
Đại học Bách Khoa Hà Nội
... hạn ch trờn gel
ã
Cỏc bc tin hnh:
-
Tỏch v tinh sch DNA
-
Phân cắt bằng một hay nhiều enzym hạn chế
-
Điện di trên gel agarose để phân tách các sản phẩm của
quá trình cắt
-
Chuyển lên màng...