... mức độ biểu gen BếnTreứngdụngcôngnghệPCR Real- timexétnghiệmbệnhtôm Việc xétnghiệmbệnhtôm hệ thống PCR Real- time tiến hành theo qui trình khép kín Trước tiên, mẫu tôm Post nghiền ... chứa DNA Bến TreứngdụngcôngnghệPCR Real- timexétnghiệmbệnhtômDùng thiết bị chuyên dụng lấy khoảng µl (microlít) dung dịch cho vào ống có chứa hóa chất gọi ống phản ứng Ống phản ứng đặt ... phút nhằm làm sốc nhiệt để trích ly DNA Bến TreứngdụngcôngnghệPCR Real- timexétnghiệmbệnhtôm Hỗn hợp dung dịch tôm post nghiền nhuyễn lại trải qua công đoạn làm lạnh nhanh, cho vào tủ đông...
... phản ứngPCR Đầu tiên, tiến hành phản ứngPCR với Taq ADN polymerase cặp mồi 18F 18R theo thông số tối ưu Kogan cộng Tiếp theo để sử dụng Vent ADN polymerase kỹ thuật PCR - RFLP phát đột biến bệnh ... phẩm PCR sử dụng Vent ADN polymerase với cặp mồi đặc hiệu cho intron 18 có kích thước 142bp người bình thường khoẻ mạnh bệnh nhân Hemophilia, sử dụng Taq ADN polymerase (giếng đến 3, hình 1) Trong ... tiến hành tối ưu hoá điều kiện cho PCR với enzyme Sử dụng số liệu hãng New England Biolabs kinh nghiệmdùng Vent ADN polymerase nghiên cứu trước [1, 3], điều kiện PCR với enzyme sau tối ưu hoá 30...
... sàng sau: + Chức gan (xét nghiệm ASAT, ALAT, bilirubin máu) + Chức thận (xét nghiệm ure, creatinin máu) + Các xétnghiệm huyết học (số lợng hồng cầu, số lợng bạch cầu, công thức bạch cầu, hemoglobin) ... (EUTECH) Các dụng cụ thí nghiệm khác: Máy lọc, pipet tự động, pipet thuỷ tinh xác, dụng cụ thủy tinh thí nghiệm 10 3.2.2 Hoá chất thí nghiệm: - Metformin (Chất đối chiếu quốc gia, Viện kiểm nghiệm ... biguanid Metformin đợc định cho bệnh ĐTĐ typ (ĐTĐ không phụ thuộc insulin) Metformin sử dụng đơn trị liệu sử dụng phối hợp với thuốc điều trị ĐTĐ khác Ngoài tác dụng gây hạ đờng huyết, metformin...
... giả Kantakamalakul W Thái Lan, Peh S C Malaysia [12] sử dụng kỹ thuật PCR lồng (nested - PCR) thay PCR đơn Độ nhạy PCR lồng cao sản phẩm PCR tiếp tục khuếch đại lại lần nữa, kết đạt mức cao 96,5% ... không biệt hóa (đã xác chẩn mô bệnh học) miền Bắc miền Trung - Nhóm chứng: 32 mẫu sinh thiết tươi khối paraffin bệnh nhân ung thư vùng đầu, cổ khác UTVMH (có xác chẩn mô bệnh học) Phương pháp nghiên ... lệ phát DNA-EBV đối tượng chứng thấp nhiều so với bệnh nhân UTVMH Tuy nhiên, số cụ thể khác tùy thuộc vào số lượng nghiên cứu, chất liệu nghiên cứu, kỹ thuật ứngdụng nghiên cứu không loại trừ...
... polymerase để sử dụng kỹ thuật PCR- RFLP phát đột biến intron 18 19 gen mã hoá cho yếu tố đông máu số VIII Kỹ thuật ứngdụng để phát phụ nữ mang gen bệnh chuẩn đoán sớm trước sinh bệnh Haemophilia, ... hành phản ứngPCR Sủ dụng điều kiện PCRdùng Taq ADN polymerase cho cặp mồi intron 18, gen mã hoá yếu tố VIII theo Kogan cộng (30 chu kỳ với 94oC-1 phút, 45oC-1 phút, 72oC -1 phút), thành công việc ... Hình 1) Trong số 25 mẫu người bình thường khoẻ mạnh sử dụng kỹ thuật PCR- RFLP với cặp mồi đặc hiệu cho intron 18: 25/25 mẫu (100%) bị cắt với enzyme Bcl I 50oC sau 12 Trong số 19 mẫu bệnh nhân...
... phân tử nghiên cứu bệnh máu, thực đề tài với mục tiêu: ứngdụng kỹ thuật PCR xác định bất thờng ADN bệnh nhân hemophilia A góp phần phát ngời mang gen bệnhứngdụng kỹ thuật PCR và FISH phát bất ... phản ứngPCR theo quy trình cụ thể trình bày sau Riêng phản ứng RT -PCR có thêm giai đoạn đầu tổng hợp cDNA từ 10àl RNA tách chiết đợc trên, sau cDNA làm khuôn mẫu cho phản ứngPCR Phản ứng RT- PCR ... gen bệnh XhY Con trai bị bệnh Nếu bố bị bệnh lấy mẹ mang gen bệnh (trờng hợp gặp thờng kết hôn gần) 50% trai họ ngời bị bệnh, 50% trai bình thờng, 50% gái bị bệnh, 50% gái ngời mang gen bệnh...
... phẩm PCR điện di kiểm tra gel agarose 1% ghi nhận hình ảnh máy ảnh Canon EOS 40D 3.2.7.3Phản ứng Multiplex PCR 2.149 Nguyên tắc phản ứng: Phản ứng Multiplex PCR dạng thay đổi phản ứngPCR thông ... nor-1 apa-2 công bố trình tự nucleotide chức gen Trình tự nucleotide gen sở để sinh tổng hợp cặp mồi đặc hiệu cho phản ứngPCR sử dụng sợi khuôn ADN tổng số tách chiết từ sợi nấm mẫu xétnghiệm 2.107 ... nor-1 apa-2 công bố trình tự nucleotide chức gen Trình tự nucleotide gen sở để sinh tổng hợp cặp mồi đặc hiệu cho phản ứngPCR sử dụng sợi khuôn ADN tổng số tách chiết từ sợi nấm mẫu xétnghiệm 2.38...
... al., 2009) Cấp bệnh Mô tả vết bệnh Không bị bệnh 1-2% diện tích trái bị bệnh chổ chủng bệnh có biểu nhũng nước lan xung quanh điểm chủng bệnh >2-5% diện tích trái bị bệnh chổ chủng bệnh bị nhũng ... lập xoài để sử dụng thí nghiệm Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên nhân tố, với lặp lại Các bước thực hiện: Trái xoài sử dụng thí nghiệm trái xoài già bệnh (85 ngày sau ... Phòng thí nghiệmbệnh (C102), Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học ỨngDụng Trường Đại học Cần Thơ - Phòng thí nghiệm Sinh học phân tử, Viện Nghiên Cứu Phát Triển CôngNghệ Sinh...
... Inversion PCR Kỹ thuật Inversion PCR (I -PCR) gồm bước: (1) Cắt DNA enzyme BclI, (2) Nối T4 ligate, (3) Khuyếch đại phản ứng multiplex PCR Phương pháp I -PCR có ưu điểm dễ tiến hành enzyme BclI tác dụng ... multiplex PCR Kỹ thuật multiplex PCR: Thiết kế hai phản ứng multiplex PCR phát bệnh nhân bị đột biến: phản ứng có chứa cặp mồi đặc hiệu cho int1h1cộng với mồi đặc hiệu cho chuỗi in1h2, phản ứng chứa ... Hình 3.3 Kết PCR xác định đột biến exon bệnh nhân HA51 Nhận xét: Bệnh nhân mã số HA64 sau khuếch đại toàn 38 cặp mồi với mẫu đối chứng âm đối chứng dương phát vị trí exon 8, exon bệnh nhân vạch...
... kết hợp phản ứng với PCR lồng có tác dụng phát ARN thời điểm định mẫu Kỹ thuật PCR chiều ứngdụng phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR + Sử dụng kỹ thuật PCR cho xác ... revert transtriptase PCR (sao chép ngược) asymmetric PCR (PCR chiều) PCR lồng phản ứngPCR bao bồm hai phản ứng đồng thời, phản ứng đầu vòng gene sản phẩm lại làm khuôn cho phản ứng sau cho đoạn ... có mặt nonidet-40 có tác dụng tăng hiệu suất phản ứng Việc ứngdụng kỹ thuật RFLP với sản phẩm PCR cách nhanh chóng để tìm khác biệt gene khác Với cách yêu cầu sản phẩm PCR phải đồng Theo cách...
... kết hợp phản ứng với PCR lồng có tác dụng phát ARN thời điểm định mẫu Kỹ thuật PCR chiều ứngdụng phương pháp giải trình tự ADN trực tiếp từ sản phẩm PCR. phẩm PCR + Sử dụng kỹ thuật PCR cho xác ... revert transtriptase PCR (sao chép ngược) asymmetric PCR (PCR chiều) PCR lồng phản ứngPCR bao bồm hai phản ứng đồng thời, phản ứng đầu vòng gene sản phẩm lại làm khuôn cho phản ứng sau cho đoạn ... có mặt nonidet-40 có tác dụng tăng hiệu suất phản ứng Việc ứngdụng kỹ thuật RFLP với sản phẩm PCR cách nhanh chóng để tìm khác biệt gene khác Với cách yêu cầu sản phẩm PCR phải đồng Theo cách...
... polymerase 2.4.2.9 ỨngdụngPCRPCR có nhiều ứngdụng ngành sinh học PCR với cặp primer đƣợc thiết kế riêng phân lập đƣợc đoạn DNA mong muốn Từ đƣợc ứngdụng lĩnh vực: Y khoa: dùng chẩn đoán bệnh tác nhân ... việc thực phản ứngPCR 33 4.2.1 Kết thực phản ứngPCR theo qui trình khác 33 4.2.1.1 Qui trình phản ứngPCR theo nhiệt độ bắt cặp khác .33 48 4.2.1.2 Qui trình phản ứngPCR theo nồng ... Ứngdụng phƣơng pháp PCR – RFLP khảo sát đa hình gen PRLR 3.4.2.4.1 Xây dựng qui trình khuyếch đại PCR cắt enzyme giới hạn Xây dựng qui trình phản ứngPCR o Xác định nhiệt độ thời gian phản ứng...
... thước phản ứngPCR Tuy nhiên, thành phần nên hiệu chỉnh 1) sản phẩm PCR lớn 5kb; 2) có khả hoạt tính enzyme bị giảm sút thiếu sót khâu bảo quản; 3) tiến hành hiệu chỉnh nhiều cách sản phẩm PCR thấp ... tích phản ứng Việc thay đổi loại DNA polymerase làm thay đổi hiệu suất phản ứngPCR - Khi tính toán chiến lược cloning hệ thống TA vector, cần lưu ý DNA polymerase có đặc tính tạo đầu treo A đầu ... nhiều vào hệ buffer sử dụng Thông thường nên sử dụng loại buffer tương ứng với enzyme nhà sản xuất khuyến cáo _Một số buffer chứa chất hoạt động bề mặt ảnh hưởng đến phản ứng microarray DHPLC _Nhiều...
... vậy, RT – PCR cần tối ưu hóa cẩn thận sử dụng để phân tích định lượng mARN Sự định lượng thường hai dạng: tương đối tuyệt đối IX REAL – TIMEPCRTrong sinh học phân tử, real – timePCR (PCR úng ... chuyên biệt 21 - Real – TimePCR đánh giá tích lũy sản phẩm định lượng qPCR (quantitative PCR – PCR định lượng) Ngoài số kỹ thuật PCR khác nữa… VIII RT – PCR Như biết, PCR kỹ thuật nhân bội ADN ... Thiết bị dụng cụ cho PCR Phản ứngPCR thực máy chu trình nhiệt Đây máy đun nóng làm nguội ống phản ứng nhiệt độ xác cho phản ứng Để ngăn ngừa bay hỗn hợp phản ứng, phần nắp đậy máy PCR đun nóng,...
... phép thành công không mẫu hạt, mẫu bột dinh dưỡng mà mẫu thực vật sống Thử nghiệm, phân tích hoàn thiện thành phần hóa chất phản ứngPCR Để chẩn đoán sản phẩm chuyển gen thành côngcông việc tìm ... phần hỗn hợp cho phản ứngPCR trình bày qua bảng Bảng Thành phần hóa chất cho phản ứngPCR H2O cất PCR buffer MgCl2 dNTP/s Taq DNA polymerase 10X 2,5mM 10mM 5U/µl Thể tích sử dụng (µl) 17 2,5 2,0 ... hòa tan DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứngPCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR buffer, MgCl2, dNTP/s, Taq DNA...
... hòa tan DNA Sau giữ lạnh -20oC để sử dụng cho phản ứngPCR Phương pháp khuyếch đại DNA (Kỹ thuật PCR) Sản phẩm DNA sau ly trích trộn chung với hỗn hợp gồm có PCR buffer, MgCl2, dNTP/s, Taq DNA ... trước đổ gel) - Để nguội cho gel cứng hoàn toàn, cẩn thận rút lược khỏi gel, cho dung dòch TAE 0,5X vào bể điện di cho ngập gel khoảng đến 1,5cm - Trộn 5µl sản phẩm PCR với 2µl loading dye 6X cho ... primer Gic Bt Với cặp primer Gic, sản phẩm PCR sau chụp hình cho thấy có hai mẫu có band kích thước 226bp (có chuyển gen Invertase) Với cặp primer Bt, sản phẩm PCR sau chụp hình cho thấy có mẫu có...
... thực tiếp phản ứng RT -PCR Trong đề tài thực phản ứng RTPCR đối tƣợng virus PLRV Tiêu chuẩn chọn mẫu để thực RT -PCR - Dƣơng tính - Trị số dƣơng tính từ máy đọc phải cao 21 - Triệu chứng đƣợc quan ... Chu kỳ nhiệt phản ứng tổng hợp cDNA 25oC phút 42oC 30 phút 85oC phút Giữ 4oC cDNA đƣợc tổng hợp (20 µl) đem sử dụng phản ứngPCR cất 4oC để chạy PCR sau Bƣớc 2: Thực phản ứngPCR khuếch đại cDNA ... lúc xác, vết bệnh dễ biến đổi, nhiều bị bệnh mà vết bệnh không phát ngoài, thời kỳ tiềm phục bệnh dài nên khó phát đƣợc Một số trƣờng hợp vết bệnh không rõ ràng *Ngoài xem tế bào bị bệnh dƣới kính...
... chúng em tiến hành đề tài Ứngdụng kỹ thuật PCR lây nhiễm nhân tạo kiểm chứng gen kháng bệnh bạc dòng đẳng gen” Phan Thị Hương, Nguyễn Thị Vân Anh, Bùi Văn Công, Hoàng Văn Dương HỘI NGHỊ ... Mỗi tương ứng với hoặc chủng đặc thù • Đánh giá khả kháng bệnh giống cách đo chiều dài vết bệnh sau 18 ngày lây nhiễm - Chiều dài vết bệnh < cm: kháng bệnh (R) - Chiều dài vết bệnh 8-12cm: ... phút Sau đó, sản phẩm PCR cắt enzyme DraI Trong 15μl phản ứng gồm có 10μl sản phẩm PCR, 0,3μl enzyme DraI 10unit/ μl, 1,5μl buffer B, 3,2μl nước Hỗn hợp ủ 37ºC tiếng + Sản phẩm PCR điện di gel agarose...
... quản 4oC Bố trí thí nghiệm phản ứngPCR Thực PCR theo trình tự sau: Bƣớc 1: thực PCR với cặp primer T1 Thiết kế phản ứngPCR Lập lại 30 chu kỳ 27 Bảng 3.1 Thành phần phản ứngPCR với cặp primer ... phản ứngPCR với cặp primer T1,W11, tiến hành PCR với cặp primer Thiết kế phản ứng multiplex PCR: Bảng 3.3 Thành phần phản ứng multiplex PCR Thành phần Nồng độ cuối phản ứng µl DNA Buffer PCR ... sử dụng thƣờng xuyên, trữ lâu dài -20oC Điện di để kiểm tra kết 3.3.3 Thực phản ứngPCR Quy trình nhiệt phản ứngPCR Thử nghiệm quy trình nhiệt để tìm quy trình nhiệt thích hợp cho phản ứng PCR...
... Ứngdụng kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR có nhiều ứngdụng ngành sinh học PCR với cặp primer đƣợc thiết kế riêng phân lập đƣợc đoạn DNA mong muốn Từ đƣợc ứngdụng lĩnh vực: Y khoa: dùng chẩn đoán bệnh ... liệu, dụng cụ, máy móc thiết bị làm thí nghiệm + Vật liệu Vật liệu dùng thí nghiệm mẫu da tai đƣợc lấy từ heo nái trại heo Đồng Hiệp + Dụng cụ Các dụng cụ để tiến hành thí nghiệm bao gồm: ống nghiệm, ... Tỷ lệ thành công phản ứngPCR Chúng ứngdụng quy trình PCR Bùi Thị Trà Mi (Khoa Chăn Nuôi Thú Y - Đại Học Nông Lâm TP.HCM, 2005), đƣợc xem quy trình ổn định phù hợp với phòng thí nghiệm Trƣờng...