TRNG I HC VINH KHOA : Sinh học nghiên cứu ảnh hởng của tổ hợp Xytokinin và Auxin lên quá trình nhân nhanh và ra rễ giống hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus luận văn tốt nghiệp đại học ngành s phạm sinh học Giỏo viờn hng dn: Ths. Phạm Thị Nh Quỳnh Sinh viên thực hiện : Đậu Thị Nga Lp : 48 A Sinh Vinh - 05 / 2011 Lêi c¶m ¬n Để hoàn thành luận văn này tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới cô giáo – Th.S Phạm Thị Như Quỳnh – cán bộ hướng dẫn khoa học, thầy giáo Phùng Văn Hào – cán bộ phòng thí nghiệm, đã tận tình hướng dẫn và tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp đỡ tôi trong suốt thời gian nghiên cứu và hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này. Tôi xin chân thành cảm ơn những ý kiến đóng góp vô cùng quý báu của các thầy cô tổ Sinh lí – Hóa Sinh cũng như các thầy cô trong khoa Sinh Học,sự tạo điều kiện và ủng hộ của các cán bộ trong phòng thí nghiệm nuôi cấy mô – tế bào thực vật khoa Sinh Học, Trường Đại Học Vinh. Xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ cung cấp tư liệu, hóa chất, nguồn giống của Viện Di Truyền Nông Nghiệp Việt Nam. Cảm ơn gia đình và bạn bè đã luôn động viên giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn này. Đây là lần đầu tiên tôi tham gia nghiên cứu khoa học bản thân sẽ không tránh khỏi những thiếu sót, rất mong nhận được những ý kiến đóng góp quý báu của thầy giáo, cô giáo và bạn bè để đề tài của tôi hoàn thiện một cách tốt nhất. Xin chân thành cảm ơn! Vinh, tháng 5 năm 2011 Sinh viên thực hiện : Đậu Thị Nga NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN NCM – TB : Nuôi cấy mô tế bào CNSH : Công nghệ sinh học ĐTST : Điều tiết sinh trưởng CT : Công thức HSNN : Hệ số nhân nhanh MS : (Môi trường dinh dưỡng ) Murashine & Sknoog 1962 KI : Kinetin IAA : Axit Indol butyric ĐC : Đối chứng mM : milimol MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU………………………………………………… … ……1 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU………………………….…… .…3 1.1. Nguồn gốc và vị trí phân loại của cây hoa đồng tiền……….…… .3 1.1.1. Nguồn gốc:………………………………………… …………… 3 1.1.2. Phân loại thực vật…………………… ………………………… 4 1.2. Đặc điểm thực vật học và yêu cầu sinh thái của cây hoa Đồng Tiền… .4 1.2.1. Đặc điểm thực vật học………………………………………… .…4 1.2.2. Yêu cầu về sinh thái………………………………………………………4 1.3. Một số nghiên cứu về nhân giống hoa Đồng Tiền bằng phương pháp nuôi cấy mô trên thế giới và ở Việt Nam………………………………………… .6 1.3.1 Trên thế giới…………………………………………………… 6 1.3.2. Ở Việt Nam…………………………………………………………7 1.4. Kỷ thuật NCM - TB thực vật in vitro…………………………………….8 1.4.1. Cơ sở khoa học của NCM - TB thực vật in vitro………………… 8 1.4.2. Môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật……………………………9 1.4.3. Quy trình chung của NCM - TB in vitro………………………… 18 CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU……………………………………………………………………20 2.1. Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu………………………… .20 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu…………………………………………… 20 2.1.2. Địa điểm nghiên cứu………………………………………………20 2.1.3. Thời gian nghiên cứu…………………………………………… .20 2.2. Nội dung nghiên cứu…………………………………………………….20 2.3. Phương pháp nghiên cứu……………………………………………… 21 2.3.1. Bố trí thí nghiệm………………………………………………… .21 2.3.2. Điều kiện thí nghiệm 2.3.3.Các chỉ tiêu theo dõi . 2.3.3.1.Giai đoạn nhân nhanh . 2.3.3.2. Giai đoạn ra rễ . 2.4. Phương pháp xử lý số liệu CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN . 3.1.Giai đoạn nhân nhanh 3.2. Giai đoạn ra rễ . KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ A. Kết luận . B. Kiến nghị . TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC BẢNG SỐ LIỆU Bảng 3.1 : Ảnh hưởng của nồng độ KI tổ hợp với IAA đến khả năng bật chồi và hệ số nhân nhanh hoa đồng tiền in vitro (sau 4 tuần nuôi cấy) .23 Bảng 3.2 : Ảnh hưởng của nồng độ KI tổ hợp với IAA đến khả năng sinh trưởng, phát triển của hoa Đồng Tiền in vitro (sau 4 tuần nuôi cấy) .25 Bảng 3.3 : Ảnh hưởng của nồng độ IAA tổ hợp với KI đến thời gian ra rễ và khả năng ra rễ của hoa đồng tiền in vitro (sau 4 tuần nuôi cấy) 30 Bảng 3.4 : Ảnh hưởng của nồng độ IAA tổ hợp với KI đến khả năng sinh trưởng của rễ hoa đồng tiền in- vitro (sau 4 tuần nuôi cấy) .32 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1. Ảnh hưởng của nồng độ KI tổ hợp với IAA đến hệ số nhân nhanh chồi hoa Đồng Tiền 24 Hình 3.2. Ảnh hưởng của nồng độ KI tổ hợp với IAA đến khả năng sinh trưởng, phát triển của chồi hoa Đồng Tiền in vitro 26 Hình 3.3 Ảnh hưởng của nồng độ IAA tổ hợp với KI đến số ngày ra rễ của chồi hoa Đông Tiền 31 PHẦN MỞ ĐẦU Ngày nay, sử dụng hoa trong sinh hoạt và công tác hàng ngày đã trở thành một thói quen tốt, tạo nên một nét văn hóa mới trong thưởng ngoạn, giải trí cũng như trong tiêu dùng. Hoa được coi là một món ăn tinh thần không thể thiếu của con người. Hoa luôn mang cho đời màu sắc rực rỡ, hương thơm ngọt ngào. Trong muôn vàn các loài hoa thì Đồng Tiền không những là một loài hoa đẹp, đa dạng về chủng loại mà còn phong phú về màu sắc. Hiện nay, hoa Đồng Tiền rất được ưa chuộng trên thị trường thế giới cũng như ở Việt Nam. Loài hoa này được trồng phổ biến ở rất nhiều nước như Hà Lan, Mỹ, Đức, Nhật Bản, Trung Quốc .[4] Sản xuất hoa Đồng Tiền đã đem lại nguồn doanh thu lớn cho các nước này, đồng thời nâng cao kim ngạch xuất khẩu của thế giới. Với vẻ đẹp thanh cao, màu sắc sống động, hoa Đồng Tiền đang được đông đảo người tiêu dùng Việt Nam ưa thích. Loài hoa này không chỉ có mặt trong các vườn hoa công viên, trong phòng họp, bàn làm việc của các công sở cho đến phòng khách của nhiều gia đình mà còn có trong các lễ hội,sinh nhật . Việt Nam là nước có điều kiện khí hậu thuận lợi để trồng hoa Đồng Tiền. Việc sản xuất hoa Đồng Tiền không chỉ nâng cao sản xuất thu nhập cho người dân mà còn góp phần quan trọng trong việc thúc đẩy chuyển dịch cơ cấu cây trồng, đẩy nhanh tiến trình công nghiệp hóa, hiện đại hóa nông nghiệp. Tuy nhiên ngành sản xuất hoa nói chung và ngành sản xuất hoa Đồng Tiền nói riêng ở nước ta hiện nay còn gặp phải rất nhiều khó khăn, nhất là chất lượng hoa còn thấp chưa đáp ứng được nhu cầu xuất khẩu. Một trong những nguyên nhân chủ yếu đó là nguồn cây giống chưa đáp ứng được nhu cầu về cả chất và lượng. Để có thể đáp ứng được nhu cầu tiêu thụ hoa ngày càng tăng, nhiều giống hoa, loại hoa mới, có giá trị thẩm mỹ, giá trị kinh tế và giá trị văn hóa được đưa vào sản xuất trên quy mô lớn và được dùng nhiều phương thức tạo giống khác nhau, trong đó nuôi cấy mô - tế bào thực vật in vitro được đánh giá là một phương pháp tiên tiến, ưu việt. Xuất phát từ những lý do trên, chúng tôi thực hiện đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng của tổ hợp Xytokinin và Auxin lên quá trình nhân nhanh và ra rễ giống hoa Đồng Tiền Gerbera Jamesonii Bolus ”. Mục tiêu của đề tài : - Xác định nồng độ KI tổ hợp với IAA tốt nhất cho quá trình hình thành chồi của giống hoa Đồng Tiền. - Xác định nồng độ IAA tổ hợp với KI tốt nhất cho quá trình phát sinh hình thái rễ hoa Đồng Tiền. CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Nguồn gốc và vị trí phân loại của cây hoa đồng tiền 1.1.1. Nguồn gốc: Hoa đồng tiền có tên khoa học là Gerbera Jamesonii Bolus (còn gọi là hoa mặt trời hay hoa Phu Lăng), được tìm thấy đầu tiên ở các tỉnh Transvaal, Natal và Swaziland của Nam Phi. Năm 1697 được Relomen phát hiện ở phía nam Châu Phi (Delasia) và ông đã đưa về vườn thực nghiệm nước Anh. Irwin Lynch là người đầu tiên tiến hành lai tạo các giống Đồng Tiền với nhau. Sau đó người Pháp và người Hà Lan cũng tiến hành lai tạo và dần hai nước này đẫ trở thành trung tâm tạo giống Đồng Tiền của thế giới. Đến nay hoa Đồng Tiền được trồng nhiều nước trên thế giới điển hình là: Hà Lan, Mỹ, Đức, Nhật Bản, Trung Quốc .[4] Hoa Đồng Tiền rất phong phú và đa dạng với nhiều màu sắc khác nhau như: đỏ, cam vàng, trăng, phấn hồng, tím . trên một bông hoa có thể có một màu đơn hoặc nhiều màu xen kẽ với nhau. Đồng Tiền là một trong mười loại hoa quan trọng nhất trên thế giới (sau hoa hồng, cúc, lan, cẩm chướng, lay ơn). Các nước có sản lượng hoa Đồng Tiền lớn là: Hà Lan, Colombia, Pháp, Trung Quốc . Ở Việt Nam, hoa Đồng Tiền được người Pháp đưa vào những năm 1940 thế kỷ XX và được phát triển đến ngày nay nhưng chủ yếu vẫn là các giống Đồng tiền đơn, hoa nhỏ. Cây sinh trưởng phát triển tốt, thích nghi với điều kiện nước ta nhưng hoa nhỏ, cánh đơn, màu sắc hoa đơn điệu nên không được trồng rộng rãi. Vào những năm 1990 nước ta bắt đầu nhập khẩu giống Đồng Tiền kép từ Trung Quốc, Hà Lan, Đài Loan. Các giống này có ưu điểm