Lời cảm ơn Luận văn này đợc hoàn thành tại bộ môn hoá hữu cơ, phòng thí nghiệm Hoá hữu cơ - Khoa Hoá - Trờng Đại học Vinh, Viện Hoá học, Trung tâm KHTN và Công nghệ quốc gia. Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc tôi xin chân thành cảm ơn : - PGS.TS Lê Văn Hạc Trởng bộ môn Hoá hữu cơ - Trờng Đại học Vinh đã giao đề tài và tận tình hớng dẫn giúp đỡ tạo điều kiện và mọi mặt trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn này. - TS. Hoàng Văn Lựu Phó Trởng khoa hoá đã quan tâm đóng góp nhiều ý kiến quý báu giúp tôi hoàn thành luận văn này. - GS.TSKH Nguyễn Xuân Dũng khoa Hoá trờng Đại học KHTN - Đại học quốc gia Hà Nội đã giúp tiến hành phân tích sắc ký khí, khối phố ký và góp ý kiến về kết quả thu đợc trong luận văn này. - Th.S Trần Đình Thắng đã cung cấp thông tin và góp ý kiến. - Th.S Lê Đức Giang đã góp ý kiến cho luận văn - Cô Nguyễn Thị Liên Cán bộ phòng thí nghiệm hoá hữu cơ đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong quá trình làm thí nghiệm. Đồng thời nhân dịp này tôi cũng bày tỏ lòng biết ơn thầy cô cán bộ khoa Hoá học Trờng Đại học Vinh cùng các bạn lớp 41B 2 Hoá đã tạo điều kiện giúp đỡ tạo điều kiện giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn này. Vinh, ngày tháng 5 năm 2004 Nguyễn Thị Thanh Hoài 1 Mục lục Trang Mở đầu 1 Chơng I : Tổng quan 1 1.1. Chi Eupatorium 2 1.1.1. Đặc điểm thực vật và phân loại 2 1.1.2. Thành phần hoá học 4 1.2. Cây cỏ lào 15 1.2.1. Thục vật học 15 1.2.2. Thành phần hoá học 17 1.3.3. Tác dụng dợc lý và sử dụng 19 1.4. Các phơng pháp tách tinh dầu 20 1.4.1. Yêu cầu của phơng pháp 20 1.4.2. Phơng pháp cất kéo bằng hơi nớc 21 1.4.3. Phơng pháp ép 21 1.4.4. Phơng pháp dung môi để hoà tan 22 1.4.5. Phơng pháp ớp 22 1.4.6. Phơng pháp lên men 22 1.4.7. Bảo quản tinh dầu 23 1.5. Các phơng pháp xác định thành phần hoá học của tinh dầu 23 1.5.1. Phơng pháp sắc kí khí 23 1.5.1.1. Bản chất của phơng pháp sắc kí khí 25 1.5.1.2. u điểm của phơng pháp 25 1.5.2. Phơng pháp khối phổ 25 1.6. Phơng pháp thực nghiệm 28 1.6.1. Phơng pháp thu hái và bảo quản mẫu cây 28 2 1.6.2. Phơng pháp định lợng tinh dầu 28 1.6.3. Phơng pháp xác định thành phần hoá học của tinh dầu 28 Chơng II Thực nghiệm 31 2.1. Hoá chất, dụng cụ, thiết bị máy móc 31 2.1.1. Hoá chất 31 2.1.2. Dụng cụ, thiết bị máy móc 31 2.2. Lấy mẫu và bảo quản mẫu cây 31 2.2.1. Cách chọn và bảo quản 31 2.2.2. Địa điểm và thời gian lấy mẫu 31 2.3. Thí nghiệm tách tinh dầu 32 2.4. Xác định thành phần hoá học của tinh dầu 33 Chơng III Kết quả và thảo luận 34 3.1. Xác định thành phần hoá học của tinh dầu cây cỏ lào ở Vinh Nghệ An 34 3.1.1. Nguyên liệu thực vật 34 3.1.2. Xác định thành phần hoá học 34 3.2. Xác định thành phần hoá học của cây cỏ lào ở Nghi Xuân Hà Tĩnh 39 3.2.1. Nguyên liệu thực vật 39 3.2.2. Xác định thành phần hoá học 39 Kết luận 48 ý kiến đề xuất 48 Tài liệu tham khảo 50 3 Mở đầu 1. Lý do chọn đề tài. Cây cỏ lào còn gọi là cây cộng sản, bớp bớp, bù xích, yên bạch, chùm hội, nhả nhật, muồng mung phia (Eupatorium odoratum L.) thuộc họ Cúc, phân bố chủ yếu ở các nớc Đông Nam á. Cỏ lào thờng gặp ở nhiều nơi, bao gồm cả các tỉnh ở vùng đồng bằng, trung du và vùng núi thấp. Cây a sáng, chịu đợc hạn và có thể sống đợc trên mọi loại đất, mọc tơng đôi tập trung trên những diện tích lớn ở đồi, nhất là đất nơng rẫy đã bỏ hoang. Do đó, co thể coi cỏ lào là loại cây tiên phong sống trong quá trình diễn thế thứ sinh trên đất sau canh tác. Cỏ lào ra hoa kết quả nhiều hàng năm. Với số lợng hạt giống nhiều, lại phát tán nhờ gió nên cỏ lào có khả năng chiếm lĩnh và mở rộngvung phân bố cực nhanh. Nhân dân ta dùng cỏ lào chữa tiêu chảy, kiết lỵ, đau nhức xơng, ghẻ lở, phòng và trị đỉa cắn. Một chế phẩm từ cao lá cỏ lào chữa một số bệnh về răng miệng. Cỏ lào còn đợc dung chữa bỏng và vết thơng phần mềm. Chính vì vậy chúng tôi chọn đề tài Nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu cây cỏ lào (Eupatorium odoratum L.) ở Nghệ An và Hà Tĩnh từ đó góp phần xác định thành phần hoá học và tìm ra nguồn nguyên liệu cho ngành hoá dợc, hơng liệu và góp phần phân loại bằng hoá học chi Eupatorium. 2. Nhiệm vụ nghiên cứu. Trong luận văn này, chúng tôi có các nhiệm vụ: - Chng cất lôi cuốn hơi nớc thu tinh dầu. - Xác định thành phần hoá học của tinh dầu cây cỏ lào. 3. Đối tợng nghiên cứu. Đối tợng nghiên cứu là tinh dầu của phần trên mặt đất của cây cỏ lào (Eupatorium odoratum L.) thuộc họ Cúc (Compositae) ở Nghệ An và Hà Tĩnh . 4 Chơng I Tổng quan 1.1. Chi Eupatorium 1.1.1. Đặc điểm thực vật và phân loại. Eupatorium L. là họ chi lớn trong họ Compositae. Trên thế giới, có khoảng 400 loài, đa số là cây bụi, cây bụi nhỏ hoặc cây thảo. Phân bố tập trung ở ở vùng nhiệt đới châu Mỹ, châu Phi và châu á. Vùng ôn đới ấm ở châu Âu chỉ có một số ít loài. 1. Eupatorium album 2. Eupatorium album var. album 3. Eupatorium album var. glandulosum 4. Eupatorium album var. subvenosum 5. Eupatorium altissimum 6. Eupatorium anomalum 7. Eupatorium azureum 8. Eupatorium betonicifolium 9. Eupatorium bigelovii 10. Eupatorium borinquense 11. Eupatorium cannabinum 12. Eupatorium capillifolium 13. Eupatorium chapmanii 14. Eupatorium chinense 15. Eupatorium chinense simplicifolium 16. Eupatorium coelestinum 17. Eupatorium compositifolium 18. Eupatorium corymbosum 19. Eupatorium dolicholepis 20. Eupatorium droserolepis 21. Eupatorium dubium 22. Eupatorium fistulosum 23. Eupatorium fortunei 24. Eupatorium frustratum 25. Eupatorium geraniifolium 26. Eupatorium glaucescens 27. Eupatorium godfreyanum 28. Eupatorium greggii 5 29. Eupatorium hyssopifolium 30. Eupatorium hyssopifolium var. calcaratum 31. Eupatorium hyssopifolium var. hyssopifolium 32. Eupatorium hyssopifolium var. laciniatum 33. Eupatorium incarnatum 34. Eupatorium iresinoide 35. Eupatorium ivifolium 36. Eupatorium lancifolium 37. Eupatorium leptophyllum 38. Eupatorium leucolepis 39. Eupatorium leucolepis var. leucolepis 40. Eupatorium leucolepis var. novae-angliae 41. Eupatorium lindleyanum 42. Eupatorium macrophyllum 43. Eupatorium maculatum 44. Eupatorium maculatum var. bruneri 45. Eupatorium maculatum var. foliosum 46. Eupatorium maculatum var. maculatum 47. Eupatorium microstemon 48. Eupatorium mikanioides 49. Eupatorium mohrii 50. Eupatorium odoratum 51. Eupatorium oteroi 52. Eupatorium perfoliatum 53. Eupatorium perfoliatum var. colpophilum 54. Eupatorium perfoliatum var. perfoliatum 55. Eupatorium perfoliatum var. perfoliatum 56. Eupatorium pilosum 57. Eupatorium polyodon 58. Eupatorium portoricense 59. Eupatorium purpureum 60. Eupatorium purpureum var. holzingeri 61. Eupatorium purpureum var. holzingeri 62. Eupatorium pycnocephalum 63. Eupatorium resinosum 64. Eupatorium rotundifolium 65. Eupatorium rotundifolium var. cordigerum 66. Eupatorium rotundifolium var. ovatum 67. Eupatorium rotundifolium var. rotundifolium 68. Eupatorium rotundifolium var. scabridum 6 69. Eupatorium semiserratum 70. Eupatorium serotinum 71. Eupatorium sessilifolium upland boneset 72. Eupatorium sessilifolium var. brittonianum 73. Eupatorium sessilifolium var. sessilifolium 74. Eupatorium sessilifolium var. vaseyi 75. Eupatorium sinuatum 76. Eupatorium solidaginifolium 77. Eupatorium sonorae 78. Eupatorium sordidum 79. Eupatorium steelei 80. Eupatorium triplinerve 81. Eupatorium villosum 82. Eupatorium x pinnatifidum 1.1.2. Thµnh phÇn ho¸ häc [2] B¶ng 1: C¸c germacradienolit tõ chi Eupatorium E. altisiimum 10 (ex triploid) 2c, 2b,d E. cannabium 1f, 1a, 1a, d,f,g,i,2d,3b E. chinense var. sachalinenese 2e, f,1f,9a-c E.cuneifolium 3c E. formosanum 1a E. fortunei 1f,8 E. hyssopifolium 7b,f,i,7f,6c,7c,f, j E.lancifolium 4a E.mikanioides 3a, c, e-h E.perfoliatum E.semiserratum 3c,d, 3c E. serotium 1c,e,6a,b,7a,c,d,1c,e,6a,b,7a,c,d, 1b,7d,e,g,h E.seeilifolium 2a 1a R = H 2a R = A 3a R = H 7 O OR OH O O 11 13 O O OR OH OR O b R = H b R = C b R=Ac c R = B c R = E c R=K d R = C d R = F d R=L e R = D e R = G e R=T f R = F f R = I f R=U g R = I g H 11 α ,13-dihydro R=A g R=V h R = S h R=W i R = X 4a R=L 5a R=J 6a R=CH 2 OH, R 1 =Ac b R= 11,13dihydro R=A b R=O b R=CH 2 OH, R 1 = A c R=CH 2 OH, R 1 = C d R=CO 2 H, R 1 = Q 7a R=H,R1=A 7f R=OH,R1=C b R=H,R1=C g R=OH,R1=J c R=H,R1=J h R=OH, R1=Q d R=H,R1=Q i R=OH, R1=Y e R= OH,R1=A j R=H, R1=Y 8 R=F 9a R,R1=Ac 10a R=Gluc b R=H,R1=F c R=OH,R1=F 11 Elemadienolit tõ E. serotinum 8 OH OH OR O OH OR O O O R O OR 1 O 11 13 OH O R O OR 1 O OR 1 O OR O O OAc OR RO O O O O CO 2 H O O 12a R=H,R1=A 13a R=H, R1=C 14a R=J,R1=H b R=h, R1=C b R=Ac, R1=H b R=T or ent- T R1=H c R=H, R1=F c R=Ac, R1=A c R=H, R1= O d R=Ac,R1=B d R=Ac, R1=B e R=Ac,R1=F e R=AcC,R1=C f RT=Ac,R1=H f R=Ac, R1=F g R=Ac, R1=G h R=Ac, R1=M B¶ng 2: C¸c heliangolit tõ chi Eupatorium E. altissimum 12a- c, 13a, e,f, 15a,b E. cannabinum 13f,13b,c,e,f E. chinense var.sachalinense var. simplicifolium 13b,f,h ,16c ,12d ,13d E. cuneifolium 14a,b,18a,c,19a E. formosanum 12f, 12e E. hissopiforlium 16a,b E. lanciforlium 18a,b,19a E. lindleyanum 17a- d E. recurvans 14c,18d,19b 15a R= A, 16a R 1 =Me, R 2 =H, R 3 = CH 2 OH, R 4 = C 9 O RO O OR 1 O O RO OR 1 OR O O AcO OR 1 O O O OR R3 R1 O O R2 OR 4 b R= C, b R 1 = Me, R 2 =H, R 3 =CH 2 Ac,R 4 = C c R 1 =CHO, R 2 =OH, R 3 =Me, R 4 =O B¶ng 3: C¸c guaianolit tõ chi Eupatorium E. altissimum 20b – d, 25a-c,24a,30a,3b E. canabinum 20f E. chinese var. hakonense var.japonicum var. simplicifolium 20a,f,h,i,22a-c,32,20r,25d,26a,29d E. perfoliatum 35,38,37 E. rotundifolium 23a,25e,f,26d,28,29a,c,31 E. sesilifolium 30a,33 17a α- OAc, R=B 18a R = H,R 1 = J 19a R = J b α - Oac, R=C b R = Ac, R 1 = J b R = O c β - Oac, R=B c R = Ac, R 1 =T or ent-T d β - Oac, R=C d R = Ac, R 1 = O H×nh 2: C¸c heliangolit tõ chi Eupatorium 20a R, R 1 = H, R 2 =F 21a R = H, R 1 = A 22a R = H b R = H, R 1 = OH, R 2 =A b R = H, R 1 = J b R = OH 10 AcO O O RO O O RO OR 1 O OH OH O O OR 1 AcO OH O OR 2 R R1 RO O RO R O OF R . đề tài Nghiên cứu thành phần hoá học tinh dầu cây cỏ l o (Eupatorium odoratum L. ) ở Nghệ An và Hà Tĩnh từ đó góp phần xác định thành phần hoá học và tìm. định thành phần hoá học của tinh dầu cây cỏ l o ở Vinh Nghệ An 34 3.1.1. Nguyên liệu thực vật 34 3.1.2. Xác định thành phần hoá học 34 3.2. Xác định thành