BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN : CÔNG NGHỆ SINH HỌC BỘ MÔN : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Lớp : DHO4SH Lớp : DHO4SH BÀI THUYẾT TRÌNH BÀI THUYẾT TRÌNH LAI PHÂN TỬ LAI PHÂN TỬ (DNA Hybridization) (DNA Hybridization) 1. 1. Lê Duy Hoàng Chương Lê Duy Hoàng Chương 2. Lê Vũ Hồng Hải 2. Lê Vũ Hồng Hải 3. Nguyễn Thúy Hằng 3. Nguyễn Thúy Hằng 4. Đặng Cao Hạnh 4. Đặng Cao Hạnh 5. Vũ Quang Hiếu 5. Vũ Quang Hiếu 6. Huỳnh Thanh Hồng 6. Huỳnh Thanh Hồng 7. Trần Ánh Hồng 7. Trần Ánh Hồng 8. Nguyễn Thị Tuyết Nga 8. Nguyễn Thị Tuyết Nga 9. Mã Phạm Quế Mai 9. Mã Phạm Quế Mai Thành viên : Thành viên : DÀN BÀI CHUNG DÀN BÀI CHUNG I-Lịch sử lai phân tử II–Cơ sở của sự lai phân tử II–Cơ sở của sự lai phân tử III-Các phương pháp lai phân tử III-Các phương pháp lai phân tử IV-Ứng dụng của lai phân tử IV-Ứng dụng của lai phân tử Tài liệu tham khảo Tài liệu tham khảo I-Lịch sử lai phân tử: - 1960 Julius Marmur và những đồng nghiệp của ông quản lý, ngành học tại đại học Harvard đã khám phá ra quá trình ủ lại (reannealing). Quá trình này bao gồm sự kết hợp lại của những mạch đơn thành các phân tử 2 mạch đôi bền vững. Từ sự khám phá ra quá trình reannealing, phương pháp lai các sour nucleic được phát triển. triển. - Sử dụng kỹ thuật những mạch bổ sung từ các nguồn khác nhau của acid nucleic có thể trộn lẫn thành dạng phân tử 2 mạch đôi được đặt tên là thể lai (hybrid). Sử dụng lai DNA như một kỹ thuật so sánh dùng cặp base bổ sung để đối chiếu bộ gene chứa toàn bộ nội dung di truyền của 2 loài khác nhau và đánh giá những điểm tương đồng giữa chúng.  Mục đích : Từ sự phát triển đó, việc lai phân tử mở rộng ra nhiều kỹ thuật khác nhau và được dùng vào những mục đích đa dạng. Khi một phân tử DNA mạch đôi Khi một phân tử DNA mạch đôi được đun lên một nhiệt độ vượt quá được đun lên một nhiệt độ vượt quá “nhiệt độ nóng chảy” (Tm) thì hai “nhiệt độ nóng chảy” (Tm) thì hai mạch sẽ tách rời nhau do sự phá vỡ mạch sẽ tách rời nhau do sự phá vỡ các liên kết hydro nối liền hai mạch. các liên kết hydro nối liền hai mạch. II–Cơ sở của sự lai phân tử : II–Cơ sở của sự lai phân tử : 1–Khái niệm về “nhiệt độ nóng chảy “ 1–Khái niệm về “nhiệt độ nóng chảy “ của DNA : của DNA : Đường cong Tm Đường cong Tm - Ảnh hưởng của các thành phần - Ảnh hưởng của các thành phần base trong phân tử DNA . base trong phân tử DNA . - Ảnh hưởng của độ dài đoạn - Ảnh hưởng của độ dài đoạn DNA . DNA . - Ảnh hưởng của các điểm bắt - Ảnh hưởng của các điểm bắt cặp sai lệch (các mismatch) . cặp sai lệch (các mismatch) . - Ảnh hưởng của môi trường - Ảnh hưởng của môi trường phản ứng phản ứng . 2–Các nhân tố ảnh hưởng đến “nhiệt độ 2–Các nhân tố ảnh hưởng đến “nhiệt độ nóng chảy” của DNA : nóng chảy” của DNA : - Sau khi hai mạch của phân tử DNA tách - Sau khi hai mạch của phân tử DNA tách rời nhau dưới tác động của Tm, sự bắt cặp sẽ rời nhau dưới tác động của Tm, sự bắt cặp sẽ không xảy ra nếu nhiệt độ phản ứng hạ xuống không xảy ra nếu nhiệt độ phản ứng hạ xuống đột ngột. đột ngột. - Lúc đó phân tử DNA sẽ tồn tại trong môi - Lúc đó phân tử DNA sẽ tồn tại trong môi trường ở dạng mạch đơn dưới một cấu hình trường ở dạng mạch đơn dưới một cấu hình không gian vô trật tự. Ngược lại, nếu sau khi hai không gian vô trật tự. Ngược lại, nếu sau khi hai mạch tách rời, nhiệt độ được gíảm từ từ cộng mạch tách rời, nhiệt độ được gíảm từ từ cộng với điều kiện thí nghiệm thích hợp, hai mạch sẽ với điều kiện thí nghiệm thích hợp, hai mạch sẽ bắt cặp trở lại. bắt cặp trở lại.   Hiện tượng này được gọi là sự lai phân Hiện tượng này được gọi là sự lai phân tử (molecular hybridization). tử (molecular hybridization). 3-Khái niệm về lai phân tử : 3-Khái niệm về lai phân tử : [...]... xảy ra giữa hai trình tự hoàn toàn bổ sung  Các trình tự bổ sung có thể là DNA hay RNA, dẫn đến sự hình thành các phân tử DNA-DNA, RNA-RNA hay các phân tử lai DNA-RNA 4-Các yếu tố ảnh hưởng đến sự lai phân tử : 4-1 Nồng độ DNA và thời gian phản ứng - Nồng độ DNA, nghĩa là số lượng các trình tự bổ sung, càng cao thì xác suất tiếp xúc với nhau càng tăng ;  tốc độ phản ứng lai phân tử tăng lên - Thời... hoàn toàn không còn tác dụng III-Các phương pháp lai phân tử : Các phương pháp lai phân tử rất đa dạng, cơ bản có thể chia thành 3 nhóm lớn : - Lai trong pha lỏng - Lai trên pha rắn - Lai tại chỗ (in situ hybridization) 1 -Lai trong pha lỏng : 1-1 Nguyên tắc : - Các mạch đơn nằm trong môi trường lỏng là một dung dịch đệm - Sự lai phân tử xảy ra khi các trình tự này gặp nhau do chuyển động nhiệt và khi... mạch của cùng một phân tử Hình - Các bước lai trên pha rắn Khuyết điểm : + Phân tích định lượng các phân tử lai kém chính xác + Hiệu quả thấp + Vận tốc lai trên pha rắn . phương pháp lai phân tử IV-Ứng dụng của lai phân tử IV-Ứng dụng của lai phân tử Tài liệu tham khảo Tài liệu tham khảo I-Lịch sử lai phân tử: - 1960 Julius. viên : DÀN BÀI CHUNG DÀN BÀI CHUNG I-Lịch sử lai phân tử II–Cơ sở của sự lai phân tử II–Cơ sở của sự lai phân tử III-Các phương pháp lai phân tử III-Các