Đang tải... (xem toàn văn)
luận văn
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI -------------***-------------- PHẠM THỊ LAN HƯƠNG ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ HỌC BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG TẠI MỘT SỐ TỈNH MIỀN BẮC GIAI ðOẠN 2005-2009 LUẬN VĂN THẠC SỸ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Thú y Mã số : 60.62.50 HÀ NỘI - 2010 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 3 LỜI CẢM ƠN Trong suốt quá trình thực tập và hoàn thành luận văn tôi ñã nhận ñược sự giúp ñỡ, hướng dẫn tận tình của nhiều cá nhân và tập thể. Cho phép tôi ñược bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới: - TS. Tô Long Thành – Trung tâm Ch ẩn ñoán Thú y Trung Ương - PGS. TS Lê Th ị Ngọc Diệp – Giảng viên bộ môn Nội – Chẩn- Dược- ðộc chất. Khoa Thú y. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội Nhân ñây tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới những người thân và bạn bè ñã giúp ñỡ tôi trong thời gian thực hiện ñề tài này. Hà N ội, ngày 8 tháng 12 năm 2009 Học viên Ph ạm Thị Lan Hương Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 4 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan toàn bộ kết quả nghiên cứu trong luận văn này là hoàn toàn trung th ực cũng như chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ bất kỳ một học v ị nào. Các số liệu, thông tin trích dẫn ñều ñược ghi rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày 10 tháng 12 năm 2009 Tác gi ả Ph ạm Thị Lan Hương Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 5 DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 1 Bảng 4.1. Tình hình chăn nuôi gia súc trên ñịa bàn Hà Nội từ n ăm 2005 ñến tháng 6/2009 45 2 Bảng 4.2. Tình hình chăn nuôi gia súc tại tỉnh Thái Bình từ năm 2005 ñến tháng 6/2009 48 3 Bảng 4.3. Tình hình chăn nuôi gia súc tại tỉnh Sơn La từ năm 2005 ñến tháng 6/2009 50 4 Bảng 4.4. Tình hình chăn nuôi gia súc tại tỉnh Lạng Sơn từ năm 2005 ñến tháng 6/2009 51 5 Bảng 4.5. Tình hình dịch bệnh LMLM giai ñoạn 2005 ñến tháng 6/2009 53 6 Bảng 4.6. Kết quả phát hiện kháng nguyên, ñịnh type virus LMLM ở trâu, bò, lợn tại một số tỉnh miền Bắc giai ñoạn 2005-2009 55 7 Bảng 4.7. Kết quả chẩn ñoán huyết thanh của trâu bò bằng phương pháp 3ABC- ELISA b ằng bộ CHECKIT FMD- 3ABC-BO-OV 56 8 Bảng 4.8. Kết quả chẩn ñoán huyết thanh của lợn bằng phương pháp 3ABC- ELISA b ằng bộ CHECKIT FMD- 3ABC-BO-PO 57 9 Bảng 4.9. Tình hình sử dụng vacxin vô hoạt nhũ dầu nhị giá O- Asia1 trong n ăm 2008 tại một số tỉnh miền Bắc 59 10 Bảng 4.10. Kết quả kiểm tra kháng thể LMLM trong huyết thanh c ủa trâu bò sau khi tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu nhị giá type O- Asia1 t ại 4 tỉnh miền Bắc, bằng bộ KIT LPB-ELISA của Pirbright (Anh) 61 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 6 11 Bảng 4.11. Diễn biến dịch LMLM ở trâu, bò và lợn tại tỉnh Thái Bình t ừ năm 2005 ñến năm 2009 66 12 Bảng 4.12. Hệ số năm dịch của từng năm ở trâu bò từ năm 2005- 2009 t ại tỉnh Thái Bình 67 13 Bảng 4.13. Hệ số năm dịch của từng năm ở lợn từ năm 2005- 2009 t ại tỉnh Thái Bình 66 14 Bảng 4.14. Tỷ lệ hiện mắc bệnh của trâu, bò tại tỉnh Thái Bình t ừ năm 2005- 2009 69 15 Bảng 4.15. Tỷ lệ hiện mắc bệnh của lợn tại tỉnh Thái Bình từ n ăm 2005- 2009 70 16 Bảng 4.16. Tỷ lệ tử vong bệnh LMLM ở trâu, bò, lợn tại tỉnh Thái Bình giai ñoạn 2005-2009 71 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 7 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AND : Axit desoxyribonucleic ARN : Axit ribonucleic FMD : Food and mouth disease OIE : Office International des Epizooties PCR : Polymerase Chain Reaction RT-PCR : Reverse Transcription- Polymerase Chain Reaction ELISA : Enzym Linked Immuno Sorbent Assay LPB : Liquid Phase Blocking OD : Optical Density BHK-21 : Baby Hamster Kidney, line 21 HSND : H ệ số năm dịch LMLM : L ở mồm long móng TLLH : T ỷ lệ lưu hành TLTV : T ỷ lệ tử vong CSMBTBT : Ch ỉ số mắc bệnh trung bình tháng T ðTB : Tổng ñàn trung bình TLHM : T ỷ lệ hiện mắc Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 8 MỤC LỤC PHẦN I. MỞ ðẦU…………………………………………………………1 1.1. ðặt vấn ñề……………………………………………………………….1 1.2. M ục tiêu ñề tài………………………………………………………… 2 1.3. Ý ngh ĩa khoa học và thực tiễn………………………………………… 2 1.4. ðối tượng và phạm vi nghiên cứu………………………………………2 PH ẦN II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU VÀ CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ðỀ TÀI………………………………………………………………………… 3 2.1. L ịch sử bệnh LMLM……………………………………………………3 2.1.1. Tên g ọi……………………………………………………………… .3 2.1.2. Khái ni ệm bệnh LMLM………………………………………………3 2.1.3. Tình hình nghiên c ứu bệnh LMLM trên thế giới…………………… 3 2.1.4. Tình hình nghiên c ứu bệnh LMLM ở Việt Nam…………………… .5 2.2. Các ñặc tính sinh học của virus…………………………………………6 2.2.1. Hình thái, c ấu trúc…………………………………………………….6 2.2.2. Quá trình xâm nh ập và nhân lên của virus……………………………8 2.2.3. ðặc tính nuôi cấy…………………………………………………….12 2.2.4. S ức ñề kháng và sự tồn tại của virus……………………………… .13 2.2.5. ðộc lực của virus…………………………………………………….14 2.2.6. Phân lo ại virus……………………………………………………….15 2.3. ðặc ñiểm dịch tễ học bệnh LMLM……………………………………16 2.3.1. Loài v ật mắc bệnh………………………………………………… .16 2.3.2. Chất chứa mầm bệnh và sự lây lan………………………………… 16 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 9 2.3.3. ðường xâm nhập của virus………………………………………… 17 2.3.4. C ơ chế sinh bệnh…………………………………………………….18 2.4. Các bi ểu hiện ñặc trưng của bệnh LMLM…………………………….18 2.4.1. Tri ệu chứng lâm sàng……………………………………………… 18 2.4.2. B ệnh tích…………………………………………………………….19 2.5. Các ph ương pháp chẩn ñoán bệnh LMLM…………………………….20 2.5.1. Ch ẩn ñoán lâm sàng…………………………………………………20 2.5.2. Ch ẩn ñoán trong phòng thí nghiệm………………………………….21 2.5.2.1. Ch ẩn ñoán virus học……………………………………………….21 2.5.2.2. Ch ẩn ñoán bằng phản ứng kết hợp bổ thể…………………………21 2.5.2.3. Ch ẩn ñoán bằng các phản ứng trung hòa virus……………………22 2.5.2.4. Ch ẩn ñoán bằng phản ứng ELISA…………………………………22 2.5.2.5. Ch ẩn ñoán bằng kỹ thuật RT-PCR……………………………… 28 2.6. Vacxin phòng b ệnh…………………………………………………….28 2.6.1. Vacxxin vô ho ạt formol keo phèn………………………………… 29 2.6.2. Vacxin vô ho ạt nuôi cấy trên môi trường tế bào…………………….29 2.6.3. Vacxin nh ược ñộc……………………………………………………29 2.6.4. Vacxin ñược sản xuất theo công nghệ gen………………………… 30 2.6.5. Nh ững ñiều cần chú ý khi sử dụng vacxin………………………… 30 PH ẦN III. NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C ỨU…………………………………………………………….31 3.1. N ội dung nghiên cứu………………………………………………… .31 3.2. Nguyên li ệu……………………………………………………………31 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 10 3.2.1. Bệnh phẩm………………………………………………………… .31 3.2.2. Hóa ch ất…………………………………………………………… .31 3.2.3. B ộ CHEKIT FMD – 3ABC – BO – OV và bộ CHEKIT FMD – 3ABC – PO c ủa Bommeli Diagnostics (Thuỵ Sĩ) ……………………………… .31 3.2.4. B ộ KIT LPB – ELISA của Pirbright (Anh) ñể phát hiện kháng thể LMLM trong huy ết thanh trâu bò ñã tiêm phòng vacxin 3.3. Ph ương pháp nghiên cứu………………………………………………32 3.3.1. Ph ương pháp dịch tễ học mô tả, dịch tễ học phân tích………………32 3.3.2. ðịnh lượng các chỉ tiêu dịch tễ…………………………………… 32 3.3.2.1. H ệ số năm dịch (HSND)………………………………………… 33 3.3.2.2. T ỷ lệ hiện mắc (TLHM)………………………………………… .33 3.3.2.3. T ỷ lệ mới mắc…………………………………………………… 33 3.3.2.4. T ỷ lệ tử vong………………………………………………………33 3.3.2.5. Nguy c ơ tương ñối…………………………………………………34 3.3.3. Ph ương pháp lấy mẫu và bảo quản………………………………… 34 3.3.4. Ph ương pháp 3ABC – ELISA……………………………………….35 3.3.5. Ph ương pháp Liquid Phase Blocking ELISA (LPB – ELISA)…… .39 3.4. X ử lý số liệu………………………………………………………… .43 PHẦN IV. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1. Tình hình ch ăn nuôi gia súc tại một số tỉnh miền Bắc trong những năm g ần ñây…………………………………………………………………… 44 4.1.1. Tình hình ch ăn nuôi gia súc tại Hà Nôi…………………………… .44 4.1.2. Tình hình ch ăn nuôi gia súc tại Thái Bình………………………… 47 4.1.3. Tình hình ch ăn nuôi gia súc tại Sơn La…………………………… .49 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 11 4.1.4. Tình hình chăn nuôi gia súc tại Lạng Sơn………………………… .50 4.2. Khái quát tình hình d ịch bệnh LMLM ở Việt Nam từ năm 2005 ñến 2009 (tính ñến tháng 6/2009)………………………………………………52 4.3. K ết quả chẩn ñoán, ñịnh typ virus LMLM…………………………….55 4.3.1. Phát hi ện kháng nguyên, ñịnh typ virut LMLM…………………… 55 4.3.2. Phát hi ện kháng thể virus LMLM do nhiễm tự nhiên trong huyết thanh c ủa trâu, bò…………………………………………………………………56 4.3.3. Phát hi ện kháng thể virus LMLM do nhiễm tự nhiên trong huyết thanh c ủa lợn…………………………………………………………………… .57 4.4. ðánh giá hiệu quả của công tác tiêm phòng bệnh LMLM…………….58 4.4.1. Tình hình tiêm phòng vacxin vô ho ạt nhũ dầu nhị giá O-Asia1 cho ñàn gia súc m ột số tỉnh miền Bắc trong năm 2008…………………………… 58 4.4.2. K ết quả kiểm tra kháng thể trong huyết thanh của trâu bò sau khi tiêm vacxin vô ho ạt nhũ dầu nhị giá O-Asia1……………………………………60 4.5. Xác ñịnh trình tự gen của các chủng virut LMLM trong những năm gần ñây………………………………………………………………………….62 4.6. M ột số ñặc ñiểm dịch tế bệnh LMLM ở trâu, bò, lợn trên ñịa bàn Thái Bình t ừ năm 2005-2009…………………………………………………….64 4.6.1. Di ễn biến dịch……………………………………………………….64 4.6.2. Hình thái, m ức ñộ năm dịch…………………………………………67 4.6.2.1. Trên trâu bò……………………………………………………… 67 4.6.2.2. Trên l ợn……………………………………………………………68 4.6.3. T ỷ lệ hiện mắc……………………………………………………….69 [...]... và ñi ñ n thanh toán b nh LMLM gia súc Xu t phát t v n ñ trên, chúng tôi ti n hành nghiên c u ñ tài: “ ð c ñi m d ch t h c b nh L m m Long móng t i m t s t nh mi n B c giai ño n 2005- 2009 1.2 M C TIÊU ð TÀI - Kh o sát tình hình d ch b nh LMLM t i Vi t Nam t năm 2005- 2009 - ðánh giá hi u qu công tác tiêm phòng b nh LMLM t i m t s t nh mi n B c - Xác ñ nh trình t gen c a các ch ng virut LMLM trong nh... NH L KHOA H C C A ð TÀI M M LONG MÓNG 2.1.1 Tên g i: có nhi u tên g i theo các ti ng khác nhau như - Foot and Mouth Disease (FMD) - Aphetae Epizooticae (tên Latinh) - Feivre Aphteuse (tên ti ng Pháp) - Fiebre Aftosa (tên ti ng Tây Ban Nha) - Hoof and mouth Disease 2.1.2 Khái ni m b nh LMLM B nh L m m Long móng (LMLM) là m t b nh truy n nhi m c p tính nguy hi m c a ñ ng v t móng gu c ch ñôi ch n như :... mã hoá cho axit amin ñó ñ x p ñ t nó vào v trí tương t ng trên m ch polynucleotit ñang ñư c t ng h p Giai ño n này x y ra trên riboxom c a t bào Quá trình t ng h p protein c u trúc c a virus thư ng x y ra sau khi t ng h p axit nucleic * Giai ño n k t h p các thành ph n c a virus hay giai ño n l p ráp: Giai ño n này thư ng x y ra ñư c t ng h p g n màng t bào, axit nucleic và protein các nơi khác nhau... nhân virus và sinh t ng h p protein t o nên v capxit Cơ ch t ñ t ng h p lên hai lo i trên là nguyên li u c a t bào cung c p, còn virus ch ñóng vai trò ñi u khi n Giai ño n t ng h p các thành ph n c a virus có th chia ra các giai ño n ph sau: + Giai ño n sao chép thông tin (bư c sao s m): H th ng thông tin di truy n ñ c trưng ñư c ch a trong axit nucleic c a virus ð s sao chép thông tin di truy n ñư c... ngoài………………………………………………………… 79 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p…………… 12 PH N I M ð U 1.1 ð T V N ð B nh L m m Long móng là m t b nh truy n nhi m nguy hi m, do virus gây ra và gây thi t h i kinh t l n ñ i v i ñ ng v t có móng gu c ch n như trâu, bò, dê, c u, hươu…T ch c Thú y th gi i (OIE) x p b nh này v trí s 1 trong b ng A (b ng các b nh truy n nhi m nguy hi m c... và hình thành m n nư c sơ phát Sau ñó, virus ch a trong d ch lâm ba và s ti n vào máu, ph t ng Khi virus vào máu s gây s t, cu i giai ño n s t, virus nhân lên và gây ra các m n nư c th phát nơi nh ng t bào thư ng bì ñang phân chia m nh như niêm m c, xoang mi ng, vành móng, k móng, ñ u vú bò s a, mõm l n M n nư c phát tri n to d n ra, nhô lên nhưng không bao gi sinh m khi không có vi trùng k phát Sau... trong khoang mi ng (lư i, l i), quanh mũi, vành ti p giáp da v i móng chân, k chân và các ñ u vú (ñ i v i bò s a) Kèm theo các tri u ch ng trên là hi n tư ng con v t b què do b ñau chân gây khó khăn trong khi di chuy n ð i v i l n da tr ng, có th xu t hi n các v t ñen trên móng chân màu tr ng Thông thư ng l n m c b nh thư ng d b t t móng chân hơn bò Tuy nhiên, vi c ch n ñoán lâm sàng thư ng d b nh... ARN trung gian có nhi m v : - Làm nhi m v thông tin ñ t ng h p nên protein c u trúc - ðư c s d ng làm khuôn m u t ng h p ARN m i - Làm nguyên li u t o nhân virus m i + Giai ño n t ng h p protein c u trúc (protein m i, bư c d ch mu n): là giai ño n phiên d ch mã c a ARN thông tin Các axit amin trư c khi tham gia vào quá trình sinh t ng h p protein ñã ñư c ho t hoá nh h th ng men ñ c bi t có trong nguyên... ðăng Kh i và c ng s ñã s d ng k thu t ELISA ñ ch n ñoán và ñ nh type virus LMLM nư c ta [3] Năm 2003, H ðình Chúc và Ngô Thanh Long ñã s d ng phương pháp 3ABC- ELISA ñ phát hi n kháng th c a trâu bò b nhi m virus LMLM, phân bi t v i kháng th do vacxin LMLM t o nên Năm 2004, Tô Long Thành và c ng s ñã thi t l p ñư c phương pháp RT - PCR ñ ch n ñoán ñ nh type virus LMLM trong b nh ph m thu nh p t th c... v t c m th [14] 2.3 ð C ðI M D CH T H C B NH LMLM 2.3.1 Loài v t m c b nh - V t nuôi: T t c các ñ ng v t móng gu c ch ñôi bao g m trâu bò, dê, c u, l n và hưu là nh ng ñ ng v t c m nhi m t nhiên v i virus LMLM ð ng v t non m n c m hơn v i ñ ng v t trư ng thành Ng a và các ñ ng v t thu c loài m t móng khác không c m nhi m v i b nh - ð ng v t hoang dã: Voi, l c ñà, l n r ng, bò r ng, sơn dương, nhi u
