Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu quy trình lên men kết hợp để sản xuất bào tử nấm Metarhizium và khả năng diệt mối của bào tử nấm qua lây nhiễm
Phần IMở đầu1.1. Đặt vấn đề Mối (isoptera) là loài côn trùng có phạm vi phân bố rộng, a nhiệt chúng sống ở vùng có điều kiện khí hậu nhiệt đới và cận nhiệt đới. Chúng sống trong thân đê, thân đập, trong rừng, đồi, các thân cây gỗ, đồ dùng bằng gỗ ., khác với nhiều loại côn trùng đơn sinh mỗi tổ mối là một đơn vị sống hoặc đợc coi là một xã hội riêng biệt, trong mỗi tổ mối tuỳ theo từng loài có từ vài trăm đến chục triệu con, chúng sinh sản rất nhanh và có phạm vi phân bố rộng. Trên thế giới đã giám định đợc trên 2700 loài, ở nớc ta đã giám định đợc 106 loài. Thức ăn chủ yếu của mối là xenllulo cho nên ngời ta đã khám phá đợc vai trò của mối nh nó giúp cho sự phân huỷ thảm thực vật nhanh chóng, chúng góp phần cải tạo tính chất vật lí của đất thông qua việc đào bới thờng xuyên. Ngoài ý nghĩa về mặt tự nhiên mối còn cung cấp nguyên liệu cho ngành y tế nh làm thuốc chữa bệnh thấp khớp và tổ mối đợc các nhà kiến trúc s áp dụng trong các công trình kiến trúc Nhng xét về tổng thể thì mối vẫn là loài gây hại. Do mối là côn trùng chuyên dinh dỡng trên các nguồn thức ăn có chứa xenlullo nên mối gây hại nhà cửa, công trình xây dựng bằng gỗ, đê điều nhng đặc biệt nguy hiểm hơn mối đợc xem là ẩn hoạ thân đê, đe doạ nghiêm trọng đến cuộc sống của con ngời. Theo nghiên cứu sơ bộ nớc ta thì sức phá hoại của chúng thật ghê gớm. Ngoài ra, mối còn phá hại cây công nghiệp và cây hoa màu nh: cao su, cà fê, chè, bông, cây lạc, sắn . làm cho cây chết hoặc sinh trởng kém, còi cọc từ đó ảnh hởng đến năng suất, chất lợng cây trồng. Trong các loài mối gây hại phải kể đến các loài mối nhà Coptotermes, chúng phá hại các trang thiết bị đồ dùng bằng gỗ, đặc biệt hơn là các di tích lịch sử. Hàng năm mối làm cho hàng chục ngôi nhà và các di tích lịch sử có nguy cơ bị sụp . Chính vì vậy chúng ta cần phòng và trừ mối. Hiện nay có nhiều phơng pháp phòng và diệt mối nh phơng pháp hoá học, vật lý, thủ công Tuy nhiên các ph ơng pháp trên còn tồn tại những hạn chế. Phơng pháp hoá học do thuốc không thể tác dụng trực tiếp đến tổ mối đợc, khó tìm tổ mối chính, mùi vị bị mối phát hiện nhanh chóng, chi phí cho mỗi lần nh thế tốn kém, đồng thời dẫn đến tính kháng thuốc và nguy hiểm hơn là phơng pháp này ảnh hởng trực tiếp tới sức khỏe con ngời và môi trờng nếu lợng thuốc sau xử lí thừa hoặc phân huỷ không hết còn tồn d lại. Phơng pháp vật lí gặp khó khăn trong việc xác định tổ mối vì trên các con đê đập tổ mối thờng nằm sâu trong lòng đất. Hiện nay, một hớng phòng trừ mối mới đang đợc mở ra đó là biện pháp phòng trừ sinh học, hiện nay phơng pháp này đã và đang có rất nhiều công trình khoa học ngiên cứu đã chỉ ra rằng mối cũng bị kí sinh và gây bệnh do nấm (Metarhizium, Beauveria) và vi khuẩn Bacillus, .gây ra. Trong các chủng vi sinh vật kể trên thì Metarhizium là chủng nấm có hiệu lực diệt mối mạnh nhất. Mặt khác bào tử nấm có kích thớc bé (trung bình vàimà) chúng lại không có mùi vị nên mối khó phát hiện. Cơ chế gây hại của bào tử nấm Metarhizium nh sau: Khi bào tử nấm bám dính trên cơ thể mối, gặp điều kiện thích hợp sau 24 giờ sẽ nảy mầm thành ống đâm xuyên qua lớp vỏ kitin hút dinh dỡng đồng thời tiết chất độc giết chết mối. Đây là cơ sở khả năng diệt mối một cách lâu dài, hiệu quả và rất an toàn đối với môi trờng và con ngời. Đây là một phơng pháp diệt trừ mối rất hay và đang là một hớng đi mới rất khả thi, tuy nhiên các công trình nghiên cứu trớc chỉ mới giải quyết ở mức độ hoàn thành một khâu trong cả quá trình. Do vậy để khẳng định và đánh giá hiệu lực diệt mối của chế phẩm Metarhizium. Vì vậy chúng tôi quyết định thực hiện đề tài. Nghiên cứu quy trình lên men kết hợp để sản xuất bào tử nấm Metarhizium và khả năng diệt mối của bào tử nấm qua lây nhiễm1.2. Mục đích và yêu cầu1.2.1. Mục đích:- Hoàn thành quy trình lên men kết hợp để sản xuất bào tử nấm Metarhizium (m4; m5) trong phòng trừ mối. - Đánh giá khả năng diệt mối bằng trực tiếp và lây nhiễm của chế phẩm Metarhizium (m4; m5) sau lên men kết hợp.1.2.2. Yêu cầu:- Xác định đợc đặc điểm hình thái của nấm Metarhizium (M4; M5).- Quan sát sự phát triển của bào tử nấm Metarhizium trên môi trờng nuôi cấy kết hợp khác nhau.- Xác định sự ảnh hởng của các yếu tố: Lợng mẫu, thời gian lên men kết hợp đến sự hình thành bào tử nấm Metarhizium.- Thử khả năng diệt mối của bào tử chủng Metarhizium (M4; M5) sau khi lên men kết hợp bằng phơng pháp lây nhiễm và trực tiếp. Phần II Tổng quan tài liệu2.1. Giới thiệu về Metarhizium anisopliae Sorok.2.1.1. Sơ lợc về lịch sử ra đời của Metarhizium.Từ những năm 70 của thế kỷ xix, các nhà khoa học trên thế giới đã nghiên cứu và nhận thấy nhiều loại côn trìng bị nhiễm bệnh và chết bởi các chủng vi nấm thuộc lớp nấm bất toàn (Deutermyceter).Năm 1878, nhà bác học ngời Nga Metschnhikov trong khi nghiên cứu bệnh của bọ cứng hại lúa mì để tìm phơng pháp phòng trừ đã phát hiện bệnh nấm xanh (nấm Entomophthora, nay đổi tên là Metarhizium anisopliae). ông đã cùng ngời học trò của mình là Isac Craxinstic nghiên cứu môi trờng nuôi cấy loài nấm này cho việc thử nghiệm hàng nghìn kilogram nấm để tách bào tử thuần khiết và đem thử nghiệm sâu non bọ đầu dài (Boxthinoderes punctriventric) hại củ cải đờng. Kết quả là sau khi dùng bào tử và chất bột nền để tung ra đồng ruộng diệt sâu non đã cho hiệu quả gây chết 55-80% sau 10-14 ngày. Kể từ đó nhiều công trình nghiên cứu lớn, nhỏ về khả năng ứng dụng Metarhizium cho phòng trừ nhiều đối tợng gây hại khác nhau đã đợc tiến hành. Cho đến nay đã xác định đợc hơn 200 loài côn trùng là đối tợng tấn công của loại nấm này trong đó có cả loài mối là loại côn trùng đặc biệt nguy hại đối với chúng ta. 2.2.2. Đặc điểm hình thái của Metarhizium anisopliaeMetarhizium anisopliae thuộc họ moniliaceae, bộ nấm bông moniliales, lớp nấm bất toàn Deuteromycetes (Fungi imperfecty), có kiểu phát sinh bào tử trần của nhóm Hyphomycetes [4]. Trong chi Metarhizium có hai loại nấm đợc xác định nhiều trong việc kí sinh gây bệnh cho côn trùng đó là Metarhizium anisopliae và Metarhizium flavoviride.Nấm Metarhizium có màu lục hoặc xanh lục nên ngời ta gọi là nấm lục cơng. Đặc điểm hình thái: Sợi nấm phát triển trên bề mặt côn trùng có màu từ trắng đến hồng, cuống sinh bào tử ngắn, mọc tỏa tròn trên đầu sợi nấm dày đặc. Bào tử trần hình que 3,5 x 6, 4 x 7,2mà. Màu từ lục xám đến oliu đến lục. Bào tử xếp thành hình chuỗi khá chặt chẽ và nhìn bằng mắt thờng ngời ta có thể thấy bào tử đợc tạo ra trên bề mặt cơ thể côn trùng một lớp phấn khá rõ màu xanh lục [14].Nấm Metarhizium anisopliae có bào tử dạng hình trụ, hình hạt đậu, khuẩn lạc có màu xanh hoặc hồng. Chúng phát triển nhanh trên môi trờng Czapek- Dox khi nuôi ở nhiệt độ 28oC (nuôi trong tủ định ôn) sau 8 10 ngày nuôi cấy thì khuẩn lạc có đờng kính 7 - 8,5 cm. Loại nấm Metarhizium anisopliae có hai loài là dạng bào tử nhỏ và lớn. Tuy nhiên Metarhizium anisopliae là chủng gây bệnh mạnh nhất trên côn trùng thuộc bộ cánh cứng Coleoptera.2.1.3. Đặc điểm sinh lý sinh hoá của Metarhizium anisopliae.Nấm Metarhizium anisopliae sinh trởng rất tốt trên nền cơ chất có kitin, chúng sống đợc ở nhiệt độ thấp 80C, có biên độ về độ ẩm rộng ở nơi tích lũy nhiều CO2và thiếu O2 chúng có thể sống tới 445 ngày. ở nhiệt độ nhỏ hơn 100C và lớn hơn 450C thì nấm không thể hình thành bào tử. Nhiệt độ thích hợp cho sự nảy mầm của bào tử là 280C và pH = 6,8 - 70 hoặc dao động từ 3,3 8,5. Nấm có khả năng phân giải xenlulose và kitin (lông và lớp vỏ ngoài của côn trùng) [14].Độc tố diệt côn trùng của nấm: Gồm một số độc tố có tên là DestruxinA, B, C, hay D. Các ngoại độc tố này là sản phẩm thứ cấp vòng peptit, L-prolyn, L leucine, anhydrie, L-prolyn, L-valine anhydride và Desmethyl Destruxin B [12].2.1.4. Cơ chế gây bệnh của MetarhiziumBào tử nấm phát tán trong gió hoặc lây nhiễm qua tiếp xúc giữa các cá thể mang mầm bệnh. sau khi bám vào cơ thể côn trùng, gặp ẩm độ nhiệt độ thích hợp (xâm nhập qua đờng hô hấp) bào tử nấm nảy mầm tiết ra độc tố Destruxin làm tê liệt hệ thần kinh côn trùng và sử dụng dinh dỡng của côn trùng từ đó làm cho các cơ hệ cơ quan côn trùng suy yếu dần đi và chết sau 2-5 ngày phụ thuộc vào kích cỡ của côn trùng. Xác côn trùng chết thờng khô, không có mùi thối. Sau vài ngày sợi nấm sẻ đâm qua lớp vỏ kitin lại phát tán bào tử ra ngoài và tiếp tục một chu trình gây bệnh mới với côn trùng kế tiếp.2.2. Tình hình nghiên cứu sử dụng Mertarhizium trong phòng trừ mối2.2.1. Tình hình nghiên cứu sử dụng Metarhizium trên thế giớiNhững năm cuối của thế kỷ xx, rất nhiều công trình nghiên cứu đã khẳng định trong điều kiện tự nhiên vi nấm là một nhân tố gây chết quan trọng đối với nhiều loài côn trùng. Mỗi nhóm côn trùng có thể bị ảnh hởng bởi một số vi nấm nhất định. Ngời ta đã xác định hơn 700 loài vi nấm là mầm bệnh cho các loài côn trùng. Tuy nhiên, căn cứ vào mức độ gây chết, điều kiện nuôi cấy, điều kiện sản xuất và phổ tác dụng, ngời ta chỉ tập trung nghiên cứu vào 4 nhóm vi nấm: Metarhizium, Beauveria, Verticilum và Paecilomyces [14], [15].Metarhizium đợc xác định là mầm bệnh nguy hiểm của hơn 200 loài côn trùng. Tuy Metarhizium chỉ có 3 loài nhng lại có rất nhiều chủng khác nhau và mỗi chủng thích nghi cao đối với nhóm côn trùng xác định. Trong nghiên cứu ứng dụng, vấn đề quan trọng hàng đầu là phải tuyển chọn đợc các chủng thích nghi, có hiệu lực cao đối với một nhóm côn trùng xác định (Hanel 1982, Tanada và Kaya 1993) theo Milner và cộng sự [15].Những năm gần đây, xuất hiện ngày càng nhiều các công trình nghiên cứu sử dụng vi nấm để diệt trừ côn trùng, nhất là nghiên cứu sử dụng Metarhizium để phòng trừ mối. và kết quả là 11 chế phẩm vi nấm diệt côn trùng đã đợc đa vào sử dụng, trong đó có 3 chế phẩm Metarhizium: chế phẩm BioBlast của Mỹ dùng để diệt mối đất Đài Loan (Coptotermes formosanus); chế phẩm GreenMuscle của Nam Phi để diệt châu chấu (Locusts); chế phẩm BioGreen của úc để diệt bọ ngô đầu đỏ (Red- headed cokchafer).ở úc, nhóm nghiên cứu thuộc viện nghiên cứu côn trùng của thành phố Canbera, do tiến sỹ Milner (1998) chủ trì đã nghiên cứu tuyển chọn từ 97 chủng Metarhizium, phân lập từ các nguồn khác nhau, nhng chỉ có 2 chủng FI-1186 và FI- 610 là có hiệu lực mạnh và ổn định đối với 2 loài mối Nasutitermes exitosus và Coptotermes lacteus. Họ đã tiến hành hàng loạt thí nghiệm và cho thấy rằng nấm không lây nhiễm vào các vật chủ bằng con đờng tiêu hóa, mà nó trực tiếp xâm nhập qua vỏ cơ thể, cho nên cả ấu trùng còn non cũng có thể bị tiêu diệt. Xác mối bị chết do nấm sẽ khô cứng, đầy sợi nấm trắng, sau đó tạo thành thế hệ bào tử mới màu xanh đậm. Các bào tử chỉ nảy mầm khi gặp độ ẩm cao và thời tiết thích hợp. Tuy nhiên các thử nghiệm này mới chỉ đợc thực hiện trong phòng thí nghiệm ở quy mô nhỏ.Tại Canada, nhóm nghiên cứu do tiến sỹ Bary H.Track (1999) đứng đầu thuộc phòng thí nghiệm côn trùng học, trờng đại học tổng hợp Toronto đang thử nghiệm một số chủng nấm Metarhizium để diệt các loài kiến và loài mối Reticulitermes flavipes (loài mối gây hại nghiêm trọng cho công trình kiến trúc ở thành phố Toronto). Họ đã phân lập đợc một số chủng vi nấm của loài Metarhizium anisopliae có hoạt lực cao với mối Reticulitermes flavipes. Họ quan sát thấy bào tử vi nấm bám lên vỏ cơ thể của mối, mọc xuyên vào các mô và hệ tuần hoàn, rồi giết chết mối trong vòng 24-48 giờ, tùy thuộc vào liều lợng và tác dụng. Bào tử vi nấm có thể lây truyền từ cá thể này sang cá thể khác thông qua hàng loạt các hoạt động tiếp xúc trực tiếp với nhau giữa các cá thể trong quần thể nh việc trao đổi thức ăn, sự tiêu thụ chất tiết, việc làm vệ sinh cho nhau . Vấn đề đang đợc họ quan tâm là nghiên cứu khả năng phát hiện và ngăn chặn các con mối đã bị nhiễm bào tử vi nấm của quần thể mối.ở Mỹ, tại trung tâm của hiệp hội nghiên cứu mối ngầm Đài Loan, M. Guadalupe Rojas và cộng sự (2000), đã chứng minh các bào tử của các loài vi nấm này có thể bám vào vỏ kitin của cơ thể mối Coptotermes formosanus để nảy mầm, sau đó sợi nấm phát triển đâm xuyên vào cơ thể mối và diệt mối rất tốt. Họ khẳng định bào tử nấm không độc với ngời, động vật và môi trờng. Hớng nghiên cứu của họ là sử dụng bào tử vi nấm trộn với diflubensuzon trong các vị trí đặt bả hỗn hợp.Năm 2002, Tiến sỹ Haimanot Abebe đã tiến hành thử nghiệm bào tử Metarhizium trên mối Macrotermes subhyalinus ở vùng Lenkemt Zuria (Ethiopia). Ông đã thử nghiệm bào tử ở ba nồng độ là 4,6; 9,3 và 20 gram bào tử / tổ, các tổ Macrotermes thử nghiệm có tuổi từ 2 đến 3 năm. Sau 60 ngày thử nghiệm tỷ lệ mối chết đạt 61%, 64% và 74% ở các nồng độ tơng ứng. Sau 75 ngày tác giả còn quan sát thấy nấm Xylaria mọc trên các tổ mối đã thí nghiệm.Tại hội nghị hoá học của mỹ tháng 4/2002 ngời ta đã đa ra và nhất trí là phải thay thế các phơng pháp phòng trừ mối và côn trùng, hiện nay bằng bã mối và các chế phẩm sinh học nh vi nấm Metarhizium, beauveria và vi khuẩn bacillus. Chế phẩm Bio Blast của mỹ do Ecoscience sản xuất bán ra thị trờng dựa vào kết quả thử nghiệm trên mối Coptotemes fomosanus ở 1000 điểm khắp 11 bang bị mối hại ở nớc mỹ, chế phẩm này đợc sản xuất theo phơng pháp lên men xốp và đợc sử dụng ở hai dạng bột mịn và huyền phù, hiện nay ngời ta đang tiến hành nghiên cứu cho thêm chất phụ gia để tăng tính dính bám và làm sao đa đợc lợng bào tử Metarhizium vào ít nhất là 10% số cá thể của quần thể mối.2.2.2. Nghiên cứu ở trong nớcViệc nghiên cứu nấm gây bệnh trên côn trùng đã đợc các cán bộ khoa học kỹ thuật ở một số trờng đại học và viện nghiên cứu bắt đầu tìm hiểu và đi sâu nghiên cứu chúng từ những năm 70 của thập kỷ XX. Theo Phạm Bình Quyền (1994), cơ sở khoa học của phòng trừ sinh học, phòng trừ tổng hợp là hiểu đúng quy luật cơ chế tự nhiên của sự điều chỉnh số lợng côn trùng, nhằm sử dụng tối u các cơ chế đó vào việc hạn chế tác hại do côn trùng gây nên nói chung và mối nói riêng. Tác giả đã phân tích rất sâu sắc quan hệ giữa vật chủ và vật ký sinh thông qua yếu tố quần thể của vật chủ và vật ký sinh. Đối với các nhóm côn trùng không có đời sống xã hội, vai trò điều chỉnh số lợng côn trùng của dịch bệnh thờng chỉ thể hiện khi mật độ quần thể gia tăng đến mức gần cực đại [12].Năm 1981 GS.TS Nguyễn Lân Dũng nghiên cứu nấm lục cơng Metarhizium mô tả hình thái, phân tích cơ chế tác dụng, hớng dẫn cách phân lập, nuôi cấy và ph-ơng pháp sản xuất sinh khối Metarhizium [4].Từ năm 1992, Phạm Thị Thùy và cộng sự thuộc viện Bảo vệ Thực vật đã phân lập, nuôi cấy và thử nghiệm các chủng Metarhizium thuộc 2 loài Metarhizium anisopliae và Metarhizium flavoviride để phòng trừ cho các loài sâu bọ hại cây nông, lâm nghiệp bằng phơng pháp phun trực tiếp bào tử Metarhizium trên đồng ruộng [5], [6], [7], [8].Năm 1996, Tạ Kim Chỉnh đã phân lập, nuôi cấy một số chủng Metarhiziumanisopliae và thử nghiệm để diệt châu chấu di c và các loài sâu bệnh hại cây nông nghiệp. Tác giả cũng thử nghiệm bào tử M. anisopliae trên mối Coptotermes formosanus và cho biết mối chết do nấm sau 3 ngày là 91,35% ở mật độ 18 x 107 bào tử / ml. Ngoài ra, tác giả còn thử nghiệm trên châu chấu di c (Locusta mirgratioria) và hiệu quả đạt tới 92,2%.Năm 1997, Đại học Quốc gia Hà Nội đã nghiệm thu đề tài: Nghiên cứu vi nấm Metarhizium ansopliae chống mối hại cây trồng. Trong đó đã phân lập đợc nhiều chủng nấm có khả năng chống mối quan trọng và đợc bảo quản tại Bảo tàng giống vi sinh vật của trờng.Năm 1998 Dơng Ngọc Khê và cộng sự thuộc viện khoa học lâm nghiệp đã nghiên cứu và tuyển chọn một số chủng nấm Metarhizium để thử khả năng diệt mối coptotemes fomosanus trong phòng thí nghiệm, các nghiên cứu đã đa ra đợc các chế phẩm LT50 , LT100 , LD50, LD100 của các chủng Metarhizium đã tuyển chọn đối với Coptotemes fomosanus và cho biết có 3 chủng có hiệu lực diệt mối cao nhất [2]Phạm Thị Thùy và cộng sự (2002- 2003) đã nghiên cứu sử dụng nấm Metarhizium anisopliae để diệt bọ hại dừa cho tỉnh Bình Định bằng phơng pháp phun trực tiếp. Kết quả cho thấy chế phẩm nấm Metarhizium anisopliae đều có hiệu quả cao với sâu non và trởng thành của bọ dừa, đặc biệt là hiệu quả kéo dài đến 8 tuần sau phun, hiệu quả thể hiện rõ khi cây dừa phục hồi màu xanh trở lại, điểm giá trị nhất của chế phẩm nấm là hiệu quả kéo dài, nấm không gây ô nhiễm môi trờng và nguy hiểm đối với con ngời, không làm mất đi những loài kí sinh thiên địch có ích khác.Từ năm 1998 đến năm 2002, Trịnh Văn Hạnh và cộng sự ở Trung tâm nghiên cứu phòng trừ mối đã nghiên cứu tuyển chọn các chủng Metarhizium có hiệu lực cao để phòng trừ các loài mối gây hại điển hình ở nớc ta, nh loài mối nhà nguy hiểm nhất Coptotermes formosanus Shiraki; loài mối hại đê Odontotermes hainanensis và loài mối hại đập Macrotermes annandalei. Khi nuôi cấy trên môi trờng Czapek - Dox và môi trờng Sabouraud có bổ sung kitin đã thu đợc hàng trăm gram bào tử với khối l-ợng trung bình từ 1,9 x 109 đến 8,25 x 1010 bào tử/g. Kết quả thử nghiệm trực tiếp và lây nhiễm đối với mối trong điều kiện phòng thí nghiệm và trên mô hình nh sau [9], [10].Từ 23 chủng vi nấm thu thập và phân lập từ các nguồn khác nhau đã tuyển chọn đợc 9 chủng Metarhizium trong đó có 2 chủng phân lập từ tổ mối chết ngoài hiện trờng có khả năng gây bệnh làm chết mối trong điều kiện phòng thí nghiệm. Với 3 chủng chọn lọc có hiệu lực diệt mối cao nhất là M1, M2, M3 thì LT50 đối với mối Coptotermes formosanus trung bình là 2,6 ngày sau khi nhiễm bào tử Metarhizium.Bào tử của các chủng M1, M2, M3 không chỉ có khả năng diệt mối C. formosanus khi tiếp xúc trực tiếp mà còn đợc truyền từ cá thể này sang cá thể khác trong đàn mối, tỷ lệ số cá thể mối bị nhiễm bào tử lúc đầu đóng vai trò quyết định. Hiệu quả của phơng pháp thử nghiệm diệt mối C. formosanus bằng lây nhiễm bào tử M1 rất rõ ràng. Tỷ lệ nhà dân thử nghiệm hết mối đạt gần 90%. Kết quả này mở ra triển vọng trong việc nghiên cứu sản xuất chế phẩm diệt mối C. formosanus bằng lây nhiễm thay thế các biện pháp dùng hoá chất nh hiện nay. [...]... khiết để diệt trừ trực tiếp một cá thể mối nhất định trong điều kiện phòng thí nghiệm đã làm sáng tỏ cơ chế gây bệnh và hiệu lực diệt mối cao của nấm đối với mối Tuy nhiên, điều quan trọng không chỉ là tuyển chọn đợc các chủng Metarhizium có hiệu lực diệt mối cao trong phòng thí nghiệm mà còn phải nghiên cứu đợc quy trình lên men để sản xuất thu bào tử đợc nhiều Trong quá trình sản xuất thu bào tử phải... lợng bào tử nhiều từ đó lựa chọn ra đợc môi trờng thích hợp nhất để sản xuất trên qui mô rộng với một giá thành phải rẻ Để lựa chọn đợc quy trình lên men kết hợp thích hơp cho sự sinh trởng và phát triển của các chủng Metarhizium thì đề tài chúng tôi đáp ứng đợc một phần tuy nhiên để có quy trình lên men kết hợp thích hơp nhất thì cần nghiên cứu thêm 2.2 Mối nhà Coptotermes foramsanus Shiraki Loài mối. .. phơng pháp rắc bào tử trực tiếp trên đĩa petri (lợng bào tử Metarhizium tính theo gam) Thí nghiệm đợc tiến hành trên đĩa petri với 100 mối (90 mối thợ với 10 Mối lính): Mỗi công thức nhắc lại 3 lần CT 1 : Đối chứng (không cho bào tử) CT 2 : 0,005g bào tử nấm Metarhizium (M4, M5) CT 3 : 0,01g bào tử nấm Metarhizium (M4, M5) CT 4 : 0,03g bào tử nấm Metarhizium (M4, M5) CT 5 : 0,05g bào tử nấm Metarhizium. .. cho kết quả diệt trừ sâu bệnh hơn 70% Một hớng mới đang đợc các nhà khoa học nghiên cứu để sản xuất sinh khối của nấm Metarhizium trên các nguồn cơ chất rẻ tiền mà vẫn thu đợc sinh khối lớn [5] Nghiên cứu sử dụng Metarhizium để phòng trừ mối là một hớng nghiên cứu đang đợc nhiều nhà khoa học trong và ngoài nớc quan tâm Các kết quả nghiên cứu về phân lập, nuôi cấy, tuyển chọn và thử nghiệm bào tử thuần... dạng bào tử, sợi khí sinh và cuống phát sinh bào tử của các chủng nấm Metarhizium (M4, M5) - Nuôi và quan sát khuẩn lạc của hai chủng nấm Metarhizium (M4; M5) trên môi trờng Czapek-Dox có hai giai đoạn + Thứ nhất: Cấy chấm bào tử của hai chủng Metarhizium (M4; M5) lên đĩa petri theo dõi và quan sát đặc điểm hình thái khuẩn lạc (màu sắc, kích thớc, tốc độ phát triển ) của khuẩn lạc hai chủng nấm Metarhizium. . .Mối cánh O hainanensis bị chết 100% sau 5 - 10 ngày ở trong đất đã rắc bào tử M3 cho phép nghĩ tới khả năng nghiên cứu sản xuất chế phẩm để phun phòng mối cánh trên mặt đê vào mùa mối bay phân đàn Một phần của kết quả nghiên cứu trên đã đợc trình bày tại Hội nghị Quốc tế về Vi sinh vật tại Bangkok, Thái Lan tháng 7 / 2000 Năm 1997 đại học quốc gia hà nội đã nghiệm thu đề tài nghiên cứu vi nấm Metarhizium. .. hai: Quan sát bào tử, sợi khí sinh của khuẩn lạc dới kính hiển vi đợc thực hiện bằng cách cấy gạt bào tử lên đĩa petri Sau đó 4 ngày cắm lamen lên đĩa petri vừa gạt nghiêng một góc 45o so với mặt thạch, sau 2 ngày lấy lamen đem soi dới kính hiển vi và quan sát đặc điểm hình thái của bào tử, sợi khí sinh của hai chủng nấm Metarhizium (M4; M5) - Theo dõi sự sinh trởng, phát triển, phát sinh bào tử và đếm... để đánh giá chung - Đánh giá và chọn nồng độ thích hợp nhất các chủng Metarhizium có hiệu lực diệt mối cao và hiệu quả kinh tế nhất 3.2.2.4 Thử hiệu lực diệt mối qua lây nhiễm của các bào tử nấm Metarhizium giữa các tổ mối bằng mô hình hình hộp - Phơng pháp lây nhiễm là một trong những phơng pháp đợc nhiều cơ sở phòng chống mối quần thể đang đợc sử dụng rộng rãi để xử lý mối ở nớc ta hiện nay Phơng... tổ chức theo bản năng, có sự chuyên hoá về hình thái và chức năng Mối có hai loại hình lớn: Mối sinh sản và mối không sinh sản mỗi loại hình này chia ra nhiều đẳng cấp khác nhau Mối sinh sản: Loại mối này có thân hình tơng đối lớn nhất là mối chúa có bụng rất to cơ thể của chúng có cơ quan phát dục hoàn chỉnh gồm mối vua, mối chúa mối cánh nguyên thủy và mối cánh ngắn hay còn gọi là mối chúa thay thế... tổ xuất hiện mối cánh nguyên thủy và mối cánh ngắn Mối cánh ngắn đợc coi nh một nguồn hậu bị để sinh sản thay thế cho mối vua và mối chúa khi cần thiết Loại mối này cánh bị tiêu giảm, mắt mù và màu sắc cơ thể nhạt hơn so với mối cánh nguyên thủy Chúng không bao giờ rời khỏi tổ và chỉ trở thành các cá thể sinh sản khi mối vua hoặc mối chúa bị chết hoặc không đáp ứng đợc khả năng sinh sản cần thiết của . kết hợp để sản xuất bào tử nấm Metarhizium và khả năng diệt mối của bào tử nấm qua lây nhiễm1 .2. Mục đích và yêu cầu1.2.1. Mục đích:- Hoàn thành quy trình. trình lên men kết hợp để sản xuất bào tử nấm Metarhizium (m4; m5) trong phòng trừ mối. - Đánh giá khả năng diệt mối bằng trực tiếp và lây nhiễm của chế
