Đang tải... (xem toàn văn)
tách chiết Enzym
Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHVIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC&THỰC PHẨMHÓA SINH THỰC PHẨMĐỀ TÀI: CHIẾT, TINH CHẾ VÀ ỨNG DỤNG CỦA ENZYMETrang 1/101GVHD: LỚP: NHÓM : 1SVTH: LÊ THANH NGUYÊN 09248781 VŨ THỊ NINH 09248861 ĐOÀN THỊ PHƯỢNG 09247521 NGUYỄN THỊ THỦY 09246191 TẠ PHI VŨ 09258231 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ ENZYME1.1Khái niệm về enzyme Trong các phản ứng hóa học, nếu ta cho thêm vào phản ứng một chất nào đó phản ứng sẽ xảy ra với tốc độ tăng hàng chục lần. Chất cho thêm vào này gọi là chất xúc tác.Chất xúc tác hóa học có hai đặc điểm quan trọng:1- Làm tăng phản ứng hóa học.2- Bản than chất xúc tác không có sự thay đổi nào sau phản ứng. Sau này các nhà khoa học thấy rằng các chất xúc tác hóa học chỉ làm tăng tốc độ phản ứng, chứ không tham gia làm thay đổi chiều hướng phản ứng, trạng thái phản ứng hay năng lượng sử dụng trong phản ứng. Trong các phản ứng sinh học (các phản ứng xảy ra trong cơ thể sinh vật) cũng có chất làm tăng các phản ứng, chất đó gọi là enzyme. Chữ “enzyme” được bắt nguồn từ tiếng Hy Lạp có nghĩa là chất trong nấu men. Enzyme được các cơ thể sinh vật tổng hợp nên và tham gia các phản ứng hóa học trong cơ thể. Enzyme là một chất hữu cơ, trong khi đó các chất xúc tác hóa học thường là chất vô cơ. Sau này, các nhà khoa học xác định chúng là protein. Như vậy enzyme là một protein có khả năng tham gia xúc tác các phản ứng hóa học trong và ngoài cơ thể. Điểm rất đặc biệt của enzyme là chúng hoạt động trong diều kiện ôn hòa giống như nhiệt độ ôn hòa của cơ thể sinh vật. Trong khi đó, các chất hóa học cần phải có nhiệt độ cần thiết cho phản ứng. Nhiệt độ càng cao, tốc độ xúc tác phản ứng hóa học càng cao. Ưu điểm cơ bản của enzyme khi tham gia các phản ứng sinh hóa có thể tóm tắt như sau:1- Enzyme có thể tham gia hàng loạt các phản ứng trong chuỗi phản ứng sinh hóa để giải phóng hoàn toàn năng lượng hóa học có trong vật chất.2- Enzyme có thể tham gia những phản ứng độc lập nhờ khả năng chuyển hóa rất cao.Trang 2/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme 3- Enzyme có thể tạo ra những phản ứng dây chuyền. Khi đó sản phẩm phản ứng đầu sẽ là nguyên liệu hay cơ chất cho những phản ứng tiếp theo.4- Trong các phản ứng enzyme, sự tiêu hao năng lượng thường rất ít.5- Enzyme luôn luôn được tổng hợp trong tế bào của sinh vật. Số lượng enzyme được tổng hợp rất lớn và luôn luôn tương ứng với số lượng các phản ứng xảy ra trong cơ thể. Các phản ứng xảy ra trong cơ thể luôn luôn có sự tham gia xúc tác bởi enzyme.6- Có nhiều enzyme không bị mất đi sau phản ứng. Ngày nay, các nhà khoa học đã tìm ra trên 1000 loại enzyme khác nhau có trong tế bào sinh vật, số lượng này là rất nhỏ so với số lượng có thật trong mỗi tế bào. Trong hơn 1000 loại enzyme đã biết, loài người mới thu nhận và kết tinh được khoảng 200 loại.1.2 Cấu tạo của enzyme Enzyme là những protein có phân tử lượng từ 20000 đến 1000000 dalton.Các enzyme được cấu tạo từ L – axit amin. Các axi tamin này liên kết với nhau bởi liên kết peptit. Khi thủy phân protein enzyme, ta sẽ thu nhận được các axitamin. Trong một số trường hợp, ngoài axit amin ra người ta còn thu được những thành phần khác.- Nếu một enzyme, khi bị thủy phân, ta chỉ thu được các axit amin thì enzyme này được gọi là enzyme đơn cấu tử hay còn gọi là enzyme đơn giản.- Nếu một enzyme, khi bị thủy phân, ta thu được ngoài axit amin còn các thành phần khác thì enzyme này được gọi là enzyme đa cấu tử hay còn gọi là enzyme phức tạp. Các enzyme phức tạp, ngoài protein ra còn có các thành phần khác như ion kim loại, vitamin, glutation dạng khử, … đa số enzyme có trong cơ thể thuộc enzyme đa cấu tử. Trong thành phần enzyme đa cấu tử người ta phân biệt rõ các phần như sau:- Phần protein được gọi là feron hay apoenzyme.- Phần không phải protein gọi là nhóm ngoại “agon”. Nhóm ngoại, khi được tách ra khỏi enzyme, có thể tồn tại độc lập.Trong khi tham gia xúc tác, không phải toàn bộ tất cả các phần trong cấu trúc của enzyme tham gia mà chỉ có một phần giới hạn của phân tử enzyme tham gia phản ứng. Phần giới hạn tham gia phản ứng này được gọi là trung tâm hoạt động. Trung tâm hoạt đông của enzyme do một số axit amin đảm trách. Như vậy, trong trường hợp cơ thể bị đột biến thì không phải bất kỳ đột Trang 3/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme biến nào cũng dẫn tới hiện tượng làm sai lệch các phản ứng sinh hóa của tế bào, chỉ có những đột biến làm thay đổi axit amin hoặc làm thay đổi thứ tự sắp xếp của các axit amin thì mới có ý nghĩa. Trung tâm hoạt động của các enzyme đơn cấu tử thường bao gồm một tổ hợp các nhóm định chức của axit amin không tham gia vào trục chính của sợi polypeptit. Các nhóm này có thể ở xa nhau trong mạch polypeptit nhưng chúng lại gần nhau trong không gian. Khoảng cách này được xác định sao cho chúng có thể tương tác với nhau trong quá trình xúc tác. Cấu trúc không gian của trung tâm hoạt động thường giống cấu trúc không gian của cơ chất mà chúng tham gia xúc tác. Trung tâm hoạt động của các enzyme đa cấu tử là nhóm ngoại và nhóm định chức của axitamin nằm ở apoenzyme. Khi enzyme tương tác với cơ chất các nhóm định chức của trung tâm hoạt động sẽ thay đổi cấu trúc không gian sao cho tương ứng với cấu trúc không gian của cơ chất. Ở tế bào động vật tồn tại một loại enzyme không có khả năng tham gia phản ứng ngay, muốn có khả năng hoạt động chúng phải được hoạt hóa. Trung tâm hoạt động của loại enzyme này tồn tại ở dạng chưa được hoạt hóa và được gọi là zymogen hay proenzym, ví dụ như enzyme pepxinogen, tripxinogen, kimotripxinogen hay protrombin. Các enzyme này có thể tự hoạt hóa hoặc nhờ tác dụng của một enzyme nào đó hoặc một yếu tố nào đó. Khi đó một số liên kết peptit trong phân tử zymogen bị mất, enzyme sẽ được hoạt hóa. Trong một số trường hợp khác có sự sắp xếp lại các nhóm chức trong phân tử enzyme. Khi đó trung tâm hoạt động của enzyme ở trạng thái hoạt hóa. Ở những enzyme dị lập thể hay enzyme điều hòa còn có trung tâm dị lập thể (enzyme điều hòa). Các trung tâm này có khả năng tương tác với cơ chất khác. Các cơ chất tương tác với trung tâm này gọi là chất điều hòa. Khi trung tâm điều hòa này tương tác với chất điều hòa, chúng sẽ làm thay đổi cấu trúc không gian của trung tâm hoạt động, khi đó tốc độ phản ứng enzyme sẽ bị thay đổi. Trong trường hợp phản ứng enzyme được tăng lên khi Trang 4/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme chất điều hòa tương tác với trung tâm điều hòa thì chất điều hòa này được gọi là chất điều hòa dương. Ngược lại nếu phản ứng enzyme giảm đi khi chất điều hòa tương tác với trung tâm điều hòa thì chất diều hòa này được gọi là chất điều hòa âm. Các chất điều hòa hoàn toàn không biến đổi khi chúng tương tác với enzyme. Các nhóm chức năng của axit amin thường gặp trong trung tâm hoạt động của enzyme bao gồm:- Nhóm sulfridril của xistein.- Nhóm amin ở đầu N hoặc nhóm ε – amin của lizin.- Nhóm cacboxyl của axit aspartic và axit glutamiz.- Nhóm hydroxyl của serin, treonin, và trirozin. Trung tâm hoạt động của các enzyme một thành phần bao gồm từ 3 – 7 nhóm chức năng trên. Các nhóm chức năng trong trung tâm hoạt động được định hướng xác định sau đó để đảm bảo cho chúng có khả năng tương tác với nhau trong khi phản ứng. Trung tâm hoạt động của enzyme hai thành phần bao gồm một số nhóm chức năng của axit amin trong thành phần apoenzyme và trong nhiều trường hợp còn cần cả ion kim loại. Các kim loại thường gặp trong trung tâm hoạt động của enzyme là nhũng ion kim loại hóa trị 2 như Fe, Co, Mn, Zn, Cu …chúng có mặt ở cả trung tâm hoạt động của enzyme một thành phần và enzyme hai thành phần. Các kim loại này có thể tham gia trực tiếp trong các phản ứng xúc tác, chúng liên kết bền với phân tử enzyme. Trong nhiều trường hợp enzyme bị mất hoàn toàn hoạt tính khi bị loại bỏ kim loại ra khỏi thành phần của enzyme. Trong trường hợp này enzyme này được gọi là metaloenzyme. Hoạt động của enzyme này sẽ được phục hồi khi cho kim loại vào.1.3Cách gọi tên và phân loại enzyme Trước kia thường gọi tên enzyme một cách tùy tiện, tùy theo tác giả. Các tên đã quen dùng như tripxin, pepxin, kimotripxin, …hiện nay vẫn được dùng gọi là tên thông dụng. Trang 5/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Tên gọi đầy đủ, chính xác theo quy ước quốc tế - tên gọi hệ thống của enzyme được gọi theo tên cơ chất đặc hiệu của nó cùng với tên của kiểu phản ứng mà nó xúc tác, cộng thêm đuôi “aza”.Tên gọi hệ thống thường gồm hai phần:- Phần thứ nhất là tên gọi cơ chất (nếu phản ứng lưỡng phân thì phần thứ nhất là tên gọi của hai cơ chất viết cách nhau bằng hai chấm);- Chỉ một cách khái quát bản chất của phản ứng xúc tác.Ví dụ: + Tên thông dụng: ureaza + Tên gọi hệ thống: cacbamit – amidohydrolazaNếu phản ứng bao gồm hai sự chuyển hóa tương hổ thì người ta còn thêm vào sau phần thứ hai của tên gọi một phần tương ứng trong dấu ngoặc.Ví dụ, enzyme xúc tác oxy hóa axit amin trong phản ứng: L – axit aminCó tên gọi: L – axit amin: oxydoreductaza (deamin)Dựa vào tính đặc hiệu phản ứng của enzyme, từ năm 1960 Hội hóa sinh quốc tế (IUB) đã thống nhất phân loại enzyme thành sáu lớp, đánh số từ 1- 6. Các số thứ tự này là cố định cho mỗi lớp:1- Oxydoreductaza2- Transpheraza3- Hydolaza4- Liaza5- Izomeraza6- LigazaTrang 6/101 COOH COOH H2N CH + O2 C = O + NH3 + H2R R Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Mỗi lớp lại chia thành nhiều tổ. Mỗi tổ lại chia thành nhiều nhóm. Do đó trong bảng phân loại, đứng trước tên enzyme thường có 4 con số: số thứ nhất chỉ lớp, số thứ hai chỉ tổ, số thứ ba chỉ nhóm, số thứ tư chỉ enzyme.Ví dụ, 2.6.1.1. L – aspartat: α – xetoglutarat aminotranspheraza xúc tác cho phản ứng chuyển vị (lớp 2) nhóm chứa nitơ (tổ 6), nhóm chứa nitow ấy là nhóm amin (nhóm 1); phản ứng do enzyme này xúc tác:L – aspartat + α – xetoglutarat = oxaloaxetat + glutamate(Nhóm amin được chuyển từ L – aspactat đến α – xetoglutarct)1.3.1 Oxydoreductaza Có tác động đến phản ứng oxy hóa khử. Có khả năng chuyển e-, H+ …Phản ứng tổng quát: A- + B A + B-Các dạng thông dụng: - Dehydrogenase: tách H+. Ví dụ: alcol dehydrogenase (1.1.1.1.), glutamate dehydrogenase (1.4.3) - Reductase: tác động khử - Oxygenase: tác động oxy hóa - Peroxydase: tác động khi có H2O2, có tác dụng loại khả năng gây độc của H2O2 trong cơ thể.1.3.2 TransferaseCó tác động lên phản ứng chuyển nhóm chức. Phương trình phản ứng tổng quát: A – B + C A + B – CCác dạng thông dụng:- Acyltransferase: có nhóm acyl (coenzyme A)- Glucosyltransferase: chuyển nhóm glucose. Enzyme chuyển hóa tinh bột.- Amino transferase: chuyển nhóm amin.- Photpho transferase: ATP ADPTrang 7/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme ATP + AMP ADP + ADP1.3.3 HydrolaseCó tác động lên phản ứng thủy phân. Phương trình phản ứng tổng quát: A – B + H2O A – H + B – OHCác dạng thông dụng:- Amylase:+ α – amylase: có trong nước bọt, mầm hạt ngũ cốc, nấm, vi khuẩn. Có khả năng phân giải 1- 4-glucozit tại vị trí giữa mạch.+ ß – amylase: có trong thực vật (hạt củ). Phân giải 1-4 glucozit tại vị trí đầu mạch. Bền hơn α – amylase (bền tính acid).- Peptit hydroláe: có khả năng thủy phân liên kết peptit- Lipase có khả năng thủy phân lipit. Ví dụ triacylglycerol lipase (3.1.1.3)1.3.4 Lyase Có tác động đến phản ứng nhờ bổ sung nhóm chức vào nối đôi hoặc tạo nối đôi nhờ lấy đi nhóm chức. Phương trình phản ứng tổng quát:AX – BY A = B + X – YVí dụ: Pyruvat decarboxylase: loại CO2 ra khỏi acid pyruvic tạo thành acetaldehyde1.3.5 Isomerase Có khả năng chuyển các nhóm chứctrong phân tử tạo thành các đồng phân.Phương trình phản ứng tổng quát: AX – BY AY - BXVí dụ chuyển đổi galactose thành glucose1.3.6 Ligase Có khả năng tổng hợp liên kết C – C, C – S, C – O, C – N nhờ vào phản ứng trùng ngưng liên hợp với sự thủy phân ATP và tác dụng của enzyme.Ví dụ: dưới tác dụng của pyruvat carboxylase (6.4.1.1), từ acid pyruvit tạo thành oxaloacetic.Trang 8/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme CHƯƠNG II: TÁCH CHIẾT VÀ LÀM SẠCH ENZYME1 Các phương pháp phá vỡ tế bào1.1 Phá vỡ tế bào bằng phương pháp cơ học Mục đích của phá vỡ tế bào là giải phóng các chất có trong tế bào và đảm bảo được hoạt tính enzyme nội bào. Việc phá vỡ tế bào sinh vật bao gồm cả phá vỡ tế bào động vật, Trang 9/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme thực vật và VSV. Đối với tế bào động vật, người ta thường sử dụng toàn bộ cơ quan (hay mô bào) của động vật có chứa enzyme và cần phải loại bỏ mỡ hoặc các thành phần khác bám theo mô bào đó, các mẫu cần được xử lý nhanh và phải được thu nhận enzyme trong thời gian không quá 4 giờ kể từ khi giết mỗ. Đối với tế bào và mô bào thực vật, cần phải được làm sạch và phải được trữ lạnh nếu chưa tiến hành thu nhận enzyme ngay. Tế bào động vật và thực vật thường rất dễ phá vỡ bằng các phương pháp cơ học. Riêng tế bào vi sinh vật, việc phá vỡ tế bào có những khó khăn nhất định.- Tế bào vi sinh vật có kích thước quá nhỏ, việc phá vỡ tế bào bằng phương pháp nghiền nếu không có chất trợ nghiền sẽ không có hiệu quả.- Vi sinh vật là cơ thể đơn bào, khi phát triển trong môi trường, đặc biệt là môi trường lỏng có nhiều cơ chất thủy phân, chúng sẽ tạo ra nhiều enzyme ngoại bào tương ứng. Các enzyme ngoại bào này được hòa tan trong môi trường và dễ dàng tách chúng ra khỏi dung dịch nuôi cấy, do đó trong công nghiệp người ta ít khi tiến hành nghiền tế bào (trừ trường hợp phải thu nhận enzyme nội bào). Tuy nhiên, trong thời gian gần đây, việc nghiên cứu enzyme nội bào ở VSV ngày càng nhiều, do đó phương pháp cơ học được ứng dụng để phá vỡ tế bào VSV ngày càng nhiều.* Phương pháp đồng hóa áp lực cao: Đây là phương pháp được ứng dụng rộng rãi nhất để phá vỡ tế bào quy mô công nghiệp. Theo phương pháp này, huyền phù tế bào sẽ được nén với một áp suất cao, chúng va chạm rất mạnh vào vành ống (máy đồng hóa maton-gaulin). Tế bào bị phá vỡ bởi lực cắt và sức nén. Tùy thuộc vào loại máy, công suất từ 50 – 5000 lít/giờ mà áp lực cần có khác nhau. Mặt khác, tính chất, cấu tạo của tế bào khác nhau đòi hỏi áp lực khác nhau. Ví dụ đối với tế bào vi khuẩn người ta cần áp lực khoảng 550 bar. Phương pháp đồng hóa áp lực cao thường được áp dụng cho việc phá vỡ tế bào vi khuẩn. Tế bào động vật và tế bào thực vật ít khi phải dùng phương pháp này.* Phương pháp nghiền ẩm: Đây cũng là phương pháp được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp sản xuất enzyme. Trong quá trình nghiền, người ta thường sử dụng những viên bi thủy tinh có kích thước 0.2 – 1mm để tăng quá trình phá vỡ tế bào. Trong nhiều trường Trang 10/101 [...]... quá trình tách vật chất rắn ra khỏi dung dịch Trong công nghệ enzyme, phương pháp ly tâm thường được ứng dụng khá rộng rãi để thu nhận dung dịch enzyme, dung dịch này chứa các enzyme ngoại bào Enzyme nội bào nằm trong tế bào sinh vật, muốn thu nhân enzyme nội bào ta phải tiến hành một giai đoạn phá vỡ tế bào Trang 12/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Phần lớn các enzyme ngoại bào (exoenzyme)... Dung dịch enzyme thô thường chứa lượng enzyme không nhiều Để xử lý một khối lớn dung dịch enzyme phải tốn rất nhiều công sức và chi phí cho xử lý này rất cao Mặt khác Trang 14/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme lượng enzyme có trong dịch enzyme thô quá ít, hoạt tính enzyme không cao Chính vì thế, người ta phải cô đặc dung dịch enzyme nhằm một số mục đích sau: - Làm tăng hoạt tính của enzyme trong... để làm tăng khả năng kết tủa của enzym và làm bền cấu trúc của chúng Khi cần tách riêng biệt một enzym nào đó ra khỏi hỗn hợp enzym kết tủa trên, ta sẽ dựa trên độ hòa tan khác nhau trong hỗn hợp etanol và các enzym đó để tách b Phương pháp kết tủa enzym bằng một số muối trung tính Trang 30/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Muối trung tính dùng để kết tủa enzym là: sulfat amon, sulfat natri,... bào vi sinh vật Chế phẩm enzym tinh là sản phẩm được tách khỏi dung dịch môi trường và tách khỏi tế bào vi sinh vật, sau đó được tinh sạch bằng cách kết tinh, làm khô Các chế phẩm enzym tinh khiết được ứng dụng sản xuất các sản phẩm tinh khiết, vô trùng Thông thường chế phẩm enzym tinh chứa một loại enzym, cũng có một số trường hợp enzym tinh chứa một số enzym cùng loại Các enzym tinh thưòng sử ụng... phẩm, y học và trong một số công nghệ thực phẩm Quá trình thu nhận enzym sạch được trình bày như sau: 2.6.1 Thu nhận enzym sạch từ nuôi cấy bề mặt: Trang 27/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Việc thu nhận enzym sạch từ nuôi cấy bề mặt bao gồm 2 giai đoạn: 2.6.1.1 .Chiết rút enzym từ môi trường nuôi cấy bề mặt: Công đoạn chiết rút enzym từ môi trường nuôi cấy bề mặt rất phức tạp Giai đoạn tinh... đoạn enzyme - Các phân đoạn sau khi qua cột gel sẽ được xác định lại hoạt tính, trộn với tinh bột với tỷ lệ 1:1 rồi sấy khô ở nhiệt độ 400C Chế phẩm enzyme thu được ở dạng bột sẽ được bảo quản ở nhiệt độ 0– 40C 2.6 Chiết và tinh chế enzyme từ vi sinh vật Tùy theo yêu cầu của ứng dụng enzym mà ta cần enzym sạch và enzym không sạch(chế phẩm thô, chế phẩm tinh) Chế phẩm enzym thô thường chứa nhiều loại enzym. .. dung dịch enzyme Mức độ nhạy cảm nhiệt độ của enzyme khi có mặt các dung môi hữu cơ thường mạnh hơn mức độ nhạy cảm của enzyme với nhiệt độ khi có mặt của muối vô cơ Người ta thường kết tủa enzyme bằng dung môi hữu cơ ở nhiệt độ từ 3 – 100C Tỷ lệ và nồng độ các dung môi hữu cơ dùng để kết tủa enzyme được xác định bằng thực nghiệm cho từng loại enzyme và từng nồng độ enzyme có trong dung dịch enzyme *... trình này là làm tăng khả năng thu nhận enzym trong dịch chiết từ tế bào vi sinh vật Dịch chiết thu nhận được từ phương pháp này rất đục do trong đó chứa rất nhiều chầt khác nhau b Phương pháp chiết rút enzym bằng các thiết bị khuếch tán Trong phương pháp chiết rút bằng các thiết bị khuếch tán, các enzym được chuyển từ tế bào vào nước do sự chêch lệch nồng độ enzym từ tế bào vào nước Thiết bị dùng cho... hấp phụ lần thứ hai như lần thứ nhất Sau đó, góp các dịch chiết lại và tủa bằng acetone hay cồn lạnh để tách lấy enzyme Phương pháp tinh sạch enzyme bromelin Tinh sạch bằng phương pháp thẩm tích Trang 23/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Cân 1g enzyme thô, pha trong 10ml dung dịch đệm sodium phosphate 0,03M có pH 7,2 Sau khi tất cả enzyme hòa tan thì cho hỗn hợp vào túi cellophane rồi đặt... giảm đáng kể hoạt động enzym 2.6.4.2 Thu nhận enzym amylase từ VSV Trang 32/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Hệ enzym amylase là một trong số các hệ enzym đựoc sử dụng rộng rãi trong nhất trong công nghiệp, y học và nhiều lĩnh vực kinh tế quốc dân khác Những nghiên cứu thực nghiệm đầu tiên về enzym nói chung và về amylase nói riêng được bắt đầu vào những năm 1811-1814 Các enzym amylase có trong . một enzyme, khi bị thủy phân, ta chỉ thu được các axit amin thì enzyme này được gọi là enzyme đơn cấu tử hay còn gọi là enzyme đơn giản.- Nếu một enzyme,. khác Trang 14/101 Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme lượng enzyme có trong dịch enzyme thô quá ít, hoạt tính enzyme không cao.
