ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN _ _ BÁO CÁO THỰC TẬP DI TRUYỀN 2019 Mục lục: I BUỔI 1: Nhuộm nhân chất tế bào VSV, phương pháp sử dụng trắc vi thị kính & trắc vi vật kính: a Nhuộm nhân chất tế bào vi sinh vật: Chồi Bacillus subtilis Saccharomyces cerevisiae b Kích thước tế bào: D=1 khoảng chia thước đo trắc vi vật kính = 10μm  Có khoảng chia trắc vi vật kính = x 10μm = 10 khoảng chia trắc vi thị kính khoảng trắc vi thị kính = μm  Kích thước tế bào B subtilis = 0.5 vạch trắc vi thị kính = μm  Kích thước tế bào S cerevisiae = vạch trắc vi thị kính = μm Định luật Mendel – Phương pháp χ2: Kết hình dạng hạt cườm: 60hh 100hx 40dd 130dt Tổ hợp hình dạng hạt cườm: 40xx 30tt (h: trịn hồng, x: tròn xanh) (d: thoi đỏ, t: thoi trắng) Tổ hợp dạng hạt cườm Kết quan sát hhdd hhdt hhtt hxdd 20 36 18 hxdt hxtt xxdd xxdt xxtt total 72 10 22 16 200 Tính χ2 (phần tập) Bảng phân cơng cơng việc: Bài Chi tiết Thời gian Chú thích Mitose Trồng hành thu chóp rễ cố định mẫu Chuẩn bị mẫu Nhuộm mẫu Quan sát Nhuộm nhân chất VSV Bài góp Chuẩn bị tiêu (2-4 tiêu bản) Quan sát Chuẩn bị góp Vẽ hình kích thước tế bào Cả nhóm (A) Đánh giá Võ Thị Tú Anh (B) Trần Trung Chánh (C) Bùi Văn Danh (D) II BUỔI Nuôi ruồi lai ruồi Nguyên phân Tổng cộng Quan sát nhiễm sắc thể chóp rễ hành: Nhiễm sắc thể khổng lồ ruồi giấm Hình 2: Hình chụp vùng tăng sinh Hìnhcủa 3: Hình chóp vẽ rễ hànhkì ngun phân Hình 4: Hình chụp tuyến nước bọt ấu trùng ruồi giấm III.BUỔI Giảm phân Quan sát nhiễm sắc thể bao phấn bơng hẹ Hình 6: Hình vẽ kì giảm phân Hình 5: Hình chụp vùng phân chia Quan sát nhiễm sắc thể người Bộ NST người Hình 7: Ảnh NST người Lai nấm lớn IV BUỔI Cảm ứng phân lập đột biến khuyết dưỡng Adenin nấm men saccharomuces cerevisiae: Ở độ pha lỗng 10-7 10-8 khơng lên khuẩn lạc Có lẽ thao tác pha lỗng nhóm em làm không chuẩn nên mật độ tế bào dày đặc Ở độ pha loãng 10-9 lên khuẩn lạc số lượng khoảng 324 tế bào Nhóm em nhóm khơng chiếu xạ  Tổng tế bào /ml: (324*10) / 10-9 = 3.24*1012 (CFU/ml) V BÀI TẬP:Hình 1: ni cấy khuẩn lạc môi trường NA với nồng độ pha lỗng khác (10-7, 10-8,10-9) Bài tập nhóm máu:  Bảng nhóm máu lớp 17CSH Nhóm máu A B AB O Số lượng 17 27 47  Tần số nhóm máu người Việt Nam: Nhóm máu A B AB O Tần số 22% 31% 5% 42%  Bảng tính χ2 với cơng thức khơng hiệu chỉnh: Quan sát (O) Dự kiến ( E ) Sai lệch (d) d2 d2/E A 15 21.56 -6.56 43.03 AB 4.9 4.1 16.81 3.43 O 47 41.16 5.84 34.11 0.83 6.64 χ2  B 27 30.38 -3.38 11.42 0.38 Bảng Chi bình phương Tra bảng với bậc tự F=3 χ2=6.64 => giá trị 0.1 > p > 0.05  không khác biệt kết quan sát dự kiến Kết luận: Tần số nhóm máu lớp giống với tần số nhóm máu nhóm máu người Việt Nam Bài tập Mendel:  Các hoạt động minh họa cho quy luật Mendel Cụ thể: Bướ Hoạt động Minh họa cho Giải thích c qui luật Mendel Cho 40 hạt cườm trịn xanh P chủng 40 hạt tròn hồng cho vào cốc nhựa (mỗi cốc màu) Bốc hạt từ cốc nhựa Lai P chủng + hạt từ cốc nhựa cho khác để vào túi nilon F1 dị hợp Chia làm cụm A, B (20 Cho F1 lai với túi/cụm) để F2 Bốc ngẫu nhiên hạt từ túi nilon cụm A + hạt từ túi cụm B Làm với hạt cườm thoi Mô quy trắng thoi đỏ luật phân li độc Bốc ngẫu nhiên bịch lập cặp tính cườm trịn + bịch trạng cườm thoi Đây phân li bắt cặp ngẫu nhiên cặp alen tương ứng cho cặp màu hạt cườm bốc tổ hợp cách ngẫu nhiên Sự phân li độc lập cặp tính trạng tương ứng dạng hạt cườm tổ hợp ngẫu nhiên cặp tính trạng  kiện độc lập  Viết sơ đồ lai: Giả sử: alen h quy định hạt tròn hồng , alen x quy định hạt tròn xanh alen d quy định hạt thoi đỏ , alen t quy định hạt thoi trắng Ta có: hhdd x (Trịn hồng thoi đỏ ) P: G1 : hd xxtt (tròn xanh thoi trắng) xt F1 ht xxdd (tròn xanh thoi đỏ) xd 100% hxdt F1 x F1: G1 : F2 : hhtt x (Tròn hồng thoi trắng ) hxdt hd, ht, xd, xt x hxdt hd, ht, xd, xt hhdd : hhdt : hhtt : hxdd : hxdt : hxtt : xxdd : xxdt : xxtt  Tính χ2 Kết hình dạng hạt cườm: 60hh 40dd 100hx 130dt 40xx 30tt (h: tròn hồng, x: tròn xanh) (d: thoi đỏ, t: thoi trắng) Tổ hợp hình dạng hạt cườm: Tổ hợp dạng hạt cườm hhdd hhdt hhtt hxdd hxdt hxtt xxdd xxdt xxtt total Kết quan sát Kết dự kiến 20 36 18 72 10 22 16 200 12 39 20 65 15 26 200 Tính χ2 và giá trị p với công thức chưa hiệu chỉnh: Quan sát (O) Dự kiến ( E ) Sai lệch (d) d2 d2/E χ2 hhdd 20 12 64 5.33 hhdt 36 39 -3 0.23 hhtt -5 25 2.78 hxdd 18 20 -2 0.2 hxdt 72 65 49 0.75 32.74 hxtt 10 15 -5 25 1.67 xxdd -6 36 4.5 xxdt 22 26 -4 16 0.62 xxtt 16 10 100 16.67 Bảng Chi bình phương Tra bảng với bậc tự F=8 χ2=32.74 => giá trị p cf- (bệnh) lặn  Khả kiểu gene thai nhi số trường hợp khơng có tái tổ hợp đoạn RFLP locus quy định bệnh:  Nếu kết RFLP thai nhi AB, không xảy tái tổ hợp đoạn RFLP locus quy định bệnh khả mắc bệnh xơ nang thai nhi 100% Xác định tội phạm dựa vào hình biểu kết RFLP  Dựa vào kết điện di đoạn RFLP:  Ở Band Band có xuất đoạn RFLP có kích thước khác với kết điện di RFLP mẫu máu nạn nhân (các vạch ô đỏ)  Band tương ứng với mẫu máu người bị nghi ngờ B cho thấy khơng có đoạn RFLP trùng với đoạn RFLP lạ có mẫu máu từ quần áo âm đạo nạn nhân mẫu máu nạn nhân  Band tương ứng với mẫu máu người bị nghi ngờ A lại cho thấy có đoạn RFLP trùng với đoạn RFLP lạ có mẫu máu từ quần áo âm đạo nạn nhân (vùng ô đỏ) Bên cạnh đó, cịn xuất đoạn RFLP trùng với đoạn RFLP lại Band 3, Band Band (vùng ô xanh lá)  A tội phạm  Nếu dựa vào phương pháp để xác định tội phạm cho kết khơng có độ tin cậy cao, cần phải phối hợp với biện pháp nghiệp vụ điều tra khác để đưa kết luận có tội hay không  ... /ml: (324*10) / 10-9 = 3.24*1012 (CFU/ml) V BÀI TẬP:Hình 1: nuôi cấy khuẩn lạc môi trường NA với nồng độ pha loãng khác (10-7, 10-8,10-9) Bài tập nhóm máu:  Bảng nhóm máu lớp 17CSH Nhóm máu... định tội phạm dựa vào hình biểu kết RFLP  Dựa vào kết điện di đoạn RFLP:  Ở Band Band có xuất đoạn RFLP có kích thước khác với kết điện di RFLP mẫu máu nạn nhân (các vạch ô đỏ)  Band tương ứng... sát dự kiến Kết luận: Tần số nhóm máu lớp giống với tần số nhóm máu nhóm máu người Việt Nam Bài tập Mendel:  Các hoạt động minh họa cho quy luật Mendel Cụ thể: Bướ Hoạt động Minh họa cho Giải