Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu được tiến hành với mục tiêu nhằm đánh giá chất lượng của chế phẩm huyết tương tươi bất hoạt virut được xử lý với bộ kit Theraflex Methylene blue Plasma và máy Maco Tronic, Maco Pharma. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 BƯỚC ĐẦU ĐÁNH GIÁ BẤT HOẠT VIRUT TRÊN CHẾ PHẨM HUYẾT TƯƠNG TƯƠI TẠI BV TRUYỀN MÁU HUYẾT HỌC TP.HCM Trương Thị Kim Dung*, Châu Trần Minh Nghĩa*, Mai Thanh Truyền*, Nguyễn Duy Hiếu* TÓM TẮT Mục tiêu: Đánh giá chất lượng chế phẩm huyết tương tươi bất hoạt virut xử lý với kit Theraflex Methylene blue Plasma máy Maco Tronic, Maco Pharma Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả tiến cứu Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Các sản phẩm huyết tương tươi điều chế xử lý bất hoạt virut Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP HCM Kết quả: Đơn vị huyết tương tươi bất hoạt virut đảm bảo an toàn, chất lượng hiệu sử dụng Các số đánh giá chất lượng số lượng bạch cầu, số lượng tiểu cầu, yếu tố VIII, protein đạt theo tiêu chuẩn chất lượng UK Quy trình điều chế chế phẩm huyết tương tươi bất hoạt virut hoàn toàn phù hợp triển khai thực Từ khóa: Bất hoạt virut, Huyết tương tươi bất hoạt virut, Theraflex MB-Plasma System, Methylene Blue (MB) SUMMARY FIRST STAGE EVALUATION PATHOGEN INACTIVATION OF FRESH PLASMA USING THERAFLEX METHYLENE BLUE SYSTEM Trương Thi Kim Dung, Chau Tran Minh Nghia, Mai Thanh Truyen, Nguyen Duy Hieu* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 380 - 384 Objective: Evaluate the quality of pathogen inactivation fresh frozen plasma is treated with Methylene blue Theraflex Plasma kit and Maco Tronic machine, Maco Pharma Research Methodology: describe prospective study Subjects and Methods: The product is prepared fresh plasma and pathogen inactivation treatment in the Blood Transfusion Hematology hospital Results: MB treated plasma is safety, quality and efficiency The quality indicators such as leukocyte count, platelet count, factor VIII, Total protein The process of preparing products pathogen inactivation of fresh frozen plasma is suitablet and can be implemented Key word: pathogen inactivation, Methylene blue treated Fresh Frozen Plasma, Theraflex MB-Plasma System, Methylene blue (MB) nâng cao cách lọc bạch cầu ĐẶT VẤN ĐỀ bất hoạt virut Lọc bạch cầu không làm giảm Hiện nay, xét nghiệm sàng lọc phản ứng truyền máu, bất phù hợp cải tiến với việc tuyển chọn người hiến HLA mà loại bỏ tác nhân gây bệnh máu nghiêm ngặt góp phần đảm bảo an có kết hợp với tế bào bạch cầu tồn khơng có nguy lây nhiễm truyền cytomegalovirus (CMV) Human T-cell máu Ở số quốc gia, việc đảm bảo an toàn * Bệnh viện Truyền máu Huyết học TPHCM Tác giả liên lạc: BS CKII Trương Thị Kim Dung, ĐT: 0913607677, Email: tynikd@yahoo.com 380 Chuyên Đề Truyền Máu Huyết Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học lymphotropic viruses (HTLV) I II Bất hoạt virut làm bất hoạt tác nhân lây nhiễm chưa phát giai đoạn cửa sổ test bị lỗi Thêm vào đó, việc bất hoạt virut làm bất hoạt tác nhân lây nhiễm chưa thực xét nghiệm sàng lọc như: West Nile Virut, Parvovirus B19,… - Hồn thiện quy trình thực điều chế sản phẩm huyết tương tươi đông lạnh có bất hoạt virut BV Truyền máu Huyết Học Việc sử dụng Methylen Blue (MB) trình bất hoạt virut chế phẩm huyết tương sử dụng để điều trị cho bệnh nhân áp dụng 10 quốc gia giới bao gồm: Anh, Pháp, Đức, Tây Ban Nha, Ý, Ai cập, Nga, Malaysia, Singapore, Brazil, Argentina Đối tượng nghiên cứu Theo xu hướng phát triển ngành truyền máu giới nói chung nước nói riêng, Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học thử nghiệm để đưa vào sử dụng chế phẩm huyết tương tươi bất hoạt virut với hệ thống “MacoPharma Theraflex MB plasma” Với mục tiêu đem đến an toàn cho người nhận máu, tiến hành nghiên cứu bước đầu thực kỹ thuật bất hoạt virut sản phẩm huyết tương tươi Địa điểm nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu tổng quát Đánh giá chất lượng sản phẩm huyết tương tươi đông lạnh bất hoạt virut xử lý với kit Theraflex MB Plasma máy Maco Tronic, Maco Pharma ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế nghiên cứu Nghiên cứu mô tả tiến cứu Các sản phẩm huyết tương tươi điều chế xử lý bất hoạt virut Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP HCM Thời gian nghiên cứu Tháng 08 năm 2011 Tại Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP Hồ Chí Minh Phương pháp nghiên cứu Vật liệu nghiên cứu Bộ kit bất hoạt virut: THERAFLEX – MB PLASMA bao gồm: - Màng lọc huyết tương loại bỏ hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu trước xử lý với MB - 85µg Anhydro Methylen Blue xử lý 235ml đến 315ml huyết tương - Màng lọc loại bỏ Methylen Blue sau hoàn tất việc chiếu đèn máy Mục tiêu cụ thể Xác định số chất lượng sản phẩm huyết tương tươi sau bất hoạt virut: kiểm tra số: số lượng tiểu cầu, số lượng bạch cầu, số lượng hồng cầu, Yếu tố VIII, Total Protein Đối chiếu tiêu chất lượng kiểm tra với tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm theo tiêu chuẩn Châu Âu với tiêu chí - Tiểu cầu: < 30 x 109/L - Số lượng bạch cầu: < x 106/ Đơn vị Hình: Hệ thống kit Theraflex MB - Plasma - Định lượng yếu tố VIII: > 0.5 IU/mL Chuyên Đề Truyền Máu Huyết Học 381 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Máy bất hoạt virut Maco Tronic, Maco Pharma bao gồm đặc điểm: - Kiểm tra viên MB đảm bảo toàn viên tan hoàn toàn vào túi huyết tương - Máy trang bị hệ thống “sodium lamp” với độ dài sóng 590nm; ngăn chứa túi máu ln trì nhiệt độ ≤ 22 oC - Kiểm tra lọc huyết tương đảm bảo toàn huyết tương lọc hết - Q trình thực máy hồn tất khoảng 20 phút với liều chiếu sáng 180J/cm3 - Sau chiếu đèn, lượng MB dư loại bỏ lọc Blueflex Phương pháp chọn mẫu Tiêu chuẩn chọn mẫu Chọn túi máu toàn phần để điều chế huyết tương tươi: - Người hiến máu đủ điều kiện hiến máu 450ml, hiến máu nhiều lần có xét nghiệm sàng lọc âm tính tất lần trước - Túi máu tồn phần tích 450ml thời gian lấy máu khơng q 15 phút, tính thời gian từ lúc lấy máu đến lúc hồn thành đơng lạnh khơng q 08 - Điều chế huyết tương từ túi máu toàn phần: túi máu toàn phần quay ly tâm lạnh RPF: 5000g 12 phút nhiệt độ 4oC, tách lấy phần huyết tương - Túi huyết tương chọn tích từ 235ml đến 315ml Tiêu chuẩn loại trừ - Túi máu người hiến máu lần đầu - Túi máu toàn phần 250ml 350ml - Thời gian lấy máu 15 phút - Thời gian tính từ lúc lấy máu đến lúc đơng lạnh 08 Quy trình thực Thao tác với kit - Nối túi huyết tương với kit bất hoạt virut, mở khóa để huyết tương chảy vào lọc để loại bỏ bạch cầu - Bẻ đường ống thông để huyết tương thấm vào viên Methylen blue chảy vào túi chứa để chiếu đèn 382 - Lắc túi chứa huyết tương 20 giây để MB hòa tan hồn tồn vào huyết tương - Đuổi khí khỏi túi chứa huyết tương, ý không làm huyết tương q trình đuổi khí - Hàn dây túi huyết tương đuổi khí hết: hàn dây để bỏ phần túi rỗng huyết tương ban đầu chảy qua túi để chiếu đèn, giữ lại phần kít có chứa lọc loại bỏ MB sau hoàn tất việc chiếu đèn máy MACOTRONIC Thao tác máy bất hoạt virut MACOTRONIC - Quét mã vạch túi máu vào máy bất hoạt virut - Đặt túi máu vào ngăn chiếu đèn máy, đóng máy lại, chương trình tự động chiếu đèn, thời gian hoàn thành việc chiếu đèn khoảng 20 phút - Lấy túi máu khỏi ngăn chiếu đèn Cho huyết tương túi máu lọc qua lọc để loại bỏ Methylen Blue sau hoàn tất việc chiếu đèn Huyết tương chảy qua túi chứa loại bỏ Methylen Blue có màu vàng Hàn dây túi huyết tương lấy mẫu để kiểm tra tiêu chuẩn chất lượng trước đưa vào tủ đông lạnh để lưu trữ KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Chúng tơi tiến hành quy trình bất hoạt virut 10 đơn vị huyết tương tươi thu kết sau: Số lượng bạch cầu tiểu cầu Theo tiêu chuẩn Châu Âu ( Anh)(4): Số lượng bạch cầu: < x 106/Đơn vị Số lượng tiểu cầu: < 30 x 109/L Chuyên Đề Truyền Máu Huyết Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Bảng Số lượng bạch cầu tiểu cầu STT Số lượng Số lượng Thể tích Tiểu cầu (K/uL) (ml) 10 Bạch cầu (x 10 / Đơn vị) 2,52 2,50 5,24 2,56 4,39 2,50 2,47 2,54 2,41 4,47 0,25 0,25 0,00 0,00 0,44 0,50 0,00 0,25 0,24 0,00 252 250 262 256 219 250 247 254 241 223 Nghiên cứu Y học virut có thời gian lấy máu khơng q 15 phút thời gian từ lúc lấy máu đến lúc đông lạnh không nên giữ yếu tố VIII đạt với tiêu chuẩn chất lượng đề Và sau bất hoạt virut khơng có ảnh hưởng lớn đến số Kết phù hợp với nghiên cứu khác(1,2) Chỉ số Protein Ngồi tiêu chuẩn chất lượng theo tiêu chí Châu Âu (của Anh)(3) Chúng tiến hành kiểm tra thêm số Protein thu số liệu sau: Protein (g/L) 6.00 68 5.00 66 64 4.00 62 SL BC (X 10^6/ĐV) 3.00 SL TC (10^9/L) 60 Protein (g/L) 58 2.00 56 54 1.00 52 0.00 1 Biểu đồ Số lượng bạch cầu, tiểu cầu đơn vị huyết tương Nhận xét: Số lượng bạch cầu tiểu cầu nằm giới hạn chất lượng đạt 100% Yếu tố VIII Theo tiêu chuẩn Châu Âu ( Anh)(4) FVIII: > 0,5 IU/mL 0.8 Yế u t ố VIII (UI/mL) 0.6 Linear (Y ếu t ố VIII (UI/mL)) 0.4 0.2 10 10 Biểu đồ Chỉ số Protein sau bất hoạt Chỉ số protein kiểm tra từ đơn vị huyết tương tươi có bất hoạt virut 100% có số lượng Protein lớn 57 g/L Tham khảo với tiêu chuẩn Châu Âu ( Anh)(3) Đối với huyết tương tươi bất hoạt virut Protein > 50g/L(3,4) KẾT LUẬN 1.2 10 15 Biểu đồ Yếu tố VIII sau bất hoạt Theo quy trình chúng tơi, túi máu chọn để điều chế huyết tương bất hoạt Chuyên Đề Truyền Máu Huyết Học Qua nghiên cứu 10 đơn vị huyết tương tươi bất hoạt virut với kit Theraflex-MB plasma chiếu đèn máy Macotronic, Macopharma Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học Tp Hồ Chí Minh chúng tơi có kết luận rằng: 1.Đơn vị huyết tương tươi bất hoạt virut đảm bảo an toàn, chất lượng hiệu sử dụng 2.Các số đánh giá chất lượng số lượng bạch cầu, số lượng tiểu cầu, yếu tố VIII, protein đạt theo tiêu chuẩn chất lượng Châu Âu (của Anh)(3) 383 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 3.Quy trình điều chế chế phẩm huyết tương tươi bất hoạt virut hoàn toàn phù hợp TÀI LIỆU THAM KHẢO 384 Lambrecht B, Mohr H, Knuver-Hopf J, Schmitt H (1991) Photo inactivation of virues in human fresh plasma by phenothiazine dyes in combination with visible light Vox Sang; 60:207-13 Politis C, Kavallierou L, Hantziara S, Katsea P, Triantaphylou V, Richardson C, et al (2007) Quality and safty of fresh frozen plasma inactivated and leucoreduced with the theraflex methylene blue system including the Blueflex filter: years’experience Vos Sang; 92:319-26 UK Blood Tranfusion & Tissue Transplantation Guidelines (2007) Guide to the reparation, use and quality assurance of blood components, 13th edition Concil of Europe UK Blood Tranfusion & Tissue Transplantation Guidelines, Guidelines for the Blood Transfusion Services in the United Kingdom – 6th Edition Chuyên Đề Truyền Máu Huyết Học ... sản phẩm huyết tương tươi điều chế xử lý bất hoạt virut Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP HCM Thời gian nghiên cứu Tháng 08 năm 2011 Tại Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP Hồ Chí Minh Phương pháp... máu, tiến hành nghiên cứu bước đầu thực kỹ thuật bất hoạt virut sản phẩm huyết tương tươi Địa điểm nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu tổng quát Đánh giá chất lượng sản phẩm huyết tương tươi. .. xu hướng phát triển ngành truyền máu giới nói chung nước nói riêng, Bệnh viện Truyền Máu Huyết Học thử nghiệm để đưa vào sử dụng chế phẩm huyết tương tươi bất hoạt virut với hệ thống “MacoPharma