Đang tải... (xem toàn văn)
Nội dung của bài viết trình bày về việc đánh giá hiệu quả bảo quản tế bào gốc (TBG) tủy răng bằng dung dịch chuyên chở mới, không đắt tiền, pha chế dễ dàng với các thành phần phổ biến ở Việt Nam.
Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 3 HIỆU QUẢ BẢO QUẢN TẾ BÀO GỐC TỦY RĂNG CỦA DUNG DỊCH CHUN CHỞ Lê Hồng Sơn*, Ngơ Thị Quỳnh Lan*, Trần Lê Bảo Hà** TĨM TẮT Mục tiêu: Nghiên cứu nhằm đánh giá hiệu quả bảo quản tế bào gốc (TBG) tủy răng bằng dung dịch chun chở mới, khơng đắt tiền, pha chế dễ dàng với các thành phần phổ biến ở Việt Nam. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu: Dung dịch chuyên chở được pha bằng cách hòa tan 3 ống gentamycin 80mg/2ml trong 500ml dung dịch nước muối sinh lý. Nghiên cứu thử nghiệm được thực hiện trên 43 răng khơn ngun vẹn thu thập từ các bệnh nhân 18 – 35 tuổi đến nhổ răng tại Khoa Răng Hàm Mặt. Răng được loại bỏ mơ mềm, tạo rãnh sâu 2mm trên thân – chân răng và bảo quản bằng dung dịch chun chở trong 6 giờ, 9 giờ, 12 giờ ở điều kiện 4°C. Đánh giá mơ tủy nhiễm trùng khi mơi trường ni cấy vẩn đục sau 3 – 5 ngày ni cấy và mẫu mơ tủy xem như đã chết khi khơng có tế bào phát triển sau 2 tuần ni cấy. Kết quả: Trong 43 răng khơn, số lượng răng được bảo quản trong 6 giờ, 9 giờ và 12 giờ lần lượt là 14 răng, 16 răng và 13 răng. Có 1 mẫu trong nhóm 12 giờ bị nhiễm khuẩn sau 5 ngày ni cấy. Tỉ lệ mẫu khơng nhiễm đạt 100% ở nhóm 6 giờ và 9 giờ; 92,3% ở nhóm 12 giờ. Tỉ lệ mẫu ni cấy cho tế bào bám dính là 92,9% đối với nhóm 6 giờ; 75,0% đối với nhóm 9 giờ và 53,8% đối với nhóm 12 giờ. Kết quả flow‐cytometry cho thấy quần thể tế bào P4 được phân lập dương tính cao (>99,5%) với các marker của TBG trung mơ và biểu hiện khá thấp (7,5% ‐ 10,6%) với các marker tế bào tạo máu. Kết luận: Dung dịch chun chở đề nghị có thành phần dễ tìm, pha chế đơn giản và khơng đắt tiền nhưng vẫn có hiệu quả cao trong việc bảo quản sự sống của TBG tủy răng. Các mẫu tủy răng vẫn có thể cho TBG trung mơ sau 12 giờ bảo quản và hiệu quả bảo quản tương đương với các dung dịch thương mại trong 6 giờ. Từ khóa: tế bào gốc tủy răng, dung dịch chun chở, flow cytometry, tế bào gốc trung mơ, marker ABSTRACT THE EFFICIENCY OF A NOVEL TRANSPORT SOLUTION IN PRESERVING DENTAL PULP STEM CELLS Le Hoang Son, Ngo Thi Quynh Lan, Tran Le Bao Ha * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 18 ‐ Supplement of No 1 ‐ 2014: 282 ‐287 Objectives: The purpose of this study is that testing the efficiency of a suggested transport solution in preserving dental pulp stem cells (DPSCs) in 6, 9, and 12 hours after the teeth were extracted. Materials and Methods: A new transport solution was fomulated by mixing three jars of gentamycin 80mg/2mL (in liquid form) with 500ml sterile saline. The solution was poured into several small vials. Forty‐ three extracted intact human third molars were obtained from Oral Surgical Center at the Faculty of Odonto – Stomatology. The teeth were divided into three groups: group A (n=14) – stored in 6h, group B (n=16) – stored in 9h and group C (n=13) – stored in 12h. Teeth were externally sterilized and DPSCs were isolated using the protocol adapted from Stem Cell laboratory at the University of Sciences. Results: The percentage of uncontaminated samples was 100% for group A and B, 92.3% for group C. The * Khoa RHM – Đại học Y Dược TP HCM Khoa Sinh Học – Trường ĐH Khoa Học Tự Nhiên – ĐHQG TP HCM Thông tin liên hệ: Lê Hoàng Sơn ĐT: 0933688804 ** 282 Email: sonrhm07@gmail.com Chuyên Đề Mắt – Tai Mũi Họng – Răng Hàm Mặt Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Nghiên cứu Y học success rate for DPSCs isolation was 92.9% for group A, 75.0% for group B and 53.8% for group C. Three selected passage 4 DPSCs cultures showed high expression of bone – marrow mesenchymal stem – cell (MSC) markers (>99.5%) and low expression of specific hematopoietic cells markers (7.5% ‐ 10.6%). Conclusion: Suggested solution is not expensive, easy to solube with available ingredients, and effective in preserving DPSCs. The pulp of extracted wisdom teeth still has viable MSCs after 12 hours preservation, and the effect of transpotation solution is same with commercial ones in 6 hours. Keywords: dental pulp stem cells, transport solution, flow cytometry, mesenchymal stem cells, marker pha chế, khơng đắt tiền và có hiệu quả trong ĐẶT VẤN ĐỀ việc bảo quản sự sống của TBG tủy răng, tạo Tế bào gốc (TBG) là các tế bào có khả năng tiền đề để thành lập một ngân hàng TBG tủy biệt hóa thành nhiều dòng tế bào trưởng thành. răng tại Việt Nam, chúng tơi đề nghị một dung TBG được tìm thấy ở nhiều mơ khác nhau như dịch chun chở mới có thành phần chính là não, tủy xương, máu, mạch máu, da, gan, mỡ, nước muối sinh lý và gentamycin. Nghiên cứu răng,… So với các loại TBG khác, TBG tủy răng này được thực hiện với vấn đề quan tâm sau: có những ưu điểm như dễ thu nhận, khơng gặp Hiệu quả bảo quản tế bào gốc tủy răng của những trở ngại về pháp lý và nhân quyền, tỉ lệ dung dịch chun chở. tăng sinh cao, có khả năng biệt hóa thành nhiều VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU dạng tế bào khác nhau khi ni cấy trong mơi trường thích hợp và ít gây đáp ứng miễn dịch Mẫu nghiên cứu khi cấy ghép. Kể từ khi được phân lập và nuôi 43 răng khôn vừa mới nhổ tại bộ môn Phẫu cấy thành công vào năm 2000, nhiều báo cáo về Thuật Miệng, Khoa Răng Hàm Mặt, Đại học Y tiềm năng biệt hóa của TBG tủy răng được các Dược TP. HCM. nhà khoa học trên khắp thế giới cơng bố. Song Thiết kế nghiên cứu song đó, bước đầu, TBG tủy răng đang được Nghiên cứu trong phòng thí nghiệm (in ứng dụng trong việc điều trị một vài bệnh liên vitro), răng được bảo quản trong dung dịch quan đến thần kinh, gan, tim trên động vật và chuyên chở ở điều kiện 4°C trong các khoảng cho kết quả khả quan. Từ những phát hiện về thời gian: khả năng biệt hóa và tiềm năng sử dụng như một nguồn vật liệu trong y học tái tạo, các nhà (1) Trong 6 giờ. khoa học đã nghĩ đến việc bảo quản lạnh chúng. (2) Trong 9 giờ. Hiện nay, trên thế giới có nhiều ngân hàng TBG (3) Trong 12 giờ. răng thương mại đang hoạt động như Store‐A‐ Quy trình thực hiện Tooth (Lexington, MA, Hoa Kì), NDPL Chuẩn bị dung dịch chuyên chở (Newton, MA, Hoa Kì), StemSave (New York, Hoa Kì), Three Bracket (Hiroshima, Nhật Dung dịch chuyên chở được pha chế bằng Bản),… Trong quy trình bảo quản, dung dịch cách hòa tan 3 ống gentamycin 80mg/2ml trong chun chở đóng vai trò rất quan trọng. Nó đảm 500ml dung dịch nước muối sinh lý. Lắc đều bảo cho răng khơng bị nhiễm các vi sinh vật như chai dung dịch trong 2 phút để tạo mơi trường vi khuẩn, vi nấm và duy trì sự sống của TBG tủy đồng nhất. Sau đó, chiết ra mỗi ống falcon (dung răng. Có nhiều dung dịch được sử dụng như tích 15ml) 5ml dung dịch chun chở. DMEM, α – MEM, HBSS, PBS,… Tuy nhiên, các dung dịch này có giá thành cao, khó pha chế và Thu thập mẫu răng khơng phổ biến tại thị trường Việt Nam. Các răng khơn còn ngun vẹn sau khi nhổ Nhằm mục đích tạo một mơi trường được làm sạch phần mơ nha chu, bao răng còn chun chở có các thành phần phổ biến, dễ Răng Hàm Mặt 283 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 dính xung quanh. Sau đó, dùng tay khoan siêu tốc và mũi khoan tròn có đường kính 2mm tạo một rãnh trên thân – chân răng. Đưa răng vào ống falcon có dung dịch chun chở và bảo quản trong đá lạnh ở điều kiện 4°C. Thu nhận mơ tủy răng Quy trình được thực hiện trong tủ ni cấy sinh học, tại Phòng thí nghiệm nghiên cứu và ứng dụng Tế Bào Gốc, Khoa Sinh Học, Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên. Răng được khử trùng bằng cách: sát trùng với Povidine Iod 10% (Betadine) trong 10 phút, sau đó rửa lại 2 lần bằng dung dịch PBS. Sau đó dùng kéo lớn tách đơi răng để thu nhận mơ tủy. Ni cấy sơ cấp mơ tủy răng Mơ tủy được nuôi sơ cấp theo phương pháp nuôi cấy mảnh mô của Trần Lê Bảo Hà và cs. (2011). Mẫu tủy răng được cắt thành nhiều mảnh nhỏ. Sau đó, đặt phần mô tủy răng vào đĩa 35 mm và ép vào bề mặt đĩa bằng lamelle. Thêm mơi trường DMEM/F12 có bổ sung penicillin và streptomycin vào đĩa ni. Mơi trường trong đĩa ni cấy được thay sau mỗi 2 ngày và ủ ở điều kiện 37°C, 5% CO2. Ni cấy thứ cấp Khi tế bào đã phủ đầy bề mặt đĩa ni, tiến hành cấy chuyền thứ cấp. Rửa sạch đĩa ni bằng PBS, tiếp đến, dùng trypsin/EDTA 0,25% để tách tế bào khỏi bề mặt đĩa. Khi tế bào đã bong ra hồn tồn, thêm mơi trường DMEM/F12 vào dung dịch rồi huyền phù. Sau đó, cho tồn bộ dung dịch thu được vào bình ni cấy. Q trình ủ và thay môi trường được thực hiện tương tự như trong nuôi cấy sơ cấp. Khi tế bào phát triển phủ đầy bề mặt chai ni, tiếp tục cấy chuyền để tạo các dòng tế bào thứ cấp tiếp theo. Nhận diện marker TBG tủy răng người bằng phương pháp flow‐cytometry Các tế bào ở lần cấy chuyền thứ 4 được 284 nhuộm với 10μl kháng thể có các marker CD34, CD73, CD90, CD13, CD14 và HLA‐DR. Tiến hành đánh giá marker bằng máy FACS Calibur sử dụng phần mềm Cell Quest Pro. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Dung dịch chuyên chở sử dụng Nước muối sinh lý là một dung dịch đẳng trương với tế bào và mô cơ thể người, tạo môi trường thuận lợi cho sự trao đổi ion và lưu thơng dịch nội – ngoại bào. Vì tính thơng dụng, khơng mắc tiền, khả năng duy trì tình trạng ổn định của tế bào của dung dịch phù hợp với yêu cầu đề tài hướng đến nên chúng tơi chọn nước muối sinh lý là thành phần chính của dung dịch chun chở. Gentamycin là kháng sinh nhóm Aminoglycosides, có tác dụng kiềm khuẩn phổ rộng. Để phát huy tối đa sự tiện lợi và đơn giản khi pha chế dung dịch, chúng tôi sử dụng gentamycin dạng dung dịch (gentamycin solfato, 80mg/2ml). Nồng độ gentamycin được khuyến cáo sử dụng trong ni cấy tế bào động vật có vú là 50 μg/ml, nồng độ gây độc tế bào là 3000 μg/ml. Trong nghiên cứu trước đây, tác giả Zhang W và cs. (2006) sử dụng kháng sinh gentamycin với nồng độ 500 μg/ml. Vì vậy, chúng tơi sử dụng gentamycin ở nồng độ 480 μg/ml (tương ứng pha 3 chai gentamycin trong 500ml dung dịch nước muối sinh lý). Kết quả thu nhận và khử nhiễm mơ tủy răng người Bảng 1: Kết quả xử lý mẫu ở các nhóm Thời gian bảo quản Số mẫu Số mẫu nhiễm % số mẫu nhiễm 14 0% 16 0% 12 13 7,7% Chung 43 2,3% Khơng có mẫu mơ tủy bị nhiễm khuẩn sau khi được bảo quản trong dung dịch chuyên chở 6 giờ và 9 giờ. Đối với nhóm răng được bảo quản trong 12 giờ, có một mẫu mơ tủy bị nhiễm (tỉ lệ 7,7%), ghi nhận ở ngày thứ 3 sau Chuyên Đề Mắt – Tai Mũi Họng – Răng Hàm Mặt Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 khi ni cấy. Mẫu bị nhiễm khuẩn được thu ngày 11/03/2013, răng khơn hàm dưới bên trái, bệnh nhân 24 tuổi, giới tính nữ. Xét chung tất cả các răng được thu thập trong nghiên cứu, tỉ lệ mẫu bị nhiễm khuẩn là 2,3% (n=43). Vì khơng ghi nhận được đặc điểm bất thường ở mẫu nhiễm và sự khác biệt tỉ lệ mẫu nhiễm ở ba nhóm khơng có ý nghĩa thống kê nên chúng tơi nghĩ ngun nhân là do thao tác của người thực hiện hoặc dụng cụ làm việc đã bị nhiễm khuẩn. Theo Perry PC và cs. (2008) khi dùng PBS để bảo quản răng, trong 40 răng bảo quản, có 7 mẫu bị nhiễm sau 5 ngày ni cấy, chiếm tỉ lệ 17,5%. Tuy tác giả có đề cập răng việc sử dụng mơi trường HTS, PBS và MesenCult có thể bảo quản răng đến 120 giờ ở 4°C sau khi nhổ nhưng tác giả khơng đề cập đến tỉ lệ răng bị nhiễm là bao nhiêu. Vậy, mơi trường chun chở do chúng tơi đề nghị có hiệu quả trong việc bảo quản mơ tủy răng khơng bị nhiễm khuẩn. Kết quả ni cấy tế bào tủy răng Bảng 2: Kết quả ni cấy mảnh mơ ở các nhóm Thời gian bảo quản giờ 12 Chung Số Số mẫu có tế % số mẫu có tế mẫu bào bám dính bào bám dính 14 16 13 43 13 12 32 92,9% 75,0% 53,8% 74,4% p* 0,027 Theo Bảng 2, tỉ lệ mẫu nuôi cấy thành công giảm dần qua 3 nhóm thời gian. Sự giảm tỉ lệ mẫu ni cấy thành cơng phù hợp vì mơi trường chun chở đề nghị khơng có chất dinh dưỡng nên sức sống của tế bào sẽ giảm đi khi thời gian kéo dài. Theo Perry BS và cs. (2008), số lượng TBG tủy răng nuôi cấy được sau 14 ngày giảm có ý nghĩa thống kê qua thời gian bảo quản (0 giờ, 24 giờ, 48 giờ và 72 giờ). Tuy nhiên, theo tác giả sự giảm sút này khơng có ý nghĩa nhiều vì qua thời gian ni cấy, lượng TBG tủy răng sẽ tăng lên nhanh chóng. Đồng thời, khi tác giả ni cấy mẫu ngay sau khi nhổ răng (dùng PBS làm dung dịch chun chở), chỉ có 31/40 (77,5%) mẫu có tế Răng Hàm Mặt Nghiên cứu Y học bào bám dính sau 14 ngày ni cấy. Tuy nhiên, có khác biệt là tác giả sử dụng phương pháp ni cấy tế bào đơn. Bảng 3: Kết quả ni cấy mảnh mơ ở nhóm bảo quản 6, 9, 12 giờ theo vị trí răng Thời gian bảo quản giờ 12 Chung Hàm Khơng Có tế có tế bào bào (100%) (66,7%) (60,0%) 12 (75,0%) (0%) (33,3%) (40,0%) (25,0%) Hàm Khơng Có tế có tế bào bào (11,1%) (88,9%) (20,0%) (80,0%) 4 (50,0%) (50,0%) 20 (25,9%) (74,1%) Theo vị trí răng, tỉ lệ mẫu răng cho tế bào bám dính ở 2 nhóm hàm trên và hàm dưới tương đương nhau (75,0% và 74,1%). Kết quả này phù hợp vì các răng khơn hàm trên và hàm dưới có mầm răng hình thành và khống hóa ở thời điểm gần như cùng lúc với nhau và đều là răng kế tiếp. Mặc dù các răng khôn hàm dưới chịu nhiều sang chấn hơn trong khi nhổ, nhưng rõ ràng tiềm năng cho TBG tủy răng khi nuôi cấy của răng khôn hàm dưới và răng khôn hàm trên là như nhau. Như vậy, khi tiểu phẫu nhổ răng khôn, nếu không cắt răng sẽ không ảnh hưởng xấu đến sức sống của các tế bào trong tủy răng. Từ q trình quan sát các mẫu ni cấy, chúng tơi nhận thấy xuất hiện tế bào bám dính trên đĩa ni sau 3 – 15 ngày ni cấy tùy theo mẫu. Sau khi nuôi sơ cấp 15 – 20 ngày có hiện tượng các tế bào hợp dòng và sau 4 – 5 tuần ni sơ cấp thì các tế bào bám đầy đĩa và có thể cho cấy chuyền để ni thứ cấp. Theo Huang và cs. (2006), Trần Lê Bảo Hà và cs. (2011), Hilkens P, Gervois P và cs. (2013) ni cấy mảnh mơ cho ra các tế bào có hình dạng giống ngun bào sợi, nhưng có kích thước khác nhau và hình dạng ít có sai biệt. Đồng thời, tác giả cũng ghi nhận sau 2 – 3 tuần thì tế bào mới bám đầy đĩa nuôi và cho phép cấy chuyền để nuôi cấy sơ cấp. So với Huang 285 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 và cs. (2006), tế bào của chúng tơi có hình dạng tương tự; tuy nhiên, thời gian cần để cấy chuyền chậm hơn. Tuy nhiên, trong cả 3 nghiên cứu trên, tác giả không bảo quản răng qua các khoảng thời gian như nghiên cứu của chúng tôi. Hơn nữa, dung dịch chuyên chở sử dụng trong nghiên cứu này khơng có chất dinh dưỡng để ni tế bào nên lượng tế bào còn sống trong tủy răng bị giảm đi. Tuy nhiên, vì nghiên cứu của chúng tôi hướng đến việc bảo quản TBG tủy răng nên không việc kéo dài thời gian nuôi cấy khơng có ảnh hưởng đến kết quả. Nhận diện marker TBG tủy răng người bằng phương pháp flow cytometry Flow cytometry là một kỹ thuật có độ nhạy cao dùng để xác định các marker bề mặt của tế bào. Kỹ thuật này sử dụng phương pháp nhuộm huỳnh quang gồm một kháng thể kháng marker bề mặt có gắn màu huỳnh quang. Sau đó, các tế bào sẽ được di chuyển theo dòng chất lỏng xuyên qua một chùm tia sáng. Khi tế bào có nhuộm huỳnh quang bị va đập bởi ánh sáng tập trung thì chúng phát ra những tín hiệu khác nhau. Tín hiệu này được cảm nhận bằng máy dò, chuyển đến máy tính xử lí và cung cấp thơng tin. Năm 2007, theo tiêu chuẩn của Tổ chức Liệu Pháp Tế Bào Quốc Tế, TBG trung mơ phải bám dính được vào bề mặt ni cấy, biểu hiện dương tính cao với các marker CD105, CD73, CD90 và khơng biểu hiện (dương tính thấp) với các marker CD45, CD34, CD14 hoặc CD11b, CD79 a hoặc CD19, HLA‐DR. Bảng 3: Nhận diện marker TBG tủy răng người bằng phương pháp flow cytometry Tên mẫu TR1 27-2 TR3 01-3 TR1 11-4 Các marker TBG trung mô CD13 CD73 CD90 99,46% 99,91% 99,58% 99,56% 99,91% 99,68% 99,60% 99,85% 99,69% Qua các thế hệ cấy chuyền, dòng tế bào thu được sẽ thuần chủng hơn nhờ khả năng chọn lọc. Theo kết quả chạy flow cytometry thế hệ P4 của ba mẫu, tất cả các marker đặc trưng cho TBG trung mơ đều biểu hiện từ 99,5% trở lên. Đối với các marker đặc trưng cho các tế bào tạo máu, sự biểu hiện khá thấp, dao động từ 7,5% đến 10,6%. Đặc điểm của việc ni cấy mơ là khơng có q trình chọn lọc tế bào ban đầu nên vẫn còn lẫn với các tế bào tạo máu khác. Tuy nhiên, nếu cấy chuyền đến các thế hệ sau như P5, P6,… dòng tế bào thuần hơn, tỉ lệ tế bào dương tính với các marker tế bào tạo máu sẽ giảm. Như vậy, quần thể tế bào P4 thu được có sự hiện diện của các TBG tủy răng. KẾT LUẬN Các marker TBG máu CD34 HLA-DR 8,80% 7,91% 7,92% 7,45% 8,18% 7,67% 80mg/2ml và 500ml dung dịch nước muối sinh lý. Từ các kết quả cho thấy DDCC đề nghị có khả năng bảo quản TBG tủy răng tương đương với các dung dịch thường dùng trong 6 giờ. Ở khoảng thời gian 9 giờ và 12 giờ thì khả năng bảo quản thấp hơn. Như vậy, chúng tơi đã pha chế được DDCC có hiệu quả bảo vệ sự sống của TBG tủy răng bằng với các dung dịch thường dùng trong 6 giờ ở điều kiện 4°C. TÀI LIỆU THAM KHẢO Nghiên cứu được thực hiện trên mẫu nghiên cứu là 43 răng khôn vừa mới nhổ tại Khoa Răng Hàm Mặt. Các răng được bảo quản bằng dung dịch nước muối sinh lý bổ sung gentamycin theo tỉ lệ 3 ống gentamycin 286 CD14 10,58% 9,76% 9,71% Gronthos S, Mankani M, Brahim J, Robey PG, and Shi S (2000), “Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo”, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 97, pp. 13625 – 13630. Hoàng Tử Hùng, Huỳnh Kim Khang, Ngơ Thị Quỳnh Lan, Hồng Đạo Bảo Trâm (2010), Mơ phơi răng miệng, NXB Y học, Hà Nội, tr. 111 – 168. Huang GTJ, Sonoyama W, Chen J, and Park SH (2006), “In vitro characterization of human dental pulp cells various isolation methods and culturing environments”, Cell Tissue Res, 324, pp. 225 – 236. Perry PC, Zhou D, Wu X, Yang FC, Byers MA, Chu TMG, Hockema JJ, Woods EJ and Goebel WS (2008), “Collection, Cryopreservation, and Characterization of Human Dental Pulp – Derived Mesenchymal Stem Cells for Banking and Chuyên Đề Mắt – Tai Mũi Họng – Răng Hàm Mặt Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ bản của Số 1 * 2014 Clinical Use”, Tissue Engineering, 14, pp. 149 – 156. Phan Kim Ngọc, Phạm Văn Phúc (2010), Công nghệ sinh học trên người và động vật, NXB Giáo dục, TP. HCM, tr. 127 – 207. Trần Lê Bảo Hà và cs. (2011), “Nghiên cứu nuôi cấy tế bào gốc tủy răng và tạo khung nâng đỡ chứa tế bào gốc tủy răng người”, Đề tài khoa học công nghệ, Trường ĐH Khoa Học Tự Nhiên, ĐH Quốc Gia TP. HCM, tr. 12 – 29. Zhang W, Walboomers F, Shi S, Fan M, and Jansen JA (2006), “Multilineage Differentiation Potential of Stem Cells Derived Răng Hàm Mặt Nghiên cứu Y học from Human Dental Pulp after Cryopreservation”, Tissue Engineering, 12, pp. 2813 – 2823. Ngày nhận bài báo: 21/11/2013 Ngày phản biện nhận xét bài báo: 11/12/2013 Ngày đăng báo: 05/01/2014 287 ... nhiêu. Vậy, mơi trường chun chở do chúng tơi đề nghị có hiệu quả trong việc bảo quản mơ tủy răng khơng bị nhiễm khuẩn. Kết quả ni cấy tế bào tủy răng Bảng 2: Kết quả ni cấy mảnh mơ ở các nhóm Thời gian bảo quản. .. 0% 16 0% 12 13 7,7% Chung 43 2 ,3% Khơng có mẫu mơ tủy bị nhiễm khuẩn sau khi được bảo quản trong dung dịch chuyên chở 6 giờ và 9 giờ. Đối với nhóm răng được bảo quản trong 12 giờ, có một mẫu mơ tủy bị ... phương pháp ni cấy tế bào đơn. Bảng 3: Kết quả ni cấy mảnh mơ ở nhóm bảo quản 6, 9, 12 giờ theo vị trí răng Thời gian bảo quản giờ 12 Chung Hàm Khơng Có tế có tế bào bào (100%) (66,7%) (60,0%)