Đang tải... (xem toàn văn)
Cây Quan âm biển mọc khá phổ biến ở vùng ven biển nước ta, quả và lá từ rất lâu được dùng làm thuốc trị đau nửa đầu, đau mắt, quáng gà, đau cơ, đau dây thần kinh, răng lợi sưng đau, bệnh ngoài da, bệnh về gan... Tuy nhiên, ở Việt Nam, việc sử dụng dược liệu này chủ yếu vẫn còn theo kinh nghiệm mà chưa có nhiều tài liệu, công trình nghiên cứu đầy đủ, sâu sắc về mặt hóa học cũng như tác dụng dược lý. Bài viết với mục đích chuẩn hóa nguồn dược liệu này làm cơ sở cho những nghiên cứu về sau, và vấn đề được đặt ra ở đây là xây dựng các tiêu chuẩn cho lá và quả quan âm biển.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN LÁ VÀ QUẢ QUAN ÂM BIỂN (VITEX ROTUNDIFOLIA L f VERBENACEAE) Nguyễn Thị Xuân Diệu*, Trần Hùng* TÓM TẮT Mục tiêu: Xây dựng số tiêu chuẩn cho Quan âm biển (Vitex rotundifolia L f.Verbenaceae) Phương pháp: Các phương pháp thường quy theo Dược điển Việt Nam IV Kết quả: Đã xây dựng số tiêu chuẩn bao gồm: cảm quan, đặc điểm vi học, thử tinh khiết, tiêu định tính định lượng cho Quan âm biển Kết luận: Đây kết bước đầu làm sở cho nghiên cứu sâu thời gian tới thành phần hóa học tác dụng dược lý dược liệu Từ khóa: Quan âm biển, Vitex rotundifolia, tiêu chuẩn ABSTRACT PROPOSE SOME STANDARDS FOR LEAF AND FRUIT OF QUAN AM BIEN (VITEX ROTUNDIFOLIA L f VERBENACEAE) Nguyen Thi Xuan Dieu, Tran Hung * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 18 - Supplement of No - 2014: 488 - 496 Objectives: To propose some standards for leaf and fruit of Quan am bien (Vitex rotundifolia L f Verbenaceae) Methods: Carry out with routine procedures Results: Standardization for leaf and fruit of Vitex rotundifolia L f Verbenaceaesuch as description, powders, purification (moisture, total ash, acidinsoluble ash, sulfat ash), qualitative analysis (chemical and thin layer chromatography method) and quantitative analysis (essential oil percentage, alkaloid content) were proposed Conclusions: These results are first step for further study on Quan am bien’s chemical compositions as well as its pharmacological effects Key words: Quan am bien, Vitex rotundifolia, standards hóa nguồn dược liệu làm sở cho ĐẶT VẤN ĐỀ nghiên cứu sau, đặt vấn đề xây Cây Quan âm biển (Vitex rotundifolia L f dựng tiêu chuẩn cho Quan âm biển Verbenaceae) mọc phổ biến vùng ven biển (Vitex rotundifolia L f Verbenaceae) nước ta, từ lâu dùng làm NGUYÊNLIỆU - PHƯƠNGPHÁP NGHIÊN CỨU thuốc trị đau nửa đầu, đau mắt, quáng gà, đau cơ, đau dây thần kinh, lợi sưng đau, bệnh Nguyên liệu da, bệnh gan Tuy nhiên, Việt Nam, Lá Quan âm biển thu hái tháng 8/ việc sử dụng dược liệu chủ yếu theo 2012 Ninh Hòa, Khánh Hòa.Mẫu định kinh nghiệm mà chưa có nhiều tài liệu, cơng danh lưu Bộ mơn Dược liệu, khoa Dược, trình nghiên cứu đầy đủ, sâu sắc mặt hóa học Đại học Y dược TP Hồ Chí Minh (QAB020512) tác dụng dược lý Với mục đích chuẩn * Khoa Dược, ĐH Y Dược TP.HCM Tác giả liên lạc: PGS TS Trần Hùng 488 ĐT: 0918057096 Email: tranhung@uphcm.edu.vn Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu thực vật học Quan sát, mô tả đặc điểm cảm quan vàvi học Quan âm biển (cắt vi phẫu, soi bột) Định tính Phương pháp hóa học Dùng phản ứng định tính nhóm hoạt chất có dược liệu Phương pháp sắc ký lớp mỏng Thăm dò, chọn hệ dung mơi thích hợp để định tính cao methanol tinh dầu Quan âm biển Thử tinh khiết Độ ẩm: theo quy định DĐVN IV, phụ lục 9.6.(1) Độ tro: theo quy định DĐVN IV, phụ lục 9.7, 9.8, 9.9 (1) Định lượng Nghiên cứu Y học với thuốc thử Bertrand Gộp chung dịch chloroform vào bình lắng gạn, rửa nước cất, gạn vào becher khô, làm khan natri sulfat Gạn dịch chiết làm khan vào becher khơ cân bì Rửa lớp natri sulfat chloroform gộp chung vào becher Bốc dung môi bếp cách thủy cắn sấy cắn 110 OCcho tới khối lượng không đổi Cân cắn tính hàm lượng alkaloid base tồn phần Xây dựng tiêu chuẩn cho Quan âm biển Tiêu chuẩn cho Quan âm biển xây dựng dựa kết thu được, bao gồm: cảm quan, đặc điểm vi học, thử tinh khiết, tiêu định tính định lượng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Cảm quan Đặc điểm giải phẫu Quan âm biển đặc trưng Đây đặc điểm phục vụ tốt cho công tác kiểm nghiệm dược liệu Hàm lượng chất chiết được: tiến hành theo phương pháp ngâm lạnh (Phụ lục 12.10)(1), với dung môi ethanol 70% (TT) ethanol 96% (TT) Định lượng hàm lượng tinh dầu toàn phần: Lấy100g bột dược liệu cho vào bình chưng cất dung tích 1l, thêm 250 ml nước cất, chưng cất đến thể tích tinh dầu khơng đổi hai lần đọc cách giờ, xác định hàm lượng tinh dầu thu Định lượng hàm lượng alkaloid toàn phần: Cân xác khoảng 20g bột dược liệu cho vào bình nón nút mài 250 ml, làm ẩm lượng vừa đủ NH4OH 25%, để yên 15 phút Chiết dung môi chloroform dịch chiết (sau acid hóa) khơng tạo tủa với thuốc thử Bertrand Dồn dịch chiết chloroform lại,cơ đến cắn Hòa tan cắn dung dịch HCl 10% lọc lấy dịch lọc dịch lọc khơng tạo tủa với thuốc thử Bertrand Gộp chung dịch acid vào bình lắng gạn, kiềm hóa NH4OH 25% pH 10, chiết alkaloid base chloroform dịch chiết (sau acid hóa) khơng tạo tủa Chun Đề Dược Học Hình Lá Quan âm biển Hình Quả Quan âm biển Định tính Phương pháp hóa học Kết định tính thành phần hóa thực vật cho thấy Quan âm biển chứa triterpenoid, tinh dầu, flavonoid, alkaloid, polyphenol Dùng phản ứng định tính nhóm hoạt chất để định tính Quan âm biển Phương pháp sắc ký lớp mỏng Định tính cao tồn phần: Dùng hệ chloroform – methanol (9:1) làm hệ phân tích Định tính tinh dầu: Dùng hệ toluen – ethyl acetat (95:5) làm hệ phân tích 489 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Thử tinh khiết Độ ẩm Độ tro Tro toàn phần Bảng Kết độ ẩm Quan âm biển Kết (%) Lá Quả Lần 7,55 10,23 Lần 7,47 10,77 Lần 7,62 10,35 Trung bình 7,55 10,45 Bảng Kết tro toàn phần Quan âm biển Kết (%) Lá Quả Lần 5,60 5,22 Lần 5,59 5,43 Lần 5,60 5,34 Trung bình 5,60 5,33 Đặc điểm vi học Vi phẫu Hình Vi phẫu Quan âm biển A Tiết diện vi Hình Vi phẫu cuống Quan âm biển Tiết diện phẫu lá; B Hình chi tiết vi phẫu lá; C Lông tiết lông che chở vi phẫu cuống lá; B Hình chi tiết vi phẫu cuống lá; C Lơng tiết Hình Vi phẫu Quan âm biển 490 Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học Bột Hình Các cấu tử bột lá: A, B, C, D Các Hình Các cấu tử bột quả: A Tế bào mơ dạng lơng che chở; E Mảnh biểu bì mang lơng che chở lỗ khí; F Mảnh biểu bì – hạ bì mang lơng che chở; G Lơng tiết; H Mảnh mô dày; I Sợi cứng; B Mảnh vỏ quả; C Mảnh vỏ hạt; D Mảnh nội nhũ; E Mạch vạch; F Mạch điểm; G Hạt tinh bột; H Lơng che chở; I Mảnh biểu bì mang lơng che chở Tro không tan acid Bảng Kết tro không tan acid Quan âm biển Kết (%) Lá Quả Lần 0,25 1,58 Lần 0,30 1,55 Lần 0,45 1,64 Trung bình 0.33 1,59 Tro sulfat Bảng Kết tro sulfat Quan âm biển Kết (%) Lá Quả Lần 7,67 7,16 Lần 7,7 7,12 Lần 7,84 6,99 Trung bình 7,74 7,09 Bảng Kết hàm lượng chất chiết Quan âm biển với dung môi ethanol 96% (TT) Kết (%) Lá Quả Lần 20,70 12,76 Lần 20,75 12,69 Lần 20,69 12,66 Trung bình 20,71 12,70 Định lượng tinh dầu Bảng Kết hàm lượng tinh dầu Quan âm biển Kết (%) Lá Quả Lần 0,6 0,4 Lần 0,65 0,45 Lần 0,6 0,5 Trung bình 0,63 0,45 Định lượng alkaloid Định lượng Hàm lượng chất chiết Bảng Kết hàm lượng alkaloid toàn phần Quan âm biển Bảng Kết hàm lượng chất chiết Quan âm biển với dung môi ethanol 70% (TT) Kết (%) Lá Quả Kết (%) Lá Quả Lần 32,48 13,53 Lần 32,56 13,44 Chuyên Đề Dược Học Lần 32,52 13,57 Trung bình 32,52 13,51 Lần 0,04 0,15 Lần 0,04 0,15 Lần 0,04 0,14 Trung bình 0,04 0,15 Do hàm lượng alkaloid thấp nên không chọn tiêu định lượng alkaloid để đưa 491 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 vào tiêu chuẩn Quan âm biển Từ kết thu được, tiến hành xây dựng tiêu chuẩn cho Quan âm biển (Vitex rotundifolia L f Verbenaceae) Tiêu chuẩn Quan âm biển Lá Quan âm biển (Folium Viticis rotundifoliae) Mạn kinh, Từ bi biển, Mạn kinh đơn, Mạn kinh nhỏ, Bình linh xoan dãy không đều; xen kẽ mạch gỗ là1-3 dãy tế bào đa giác nhỏ, vách cellulose tẩm chất gỗ Phía gỗ có 5-7cụm libe kích thước không đều, gặp vài mạch gỗ cụm libe Phiếnlá Vi phẫu Biểu bì tế bào hình chữ nhật thn tròn, kích thước khơng đều, xếp sát Biểu bì lồi lõm nhiều, tế bào nhỏ biểu bì Lơng che chởcó hai lớp biểu bì nhiều biểu bì Trên biểu bì rải rác có lơng tiết đơi có lỗ khí Hạ bì gồm 1-2 lớp tế bào hình chữ nhật đa giác, kích thước lớn Mơ mềm giậu lấn vào vùng gân giữa, gồm 3-6 lớp tế bào hình que xếp sát nhau, vng góc với biểu bì, chứa nhiều lục lạp Mơ mềm khuyết gồm 2-4 lớp tế bào tròn bầu dục, kích thước khơng đều, xếp lộn xộn Bó libe gỗ gân phụ gồm 3-4 mạch gỗ nhỏ trên, libe Gân Cuống Mặt lồi tròn, mặt lồi Biểu bì gồm lớp tế bào hình chữ nhật, kích thước khơng đều, xếp sát nhau, lớp cutin dày Trên biểu bì gặp lỗ khí, nhiềulơng che chở vàrải rác có lơng tiết.Lơng che chở đa bào dãy 2-4 tế bào, mặt ngồi xù xì, đơi có eo thắt, thấy lơng che chở đơn bào ngắn Lông tiết đa số chân đơn bào, đầu đơn bào hay đa bào gồm 2-6 tế bào có hình tròn hay bầu dục, đơi gặp lông tiết chân gồm tế bào, đầu đơn đa bào.Mơ dày góc có mơ dày tròngồm 1-4 lớp tế bào hình đa giác gần tròn kích thước khơng đều, phân bố phía biểu bì nhiều biểu bì Mơ mềm đạo gồm tế bào hình tròn đa giác gần tròn, kích thước khơng đều, xếp lộn xộn Cung libe-gỗ với gỗ libe Libe gồm tế bào đa giác, nhỏ, xếp lộn xộn, kích thước không đều, không liên tục mà tụ thành nhiều cụm ngăn cách 1-3 dãy tế bào Phía libe cụm mơ cứng, tế bào hình đa giác kích thước to nhỏ khơng Mạch gỗ nhỏ, tròn hay đa giác gần tròn xếp thành nhiều Tiết diện vi phẫu có mặt phẳng lõm, mặt lồi tròn, cấu tạo tương tự gân có thêm bó dẫn phụ hai bên cung libe gỗ chính.Bó dẫn phụ gồm gỗ trên, libe dưới, libe có cụm mô cứng Lá phơi hay sấy khô Quan âm biển (Vitex rotundifolia L f.), họ Cỏ roi ngựa (Verbenaceae) Mơ tả Lá hình bầu dục tròn, 2,5-4x 2-2,5 cm,đáy tù tròn, đỉnh tù lõm, mặt màu xám, mặt màu trắng bạc, mép ngun, gân hình lơng chim Cuống dài Tồn phủ lơng trắng mịn 492 Bột Bột màu xanh xám, mùi thơm, vị cay Thành phần gồm: lơng che chở, mảnh biểu bì mang lơng che chở lỗ khí, mảnh biểu bì – hạ bì mang lông che chở, lông tiết, mảnh mô dày, sợi Định tính A Lấy g bột dược liệu, thêm 20 ml ether (TT) Ngâm 10 phút, lắc, lọc Dịch lọc cho vào chén sứ, bốc đến cắn Hòa tan cắn với 0,5 ml anhydrid acetic (TT) thêm vào dung dịch 0,5 ml cloroform (TT) Chuyển dung dịch vào ống nghiệm nhỏ, khô Dùng pipet Pasteur thêm cẩn thận 1-2 ml acid sulfuric (TT) lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy xuống đáy ống nghiệm Nơi tiếp xúc hai lớp dung dịch có màu đỏ nâu, lớp dung dịch phía chuyển thành màu xanh lục Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học B Lấy g bột dược liệu cho vào bình nón nút mài, thêm 50 ml ethanol 96% (TT), đun hồi lưu cách thủy 30 phút, lọc dịch lọc A Lấy 10 ml dịch lọc A cho vào chén sứ bốc đến cắn Hòa tan cắn với ml ethyl acetat, lọc lấy dịch lọc bốc đến cắn Hòa tan cắn với ml ethanol 96% (TT), lọc vào ống nghiệm nhỏ Thêm vào dung dịch bột magnesi (TT) 1-2 giọt acid hydrocloric(TT), dung dịch có màu hồng đến đỏ Lấy ml dịch lọc A, thêm vào vài giọt dung dịch sắt (III) clorid 1% (TT), xuất màu xanh đen Lấy ml dịch lọc A cho vào chén sứ, bốc đến cắn Hòa tan cắn ml dung dịch acid hydrocloric 5%, lọc vào ống nghiệm nhỏ, thêm giọt thuốc thử Bertrand, xuất tủa trắng (TT) Sấy mỏng đến vết rõ Trên sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết có màu sắc giá trị Rf với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu C Đun sôi g dược liệu với 10 ml nước 10 phút, lọc dịch lọc B Lấy ml dịch lọc B, thêm 0,5 ml dung dịch Fehling A (TT) 0,5 ml dung dịch Fehling B(TT) Đun cách thủy phút, có kết tủa đỏ gạch đáy ống nghiệm Lấy ml dịch lọc B cho vào ống nghiệm Thêm vào dung dịch tinh thể natri carbonat, có bọt khí nhỏ sủi lên từ tinh thể natri carbonat Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 20 µl dung dịch Sau triển khai sắc ký, lấy mỏng ra, để khô nhiệt độ phòng, phun dung dịch vanillin 1% acid sulfuric (TT) Sấy mỏng đến vết rõ Trên sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết có màu sắc giá trị Rf với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu D Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) (1) Định tính cao tồn phần Bản mỏng: Silicagel GF254 Dung môi khai triển: Cloroform – methanol (9:1) Dung dịch thử: Lấy g bột dược liệu cho vào bình nón nút mài, thêm 30 ml methanol, đun hồi lưu cách thủy 15 phút, lọc dịch lọc C Lấy ml dịch lọc C, đem bốc cách thủy khoảng ml, dung dịch thử Dung dịch đối chiếu: Lấy g bột Quan âm biển (mẫu chuẩn), tiến hành chiết tương tự dung dịch thử Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 20 µl dung dịch Sau triển khai sắc ký, lấy mỏng ra, để khô nhiệt độ phòng, phun dung dịch vanillin 1% acid sulfuric Chuyên Đề Dược Học Định tính tinh dầu Bản mỏng: Silicagel GF254 Dung môi khai triển: toluen – ethyl acetat (95:5) Dung dịch thử: Lấy giọt tinh dầu từ mục Định lượng tinh dầu pha ml n- hexan dung dịch thử Dung dịch đối chiếu:Cất tinh dầu từ 50 g Quan âm biển (mẫu chuẩn) phương pháp cất kéo lôi theo nước Pha giọt tinh dầu ml n- hexan dung dịch chuẩn Độ ẩm Khơng q 8,0% Tro tồn phần Không 5,7% (Phụ lục 9.8) (1) Tro sulfat Không 7,9% (Phụ lục 9.8) (1) Tro không tan acid Không 0,4% (Phụ lục 9.7) (1) Chất chiết dược liệu Khơng 32,0% tính theo dược liệu khô kiệt Tiến hành theo phương pháp ngâm lạnh (Phụ lục 12.10), dùng ethanol 70% (TT) làm dung mơi Khơng 20,0% tính theo dược liệu khô kiệt Tiến hành theo phương pháp ngâm lạnh (Phụ lục 12.10) (1), dùng ethanol 96% (TT) làm 493 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học dung mơi Hàm lượng tinh dầu Khơng 0,6% tính theo dược liệu khơ kiệt Quả quan âm rotundifoliae) biển (Fructus Viticis Mạn kinh tử, Từ bi biển, Mạn kinh đơn, Mạn kinh nhỏ, Bình linh xoan Quả chín phơi hay sấy khơ Quan âm biển (Vitex rotundifolia L f.), họ Cỏ roi ngựa (Verbenaceae) Mơ tả Quả hạch hình cầu, màu đen xám, đường kính 3-5 mm, đài tồn màu trắng bạcbao bọc khoảng 2/3 Toàn phủ nhẹ lớp lông tơ màu xám nhạt Vi phẫu Vi phẫu có tiết diện tròn, có ngăn to nhỏ khơng đều, ngăn chứa hạt thường 1-2 ngăn bị lép.Vỏ có cấu tạo từ ngồi vào gồm: Biểu bì lớp tế bào hình chữ nhật thn tròn, vách tế bào dày hai mặt - dưới, lớp cutin dày, mang nhiều lông tiết, gặp lông che chở đa bào rải rác Lơng tiết chân đơn bào, đầu đa bào hình tròn bầu dục lõm Lơng che chở đa bào dãy 2-4 tế bào, mặt ngồi lơng xù xì Mơ dày góc gồm 1-2 lớp tế bào hình đa giác thuôn dài Mô mềm đạo tế bào hình bầu dục gần tròn ngồi, hình đa giác dài hẹp xếp đứng phía trong, non vách cellulose mỏng, già lớp tế bào phía vách dần hóa gỗ.Trong vùng mơ mềm rải rác có bó dẫn phụ nằm theo vòng gần tròn với libe ngồi, gỗ Tiếp theo lớp mô mềm nhiều lớp tế bào mơ cứng vào phía vách dày Biểu bì vỏ lớp tế bào vách cellulose mỏng gồm tế bào nhỏ hình chữ nhật Chính có bó dẫn đặc trưng Vỏ hạt cấu tạo -2 lớp tế bào hình chữ nhật thn hình bầu dục vách hóa gỗ hình mạng lưới Nội nhũ gồm tế bào hình chữ nhật bầu dục 494 phía ngồi hình đa giác vách uốn lượn phía trong, vách cellulose mỏng chứa nhiều hạt tinh bột Khối phôi gồm tế bào hình đa giác, vách mỏng cellulose khơng chứa nhiều tinh bột nội nhũ Bột Bột màu đen xám, mùi thơm, vị cay Thành phần gồm: Tế bào mô cứng, mảnh vỏ quả, mảnh vỏ hạt, mảnh nội nhũ, mạch vạch, mạch điểm, hạt tinh bột, lông che chở, mảnh biểu bì mang lơng che chở Định tính A Lấy g bột dược liệu, thêm 20 ml ether (TT) Ngâm 10 phút, lắc, lọc Dịch lọc cho vào chén sứ, bốc đến cắn Hòa tan cắn với 0,5 ml anhydrid acetic(TT) thêm vào dung dịch 0,5 ml cloroform (TT) Chuyển dung dịch vào ống nghiệm nhỏ, khô Dùng pipet Pasteur thêm cẩn thận 1-2 ml acid sulfuric (TT) lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy xuống đáy ống nghiệm Nơi tiếp xúc hai lớp dung dịch có màu đỏ nâu, lớp dung dịch phía chuyển thành màu xanh lục B Lấy g bột dược liệu cho vào bình nón nút mài, thêm 50 ml ethanol 96% (TT), đun hồi lưu cách thủy 30 phút, lọc dịch lọc A Lấy 10 ml dịch lọc A cho vào chén sứ bốc đến cắn Hòa tan cắn với ml ethyl acetat, lọc lấy dịch lọc bốc đến cắn Hòa tan cắn với ml ethanol 96% (TT), lọc vào ống nghiệm nhỏ Thêm vào dung dịch bột magnesi (TT) 1-2 giọt acid hydrocloric(TT), dung dịch có màu hồng đến đỏ Lấy ml dịch lọc A, thêm vào vài giọt dung dịch sắt (III) clorid 1% (TT), xuất màu xanh đen Lấy ml dịch lọc A cho vào chén sứ, bốc đến cắn Hòa tan cắn ml dung dịch acid hydrocloric 5%, lọc vào ống nghiệm nhỏ, thêm giọt thuốc thử Bertrand, xuất tủa trắng C Đun sôi g dược liệu với 10 (20) ml nước 10 phút, lọc dịch lọc B Lấy ml dịch lọc B, thêm 0,5 ml dung dịch Fehling A (TT) 0,5 ml dung dịch Fehling B(TT) Đun cách thủy Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 Nghiên cứu Y học phút, có kết tủa đỏ gạch đáy ống nghiệm 20 µl dung dịch Sau triển khai sắc Lấy ml dịch lọc B cho vào ống nghiệm ký, lấy mỏng ra, để khơ nhiệt độ phòng, Thêm vào dung dịch tinh thể natri phun dung dịch vanillin 1% acid sulfuric carbonat, có bọt khí nhỏ sủi lên từ tinh thể (TT) Sấy mỏng đến vết rõ Trên natri carbonat sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết có D Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) (1) màu sắc giá trị Rf với vết sắc ký Định tính cao tồn phần Bản mỏng: Silicagel GF254 Dung môi khai triển: Cloroform – methanol (9:1) Dung dịch thử: Lấy g bột dược liệu cho vào bình nón nút mài, thêm 30 ml methanol, đun hồi lưu cách thủy 15 phút, lọc dịch lọc C Lấy ml dịch lọc C, đem bốc cách thủy khoảng ml, dung dịch thử Dung dịch đối chiếu: Lấy g bột Quan âm biển (mẫu chuẩn), tiến hành chiết tương tự dung dịch thử Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 20 µl dung dịch Sau triển khai sắc ký, lấy mỏng ra, để khô nhiệt độ phòng, phun dung dịch vanillin 1% acid sulfuric (TT) Sấy mỏng đến vết rõ Trên đồ dung dịch đối chiếu Độ ẩm Không 11,0% Tro tồn phần Khơng q 5,5% (Phụ lục 9.8) (1) Tro sulfat Không 7,2% (Phụ lục 9.9) (1) Tro không tan acid Không 1,7% (Phụ lục 9.7) (1) Chất chiết dược liệu Khơng 13% tính theo dược liệu khơ kiệt Tiến hành theo phương pháp ngâm lạnh (Phụ lục 12.10) (1), dùng ethanol 70% (TT) làm dung mơi Khơng 12% tính theo dược liệu khơ kiệt màu sắc giá trị Rf với vết sắc ký Tiến hành theo phương pháp ngâm lạnh (Phụ lục 12.10)(1), dùng ethanol 96% (TT) làm dung môi đồ dung dịch đối chiếu Hàm lượng tinh dầu sắc ký đồ dung dịch thử phải có vết có Định tính tinh dầu Bản mỏng: Silicagel GF254 Dung môi khai triển: toluen – ethyl acetat (95:5) Dung dịch thử: Lấy giọt tinh dầu từ mục Định lượng tinh dầu pha ml n- hexan dung dịch thử Không 0,4% tính theo dược liệu khô kiệt Hàm lượng alkaloid tồn phần Khơng 0,15% tính theo dược liệu khô kiệt KẾT LUẬN Đã xây dựng tiêu chuẩn cho Dung dịch đối chiếu: Cất tinh dầu từ 50 g Quan âm biển làm sở cho nghiên cứu Quan âm biển (mẫu chuẩn) phương pháp sâu thời gian tới thành phần hóa cất kéo lơi theo nước Pha giọt tinh học tác dụng dược lý dược liệu dầu ml n- hexan dung dịch chuẩn Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng Chuyên Đề Dược Học 495 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2010), Dược điển Việt Nam IV, PL-182, PL-183, PL-239 496 Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: 14.12.2012 21.12.2012 Ngày báo đăng: 10.03.2014 Chuyên Đề Dược Học ... toàn phần Xây dựng tiêu chuẩn cho Quan âm biển Tiêu chuẩn cho Quan âm biển xây dựng dựa kết thu được, bao gồm: cảm quan, đặc điểm vi học, thử tinh khiết, tiêu định tính định lượng KẾT QUẢ VÀ BÀN... chọn tiêu định lượng alkaloid để đưa 491 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 18 * Phụ Số * 2014 vào tiêu chuẩn Quan âm biển Từ kết thu được, tiến hành xây dựng tiêu chuẩn cho Quan âm biển. .. dựng tiêu chuẩn cho Quan âm biển (Vitex rotundifolia L f Verbenaceae) Tiêu chuẩn Quan âm biển Lá Quan âm biển (Folium Viticis rotundifoliae) Mạn kinh, Từ bi biển, Mạn kinh đơn, Mạn kinh nhỏ,