Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết nghiên cứu vai trò của ghép tế bào gốc mỡ tự thân (TBGM) lên biến đổi hình thái siêu cấu trúc mô vết thương mạn tính (VTMT). Đối tượng và phương pháp: nghiên cứu 25 bệnh nhân (BN) bị VTMT, điều trị nội trú tại Khoa Liền vết thương, Viện Bỏng Quốc gia từ tháng 4 - 2015 đến 6 - 2016.
Tạp chí y - dợc học quân số 6-2016 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA GHÉP TẾ BÀO GỐC MÔ MỠ TỰ THÂN LÊN BIẾN ĐỔI SIÊU CẤU TRÚC VẾT THƯƠNG MẠN TÍNH Nguyễn Tiến Dũng*; Đinh Văn Hân*; Quản Hồng Lâm** TĨM TẮT Mục tiêu: nghiên cứu vai trò ghép tế bào gốc mỡ tự thân (TBGM) lên biến đổi hình thái siêu cấu trúc mơ vết thương mạn tính (VTMT) Đối tượng phương pháp: nghiên cứu 25 bệnh nhân (BN) bị VTMT, điều trị nội trú Khoa Liền vết thương, Viện Bỏng Quốc gia từ tháng - 2015 đến - 2016 Tuổi trung bình 56,88 ± 16,81, tỷ lệ nam/nữ 2,12 Tất BN ghép TBGM tự thân lên bề mặt vết thương - ngày Sinh thiết mô chỗ vết thương Đánh giá biến đổi siêu cấu trúc mô trước ghép, sau ghép TBGM ngày, 15 ngày 20 ngày kính hiển vi điện tử truyền qua Kết quả: siêu cấu trúc VTMT có đặc điểm phá hủy chất ngoại bào Sau ghép TBGM, siêu cấu trúc mô liên kết cải thiện rõ rệt theo thời gian: TBGM kích thích nguyên bào sợi tăng sinh, tăng chế tiết collagen, giảm tình trạng viêm cải thiện chất ngoại bào TBGM kích thích tăng sinh tế bào biểu mô lớp mầm mạch máu tân tạo chỗ VTMT Kết luận: TBGM tự thân có tác dụng kích thích q trình liền vết thương thơng qua kích thích tăng sinh tế bào cải thiện chất ngoại bào chỗ VTMT * Từ khóa: Vết thương mạn tính; Tế bào gốc mơ mỡ; Siêu cấu trúc Studying the Effectiveness of Autologous Transplantation of AdiposeDerived Stem Cells on Ultrastructure Changes of Chronic Wound Summary Objectives: Evaluating the effectiveness of autologous transplantation of adipose-derived stem cells on ultrastructure changes of chronic wound Subjects and methods: We studied 25 patients with chronic wound, who hospitalized at Department of Wound healing, National Institute of Burns from April, 2015 to June, 2016 The mean age was 56.88 ± 16.81, male/female ratio was 2.12 All patients were been grafted the autologous adipose-derived stem cells (ADSCs) once every - days The wound biopsy was done before and after the autologous transplantation of ADSCs, days, 15 days and 20 days for evaluation of ultrastructure changes by transmission electron microscope Results: Before transplantation, extracellular matrix (ECM) was destroyed After transplantation, ADSCs strongly stimulated fibroblast proliferation and fibroblasts to produce collagen ADSCs helped to reduce swelling and improve the structure of ECM ADSCs also promoted proliferations of epithelial cell and neovascularization at the chronic wound local Conclusion: Autologous ADSCs promoted the wound healing process by cell proliferation and improvement of ECM in chronic wound local * Key words: Chronic wound; Adipose-derived stem cells; Ultrastructure * Viện Bỏng Quốc gia ** Học viện Quân y Người phản hồi (Corresponding): Nguyễn Tiến Dũng (ntzung_0350@gmail.com) Ngày nhận bài: 05/06/2016; Ngày phản biện đánh giá báo: 21/07/2016 Ngày báo đăng: 26/07/2016 74 Tạp chí y - dợc học quân sè 6-2016 ĐẶT VẤN ĐỀ Tế bào gốc (TBG) phân lập từ mô mỡ, gọi tắt TBG mỡ, TBG trung mơ có hình dáng ngun bào sợi, có khả tạo colony biệt hóa thành nhiều loại mô khác [3, 6, 7] Hiện nay, TBGM ứng dụng nhiều y học tái tạo sửa chữa, có điều trị VTMT Đối với VTMT, chỗ vết thương tiết nhiều cytokine tiền viêm enzym phân hủy protein, kèm theo tế bào lão hóa, nhiễm trùng dai dẳng, thiếu hụt TBG [8] VTMT thường xuất BN có bệnh lý nội ngoại khoa Vì vậy, việc điều trị VTMT trở nên khó khăn Trị liệu tế bào, có sử dụng TBGM lựa chọn phổ biến Trên thực nghiệm, TBGM cho có khả kích thích tăng sinh ngun bào sợi, chế tiết protein chất ngoại bào, kích thích biểu mơ hóa tăng sinh mạch máu tân tạo, yếu tố quan trọng trình liền vết thương da [4, 10] Vì vậy, tiến hành nghiên cứu đề tài nhằm làm sáng tỏ vai trò ghép TBGM tự thân lên biến đổi hình thái siêu cấu trúc mơ VTMT ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 25 BN bị VTMT nguyên nhân khác nhau, điều trị nội trú Khoa Liền vết thương, Viện Bỏng Quốc gia từ tháng 04 - 2015 đến - 2016 * Tiêu chuẩn lựa chọn BN: BN ≥ 16 tuổi, tình nguyện viết đơn tham gia nghiên cứu * Tiêu chuẩn loại trừ: BN mắc viêm gan B, viêm gan C, HIV BN bị vết loét ung thư, xạ trị ung thư Phụ nữ mang thai, cho bú Trang thiết bị, vật tư nghiên cứu Tấm TBGM tự thân Khoa Labo, Viện Bỏng Quốc gia cung cấp Kim sinh thiết (biopsy puch) đường kính mm (Italia) kính hiển vi điện tử truyền qua JEM 1400 (Hãng JEOL, Nhật Bản) Phương pháp nghiên cứu Tất BN nghiên cứu vào viện theo dõi nguyên nhân trực tiếp gián tiếp gây VTMT, bệnh lý kết hợp ảnh hưởng tới trình liền vết thương Đánh giá tình trạng vết thương Theo dõi diễn biến chỗ vết thương trước sau ghép TBGM tự thân * Phương pháp ghép TBGM tự thân: sau BN người giám hộ đồng ý viết đơn tham gia ghép TBGM, tiến hành thu thập mô mỡ Làm tiểu thủ thuật lấy - gram mô mỡ da vùng bụng, bẹn mặt đùi BN Cố định mô mỡ dung dịch Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM), chuyển lên Khoa Labo, Viện Bỏng Quốc gia, phân lập, nuôi cấy tăng sinh tạo TBGM tự thân Trong thời gian chờ tạo TBGM, BN thay băng thuốc kháng khuẩn chỗ, lấy bỏ hoại tử Khi lâm sàng khơng dấu hiệu nhiễm khuẩn, tiến hành ghép TBGM Ghép TBGM tự thân lên bề mặt vết thương thay TBGM - ngày * Phương pháp làm tiêu siêu cấu trúc mô chỗ VTMT: Tại thời điểm 72 đầu sau nhập viện (T0), trước tiến hành ghép TBGM tự thân (T1), sau ghép TBGM ngày (T2), 15 ngày (T3) 20 ngày (T4), tiến hành sinh thiết mô vùng mép vết thương cho mảnh sinh thiết chứa 50% mô vết thương 50% da lành mép vết thương kim sinh thiết đường kính mm 75 Tạp chí y - dợc học quân số 6-2016 Cố định bệnh phẩm dung dịch glutaraldehyt 4% Làm tiêu hiển vi điện tử truyền qua theo phương pháp Nguyễn Kim Giao (2004) [1], thực Khoa Hình thái, Viện 69, Bộ Tư lệnh Lăng Chủ tịch Hồ Chí Minh để xác định biến đổi siêu cấu trúc Đọc kết kính hiển vi điện tử truyền qua JEM 1400, JEOL (Nhật Bản) mức độ khác Xuất tế bào viêm đại thực bào, bạch cầu đa nhân, tế bào lympho hoạt động (ảnh - 4) * Xử lý số liệu: Trên sở diễn biến lâm sàng chỗ VTMT, đánh giá chi tiết hình ảnh siêu cấu trúc mô thời điểm nghiên cứu để xác định biến đổi cấu trúc tế bào thành phần ngoại bào điển hình thời điểm nghiên cứu KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Đặc điểm nhóm BN nghiên cứu 25 BN nghiên cứu có tuổi trung bình 56,88 ± 16,81, tỷ lệ nam/nữ 2,12 Nguyên nhân gây VTMT gặp nhiều nhiễm khuẩn mô mềm (36%), tỳ đè (32%) nguyên nhân khác đái tháo đường (16%), bệnh mạch máu (8%) 24/25 BN (96%) có bệnh lý kết hợp Các bệnh kết hợp gặp với tỷ lệ cao bệnh tim mạch (28%), đái tháo đường (20%), chấn thương tủy sống (16%) VTMT có thời gian tồn lâu trước vào viện điều trị (trung bình 4,20 ± 3,20 tháng) Ảnh 1: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mơ VTMT vào viện Hình ảnh phù viêm (a), sợi collagen bị đứt gãy (b) Xuất đại thực bào (c), tế bào hoại tử (nhân đơng vón (d) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 1.500 lần BN Trần Văn Đ (số BA: 7071) Biến đổi siêu cấu trúc mô chỗ VTMT trước sau ghép TBGM tự thân * Thời điểm vào viện (T0): Hình ảnh siêu cấu trúc thấy phá hủy chất ngoại bào đáy vết thương với biểu hiện: hoại tử mạnh, phù viêm chất ngoại bào (biểu khoảng gian bào giãn rộng) Sợi collagen chân bì bị giãn tách, thưa thớt, đứt gãy phá hủy 76 Ảnh 2: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT vào viện Hình ảnh bạch cầu đa nhân (a) bên cạnh nguyên bào sợi (b) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Đinh Thị H (s BA: 0196) Tạp chí y - dợc học quân sù sè 6-2016 Ảnh 3: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT vào viện Ảnh 5: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mơ VTMT trước ghép TBGM Hình ảnh tế bào lympho hoạt động (a) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Đinh Thị H (số BA: 0196) Hình ảnh phù viêm (a), bó sợi collagen đứt gãy, cấu trúc (b), nguyên bào sợi chế tiết collagen (c) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Nguyễn Thị N (số BA: 2318) Ảnh 4: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mơ VTMT vào viện Hình ảnh bó sợi collagen đứt gãy, cấu trúc (a) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 1.500 lần BN Nguyễn Thị S (số BA: 2731) * Thời điểm trước ghép TBGM (T1): Hình ảnh siêu cấu trúc thấy chất ngoại bào thưa thớt, phù viêm khoảng gian bào, sợi collagen đứt gãy, tế bào viêm chủ yếu tế bào lympho, có bạch cầu đa nhân Nguyên bào sợi xuất có biểu chế tiết sợi collagen (ảnh - 6) Ảnh 6: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT trước ghép TBGM Thấy hình ảnh phù viêm (a), xuấn bạch cầu đa nhân (b) lympho (c) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 1.500 lần BN Trần Thị S (số BA: 1506) * Thời điểm sau ghép TBGM ngày (T2): Hình ảnh siêu cấu trúc thấy bắt đầu xuất tăng sinh tế bào: nguyên bào sợi tăng sinh, bào tương nguyên bào sợi có nhiều lưới nội bào có hạt hoạt 77 T¹p chÝ y - dợc học quân số 6-2016 ng mnh Vựng ngoại bào có sợi collagen mảnh, nằm song song với nguyên bào sợi (ảnh - 8) * Thời điểm sau ghép TBGM 15 ngày (T3): Hình ảnh siêu cấu trúc thấy tăng sinh tế bào: biểu bì tăng sinh lớp mầm, tăng sinh nguyên bào sợi, nguyên bào sợi tăng sản xuất, chế tiết collagen, tế bào xếp có trật tự theo hướng (ảnh - 10) Ảnh 7: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT sau ghép TBGM ngày Hình ảnh bào tương ngun bào sợi có nhiều lưới nội bào có hạt hoạt động (a), sợi collagen mỏng nằm song song với nguyên bào sợi (b) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Nguyễn Thị N (số BA: 2318) Ảnh 8: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT sau ghép TBGM ngày Tăng sinh tế bào, nguyên bào sợi nằm sát nhau, bào tương có nhiều lưới nội bào có hạt (a) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Trần Thị S (số BA: 1506) 78 Ảnh 9: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mơ VTMT sau ghép TBGM 15 ngày Hình ảnh tế bào biểu mô lớp mầm nằm sát nhau, không thấy khoảng gian bào (a) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Nguyễn Thị N (số BA: 2318) Ảnh 10: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT sau ghép TBGM 15 ngày Tăng sinh nguyên bào sợi (a), nguyên bào sợi tăng chế tiết collagen, sợi collagen nằm song song với thành tế bào (b) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Trần Thị S (số BA: 1506) Tạp chí y - dợc học quân số 6-2016 * Thời điểm sau ghép TBGM 20 ngày: Hình ảnh siêu cấu trúc thấy bên cạnh nguyên bào sợi, xuất thêm nguyên bào sợi dạng Ngoài bào tương nguyên bào sợi có đám tiền collagen bó sợi collagen Nhiều mạch máu tân tạo (ảnh 11 - 13) Nhiều nguyên bào sợi (a) xuất nguyên bào sợi dạng (b) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Trần Thị S (số BA: 1506) Ảnh 13: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT sau ghép TBGM 20 ngày Ảnh 11: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mơ VTMT sau ghép TBGM 20 ngày Hình ảnh tăng sinh vi tơ collagen (a), ngồi bào tương có đám tiền collagen (b) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 1.500 lần BN Nguyễn Thị N (số BA: 2318) Ảnh 12: Hình ảnh siêu cấu trúc mảnh sinh thiết mô VTMT sau ghép TBGM 20 ngày Mạch máu tân tạo thành mỏng (a) với tế bào nội mô lồi vào lòng mạch (b) Hiển vi điện tử truyền qua Phóng đại 3.000 lần BN Trần Thị S (số BA: 1506) BÀN LUẬN Thơng thường, q trình liền vết thương VTMT bị trì hỗn lại pha viêm Mặc dù có khác nguyên mức phân tử, VTMT có đặc điểm chung như: tiết nhiều cytokine tiền viêm enzym phân hủy protein, tế bào chỗ VTMT lão hóa, nhiễm trùng dai dẳng thiếu hụt TBG Điều dẫn tới chất ngoại bào bị phá hủy yếu tố tăng trưởng thụ cảm thể bị suy thoái [8] Cơ chế phần giúp giải thích tổn thương siêu cấu trúc mơ VTMT, kết nghiên cứu thời điểm vào viện gặp chủ yếu 79 T¹p chÝ y - dợc học quân số 6-2016 l hỡnh nh phỏ hủy chất ngoại bào với hình ảnh phù viêm khoảng gian bào, tế bào hoại tử, bó sợi collagen bị đứt gãy, phá hủy (ảnh - 4) Với biểu tổn thương mô chỗ VTMT trên, hình ảnh lâm sàng chúng tơi thường gặp vết thương với biểu nhiễm khuẩn, hoại tử mô, tiết nhiều dịch, tổ chức hạt viêm nề, không thấy biểu mô từ mép vết thương vào trung tâm… Để đảm bảo cho kết ghép TBGM tự thân, thời gian chờ tạo TBGM, bên cạnh việc điều trị bệnh lý kết hợp, sử dụng số biện pháp hỗ trợ điều trị như: thay băng, đắp thuốc kháng khuẩn chỗ vết thương, cắt hoại tử Nhằm mục đích để đảm bảo vết thương khơng có triệu chứng viêm lâm sàng, vết thương hoại tử, vết thương không lộ gân, xương trước ghép TBGM tự thân Tuy nhiên, hình ảnh siêu cấu trúc mơ VTMT thu trước ghép TBGM tự thân, có cải thiện đáng kể so với vào viện nguyên bào sợi có biểu chế tiết sợi collagen Chúng tơi thấy hình ảnh tổn thương mạn tính như: chất ngoại bào thưa thớt, phù viêm khoảng gian bào, sợi collagen đứt gãy, tế bào viêm chủ yếu tế bào lympho (ảnh - 6) Trong điều trị liền vết thương, TBGM sử dụng dạng tiêm trực tiếp vào vùng vết thương, phun lên bề mặt vết thương, đưa lên sau đắp lên bề mặt vết thương.Vai trò TBGM lên trình liền vết thương liên quan đến khả chống viêm, khả tồn TBGM chỗ vết thương TBGM 80 tham gia vào hoạt động điều tiết miễn dịch nhờ khả tiết yếu tố trung gian hòa tan tương tác trực tiếp với tế bào trình diện kháng nguyên tế bào đuôi gai, tế bào T, tế bào B đại thực bào TBGM có khả bất hoạt tế bào trình diện kháng nguyên, nhờ tiết cytokine kháng viêm interlekin-10 TGF-β hoạt động Sử dụng TBGM điều trị liền vết thương tái tạo mô chứng minh nhiều thử nghiệm in vitro in vivo Seung Ho Lee CS (2012) thông qua tế bào HaCaT xuất tơ tiền collagen týp I nguyên bào sợi, TBGM kích thích tăng sinh tế bào sừng nguyên bào sợi [9] Trong kết nghiên cứu chúng tôi, cấu trúc chất ngoại bào sau ghép cải thiện rõ rệt theo thời gian giảm tình trạng viêm (khơng thấy phù viêm khoảng gian bào) vào ngày thứ 15 20 sau ghép TBGM tự thân Các nguyên bào sợi tăng sinh tăng hoạt động Biểu lưới nội bào có hạt bào tương nguyên bào sợi phát triển mạnh Bào tương nguyên bào sợi chứa nhiều vi tơ collagen Các bó collagen nguyên bào sợi chế tiết nằm thành bó mỏng chạy song song hướng với nguyên bào sợi sau ngày ghép TBGM (ảnh - 8) Theo Won-Serk Kim CS (2007), TBGM chế tiết protein chất ngoại bào, kích thích tăng sinh ngun bào sợi không chế tiếp xúc trực tiếp tế bào - tế bào, mà TBGM chế tiết yếu tố tăng trưởng PDGF, PLGF, TGF-1 Tạp chí y - dợc học quân số 6-2016 -β2, HGF VEGF [10] Khi nghiên cứu vai trò ghép TBGM người vết thương toàn lớp da chuột, Cerqueira MT CS (2013) nhận thấy TBGM người có tác dụng kích thích tăng sinh mạch tân tạo ngày thứ 14 21 sau ghép Trên tiêu nhuộm hóa mơ miễn dịch, nhóm tác giả nhận thấy: TBGM kích thích tạo tế bào biểu mơ nang lơng [4] Trên hình ảnh siêu cấu trúc thu ngày thứ 20 sau ghép, chúng tơi thấy hình ảnh điển hình mạch máu hình thành mạch máu thành mỏng với tế bào nội mơ lồi vào lòng mạch (ảnh 13), hình ảnh tế bào biểu mơ xếp sát nhau, tế bào khơng có khoảng gian bào (ảnh 9) Trên thực tế lâm sàng, chỗ VTMT, thấy vết thương ngày thứ 15 ngày thứ 20, vết thương xuất tổ chức hạt đỏ đẹp, kích thước thu hẹp rõ rệt so với trước ghép Thu hẹp kích thước vết thương biểu mơ hóa tượng co kéo vết thương kết hợp hai Hiện tượng giải thích việc xuất nguyên bào sợi dạng ngày thứ 20 Nguyên bào sợi dạng kiểu hình nguyên bào sợi, khác bào tương có chứa sợi alpha-actin trơn Nguyên bào sợi dạng cơ, ngồi vai trò ngun bào sợi tiết thành phần tham gia cấu tạo chất ngoại bào, có tác dụng tham gia vào chế liền vết thương, làm thu nhỏ kích thước vết thương hình thức co kéo mơ [5] Hiện nay, có nhiều nghiên cứu thực nghiệm chứng minh TBGM biệt hóa thành loại tế bào khác cấy ghép, nguyên bào xương, tế bào giống tế bào sừng hay mạch máu [3, 6, 7] Để xác định vai trò TBGM, tác giả nhuộm hóa mơ miễn dịch đặc hiệu cho loại tế bào, nuôi cấy TBGM môi trường đặc hiệu tế bào Trong nghiên cứu này, dừng lại việc đánh giá tác dụng ghép TBGM tự thân lên trình liền vết thương VTMT Do đó, cần tiếp tục triển khai nghiên cứu khác để kiểm chứng khả biệt hóa TBGM tự thân ghép lên bề mặt VTMNT người KẾT LUẬN Qua nghiên cứu biến đổi siêu cấu trúc VTMT trước sau ghép TBGM tự thân 25 BN bị VTMT vào điều trị nội trú Khoa Liền vết thương, Viện Bỏng Quốc gia từ - 2015 đến - 2016, rút số kết luận: - Siêu cấu trúc VTMT có đặc điểm phá hủy chất ngoại bào: hoại tử mạnh, phù viêm chất ngoại bào Các sợi collagen chân bì bị giãn tách, thưa thớt, đứt gãy phá hủy mức độ khác Xuất tế bào viêm đại thực bào, bạch cầu đa nhân, tế bào lympho hoạt động - TBGM kích thích nguyên bào sợi tăng sinh, tăng chế tiết collagen, giảm tình trạng viêm cải thiện chất ngoại bào TBGM kích thích tăng sinh tế bào biểu mô lớp mầm mạch máu tân to ti ch VTMT 81 Tạp chí y - dợc häc qu©n sù sè 6-2016 Nguyễn Kim Giao Hiển vi điện tử khoa học sống NXB Đại học Quốc gia Hà Nội 2004, tr.55-108 Nie C, Yang D, Xu J, Si Z et al Locally administered adipose-derived stem cells accelerate wound healing through differentiation and vasculogenesis Cell Transplant 2011, 20 (2), pp.205-216 António J Salgado, Rui L Reis, Nuno Sousa et al Adipose tissue derived stem cells secretome: soluble factors and their roles in regenerative medicine Current Stem Cell Research & Therapy 2010, 5, pp.103-110 Reza Izadpanah, Cynthia Trygg, Bindiya Patel et al Biologic properties of mesenchymal stem cells derived from bone marrow and adipose tissue J Cell Biochem 2006, 99 (5), pp.1285-1297 Claudia Chavez-Munoz, Khang T Nguyen, Wei Xu et al Trans-differentiation of adiposeDerived stem cells into keratinocyte-like cells: Engineering a Stratified Epidermis PLoS ONE 2013, (2), e80587 Robert G Frykberg, Jaminelli Banks Challenges in the treatment of chronic wounds Advances in Wound Care 2015, (9), pp.560-582 TÀI LIỆU THAM KHẢO Cerqueira MT, Pirraco RP, Santos TC et al Human adipose stem cells cell sheet constructs impact epidermal morphogenesis in full-thickness excisional ưounds Biomacromolecules 2013, 14 (11), pp.3997-4008 Ian A Darby, Betty Laverdet, Frédéric Bonté et al Fibroblasts and myofibroblasts in wound healing Journal of Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology 2014, 7, pp.301-311 82 Seung Ho Lee, Sang Yun Jin, Jin Seok Song et al Paracrine effects of adiposederived stem cells on keratinocytes and dermal fibroblasts Ann Dermatol 2012, 24 (2), pp.136143 10 Won-Serk Kim, Byung-Soon Park, Jong-Hyuk Sung et al Wound healing effect of adipose-derived stem cells: A critical role of secretory factors on human dermal fibroblasts Journal of Dermatological Science 2007, 48, pp.15-24 ... tiếp gián tiếp gây VTMT, bệnh lý kết hợp ảnh hưởng tới trình liền vết thương Đánh giá tình trạng vết thương Theo dõi diễn biến chỗ vết thương trước sau ghép TBGM tự thân * Phương pháp ghép TBGM tự. .. hành ghép TBGM Ghép TBGM tự thân lên bề mặt vết thương thay TBGM - ngày * Phương pháp làm tiêu siêu cấu trúc mô chỗ VTMT: Tại thời điểm 72 đầu sau nhập viện (T0), trước tiến hành ghép TBGM tự thân. .. tiếp vào vùng vết thương, phun lên bề mặt vết thương, đưa lên sau đắp lên bề mặt vết thương. Vai trò TBGM lên trình liền vết thương liên quan đến khả chống viêm, khả tồn TBGM chỗ vết thương TBGM