ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI VN U KHOA Y DƯỢC dP rm ac y, ======  ====== ine an NGUYỄN THỊ HUÊ ed ic XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG M CITRAL TRONG TINH DẦU SẢ CHANH BẰNG of PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG ho ol CAO GHÉP ĐẦU DÒ DÃY DIOD NGÀNH DƯỢC HỌC Co py rig ht @ Sc KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2019 dP rm ac y, VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ======  ====== an NGUYỄN THỊ HUÊ ine XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ed ic CITRAL TRONG TINH DẦU SẢ CHANH BẰNG M PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG ho ol of CAO GHÉP ĐẦU DÒ DÃY DIOD NGÀNH DƯỢC HỌC KHOÁ: QHY.2014 rig ht @ Sc KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Co py NGƯỜI HƯỚNG DẪN: TS NGUYỄN THỊ THANH BÌNH HÀ NỘI - 2019 VN U LỜI CẢM ƠN ac y, Trước tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới Tiến sĩ Nguyễn Thị Thanh Bình – Bộ mơn Hoá Dược Kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, người tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận dP rm Tôi xin cảm ơn thầy Bộ mơn Hố Dược Kiểm nghiệm thuốc, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, tạo điều kiện để tơi thực khóa luận an Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Ban Chủ nhiệm, Phòng ban Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội tồn thể thầy giáo Khoa cho kiến thức quý báu suốt năm học tập, sinh hoạt rèn luyện Khoa Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè bên cạnh, động viên lúc khó khăn q trình thực khóa luận Hà Nội, tháng 05 năm 2019 Sinh viên Nguyễn Thị Huê VN U CHỮ VIẾT TẮT Acetonitril BP Dược điển Anh Quốc (British Pharmacopoeia) DAD Máy đo quang (Diode Array Detector) EP Dược điển châu Âu (European pharmacopoeia) GC Sắc ký khí (Gas Chromatography) HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High - performance liquid chromatography) dP rm ac y, ACN Hội nghị quốc tế hài hồ hố thủ tục đăng ký dược phẩm sử dụng cho người (International conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human use) LOD Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ Giới hạn định lượng (Limit of quantitation) MS Phương pháp khối phổ (Phương pháp khối phổ) NIR Quang phổ cận hồng ngoại RSD Độ lệch chuẩn tương đối (Relative standard deviation) ho ol of M ed ic ine an ICH Dược điển Hoa Kỳ (United States Pharmacopoeia) Co py rig ht @ Sc USP VN U MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG - TỔNG QUAN ac y, 1.1 Giới thiệu chung sả chanh 1.2 Giới thiệu chung citral dP rm 1.2.1 Nguồn gốc 1.2.2 Cấu trúc tính chất 1.2.3 Công dụng 1.2.4 Các phương pháp định lượng citral an 1.3 Thẩm định quy trình phân tích ine 1.3.1 Tính đặc hiệu ed ic 1.3.2 Miền giá trị 10 1.3.3 Tính tuyến tính 10 M 1.3.4 Giới hạn phát 11 of 1.3.5 Giới hạn định lượng 11 1.3.6 Độ 12 ho ol 1.3.7 Độ xác 13 Sc CHƯƠNG - NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nguyên vật liệu, trang thiết bị 14 @ 2.1.1 Dung mơi, hố chất 14 ht 2.1.2 Trang thiết bị 14 rig 2.2 Phương pháp nghiên cứu 14 py 2.2.1 Tối ưu hoá điều kiện sắc ký 14 Co 2.2.2 Thẩm định tính đặc hiệu 15 2.2.3 Thẩm định tính tuyến tính xác định miền giá trị 15 2.2.4 Xác định giới hạn phát giới hạn định lượng 15 VN U 2.2.5 Thẩm định độ 15 2.2.6 Thẩm định độ xác 15 ac y, 2.2.7 Định lượng citral tinh dầu sả chanh 16 CHƯƠNG - KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 17 dP rm 3.1 Xác định điều kiện phân tích 17 3.1.1 Khảo sát hệ dung môi 17 3.1.2 Xác định bước sóng hấp thụ 19 3.1.3 Điều kiện sắc ký 20 an 3.2 Tính đặc hiệu 21 ine 3.3 Tính tuyến tính miền giá trị 23 3.3.1 Đối với đồng phân neral 23 ed ic 3.3.2 Đối với đồng phân geranial 24 3.4 Giới hạn phát giới hạn định lượng 26 M 3.5 Độ 26 of 3.5.1 Đối với đồng phân neral 26 ho ol 7.5.2 Đối với đồng phân geranial 27 3.6 Độ lặp lại 27 Sc 3.6.1 Đối với đồng phân neral 28 @ 3.6.2 Đối với đồng phân geranial 29 3.7 Độ xác trung gian 29 rig ht 3.7.1 Đối với đồng phân neral 30 3.7.2 Đối với đồng phân geranial 31 py 3.8 Định lượng citral số mẫu tinh dầu sả chanh 31 Co 3.8.1 Sản phẩm A 31 3.8.2 Sản phẩm B 32 3.8.3 Sản phẩm C 33 VN U 3.8 Bàn luận 35 CHƯƠNG - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 4.1 Kết luận 38 ac y, 4.2 Kiến nghị 39 Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an dP rm TÀI LIỆU THAM KHẢO Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo Neral (A) Geranial (B) VN U DANH MỤC CÁC HÌNH ac y, Hình 3.1 Sắc ký đồ dung dịch citral chuẩn nồng độ 25 µg/ml bước sóng 233 nm, hệ dung môi ACN : H2O = 70 : 30 (v/v/v) 17 dP rm Hình 3.2 Sắc ký đồ dung dịch citral chuẩn nồng độ 25 µg/ml bước sóng phát 233 nm với hệ dung mơi ACN : MeOH : H2O = 47 : 10 : 43 (v/v/v) 18 Hình 3.3 Phổ hấp thụ UV-VIS Neral (A) Geranial (B) 19 an Hình 3.4 Sắc ký đồ dung dịch citral chuẩn nồng độ 25 µg/ml điều kiện sắc ký lựa chọn 20 Hình 3.5 Phổ hấp thụ cực đại UV-VIS geraniol 21 ed ic ine Hình 3.6 Sắc ký đồ dung dịch chứa 20 µg/ml citral µg/ml geraniol bước sóng phát 200 nm 21 M Hình 3.7 Sắc ký đồ dung dịch chứa 20 µg/ml citral µg/ml geraniol bước sóng phát 242 nm 22 of Hình 3.8 Đồ thị biểu diễn tương quang nồng độ dung dịch diện tích pic đồng phân neral 24 ho ol Hình 3.9 Đồ thị biểu diễn tương quang nồng độ dung dịch diện tích pic đồng phân geranial 25 Sc Hình 3.10 Kết xác định độ lặp lại phương pháp đồng phân neral 28 32 Hình 3.12 Sắc ký đồ dung dịch mẫu B nồng độ 100 µg/ml 33 Hình 3.13 Sắc ký đồ dung dịch mẫu C nồng độ 50 µg/ml 34 Co py rig ht @ Hình 3.11 Sắc ký đồ dung dịch mẫu A nồng độ 100 µg/ml VN U DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tên gọi sả chanh số nước Bảng 1.2 Hàm lượng citral số loại tinh dầu ac y, Bảng 3.1 Thông số pic dung dịch citral chuẩn nồng độ 25 µg/ml bước sóng phát 233 nm với hệ dung môi ACN : H2O = 70 : 30 (v/v) 18 dP rm Bảng 3.2 Thông số pic dung dịch citral chuẩn nồng độ 25 µg/ml bước sóng phát 233 nm với hệ dung môi ACN : MeOH : H2O = 47 : 10 : 43 (v/v/v) 19 20 an Bảng 3.3 Thông số pic dung dịch citral chuẩn nồng độ 25 µg/ml điều kiện sắc ký lựa chọn ine Bảng 3.4 Thông số pic dung dịch citral 20 µg/ml dung dịch geraniol µg/ml bước sóng phát 200 nm 22 ed ic Bảng 3.5 Kết phân tích hồi quy mối tương quan nồng độ dung dịch diện tích pic đồng phân neral 23 M Bảng 3.6 Kết phân tích hồi quy mối tương quan nồng độ dung dịch diện tích pic đồng phân geranial 25 26 Bảng 3.8 Kết xác định tỷ lệ phục hồi đồng phân geranial 27 ho ol of Bảng 3.7 Kết xác định tỷ lệ phục hồi đồng phân neral Sc Bảng 3.9 Kết xác định độ lặp lại phương pháp đồng phân geranial 29 @ Bảng 3.10 Kết xác định độ xác trung gian phương pháp đồng phân neral 30 35 Bảng 4.1 Các yêu cầu đảm bảo quy trình định lượng neral 38 Bảng 4.2 Các yêu cầu đảm bảo quy trình định lượng geranial 39 Co py rig ht Bảng 3.11 So sánh số phương pháp định lượng citral ht rig py Co @ ho ol Sc of M ine ed ic ac y, dP rm an VN U 3.7.1 Đối với đồng phân neral 15,94 15,20 16,10 6,34 5,98 50 20 of 10 0,48 3,05 6,16 0,18 2,92 2,04 0,06 3,00 6,17 ho ol 15,75 2,09 1,97 2,05 py rig ht @ Sc Kết cho thấy giá trị RSD neral nhỏ 3,05% Co RSD (%) M SD ac y, Diện tích pic trung bình (mAU.min) dP rm Diện tích pic (mAU.min) an Ngày ine Nồng độ dung dịch (µg/ml) ed ic STT VN U Bảng 3.10 Kết xác định độ xác trung gian phương pháp đồng phân neral 30 3.7.2 Đối với đồng phân geranial 28,29 28,98 29,01 8,97 8,47 50 20 of 10 0,41 1,42 8,77 0,27 3,06 3,05 0,07 2,31 8,89 ho ol 28,76 RSD (%) M SD ac y, Diện tích pic trung bình (mAU.min) dP rm Diện tích pic (mAU.min) an Ngày ine Nồng độ dung dịch (µg/ml) ed ic STT VN U Bảng Kết xác định độ xác trung gian phương pháp đồng phân geranial 3,04 3,12 2,98 Sc Kết cho thấy giá trị RSD geranial nhỏ 3,05% @ 3.8 Định lượng citral số mẫu tinh dầu sả chanh ht 3.8.1 Sản phẩm A Co py rig Pha loãng dung dịch mẹ 125 lần dung môi ACN : H2O (60:40, v/v) thu dung dịch có nồng độ tinh dầu 100 µg/ml Sắc ký dung dịch Kết thể hình 3.11: 31 VN U ac y, dP rm an Hình 3.11 Sắc ký đồ dung dịch mẫu A nồng độ 100 µg/ml ine Trên sắc ký đồ ghi nhận xuất pic: ho ol of M ed ic Pic có thời gian lưu trùng với thời gian lưu neral Diện tích pic 8,231 mAU.min tương ứng với nồng độ 24,85 µg/ml Như mẫu A chứa 24,85% neral Pic có thời gian lưu trùng với thời gian lưu geranial Diện tích pic 10,138 mAU.min tương ứng với nồng độ 21,54 µg/ml Như mẫu A chứa 21,54% geranial Như tổng hàm lượng citral mẫu A 46,39 µg/ml, tương đương với 46,39% Sc 3.8.2 Sản phẩm B Co py rig ht @ Pha loãng dung dịch mẹ 125 lần dung môi ACN : H2O (60:40, v/v) thu dung dịch có nồng độ tinh dầu 100 µg/ml Sắc ký dung dịch Kết thể hình 3.12: 32 VN U ac y, dP rm an Hình 3.12 Sắc ký đồ dung dịch mẫu B nồng độ 100 µg/ml ine Trên sắc ký đồ ghi nhận xuất pic: ho ol of M ed ic Pic có thời gian lưu trùng với thời gian lưu neral Diện tích pic 12,793 mAU.min tương ứng với nồng độ 37,35 µg/ml Như mẫu B chứa 37,35% neral Pic có thời gian lưu trùng với thời gian lưu geranial Diện tích pic 17,738 mAU.min tương ứng với nồng độ 35,96 µg/ml Như mẫu B chứa 35,96% geranial Như tổng hàm lượng citral mẫu B 73,31 µg/ml, tương đương với 73,31% Sc 3.8.3 Sản phẩm C Co py rig ht @ Pha lỗng dung dịch mẹ 150 lần dung mơi ACN : H2O (60:40, v/v) thu dung dịch có nồng độ tinh dầu 50 µg/ml Sắc ký dung dịch điều kiện chọn Kết thể hình 3.13: 33 VN U ac y, dP rm an Hình 3.13 Sắc ký đồ dung dịch mẫu C nồng độ 50 µg/ml ine Trên sắc ký đồ ghi nhận xuất pic: Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic Pic có thời gian lưu trùng với thời gian lưu neral Diện tích pic 6,017 mAU.min tương ứng với nồng độ 18,78 µg/ml Như mẫu C chứa 37,56% neral Pic có thời gian lưu trùng với thời gian lưu geranial Diện tích pic 8,795 mAU.min tương ứng với nồng độ 18,69 µg/ml Như mẫu C chứa 37,38% geranial Như tổng hàm lượng citral mẫu C 36,47 µg/ml, tương đương với 74,94% 34 3.8 Bàn luận VN U So sánh phương pháp xây dựng với số phương pháp định lượng citral Bảng 3.11 So sánh số phương pháp định lượng citral Thơng số RSD độ xác trung gian LOD LOQ (µg/ml) (µg/ml) dP rm (%) RSD độ lặp lại ac y, Tỷ lệ phục hồi R2 (%) (RSD %) NIR [17] Pha thuận [50] 0,99 ≤ 1,00 _ _ ≤ 1,37 _ _ _ 0,062 0,205 0,059 0,198 0,99 M Neral 100±2 ≤ 1,74 ≤ 1,93 of ml/phút, thể tích tiêm mẫu 15 µl, bước sóng phát 233nm, miền giá trị 3-100 µg/ml citral [49] 100±2 _ ed ic Pha đảo, sử dụng hệ dung môi ACN : H2O = 70 : 30, tốc độ dòng 100±2 ine _ an Phương pháp Neral 0,99 _ _ _ _ _ Geranial 0,99 _ _ _ _ _ ho ol 0,99 Sc HPLC Geranial ht @ Pha đảo, hệ dung mơi ACN : H2O : CH3OH=47:43:10 , tốc độ dòng 1,4 Co py rig ml/phút, thể tích tiêm mẫu 15 µl , bước sóng phát 240 nm, miền giá trị 50-90 35 100±2 Geranial 0,99 100±2 ≤ 2,34 ≤ 3,05 ac y, 0,99 0,10 0,33 ≤ 3,06 0,30 1,00 dP rm Neral an ≤ 2,48 ine Phương pháp xây dựng: pha đảo, hệ dung môi ACN : H2O:CH3OH = 47 : 43 :10 , tốc độ dòng ml/phút, thể tích tiêm mẫu 10 µl , bước sóng phát 240 nm, miền giá trị 10 - 100 µg/ml citral VN U µg/ml citral [51] ed ic Chú thích: ( - ) chưa xác định M Từ bảng kết so sánh cho thấy phương pháp xây dựng có độ xác, độ lặp lại thấp so với phương pháp khác Tuy nhiên phương pháp xây dựng lại có ưu điểm vượt trội như: ho ol of - So với phương pháp NIR: phương pháp xây dựng đại hơn, có khả định lượng đồng thời đồng phân citral tiến hành xác định thêm thông số (độ lặp lại, LOD LOQ) @ Sc - So với phương pháp HPLC pha thuận: phương pháp xây dựng có khả định lượng đồng thời đồng phân citral có tính đặc hiệu hơn, tiến hành xác định thêm thông số (độ xác trung gian, LOD LOQ) Co py rig ht - So với phương pháp HPLC pha đảo khác: phương pháp xây dựng xác định đầy đủ thơng số (tỷ lệ phục hồi, độ xác trung gian, độ lặp lại, LOD, LOQ) có miền giá trị rộng 36 VN U Như phương pháp xây dựng có ưu điểm bật: có khả tách chất hồn tồn nên tính đặc hiệu cao, độ xác cao nhạy với nồng độ nhỏ Chất lượng mẫu tinh dầu sả chanh Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an dP rm ac y, Qua kết định lượng citral ba sản phẩm tinh dầu sả chanh thị trường Kết xác định hàm lượng citral sản phẩm tương đương với hàm lượng citral ghi nhãn bao bì sản phẩm Sản phẩm A B có hàm lượng citral 73,31% 74,94%, đạt yêu cầu chất lượng hàm lượng citral tinh dầu sả chanh Sản phẩm C có hàm lượng citral thấp (46,39%), không đạt yêu cầu chất lượng hàm lượng citral tinh dầu sả chanh 37 VN U CHƯƠNG - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận dP rm ac y, Dựa tài liệu thẩm định quy trình phân tích ICH, nghiên cứu xây dựng thẩm định thành công quy trình định lượng đồng thời hai đồng phân hình học citral hệ thống HPLC - DAD với thông số: pha tĩnh silicagel C18 cột μm, 4,6×250 mm, pha động nước : acetonitril : nước : methanol tỷ lệ 43 : 47 : 10, thể tích tiêm mẫu 10 µl, thời gian sắc ký 25 phút, tốc độ dòng ml/phút, đầu dò DAD bước sóng 242 nm ed ic - Đối với neral ine an Bằng trình thực nghiệm chứng tỏ quy trình định lượng đồng thời hai đồng phân hình học citral đạt yêu cầu tính đặc hiệu, tính tuyến tính, độ độ xác (bảng 4.1 bảng 4.2) theo hướng dẫn chung ICH Bảng 4.1 Các yêu cầu đảm bảo quy trình định lượng neral 100±2% RSD ≤ 2,34% Sc Độ Độ lặp lại 0,9989 ho ol Hệ số tương quan R2 RSD ≤ 3,05% @ Độ xác trung gian 0,369823 py rig ht Độ lệch chuẩn S Co – 50 µg/ml y = 0,3619x - 0,7782 of Tính tuyến tính M Miền giá trị 38 - Đối với geranial VN U Bảng 4.2 Các yêu cầu đảm bảo quy trình định lượng geranial – 50 µg/ml Miền giá trị y = 0,5153x - 0,838 ac y, Tính tuyến tính 0,9996 Hệ số tương quan R2 100±2% dP rm Độ RSD ≤ 2,48% Độ lặp lại RSD ≤ 3,06% Độ xác trung gian 0,420443 an Độ lệch chuẩn S ine Phương pháp ứng dụng để định lượng citral mẫu tinh dầu sả chanh thị trường ed ic 4.2 Kiến nghị Co py rig ht @ Sc ho ol of M Ứng dụng phương pháp để góp phần vào việc kiểm sốt chất lượng tinh dầu sả chanh thị trường Phương pháp sở để lựa chọn nguyên liệu bào chế sản phẩm chống côn trùng từ tinh dầu sả chanh 39 ht rig py Co @ ho ol Sc of M ine ed ic ac y, dP rm an VN U VN U TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y tế (2012), Kiểm nghiệm thuốc (dùng cho đào tạo dược sĩ đai học), [2] ac y, Nhà xuất giáo dục Việt Nam, pp.135-184 Viện kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm (2010), Thẩm định phương pháp phân tích hố học vi sinh vật, NXB Khoa học [3] dP rm Kỹ thuật,pp.10-59 Vụ khoa học đào tạo – Bộ Y tế (2005), Kiểm nghiệm dược phẩm, NXB Y học, pp.68-84 Tiếng anh Adams, R Identification of Essential Oils Compounds by Gas an [4] Chromatography – Mass Spectroscopy Allured Publishing Co : IL, 1997 Barbier; Bouveault Comp Rend 1894, 118, 983, 1050 ; 1895, 121, ine [5] [6] ed ic 1159; 1896, 122, 293 Bassolé, I H., A Lamien-Meda, B Bayala, L.C Obame, A J Ilboudo, 18(12): 1070-1074 Bermejo, P.; Abad, M.; Silvon Sen, A.; Sonchez Contreras, S.; Diaz of [7] M C Franz, J Novak, R C Nebié, M H Dicko, 2011 Phytomedicine, lanza, A Life Sci 1998, 63, 1147- 1156 Bertram Schimmel’s Report 1888, 17 [9] Bilal Yilmaz, Emrah Alkan (2015), “Spectrofluorometric and ho ol [8] Sc Spectrofluorometric and UV Spectrofluorometric Methods for the [10] Chenghan Mei, Bin Li, et al (2015), "Liquid chromatography-tandem @ mass spectrometry for the quantification of flurbiprofen in human ht plasma and its application in a study of bioequivalence", Journal of rig Chromatography B, 993-994, pp.69-74 py [11] Determination of Flurbiprofen in Pharmaceutical Preparations”, Journal of Pharmaceutical Analysis, 4(4) Co [12] Dodge Amer Chem J 1890, 12, 553 [13] Epstein, W.; McGee, L.; Poulter,C.; Marsh, J Chem Eng Data 1976, VN U 21, 500 [14] European Medicines Agency (2011), Guideline on bioanalytical method validation, pp.9-10 ac y, [15] Fenaroli, G., Furia, T.E., Bellanca, N., Handbook of Flavor Ingredients, ISBN 0-87819-532-7 dP rm [16] Gbenou, J D., J F Ahounou, H B Akakpo, A Laleye, E Yayi, F Gbaguidi, L BabaMoussa, R Darboux, P Dansou, M Moudachirou, S O Kotchoni, 2013 Molecular Biology Reports, 40 (2): 1127-1134 [17] Hattori, T.; Ito, M.; Suzuki, Y Nippon Yakurigaku Zasshi 1991, 97, 13-21 [18] Husek, P.; Mack, K J Chromatgr 1975, 133, 139-230 an [19] Jennings, W.; Shibamoto, T Qualitative Analysis of Flavor and Press: New York, 1980 ine Fragrance Volatile by Capillary Gas Chromatography The Atlas of Spectral Data of ed ic [20] Joulain, D.; Konig, A.; Verlag, E Academic Sesquiterpene Hydrocarbons Hamburg, Germany, 1998 [21] Khan, M S., I Ahmad, 2012 Journal of Ethnopharmacology, 140 (2): 416-423 M [22] Kokane Vikrant , Naik Sonali (2014), “Formulation and evaluation of of topical flurbiprofen gel using different gelling agents”, World Journal ho ol of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 3(9),pp 654-663 [23] Kruger; Stiehl; Tiemann J Pr Chem 1898, 58, 51; 1899, 59, 497 [24] Kuwahara, Y., Suzuki, H., Matsumoto, K & Wada, Y (1983) Sc “Pheromone study on acarid mites XI Function of mite body as geometrical isomerization and reduction of citral (the alarm @ pheromone) Carpoglyphus lactis” Appl Entomol Zool 18: 30–39 ht [25] Lawless, J., The Illustrated Encyclopedia of Essential Oils, ISBN 1- rig 85230-661-0 [26] Libbey, L.; Essent, J Oil Res 1991, 3, 192 Co py [27] Maíra Maciel Mattos de Oliveiraa, Danilo Florisvaldo Brugneraa, Maria das Graỗas Cardosob, Eduardo Alvesc and Roberta Hilsdorf Piccoli, 2010 Food Control, 2010 21(4): 549-553 [28] Motoo, Y.; Sawabu, N Cancer Lett 1994, 86, 91-95 VN U [29] Murray, Kermit K., et al (2013), "Definitions of terms relating to mass spectrometry (IUPAC Recommendations 2013)", Pure and Applied Chemistry, 85(7),1515-1609 citral” Lett Appl Microbial (3): 105–108 ac y, [30] Onawunmi, G.O (1989) “Evaluation of the antimicrobial activity of [31] Pala-Paul, J.; Perez-Alonso, M.; Velasco-Negueruela, A.; Sanz, J Gas Chromatography – Mass Spectroscopy of the dP rm “Analysis by Volatile Components of Ageratina Adenophora Spreng., Growing in the Canary Islands.” J of Chromatography 2002, 947, 327-331 [32] Parry, E.J The Chemistry of Essential Oils and Artificial Perfumes an 4th Ed.; Scott, Greenwood and Son: London, UK, 1921; Vol 1, pp 63, 270, 71-73, 270 ine [33] Robacker, D.C & Hendry, L.B (1977) “Neral and geranial: ed ic components of the sex pheromone of the parasitic wasp, Itoplectis conquisitor” J Chem Ecol (5): 563–577 M [34] Schimelpfenig, C.W J Chem Ed 1978, 55, 306 [35] Semmler, F W Ber Dtsch Chem Ges 1891, 24, 201 of [36] Semmler, F.W Ber Dtsch Chem Ges 1890, 23, 2965-3556 ho ol [37] Simonsen, J.L The Terpenes 2nd Ed Cambridge University Press: Cambridge, 1947; Vol 1, pp 42 - 45, 70 - 85 [38] Singh, P., R Shukla, A Kumar, B Prakash, S Singh, N K Dubey, Sc 2010 Mycopathologia, 170(3): 195-202 [39] Sofowora, A Medicinal Plants and Traditional Medicine in Africa @ John Wiley & Sons Inc : New York, 1982; pp 71-72 ht [40] Survey and health assessment of chemical substances in massage oils rig Archived 28 June 2007 at the Wayback Machine [41] Swinger, A.; Silverstein, R Aldrich Chemical Co Milwaukee, WI, 1981 Co py [42] The Europaean Pharmacopieal Commission (2010), Pharmacopoeia Europaea 7th Edition vol 2, pp.2056-2057 [43] The International Council for Harmonisation of Technical VN U Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (2005), Validation of analytical procedures: text and methodology Q2(R1), pp.6-13 [44] Tiemann Ber DTSCH Chem Ges 1899, 32, 117 ac y, [45] Wilson, C.M Grass and People University of Florida Press: Gainesville, 1961; pp 75 [46] Wilson, N.; Ivanova, M.; Watt, R.; Moffat, A “The quantification of dP rm Citral in Lemon Grass and Lemon Oils by Near-Infrared Spectroscopy.” The Journal of Pharmacy And Pharmacology 2002, 54, 1257-1263 [47] Xiuqin, L.; Jia, Y.; Song, A.; Chen, X ; Bi, K “Analysis of the Essential Oil from Radix Bupleuri Using Capillary Gas Chromatography.” The [48] Zeitshel Ibid 1906, 39, 1787 an Pharmaceutical Society of Japan 2005, 125, 815-819 ine [49] Gaonkar, R., Yallappa, S., Dhananjaya, B L., & Hegde, G (2016) ed ic Development and validation of reverse phase high performance liquid chromatography for citral analysis from essential oils Journal of Chromatography B, 1036-1037, 50–56 M [50] Rauber, C.; Guterres, S.; Schapoval, E “LC Determination of Citral in of Cymbopogon Citratus Volatile Oil.” J of Pharmaceutical And ho ol Biomedical Analysis 2004, 37, 597-601 [51] Miron, D., Battisti, F., Schwengber Ten Caten, C., Mayorga, P., & Eva Scherman Schapoval, E (2012) Spectrophotometric Simultaneous Sc Determination of Citral Isomers in Cyclodextrin Complexes with Partial Least Squares Supported Approach Current Pharmaceutical @ Analysis, 8(4), 401–408 ht Trang web rig [52] http://www.uni-graz.at/~katzer/engl/Cymb_cit.html 2005 [53] http://edis.ifas.ufl.edu 2005 Co py [54] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Citral#section=Chemicaland-Physical-Properties ... ====== an NGUYỄN THỊ HUÊ ine XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG ed ic CITRAL TRONG TINH DẦU SẢ CHANH BẰNG M PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG ho ol of CAO GHÉP ĐẦU DỊ DÃY DIOD NGÀNH DƯỢC HỌC KHỐ: QHY.2014... dụng phương pháp để định lượng citral có tinh dầu sả chanh, tinh dầu chanh ta tinh dầu vỏ chanh tây Kết xác định hàm lượng citral mẫu tinh dầu sả chanh 74,98%, mẫu tinh dầu chanh ta 2.09% mẫu tinh. .. chanh, tiến hành xây dựng quy trình định lượng citral tinh dầu sả chanh phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ghép đầu dò dãy diod theo hướng dẫn Hội nghị quốc tế hài hồ hố thủ tục đăng ký dược phẩm sử