TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC NGUYỄN THỊ TÂM KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC PHÂN ĐOẠN NƯỚC CỦA LỒI ĐU ĐỦ RỪNG (TREVESIA PALMATA) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Hóa học hữu HÀ NỘI – 2018 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC NGUYỄN THỊ TÂM KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HĨA HỌC PHÂN ĐOẠN NƯỚC CỦA LỒI ĐU ĐỦ RỪNG (TREVESIA PALMATA) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Hóa học hữu Người hướng dẫn khoa học TS PHẠM HẢI YẾN HÀ NỘI – 2018 Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội LỜI CẢM ƠN Khóa luận hồn thành giúp đỡ tận tình thầy (cơ) khoa Hóa học trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội cán Viện Hóa Sinh Biển-Viện Hàn lâm Khoa Học Cơng Nghệ Việt Nam.Với tất lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn TS.Phạm Hải Yến giao cho em đề tài tận tình hướng dẫn, bảo, giúp đỡ em hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS.TS.Nguyễn Văn Bằng thầy (cơ) khoa Hóa học trường Đại học Sư Phạm Hà Nội giúp đỡ em thời gian học tập, tu dưỡng trường Em xin gửi lời cảm ơn đến cán phòng Nghiên cứu cấu trúc hóa học Viện Hóa Sinh Biển – Viện Hàn lâm Khoa Học Công Nghệ Việt Nam tận tình hướng dẫn, bảo em q trình làm thực nghiệm để hồn thành khoa luận Bản thân em cố gắng để hoàn thành kháo luận, khơng tránh khỏi thiếu xót Vì vậy, em kính mong đóng góp ý kiến thầy (cơ) bạn đọc để khóa luận em hoàn chỉnh Hà Nội, tháng 05 năm 2018 Sinh viên Nguyễn Thị Tâm SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC BẢNG BIỂU, HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TÁT MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Trevesia Vis 1.2 Tổng quan loài Đu đủ rừng (Trevesia palmata) 1.2.1.Mô tả 1.2.2 Phân bố sinh thái 1.2.3 Công dụng 1.2.4 Thành phần hóa học 1.2.5 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học đu đủ rừng 1.3 Các phương pháp chiết mẫu thực vật 1.3.1 Chọn dung môi chiết 1.3.2 Qúa trình chiết 1.4 Các phương pháp sắc kí phân lập hợp chất hữu 1.4.1 Đặc điểm chung phương pháp sắc ký 10 1.4.2 Cơ sở phương pháp sắc kí 10 1.4.3 Phân loại phương pháp sắc ký .11 1.5 Một số phương pháp hóa lý xác định cấu trúc hợp chất hữu 18 1.5.1 Phương pháp quang phổ hồng ngoại (IR) .19 1.5.2 Phương pháp cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) .19 1.5.3 Phương pháp khối phổ (MS) 22 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội 2.1 Mẫu thực vật 23 2.2 Phương pháp phân lập hợp chất 23 2.2.1 Sắc kí lớp mỏng ( TLC) 23 2.2.2 Sắc kí lớp mỏng điều chế 23 2.2.3 Sắc kí cột 23 2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 24 2.4 Dụng cụ 24 2.5 Hóa chất 24 CHƯƠNG : THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 25 3.1 Phân lập hợp chất 25 3.2 Hằng số vật lý liệu phổ hợp chất 28 3.2.1.Hợp chất 1: 28-O-β-D-glucopyranosyl ester oleanolic acid 28 3.2.2 Hợp chất 2:Hederagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L- rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside 28 CHƯƠNG 4: THẢO LUẬN KẾT QUẢ 29 4.1 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất 29 4.2 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất 35 KẾT LUẬN 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội DANH MỤC BẢNG BIỂU, HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Lá Đu đủ rừng Hình 1.2 Hoa Đu đủ rừng Sơ đồ Sơ đồ chiết phân đoạn dịch chiết methanol 25 Đu đu rừng Sơ đồ Sơ đồ phân lập phân đoạn nước từ Đu đủ rừng Hình 4.1.a Phổ proton H hợp chất Hình 4.2.b Phổ cacbon C hợp chất Hình 4.1.c Phổ C DEPT hợp chất 31 Hình 4.1.d Phổ chiều HMBC hợp chất 32 Hình 4.1.e Phổ chiều HSQC hợp chất 33 Hình 4.1.g Cấu trúc hóa học tương tác HMBC 33 27 29 13 30 13 (HC) hợp chất 1 Hình 4.2.a Phổ proton H hợp chất Hình 4.2.b Phổ cacbon C hợp chất Hình 4.2.c 36 13 36 Phổ cacbon C DEPT hợp chất 13 37 Hình 4.2.d Phổ COSY hợp chất 39 Hình 4.2.e Phổ chiều HSQC hợp chất 40 Hình 4.2.f Phổ chiều HMBC hợp chất 40 Hình 4.2.f Cấu trúc hóa học tương tác HMBC (HC) 41 hợp chất Bảng 4.1.1 Số liệu phổ hợp chất 34 Bảng 4.2.2 Số liệu phổ hợp chất 41 SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TÁT 13 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Cacbon 13 Carbon-13 NuclearMagneticResonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton 1 2D-NMR Phổcộng hưởng từ hạt nhân hai chiều Two-Dimensional NMR CC Sắc kí cột Column Chromatography DEPT Distortionless Enhancement By Polarization Transfer EI-MS Phổ khối lượng va chạm electronElectron Impact Mas C-NMR H-NMR H-1H COSY H-1H Chemical Shift Corelation Spectroscopy Spectroscopy FAB-MS Phổ khối lượng bắn phá nguyên tử nhanh Fast Atom Bombardment Mas Spectrometry HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivit HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence HR-FAB-MS Phổ khối lượng bắn phá nguyên tử nhanh phân giải cao High Resolution Fast Atom Bombardment Mass Spectrometry IR Phổ hồng ngoại Infrared Spectroscopy ME Nhóm metyl MS Phổ khối lượng Mass Spectroscopy NOESY Nucler Overhauser Effect Spectroscopy TLC Sắc kí lớp mỏng Thin Layer Chromatography SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội MỞ ĐẦU Họ Nhân sâm (Araliaceae) hệ thực vật Việt Nam phong phú đa dạng đặc điểm hình thái thành phần hóa học Trên giới, đặc biệt nước Đông Bắc Á sử dụng loài họ Nhân sâm làm thuốc Y học cổ truyền Trevesia Vis chi thuộc họ Nhân sâm, gồm khoảng 10 loài , thuốc quý , có giá trị Các nhà khoa học xác định Việt Nam chi Trevesia Vis gồm loài phân bố rộng khắp nước, thường mọc vùng rừng đệm, rừng xanh hay dọc bờ sông suối Trevesia palmata ( Roxb.&Lindl.) Vis., tên thường gọi Đu đủ rừng, Thông thảo gai, Thầu dầu núi, loài thuộc chi Trevesia Vis., thường mọc sông, suối, thung lũng rừng phục hồi [2] Đu đủ rừng sử dụng từ lâu theo kinh nhiệm dân gian Y học cổ truyền Theo Đơng Y, lõi thân có tác dung lợi tiểu, lợi phù, lợi sữa, dùng để chữa phù thũng, đái dắt, tê thấp, làm thuốc hạ nhiệt, xem vị thuốc bổ, chữa gãy xương Xuất phát từ ý nghĩa nên tơi chọn đề tài cho khóa luận tốt nghiệp là: “Khảo sát thành phần hóa học phân đoạn nước loài Đu đủ rừng (Trevesia palmata )” Để thực đề tài này, nội dung nghiên cứu bao gồm : - Xử lý mẫu, tạo dịch chiết; - Phân lập xác định cấu trúc hóa học chất phân lập từ loài Đu đủ rừng SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Trevesia Vis Theo hệ thống phân loại Takhtajan ghi Flowering plants [17], Đu đu rừng (Trevesia palmata ( Roxb.& Lindl.) Vis.) thuộc chi Trevesia Vis., chi nằm họ Nhân sâm ( Araliaceae) Vị trí phân loại chi Trevesia Vis hệ thống phân loại thực vật thức tóm tắt sau: Nghành: Ngọc lan Magnliophyta Lớp: Ngọc lan Magnliopsida Phân lớp: Sổ Dilleniidae Liên bộ: Cornanae Bộ Nhân sâm (Hoa tán) Apiales Họ Nhân sâm đa dạng đặc điểm hình thái Ở Việt Nam ghi nhận 18 chi thuộc họ này, có chi Trevesia Vis [4] Chi Trevesia Vis bụi hay gỗ nhỏ thường xanh, phân nhánh; thân có gai ( già gai bị tiêu biến) Lá lớn, mọc so le, có thùy chân vịt, có cuống, mép khía cưa; số thùy 5-13 Lá kèm dính với cuống thành bẹ chìa có thùy Cụm hoa tán nhiều hoa, hợp lại thành chùy chùm; tổng số tán 1-25, tán mang 9-65 hoa Hoa lưỡng tính Đài có mép dạng sóng hay có nhỏ Cánh hoa 6-16, xếp van, thường hợp thành thể dạng mũ rụng sớm Nhị số cánh hoa Bầu dưới, 6-16 ơ, vòi nhụy hợp thành cột ngắn, có nỗn treo Quả hạch hình cầu – trứng [1 ], [5], [7] Trên giới, chi Trevesia Vis có khoảng 10 lồi phân bố vùng Đông Nam Á, Ấn Độ, Nepal, Bu-tan, Băng La Đét Tây Nam Trung Quốc [5], [7] SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học Khóa luận tốt nghiệp Trường ĐHSP Hà Nội 1.2 Tổng quan loài Đu đủ rừng (Trevesia palmata) 1.2.1.Mô tả Ở Việt Nam gọi Đu dủ rừng, Nhật phiến, Thôi hoang, Thông thảo gai, Thầu dầu núi [1] Là nhỡ cao 7-8 m hơn, thân phân nhánh, cành có gai, ruột xốp đơn, phiến phân thùy chân vịt, xẻ sâu thầu dầu, có 5-9 thùy nhọn có răng, gân nối hai mặt, mép có cưa thơ, cuống dài có gai Lá non phủ lông mềm, màu nâu nhạt, già nhẵn, tụ thành chùy nhách Hoa to khoảng cm, màu trắng Quả dài 13-18mm, có khía, hạt dẹt Độ cao phân bố thường từ 400m trở lên Hoa tháng 5-6 Quả tháng 7-9 [2] Cây sinh trưởng gần quanh năm 1-2 năm/lần Hình 1.1: Lá Đu đủ rừng Hình 1.2: Hoa Đu đủ rừng 1.2.2 Phân bố sinh thái Đu đủ rừng phân bố Ấn Độ, Trung Quốc, Việt Nam Đu đủ rừng ưa ẩm chịu bóng ưa sáng Đu đủ rừng thường mọc chỗ ẩm dọc theo sông, suối, thung lũng SV Nguyễn Thị Tâm K40C – Hóa học 13 Hình 4.1.c: Phổ cacbon C DEPT hợp chất 1 13 Vị trí nhóm qui kết giá trị phổ H- C-NMR hợp chất thực phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều HSQC HMBC Tương tác HMBC từ H-24 (δH 0.77) tới C-3 (δC 79.7)/ C4 (δC 39.9)/ C-5 (δC 56.8)/ C-23 (δC 28.7) giá trị độ chuyển dịch hóa học C-3 cho phép xác định liên kết C-O C-3 Đồng thời tương tác trực tiếp HSQC gồm H-3/C-3, H-24/C-24, H-23/C-23 cho phép qui kết giá trị phổ 1H-, 13C- vị trí Tương tác HMBC từ H-25 (δH 0.97) tới C-1 (δC 39.8)/ C-5 (δC 56.8)/ C-9 (δC 49.0)/ C-10 (δC 38.1) tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-1/C-1, H-9/C-9, H-25/C-25) cho phép qui kết giá trị phổ C-1, C-9, C-10, C-25 Tương tác HMBC từ H-26 (δH 0.83) tới C-7 (δC 33.1)/ C-8 (δC 40.7)/ C-9 (δC 49.0)/ C-14 (δC 42.9) tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-7/C-7, H-26/C-26) cho phép qui kết giá trị phổ C-7, C-8, C-14, C-26 Tương tác HMBC từ H-27 (δH 1.18) tới C-8 (δC 40.7)/ C-13 (δC 144.8)/ C-14 (δC 42.9)/ C-15 (δC 28.9) tín hiệu carbon khơng liên kết với hydro vùng Csp C-13 cho thấy vị trí liên kết đôi C=C C-12/C-13 kết hợp với tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-27/C-27, H-15/C-15, H-12/C-12) cho phép quy kết giá trị phổ C-12, C-13, C-15, C-27 Các tương tác HMBC từ H-29 (δH 0.95) H30 (δH 0.93) tới C-19 (δC 47.2), C-20 (31.5), C-21 (33.9) tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-29/C-29, H-30/C-30, H-19/C-19, H-21/C-21) cho phép quy kết giá trị phổ C-18, C-19, C-20, C-21, C-29, C-30 Các tương tác COSY H-3/H-2, H-5/H-6, H-12/H-11, H-15/H-16, H18/H-19, H-21/H-22 cho phép qui kết giá trị phổ C-2, C-6, C-11, C16, C-18, C-22 Hai tín hiệu carbon lại δC 48.0 178.1 qui kết cho giá trị độ chuyển dịch hóa học C-17 C-28 Giá trị độ chuyển dịch hóa học C-28 đặc trưng cho nhóm chức carboxylic bị ester C28 cácj hợp chất triterpen dạng olean-28-oic acid Tiếp đó, số liệu phổ đơn vị đường hợp chất qui kết phân tích phổ hai chiều HSQC, HMBC Tương tác HMBC H-1ʹ (δH 5.40) với aglyone C-28 (δC 178.1) Các số liệu phổ carbon hợp phần đường δC 95.7, 73.9, 78.3, 71.1, 78.7, 62.4 cho thấy có mặt đơn vị đường glucose liên kết với alycon C-28 Hình 4.1.d : Phổ chiều HMBC hợp chất Hình 4.1.e: Phổ chiều HSQC hợp chất Như vậy, cấu trúc hóa học hợp chất xác định 28-Oβ-D-glucopyranosyl ester oleanolic acid, với công thức phân tử C36H58O8 số khối M=618 Hình 4.1.f: Cấu trúc hóa học tương tác HMBC Bảng 4.1.1: Số liệu phổ hợp chất C # δC 38.4 27.3 78.6 38.3 55.0 18.0 31.7 38.4 47.4 10 36.7 11 22.7 12 122.4 13 143.1 14 41.0 15 27.7 16 22.7 17 45.6 18 41.5 19 46.7 20 30.3 21 33.6 22 32.7 23 29.4 24 15.2 25 15.0 26 16.5 27 26.5 28 176.9 29 23.1 30 32.5 28-O-ß-D-glucopyranosyl 1′ 94.0 2′ 72.2 3′ 76.5 4′ 69.6 5′ 76.5 6′ 61.3 a b c δC 39.8 27.9 79.7 39.9 56.8 19.5 33.1 40.7 49.0 38.1 24.5 123.8 144.8 42.9 28.9 24.0 48.0 42.6 47.2 31.5 33.9 34.9 28.7 16.3 15.9 17.7 26.3 178.1 23.9 33.4 a,b δH (J, Hz) 1.01 (m)/ 1.64 (m) 1.58 (m)/ 1.64 (m) 3.16 (dd, 4.0, 11.0) 0.76 (m) 1.42 (m)/1.58 (m) 1.62 (m)/ 1.73 (m) 3.32 (m) 1.92 (m)/ 2.06 (m) 5.27 (br s) 1.10 (m)/ 1.82 (m) 1.92 (m) 2.87 (m) 1.17 (m)/ 1.72 (m) 1.33 (m)/ 1.49 (m) 1.22 (m)/ 1.41 (m) 0.99 (s) 0.77 (s) 0.97 (s) 0.83 (s) 1.18 (s) 0.95 (s) 0.93 (s) 95.7 73.9 78.3 71.1 78.7 62.4 5.40 (d, 8.0) 3.35 (m) 3.41 (m) 3.37 (m) 3.36 (m) 3.68 (m)/ 3.81 (m) # a,c Đo CD3OD, 125 MHz, 500 MHz, C 28-O-β-D-glucopyranosyl ester oleanolic acid [13] 4.2 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất Hợp chất phân lập dạng bột vơ định hình màu trắng Trên phổ H-NMR hợp chất cho thấy tín hiệu proton bảy nhóm nhóm methyl δH 0.72, 0.83, 0.93, 0.96, 0.99, 1.19 (mỗi tín hiệu 3H, singlet); 1.28 (3H, d, J = 6.0 Hz); proton olefin δH 5.26 (1H, br s); ba proton anome δH 4.52 (1H, d, J = 5.5 Hz), 4.54 (1H, d, J = 7.5 Hz), 5.18 (1H, br s) gợi ý hợp chất có ba đơn vị đường Các tín hiệu proton phần đường, tín hiệu proton dạng singlet sáu nhóm methyl thuộc phần aglycone xuất số lượng lớn tín hiệu proton vùng trường cao (δH 0.72  2.02) cho phép dự đốn hợp chất saponin có cấu trúc khung aglycone dạng oleane tương tự 1 Hình 4.2.a: Phổ proton H hợp chất 13 Phân tích phổ C-NMR DEPT nhận thấy xuất tín hiệu cộng hưởng 47 nguyên tử carbon bao gồm: nhóm carboxyl (δC 181.9) sáu carbon khác khơng liên kết với hydro (C), 22 nhóm methine (CH), 11 nhóm methylene (CH2), methyl (CH3) Sự xuất tín hiệu proton olefin hai carbon olefin (δC 123.5 145.2) phổ H13 C-NMR hợp chất cho thấy có mặt liên kết đôi C=C bị ba proton 13 Hình 4.2.b: Phổ cacbon C hợp chất 13 Hình 4.2.c: Phổ cacbon C DEPT hợp chất 13 Vị trí nhóm qui kết giá trị phổ H- C-NMR hợp chất thực phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều HSQC, HMBC, COSY Tương tác HMBC từ H-24 (δH 0.72) tới C-3 (δC 82.4)/ C-4 (δC 43.9)/ C-5 δC 48.0)/ C-23 (δC 64.5) giá trị độ chuyển dịch hóa học C-3 C-23 cho phép xác định liên kết C-O C-3 nhóm hydroxy tự C-23 Đồng thời tương tác trực tiếp HSQC gồm H-3/C-3, H-24/C-24, H-23/C-23 cho phép qui kết giá trị phổ 1H-, 13Ctại vị trí Tương tác HMBC từ H-25 (δH 0.99) tới C-1 (δC 39.6)/ C-5/ C-9 (δC 48.9)/ C-10 (δC 37.6) tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-1/C1, H-9/C-9, H-25/C-25) cho phép qui kết giá trị phổ C-1, C-9, C-10, C-25 Tương tác HMBC từ H-26 (δH 0.83) tới C-7 (δC 33.4)/ C-8 (δC 40.4)/ C-9 / C-14 (δC 42.9) tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-7/C-7, H-26/C-26) cho phép qui kết giá trị phổ C-7, C-8, C-14, C-26 Tương tác HMBC từ H-27 (δH 1.19) tới C-8 / C-13 (δC 145.2)/ C-14/ C-15 (δC 28.8) tín hiệu carbon khơng liên kết với hydro vùng Csp C-13 cho thấy vị trí liên kết đơi C=C C-12/C-13 kết hợp với tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-27/C-27, H-15/C-15, H-12/C-12) cho phép quy kết giá trị phổ C-12, C-13, C-15, C-27 Các tương tác HMBC từ H-29 (δH 0.93) H-30 (δH 0.96) tới C-19 (δC 47.2), C-20 (31.6), C-21 (34.9) tương tác trực tiếp phổ HSQC (H-29/C-29, H-30/C-30, H-19/C-19, H21/C-21) cho phép quy kết giá trị phổ C-18, C-19, C-20, C-21, C-29, C-30 Các tương tác COSY H-3/H-2, H-5/H-6, H-12/H-11, H-15/H16, H-18/H-19, H-21/H-22 cho phép qui kết giá trị phổ C-2, C-6, C11, C-16, C-18, C-22 Hai tín hiệu carbon lại δC 47.6 181.9 qui kết cho giá trị độ chuyển dịch hóa học C-17 C-28 Giá trị độ chuyển dịch hóa học C-28 đặc trưng cho nhóm chức carboxylic tự C-28 hợp chất triterpen dạng olean-28-oic acid Tiếp đó, số liệu phổ đơn vị đường hợp chất qui kết phân tích phổ hai chiều COSY, HSQC, HMBC Tương tác HMBC H-1ʹ (δH 4.52) với aglyone C-3 (δC 82.4), chuỗi tương tác quan sát phổ COSY gồm H-1ʹ/ H-2ʹ/ H-3ʹ/ H-4ʹ/ H-5ʹ với tương tác trực tiếp phổ HSQC proton cho phép qui kết giá trị phổ đơn vị đường arabinose liên kết O-glycoside đường với aglycone C-3 Tương tác HMBC Hʺ-1 (δH 5.18) C-2ʹ (δC 76.9), với chuỗi tương tác COSY H-1ʺ/ H-2ʺ/ H-3ʺ/ H-4ʺ/ H-5ʺ/ H-6ʺ cho phép qui kết giá trị phổ đơn vị đường rhamnose, liên kết (1→2) đơn vị đường rhamnose với đơn vị đường arabinose Các số liệu phổ carbon lại hợp phần đường δC 105.7, 75.3, 77.7, 71.2, 77.7, 62.4 tương tác HMBC H-1‴ (δH 4.54) với C-3ʺ (δC 82.7) cho thấy có mặt đơn vị đường glucose tự cuối chuỗi mạch trisaccharide liên kết với đơn vị rhamose liên kết (1→3) O-glycoside Hóa lập thể khung aglycone hợp chất tiếp minh chứng dựa phân tích phổ tương tác khơng gian ROESY Các tương tác ROESY H-25/H-26, H18/H-30 cho thấy proton gần không gian định hướng beta sinh tổng hợp hợp chất thứ cấp khung oleane Tương tự vậy, tương tác ROESY H-5/H-9/H-27 minh chứng cho định hướng alpha proton Ngoài phổ ROESY quan sát thấy tương tác H-25 (δH 0.99) H-24 (δH 0.72) cho thấy nhóm methyl C-24 định hướng beta, tức nhóm hydroxymethyl C-23 định hướng alpha Tương tác ROESY H-3 (δH 3.64) H-5 (δH 1.29) cho phép xác định proton H-3 định hướng alpha giống H-5, hay nhóm oxygen C-3 định hướng beta Hình 4.1.d: Phổ COSY hợp chất Hình 4.1.e: Phổ chiều HSQC hợp chất Hình 4.1.f: Phổ chiều HMBC hợp chất Như vậy, cấu trúc hóa học hợp chất xác định hederagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L- rhamnopyranosyl- (1→2)-α-L-arabinopyranoside , ứng với công thức phân tử C47H76O17, M=92 Hình 4.1.g: Cấu trúc hóa học tương tác HMBC hợp chất Bảng 4.2.2: Số liệu phổ hợp chất @ C δC δC 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 39.2 26.5 81.4 43.8 47.8 18.3 33.0 39.9 48.4 37.1 24.0 122.6 145.3 42.4 28.6 24.0 46.9 42.3 46.8 31.1 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 34.4 30.1 64.3 14.3 16.3 17.7 26.4 181.1 33.5 24.0 1′ 2′ 3′ 4′ 104.8 75.6 74.8 69.6 5′ 66.2 6′ 1′′ 2′′ 101.4 71.6 a,b 39.6 26.5 82.4 43.9 48.0 18.8 33.4 40.4 48.9 37.6 24.5 123.5 145.2 42.9 28.8 24.0 47.6 42.7 47.2 31.6 a,c δH (J, Hz) 0.99 (m)/1.63 (m) 1.75 (m)/1.90 (m) 3.64 (m) 1.29 (m) 1.38 (m)/1.52 (m) 1.29 (m)/1.64 (m) 1.65 (m) 1.91 (m) 5.26 (br s) 1.10 (m)/1.80 (m) 1.61 (m)/2.02 (m) 2.86 (br d, 10.5) 1.16 (m)/1.71 (m) - 34.9 1.22 (m)/1.40 (m) 33.8 1.56 (m)/1.77 (m) 64.5 3.35 (d, 11.5)/3.58 (d, 11.5) 13.7 0.72 (s) 16.4 0.99 (s) 17.8 0.83 (s) 26.5 1.19 (s) 181.9 33.6 0.93 (s) 24.0 0.96 (s) 3-O-α-L-arabinopyranosyl 104.9 4.52 (d, 5.5) 76.9 3.67 (m) 73.9 3.68 (m) 69.6 3.80 (m) 3.53 (dd, 3.5, 11.0) 65.6 3.86 (br d, 11.0) 2′- O-α-L-rhamnopyranosyl 101.7 5.18 (br s) 71.0 4.26 (br s) 3′′ 4′′ 5′′ 6′′ 82.8 72.8 69.7 18.4 82.7 3.90 (m) 72.5 3.59 (m) 70.1 3.93 (m) 18.1 1.28 (d, 6.0) 3′-O-ß-D-glucopyranosyl 1′′′ 106.5 105.7 4.54 (d, 7.5) 2′′′ 75.6 75.3 3.33 (m) 3′′′ 78.4 77.7 3.41 (dd, 8.5, 9.0) 4′′′ 71.6 71.2 3.34 (m) 5′′′ 78.3 77.7 3.34 (m) * 62.5 62.4 3.89 /3.71 (dd, 4.5, 11.5) a b c @ Đo CD3OD, 125 MHz, 500 MHz, δC hederagenin-3-O-β-Dglucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside [16] KẾT LUẬN Bằng phương pháp chiết sắc kí kết hợp sắc kí cột nhồi silica gel pha thường, sắc kí cột nhồi silicagel pha đảo, sắc kí lớp mỏng điều chế phân lập hai hợp chất tritecpen saponin, kết thu sau: 1) Hợp chất (1): 28-O-β-D-glucopyranosyl ester oleanolic acid 2) Hợp chất (2): hederagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-Lrhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranoside Cấu trúc hóa học hợp chất hợp chất xác định phương pháp phổ đại bao gồm phổ cộng hưởng hạt nhân chiều hai chiều TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Nguyễn Tiến Bân (2003), Từ điển thực vật thông dụng, tập 2, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật [2] Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thông dụng, tập 2, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật [3] Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam, 2, nxb.Trẻ, thành phố Hồ Chí Minh [4] Nguyễn Văn Đạt, Trần Thị Phương Anh (2013), Bước đầu xây dựng khóa định loại chi họ Ngũ Gia Bì (Araliaceae) Việt Nam Tiếng Anh [5] Committee E.(2007), Flora of China.13, 436-438 [6] De Tommasi,Nunziatuna, Autore Giuseppina, Bellino Aurora, Pinto Aldo, Pizza Cosima, Sorrentino Raffaella,63 (3), 308-314 [7] Jebb, Matthew HP (1998), A reviesion of the genus Trevesia (Araliaeae) Glasra.3(2), 85-113 [8] Kannika banyaphu, Panee Sirisa – ard, Preeyaws Na Ubol, Surapol Nathaka Karnkitkul, Sunee Chansakaou, Tran Van On (2012), Phytochemical, an tioxidant and antibacterial activities of medicinal plants used in Northern Thailand as postpartum herbal bath recipes by the Mien (Yac) community, Phytopharmacology.2(1), 92-105 [9] Sripanidkulchai B, Wongpanich V, Laupattarakasem P, Suwansaksri J, Jirakulsomchok D, (2001), Diuretic effetic of selected Thai indigenous medicinal plants in rats J Ethnopharmacol May; 75 (2-3):185-90 [10] Duc Do Khac, Sung Tran An, Angela Martha Campos, Jean – Yves Lallemand and Marcel Fetizon, Ellagic acid compounds from Diplopanax stachy anthus, Phytochemical, Vol.29(1), pp25 – 256 (1990) [11] Peter J.Houghton and Lu Minh Lian, Triterpenes from Desfontainiaspinosa, Phytochemical, Vol.25 (8) , pp 1939 – 1944 (1986) [12] Liang Guang – Yi, Alexander I.Gray amh Peter G.Waterman, Pentacylic triterpenes from the fruits of Rosa sterilis, Journal of Natural Products, Vol.52, pp 162 -167 (1989) [13] M.Cláudia Marx Young, A Potomati, E Paulo Chu, M Haraguchi, M Yamamoto, and T Kawano, 13C NMR analysis of monodesmosidic saponinis from Gomphrena macrocephala Phytochemistry, 1997 46(7): p 1267-1270 [14] K.M Hasanur Rahman, Joyanto Kumar Nandi, Samira Sultana, Shahnaz Rahman, Shahadat Hossan, Mohammed Rahmatullah (2014), Phytochemical screening, antihyperglycemic and analgesic activity studies with methanol extract of Trevesia palmata leaves, World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Volume 3, Issue 10, 91-101 [15] Mohammed Aktar Sayeed, Md Faruk, Ahmad Ibtehaz Chowdhury, Ahmmed Rusti Faisal, Abdullah Al Mamun, Mujahidul Islam (2014), Thrombolytic and anti-arthritic activities of methanolic extract of Trevesia palmata, e-Journal of Science & Technology (e-JST), Vol (5), 119-124 [16 ] Saito, S., et al., Saponins from the Leaves of Aralia elata SEEM : Araliaceae Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1990 38(2): p 411414 [17] Takhtajan Armen (2009), Flowering Plants, ed 2, Springer [18] Xiao K., Yi Y H., et al (1999) "A cytotoxic triterpene saponin from the root bark of Aralia dasyphylla", Journal of Natural Products, 62, pp 1030-1032 [19] Yoshikawa M., Yoshizumi S., et al (1995) "Medicinal foodstuffs I Hypoglycemic constituents from a garnish foodstuff "taranome," the young shoot of Aralia elata SEEM.: elatosides G, H, I, J, and K", Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 43, pp 1878-1882 [20] Yoshizaki K., Devkota H P., et al (2013) "Saponins composition of rhizomes, taproots, and lateral roots of Satsuma-ninjin Panax japonicus", Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 61, pp 344-350 [21] Yu S S., Yu D Q., et al (1994) "Triterpenoid saponins from the roots of Aralia spinifolia", Journal of Natural Products, 57, pp 978-982 [22] Zhang J., Wang H., et al (2013) "Cardioprotective and antioxidant activities of a polysaccharide from the root bark of Aralia elata (Miq.) Seem", Carbohydrate Polymers, 93, pp 442-448 ... ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC NGUYỄN THỊ TÂM KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC PHÂN ĐOẠN NƯỚC CỦA LỒI ĐU ĐỦ RỪNG (TREVESIA PALMATA) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Hóa học. .. HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Lá Đu đủ rừng Hình 1.2 Hoa Đu đủ rừng Sơ đồ Sơ đồ chiết phân đoạn dịch chiết methanol 25 Đu đu rừng Sơ đồ Sơ đồ phân lập phân đoạn nước từ Đu đủ rừng Hình 4.1.a Phổ proton... năm/lần Hình 1.1: Lá Đu đủ rừng Hình 1.2: Hoa Đu đủ rừng 1.2.2 Phân bố sinh thái Đu đủ rừng phân bố Ấn Độ, Trung Quốc, Việt Nam Đu đủ rừng ưa ẩm chịu bóng ưa sáng Đu đủ rừng thường mọc chỗ ẩm