BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ HƯƠNG GIANG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY ĐINH LĂNG RĂNG TRỒNG TẠI THÁI BÌNH KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2019 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ HƯƠNG GIANG MÃ SINH VIÊN: 1401154 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY ĐINH LĂNG RĂNG TRỒNG TẠI THÁI BÌNH KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Mạnh Tuyển DS Đinh Thị Vân Nơi thực hiện: Bộ môn Dược học cổ truyền Viện Dược liệu HÀ NỘI – 2019 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực khoá luận, em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ động viên quý báu từ thầy giáo, giáo, gia đình bạn bè Em xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển trực tiếp hướng dẫn, hết lòng truyền đạt kiến thức q báu để em hồn thành khố luận Em xin phép gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới DS Đinh Thị Vân thầy cô, anh chị kỹ thuật viên giảng dạy công tác Bộ môn Dược học cổ truyền – Trường Đại học Dược Hà Nội Khoa Hoá Phân tích – Viện Dược liệu Các thầy cơ, anh chị ln tận tình hướng dẫn, quan tâm tạo điều kiện giúp đỡ em suốt q trình hồn thành khố luận Em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo cán công tác trường Đại học Dược Hà Nội tận tình bảo, giảng dạy, dìu dắt truyền nhiệt huyết cho em suốt năm học tập trường Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình bạn bè ln động viên, giúp đỡ em suốt q trình thực khoá luận học tập Do điều kiện chủ quan khách quan, khoá luận có thiếu sót Em mong nhận ý kiến đóng góp quý giá thầy hội đồng để khố luận hồn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2019 Sinh viên Lê Hương Giang MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Đinh lăng (Polyscias) 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Phân bố chi Đinh lăng (Polyscias) 1.1.3 Đặc điểm thực vật chi Đinh lăng (Polyscias) 1.1.4 Thành phần hoá học chi Đinh lăng (Polyscias) 1.1.5 Tác dụng sinh học chi Đinh lăng (Polyscias) 13 1.2 Tổng quan loài Polyscias guilfoylei 15 1.2.1 Đặc điểm thực vật loài Polyscias guilfoylei 15 1.2.2 Thành phần hoá học loài Polyscias guilfoylei 15 1.2.3 Tác dụng sinh học loài Polyscias guilfoylei 18 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị nghiên cứu 19 2.1.1 Nguyên vật liệu nghiên cứu 19 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 19 2.1.2.1 Thuốc thử, dung mơi, hóa chất 19 2.1.2.2 Phương tiện máy móc 19 2.2 Nội dung nghiên cứu 20 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 20 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hoá học 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu 20 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu thực vật học 20 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học 21 2.3.2.1 Định tính sơ nhóm chất phản ứng hố học 21 2.3.2.2 Chiết xuất cao toàn phần phân đoạn 25 2.3.2.3 Phân lập hợp chất 26 2.3.2.4 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất 27 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28 3.1 Kết nghiên cứu đặc điểm thực vật 28 3.1.1 Đặc điểm thực vật mẫu nghiên cứu 28 3.1.2 Xác định tên khoa học Đinh lăng 29 3.1.3 Đặc điểm vi học rễ, thân, Đinh lăng (Polyscias guilfoylei cv quinquefolia) 30 3.1.3.1 Đặc điểm vi phẫu rễ 31 3.1.3.2 Đặc điểm vi phẫu thân 32 3.1.3.3 Đặc điểm vi phẫu 33 3.1.3.4 Đặc điểm bột rễ 34 3.1.3.5 Đặc điểm bột thân 35 3.1.3.6 Đặc điểm bột 36 3.2 Kết nghiên cứu thành phần hoá học 37 3.2.1 Định tính nhóm chất thân Đinh lăng (Polyscias guilfoylei cv quinquefolia) 37 3.2.2 Quy trình chiết xuất phân lập hợp chất thân Đinh lăng (Polyscias guilfoylei cv quinquefolia) 40 3.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 41 3.3 Bàn luận 45 3.3.1 Về đặc điểm thực vật 45 3.3.1.1 Về giám định tên khoa học cho Đinh lăng 45 3.3.1.2 Về mô tả đặc điểm thực vật Polyscias guilfoylei cv quinquefolia 46 3.3.2 Về thành phần hoá học 47 3.3.2.1 Về định tính nhóm chất thân Polyscias guilfoylei cv quinquefolia 47 3.3.2.2 Về chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT s : mũi đơn (singlet) d : mũi đôi (doublet) br d : mũi đôi rộng (broad doublet) dd : mũi đôi – đôi (doublet – doublet) m : mũi đa (multiplet) J : số ghép (coupling constant) cv : cultivar ESI-MS : ElectroSpray Ionization Mass Spectroscopy EtOAc : ethyl acetat EtOH : ethanol HMBC : Heteronuclear Multiple Bond Correlation MeOH : methanol NMR : nuclear magnetic resonance P : Polyscias RP-18 : Reversed Phase C-18 SKLM : Sắc ký lớp mỏng Ara : L–arabinopyranose Gal : D–galactopyranose GlA : acid D–glucuronic Rha : L–rhamnopyranose Xyl : D–xylopyranose DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học số lồi thuộc chi Polyscias Tr Bảng 3.1 Khóa phân loại chi Polyscias Tr 30 Bảng 3.2 Kết định tính phận mặt đất Đinh lăng phản ứng hoá học Tr 38 Bảng 3.3 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo Tr 42 Bảng 3.4 So sánh số liệu NMR hợp chất với tài liệu tham khảo Tr 44 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Sơ đồ 2.1 Sơ đồ 3.1 Sơ đồ chiết xuất phân đoạn Sơ đồ chiết xuất, phân lập hợp chất từ thân Polyscias guilfoylei cv quinquefolia Tr 26 Tr 41 Hình 1.1 Các hợp chất phân lập từ chi Polyscias Tr Hình 1.2 Các hợp chất phân lập từ lồi Polyscias guilfoylei Tr 15 Hình 3.1 Đặc điểm thực vật Đinh lăng Tr 28 Hình 3.2 Vi phẫu rễ Đinh lăng Tr 31 Hình 3.3 Vi phẫu thân Đinh lăng Tr 32 Hình 3.4 Vi phẫu Đinh lăng Tr 34 Hình 3.5 Bột rễ Đinh lăng Tr 35 Hình 3.6 Bột thân Đinh lăng Tr 36 Hình 3.7 Bột Đinh lăng Tr 37 Hình 3.8 Cơng thức cấu tạo hợp chất Tr 43 Hình 3.9 Công thức cấu tạo hợp chất Tr 45 Hình 3.10 Mơ tả gốc lồi Polyscias guilfoylei cv quinquefolia Tr 46 Hình 3.11 Hình ảnh sắc ký lớp mỏng phân đoạn Tr 48 ĐẶT VẤN ĐỀ Thế giới thực vật nguồn tài nguyên thiên nhiên quý giá, cung cấp nguyên liệu cho y học cổ truyền nước nhà Chủ tịch Hồ Chí Minh nói:“Y học phải dựa nguyên tắc khoa học, dân tộc, đại chúng Ông cha ta ngày trước có nhiều kinh nghiệm quý báu cách chữa bệnh thuốc ta, thuốc bắc Ðể mở rộng phạm vi y học, cô, nên trọng nghiên cứu phối hợp thuốc Đông thuốc Tây” Thực lời dạy Bác, ngày nay, xu hướng sâu nghiên cứu tìm kiếm hoạt chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học cao từ loài thực vật làm dược phẩm chữa bệnh ngày thu hút quan tâm nhà khoa học ưu điểm không độc hại độc tính, dễ hấp thu chuyển hoá thể Chi Đinh lăng (Polyscias) chi lớn thứ hai họ Nhân sâm (Araliaceae) với nhiều loài sử dụng làm thuốc Tuy nhiên giới có số lồi nghiên cứu thành phần hoá học P filicifolia Bail., P scutellaria (Burm f.) Merr., P amplifolia (Baker) Harms, P.dichroostachya Baker, P fulva, P murrayi Harms Polyscias sp nov Cây Đinh lăng lồi Đinh lăng trồng phổ biến Thái Bình, người dân sử dụng làm cảnh làm thuốc tương tự Đinh lăng xẻ để tăng cường sức khỏe, nâng cao sức đề kháng, giảm đau đầu, giảm mệt mỏi, Tuy nhiên, có nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học lồi Đinh lăng Do đó, để bổ sung sở liệu thực vật, hóa học nâng cao công dụng giá trị ứng dụng thực tiễn Đinh lăng răng, chúng tơi tiến hành khố luận: “Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Đinh lăng trồng Thái Bình" với mục tiêu: Mơ tả đặc điểm hình thái, giám định tên khoa học mô tả đặc điểm vi học Đinh lăng Chiết xuất, phân lập nhận dạng 1-2 hợp chất từ thân Đinh lăng Phụ lục Phổ UV hợp chất 326 80 mAU 10.898 50 207 60 230 235 218 70 40 263 30 20 10 200 250 300 PL 350 nm Phụ lục Phổ NMR 1H hợp chất PL 10 PL 11 Phụ lục Phổ NMR 13C hợp chất PL 12 PL 13 Phụ lục Phổ ESI-MS hợp chất Inten.(x10,000,000) 3.5 3.0 2.5 2.0 457.20 359.25 1.5 1.0 0.5 395.25 325.35 0.0 250 300 350 400 PL 14 577.15 450 500 550 m/z Phụ lục Phổ UV hợp chất 198 350 mAU 31.127 300 250 328 200 150 263 100 50 200 250 300 PL 15 350 nm Phụ lục 10 Phổ NMR 1H hợp chất PL 16 PL 17 Phụ lục 11 Phổ NMR 13C hợp chất PL 18 PL 19 Phụ lục 12 Phổ HMBC hợp chất PL 20 PL 21 PL 22 PL 23 ... đặc điểm thực vật thành phần hóa học lồi Đinh lăng Do đó, để bổ sung sở liệu thực vật, hóa học nâng cao công dụng giá trị ứng dụng thực tiễn Đinh lăng răng, tiến hành khoá luận: Nghiên cứu đặc. .. luận: Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Đinh lăng trồng Thái Bình" với mục tiêu: Mơ tả đặc điểm hình thái, giám định tên khoa học mô tả đặc điểm vi học Đinh lăng Chiết xuất, phân...BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ HƯƠNG GIANG MÃ SINH VIÊN: 1401154 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÂY ĐINH LĂNG RĂNG TRỒNG TẠI THÁI BÌNH KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC