TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ MÔN DƯỢC LÝ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN VÀ TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ BỎNG CỦA CHẾ PHẨM CH1701 TRÊN THỰC NGHIỆM Thời gian nghiên cứu: 9-10/2017 Cán tham gia nghiên cứu: PGS.TS Nguyễn Trần Thị Giáng Hương TS Phạm Thị Vân Anh TS Trần Thanh Tùng Ths Phùng Văn Long BS Trần Quỳnh Trang KTV Nguyễn Kiều Vân KTV Đinh Quang Trường KTV Đàm Đình Tranh KTV Nguyễn Thành Long 1 Nguyên liệu, đối tượng phương pháp nghiên cứu 1.1 Nguyên liệu đối tượng nghiên cứu 1.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 1.1.1.1 Thuốc nghiên cứu: Tên sản phẩm: Gel bơi ngồi da CH1701 Thành phần: ống tuýp thuốc chứa 25 g dạng nano sol-gel có chứa: + Curcuminoids: 100mg (dưới dạng nano curcumin) + Rutin: 10 mg (dưới dạng nano rutin) + Tá dược: Polyglusam (Chitosan, ethylalcohol, dầu khuynh diệp, nước tinh khiết Sản xuất bởi: Công ty TNHH MTV 120 Armephaco Ngày gửi mẫu: 9/2017 công ty cổ phần Cẩm Hà bàn giao Dạng gel với tỷ lệ: Curcuminoids: 0.4% Rutin:0.04% 1.1.1.2.Hoá chất dụng cụ nghiên cứu: - Sulfadiazin-bạc (biệt dược Silvadene®) dạng kem bơi 1% sản phẩm Cơng ty cổ phần Dược Trung Ương Huế (Medipharco) - Kit định lượng enzym chất chuyển hoá máu: ALT (alanin aminotransferase), AST (aspartat aminotransferase), bilirubin toàn phần, albumin, cholesterol toàn phần, creatinin hãng Hospitex Diagnostics (Italy) hãng DIALAB GmbH (Áo), định lượng máy sinh hóa bán tự động Erba Ấn Độ - Các dung dịch xét nghiệm máu hãng Exigo, định lượng máy Exigo – Boule Medical AB Thụy Điển - Các hố chất xét nghiệm làm tiêu mơ bệnh học - Máy scan HP G2410 công ty Hewlett-Packard Mỹ sản xuất 1.1.2 Đối tượng nghiên cứu 2 - Thử tác dụng mơ hình bỏng: Chuột cống chủng Wistar, hai giống, khoẻ mạnh, cân nặng 180 ± 20g, Trung tâm cung cấp động vật thí nghiệm Đan Phượng – Hà Tây cung cấp Động vật ni phòng thí nghiệm ngày trước nghiên cứu thức ăn chuẩn dành riêng Viện Vệ sinh dịch tễ cung cấp, uống nước tự 1.2 Phương pháp nghiên cứu 1.2.1 Tác dụng CH1701 mơ hình gây bỏng nhiệt Mơ hình tiến hành dựa nghiên cứu trước gây bỏng da chuột cống trắng Chuột cống trắng hai giống chia ngẫu nhiên thành lô, lô 13 sau:     Lô 1(Chứng sinh học): Không gây bỏng, không bôi thuốc Lơ (Mơ hình): Gây bỏng da Bơi tá dược lần/ngày Lô (Chứng dương): Gây bỏng da Bôi sulfadiazin bạc lần/ngày Lô (TĐ1 liều thấp – Lô trị 1): Gây bỏng da BôiCH1701 0,1 ml/1 vết bỏng/1 lần, lần/ngày  Lô (TĐ1 liều cao – Lô trị 2): Gây bỏng da Bôi CH1701 0,1 ml/1 vết bỏng/1 lần, lần/ngày Các thuốc tá dược sử dụng sau gây mơ hình bỏng da chuột Quy trình: - Chuột lô gây tổn thương bỏng da theo mơ hình gây bỏng nhiệt dụng cụ kim loại theo mô tả Durmus AS cộng sự, Vũ Thị Ngọc Thanh [1], [2] + Cạo lông vùng lưng chuột + Gây mê thiopental liều 50mg/kg chuột theo đường tiêm màng bụng + Gây bỏng dụng cụ kim loại chuyên biệt để gây bỏng cho chuột, vết bỏng tạo có diện tích 2,5cm2, mức độ bỏng độ Bổ sung ringer lactat cho chuột sau gây bỏng với thể tích ml/100g để tránh sốc dịch + Sau ta tiến hành bơi thuốc bơi tá dược + Nhốt riêng chuột chuồng, ăn uống đầy đủ, vệ sinh chuồng 3 Cách thức bôi thuốc: -Tá dược: Lấy bơm 1ml để lấy tá dược nhỏ vào vết bỏng với lượng 0,1ml/ vết bỏng sau dùng đầu ngón tay trỏ xoa lần/1 vết bỏng 15 giây, đảm bảo tá dược phủ kín vết bỏng -Thuốc: tương tự bôi tá dược – bôi với lượng 0,1ml/1 vết bỏng/1 lần với liều, xoa lần/1 vết bỏng 15 giây, đảm bảo thuốc phủ kín vết bỏng Thời điểm bơi thuốc: Khoảng cách lần bơi (vào thời điểm: 8h, 11h, 14h 17h) Chỉ số nghiên cứu: Tác dụng điều trị bỏng CH1701 mơ hình bỏng:  Tỷ lệ chết chuột sau gây bỏng  Chỉ số hình thái đại thể: + Tình trạng tổn thương vết bỏng: sưng, nóng, đỏ, phù nề quan sát mắt thường – ghi lại máy ảnh kỹ thuật số.Vết bỏng khỏi lúc bề mặt khô, mép vết bỏng tiến gần nhau, quan sát thấy khơng tượng sưng tấy vết bỏng Chỉ số ghi lại theo ngày chuột + Đo diện tích vết bỏng thời điểm 7, 14, 21 ngày sau gây bỏng Tính phần trăm phục hồi theo công thức Walker Mason[3]: Phần trăm phục hồi = (1 – Ad/Ao) x 100 (trong đó: Ao diện tích ngày 0, Ad diện tích ngày đánh giá) Đo diện tích vết bỏng xử lý phần mềm ImageJ Basics ver 1.38 Tổ chức y tế Thế giới công nhận phần mềm để đo đạc diện tích cho nghiên cứu y sinh học  Chỉ số hình thái vi thể: Tại thời điểm 21 ngày, lúc vết bong hết vẩy hồi phục khỏi, chuột gây mê, lấy mô bệnh học ngẫu nhiên chuột lơ vị trí trung tâm tổn thương Đánh giá tăng sinh tế bào sợi, tăng sinh mạch máu, tăng sinh sợi collagen, tỷ lệ biểu mơ hóa vết thương Các xét nghiệm vi thể thực Trung tâm Nghiên cứu phát sớm Ung thư (do PGS.TS Lê Đình Roanh đọc kết vi thể) 4 1.2.2 Ảnh hưởng tồn thân (độc tính bán trường diễn) CH1701trên chuột cống theo đường bôi qua vết bỏng Các tiêu theo dõi trình nghiên cứu: - Tình trạng chung, thể trọng chuột - Đánh giá chức phận tạo máu thông qua số lượng hồng cầu, thể tích trung bình hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu số lượng tiểu cầu - Đánh giá chức gan thông qua định lượng số chất chuyển hoá máu: bilirubin toàn phần, albumin cholesterol toàn phần - Đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan thông qua định lượng hoạt độ enzym máu: ALT, AST - Đánh giá chức thận thông qua định lượng nồng độ creatinin huyết Các thông số theo dõi kiểm tra dùng CH1701 đường bôi sau tuần nghiên cứu - Mô bệnh học: Sau tuần uống thuốc, chuột mổ để quan sát đại thể toàn quan Kiểm tra ngẫu nhiên cấu trúc vi thể gan, thận 30% số chuột lô Các xét nghiệm vi thể thực Trung tâm Nghiên cứu phát sớm Ung thư (do PGS.TS Lê Đình Roanh đọc kết vi thể) 1.3 Phân tích xử lý số liệu Số liệu xử lý theo thuật toán thống kê y sinh học Kiểm định khác biệt giá trị trung bình test T student Các tỷ lệ phần trăm thuật tốn χ2 Kết có ý nghĩa thống kê p < 0,05 5 Kết nghiên cứu 2.1 Tác dụng CH1701 mô hình gây bỏng nhiệt 2.2.1 Tỷ lệ chết lô chuột Thời gian sau gây bỏng tỷ lệ chuột chết ghi lại theo bảng sau: Bảng Tỷ lệ chuột chết lô chuột sau gây bỏng Lơ Mơ hình Chứng dương CH1701 CH1701 thấp cao Tỷ lệ chết 3/13 1/13 2/13 2/13 Theo dõi nghiên cứu cho thấy: chuột chết thời gian từ ngày đến ngày sau gây bỏng, tỷ lệ chết lô bôi tá dược cao (3/13), lơdùng CH1701 liều thấpvà liều cao có tỷ lệ chết 2/13, lơ dùng sulfadiazin bạc có tỷ lệ chết thấp 1/13.Tuy nhiên chưa có khác biệt rõ rệt 2.2.2 Diễn biến đại thể vết bỏng Ngay sau dùng nhiệt để gây bỏng: vết bỏng có màu trắng ngà, khơng phồng rộp, có ranh giới rõ với vùng da lành Khoảng 1-2 sau, rìa xung quanh vết bỏng nhìn rõ quầng xung huyết Ảnh 01 Da chuột Ảnh 02 Da chuột sau gây bỏng sau gây bỏng Ảnh minh họa: chuột số sau gây bỏng  Các vết bỏng bôi tá dược - Sau ngày 100% vết bỏng có lt Vết bỏng tình trạng hoại tử, bề mặt có nhiều ổ loét Các vết loét rộng dần, chiếm khoảng 45-50% diện 6 tích bề mặt vết bỏng, chứa nhiều dịch tiết có mùi Vùng xung quanh vết - bỏng phù nề, có ranh giới với vùng da lành Thời điểm ngày: đa số vết loét lô chuột tiết nhiều dịch Vùng da xung - quanh vết bỏng xung huyết Thời điểm 14 ngày: tất vết bỏng hình thành vảy tiết , vết bỏng bắt đầu bong vảy để lộ vùng tổn thương phía phục hồi, vết bỏng - khơ Vùng da xung quanh tổn thương khơng xung huyết Thời điểm 21 ngày: tất vết bỏng bong vảy, vết bỏng khô, vùng da tổn thương thu hẹp Riêng lơ mơ hình có vài vết bỏng ướt  Tỷ lệ liền khỏi vết bỏng Vết bỏng khỏi vết bỏng khô, hai mép tiến sát lại gần Chỉ số theo dõi ghi chép hàng ngày so sánh lô Đánh giá tiến hành ngày thứ 21trước làm giải phẫu bệnh, kết sau: Bảng Tỷ lệ liền khỏi vết bỏngở thời điểm 21 ngày sau gây bỏng Lô nghiên cứu Lơ 2: Mơ hình Lơ 2: Chứng dương Lơ 4: CH1701 liều thấp Lô 5: Tỷ lệ liền khỏi vết bỏng p 5/10 9/12 p3-20,05) 2.2.3 Mức độ thu hẹp diện tích bỏng: Bảng Diện tích vết bỏng thời điểm 7, 14 21 ngày nghiên cứu 7 Lơ Lơ 2: Mơ hình Lơ 3: Chứng dương Lơ 4: Thời Diện tích vết bỏng điểm N07 N14 N21 N07 N14 N21 (cm2) 5,41 ± 0,26 3,67 ± 0,39 1.34 ± 0,16 5,25 ± 0,38 3,10 ± 0,42 0,97 ± 0,26 p3-2>0,05 p3-20,05 N21 1,05 ± 0,25 p4-20,05 N14 3,17 ± 0,30 p5-20,05 p53>0,05 p53>0,05 Từ kết bảng cho thấy: Sau ngày dùng thuốc, diện tích bỏng khơng có khác biệt tất lơ nghiên cứu (p>0,05) CH1701cả liều có tác dụng làm giảm diện tích bỏng nhanh lơ chứng bôi tá dược vào ngày 14 21, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p 0,05 39,35 ± 3,86 39,29 ± 3,87 39,62 ± 3,71 > 0,05 39,01 ± 3,63 38,57 ± 3,52 39,37 ± 3,73 > 0,05 Kết bảng cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thử lượng hematocrit chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) Bảng Ảnh hưởng CH1701đến thể tích trung bình hồng cầu máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bơi thuốc Thể tích trung bình hồng cầu (fl) Lơ mơ hình Lơ trị Lơ trị p (t- test Student) 48,30 ± 2,91 49,20 ± 4,76 48,90 ± 1,91 > 0,05 48,80 ± 4,13 49,50 ± 6,00 49,30 ± 4,06 > 0,05 48,50 ± 3,50 49,10 ± 4,58 48,70 ± 4,19 > 0,05 Kết bảng cho thấy: Sau tuần tuần bơi thuốc thử thể tích trung bình hồng cầu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 18 18 Bảng Ảnh hưởng CH1701đến số lượng bạch cầu máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bôi thuốc p Số lượng bạch cầu (G/l) Lơ mơ hình Lơ trị Lơ trị (t- test Student) 6,67 ± 1,14 6,49 ± 0,99 6,77 ± 0,96 > 0,05 7,10 ± 1,09 6,77 ± 1,16 7,05 ± 1,03 > 0,05 6,84 ± 1,10 6,54 ± 1,25 6,91 ± 0,98 > 0,05 Kết bảng cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thử số lượng bạch cầu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) Bảng 10 Ảnh hưởng CH1701đến công thức bạch cầu máu chuột p Công thức bạch cầu (%) Chỉ số Lơ mơ hình Lympho (%) Trung tính (%) (t- test Lơ trị Lympho (%) Lơ trị Trung Lymph tính o (%) (%) Student) z Trung tính (%) Trước 83,47 17,50 82,07 17,93 82,30 17,70 ± nghiên cứu ± 6,66 ± 6,66 ± 6,05 ± 6,05 ± 7,23 Sau tuần 82,50 17,50 84,10 15,90 bôi thuốc Sau tuần ± 7,04 81,60 ± 7,04 18,40 ± 7,29 81,30 ± 7,29 ± 6,66 6,66 18,70 83,50 16,50 ± bôi thuốc ± 7,37 ± 7,37 ± 7,76 ± 7,76 ± 8,00 7,23 81,20 18,80 ± 8,00 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 10 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thử thành phần bạch cầu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 19 19 Bảng 11 Ảnh hưởng CH1701đến số lượng tiểu cầu máu chuột Chỉ số Số lượng bạch cầu (G/l) Lơ mơ hình Lơ trị Lô trị Trước nghiên 562,50 ± 554,20 ± 584,10 ± cứu 134,02 111,26 130,45 Sau tuần bôi 543,50 ± 561,50 ± 570,70 ± thuốc Sau tuần bôi 129,73 556,30 ± 113,63 575,20 ± 121,54 591,00 ± thuốc 118,54 128,27 112,68 p (t- test Student) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 11 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thử số lượng tiểu cầu chuột lô (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 2.2.3 Đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan: Bảng 12 Ảnh hưởng CH1701đến hoạt độ AST máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bôi thuốc p Lô mô hình AST (UI/l) Lơ trị Lơ trị (t- test Student) 88,50 ± 19,53 86,80 ± 14,77 93,40 ± 14,83 > 0,05 91,00 ± 15,78 89,20 ± 20,78 92,60 ± 16,62 > 0,05 86,30 ± 11,97 84,30 ± 15,32 90,50 ± 3,17 > 0,05 Kết bảng 12 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thửhoạt độ AST (GOT) máu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 20 20 Bảng 13 Ảnh hưởng CH1701đến hoạt độ ALT máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bôi thuốc p Lơ mơ hình ALT (UI/l) Lơ trị Lô trị (t- test Student) 41,80 ± 7,13 42,00 ± 6,04 39,40 ± 6,04 > 0,05 43,30 ± 8,21 41,40 ± 7,11 39,50 ± 6,43 > 0,05 43,00 ± 6,58 42,30 ± 5,91 41,70 ± 6,33 > 0,05 Kết bảng 13 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thử hoạt độ ALT (GPT) máu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 2.2.4 Đánh giá chức gan: Bảng 14 Ảnh hưởng CH1701đến nồng độ bilirubin toàn phần máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bơi thuốc Nồng độ bilirubin tồn phần(mmol/l) Lơ mơ hình Lô trị Lô trị p (t- test Student) 13,04 ± 0,58 13,07 ± 0,90 13,05 ± 0,66 > 0,05 12,95 ± 0,95 12,87 ± 0,65 12,96 ± 1,02 > 0,05 12,97 ± 0,50 13,06 ± 0,83 13,01 ± 0,74 > 0,05 Kết bảng 14 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thửnồng độ bilirubin toàn phần máu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 21 21 Bảng 15 Ảnh hưởng CH1701đến nồng độ albumin máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bôi thuốc Nồng độ albumin (g/dl) Lơ mơ hình Lơ trị Lô trị p (t- test Student) 3,61 ± 0,43 3,63 ± 0,37 3,60 ± 0,32 > 0,05 3,56 ± 0,44 3,65 ± 0,35 3,71 ± 0,29 > 0,05 3,66 ± 0,42 3,58 ± 0,35 3,64 ± 0,39 > 0,05 Kết bảng 15 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thửnồng độ albumin máu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) Bảng 16 Ảnh hưởng CH1701đến nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bơi thuốc Nồng độ cholesterol tồn phần(mmol/l) Lơ mơ hình Lơ trị Lơ trị p (t- test Student) 1,25 ± 0,24 1,23 ± 0,24 1,26 ± 0,21 > 0,05 1,20 ± 0,24 1,22 ± 0,25 1,24 ± 0,25 > 0,05 1,23 ± 0,20 1,24 ± 0,22 1,23 ± 0,21 > 0,05 Kết bảng 16 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thử nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 22 22 2.2.4 Đánh giá chức lọc cầu thận: Bảng 17 Ảnh hưởng CH1701đến nồng độ creatinin máu chuột Chỉ số Trước nghiên cứu Sau tuần bôi thuốc Sau tuần bơi thuốc Nồng độ creatinin (mg/dl) Lơ mơ hình Lơ trị Lô trị p (t- test Student) 1,05 ± 0,08 1,04 ± 0,07 1,05 ± 0,08 > 0,05 1,06 ± 0,08 1,05 ± 0,08 1,06 ± 0,08 > 0,05 1,05 ± 0,10 1,05 ± 0,05 1,06 ± 0,05 > 0,05 Kết bảng 17 cho thấy: Sau tuần tuần bôi thuốc thửnồng độ creatinintrong máu chuột lơ (lơ mơ hình lơ trị) khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (với p>0,05) 2.5 Thay đổi mô bệnh học: Sau tuần bôi thuốc 2.5.1 Đại thể: Trên tất chuột thực nghiệm (cả lô chứng lô trị), không quan sát thấy có thay đổi bệnh lý mặt đại thể quan tim, phổi, gan, lách, tuỵ, thận hệ thống tiêu hoá chuột 2.5.2 Vi thể: - Hình thái vi thể gan: + Lơ mơ hình: Bôi tá dược + Lô trị (bôi CH1701liều 0,1 ml /1 vết bỏng/lần, lần/ngày): + Lô trị (bôi CH1701liều 0,1 ml /1 vết bỏng/lần, lần/ngày): 23 23 Ảnh 15: Hình thái vi thể gan chuột lơ mơ hình (chuột số 17) (HE x 400) Tế bào gan bình thường (HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) Ảnh 16: Hình thái vi thể gan chuột lơ mơ hình (chuột số 19) (HE x 400) Tế bào gan bình thường 24 24 Ảnh 17: Hình thái vi thể gan chuột lơ trị (chuột số39) (HE x 400) Sau tuần bôi thuốc Tế bào gan bình thường Ảnh 18: Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 41) Sau tuần bôi thuốc (HE x 400) Tế bào gan bình thường 25 25 Ảnh 19: Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 51) Sau tuần bơi thuốc (HE x 400) Tế bào gan bình thường Ảnh 20: Hình thái vi thể gan chuột lơ trị (chuột số 55) Sau tuần bôi thuốc (HE x 400) Tế bào gan bình thường 26 26 - Hình thái vi thể thận: + Lơ mơ hình: Bôi tá dược + Lô trị (bôi CH1701 liều 0,1 ml /1 vết bỏng/lần, lần/ngày): + Lô trị (bôi CH1701 liều 0,1 ml /1 vết bỏng/lần, lần/ngày): Ảnh 21: Hình thái vi thể thận chuột lơ mơ hình (chuột số 17) (HE x 400) Thận bình thường Ảnh 22: Hình thái vi thể thận chuột lơ mơ hình (chuột số 19) (HE x 400) 27 27 Thận bình thường Ảnh 23: Hình thái vi thể thận chuột lô trị (chuột số 39) Sau tuần bơi thuốc (HE x 400) Thận bình thường Ảnh 24: Hình thái vi thể thận chuột lơ trị (chuột số 41) Sau tuần bôi thuốc (HE x 400) 28 28 Thận bình thường Ảnh25: Hình thái vi thể thận chuột lô trị (chuột số 51) Sau tuần bơi thuốc (HE x 400) Thận bình thường Ảnh 26: Hình thái vi thể thận chuột lơ trị (chuột số 55) 29 29 Sau tuần bôi thuốc (HE x 400) Thận bình thường NHẬN XÉT: Kết nghiên ảnh hưởng tồn thân (độc tính bán trường diễn) CH1701 cho thấy: Trên hai lô chuột, lô bôi CH1701 liều 0,3ml/vết bỏng/ngày lô bôi liều cao gấp lần 0,6ml/vết bỏng/ngày liên tục tuần, kết cho thấy: + Cả hai liều thuốc thử khơng làm ảnh hưởng xấu đến tình trạng chung, mức độ tăng trọng lượng chuột so với lơ mơ hình (lơ bơi tá dược) + Khơng làm thay đổi kết xét nghiệm đánh giá chức tạo máu (số lượng hồng cầu, hàm lượng huyết sắc tố, hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu) so với lơ mơ hình + Khơng làm thay đổi kết xét nghiệm đánh giá chức gan (nồng độ bilirubin toàn phần, albumin cholesterol toàn phần máu chuột) so với lơ mơ hình + Khơng gây hủy hoại tế bào gan (hoạt độ AST, ALT máu chuột) so với lơ mơ hình + Khơng làm thay đổi kết xét nghiệm creatinin máu chuột sau tuần uống thuốc thử liên tục so với lô mơ hình + Khơng gây tổn thương mặt hình thái quan sát đại thể quan chuột so với lơ mơ hình + Cấu trúc vi thể gan, thận chuột: khơng có tổn thương cấu trúc vi thể gan, thận chuột sau tuần bơi thuốc so với lơ mơ hình 30 30 KẾT LUẬN Mẫu CH1701 gửi đến Bộ môn Dược lý, trường Đại học Y Hà Nội yêu cầu đánh giá độc tính bán trường diễn tác dụng điều trị bỏng thực nghiệm, kết cho thấy:  Về tác dụng điều trị bỏng thực nghiệm: + CH1701 liều có xu hướng làm giảm số chuột chết so với lơ mơ hình (bơi tá dược) + CH1701cả liều làm nhanh trình liền vết thương bỏng thể qua hình thành sẹo sớm + CH1701cả liều làm giảm diện tích vết thương bỏng thời điểm 14 21 ngày so với tá dược + CH1701cả liều giảm viêm tăng sinh xơ xét nghiệm giải phẫu vi thể so với tá dược + CH1701liều thấp 0,1 ml/1 vết bỏng/1 lần x lần/ngày tác dụng so với TĐ1 liều cao 0,1 ml/1 vết bỏng/1 lần x lần/ngàyvà CH1701 liều cao có tác dụng tương đương sulfadiazin bạc 1% bơi 2lần/ngày  Về độc tính bán trường diễn CH1701 + CH1701 liều không làm thay đổi số trọng lượng chuột, chức tạo máu, chức gan, chức thận thay đổi đại thể vi thể gan, thận so với lơ mơ hình sau tuần bôi thuốc 31 31 Tài liệu tham khảo Durmus AS, Han MC, Yaman I (2009) Comperative evaluation of collagenase and silver sulfadiazine on burned wound healing in rats Firat Universitesi Saglik Bilimleri Veteriner Dergisi, 23, 135 - 139 Vũ Thị Ngọc Thanh (2003), Nghiên cứu độc tính tác dụng điều trị chỗ vết thương bỏng nhiệt kem chitosan 2% thực nghiệm, Luận án tiến sỹ y học, Đại học Y Hà Nội Walker HL, Mason AD Jr (1968) A standard animal burn J Trauma Nov; 8(6), 1049 - 1051 32 32 ... 30 KẾT LUẬN Mẫu CH1701 gửi đến Bộ môn Dược lý, trường Đại học Y Hà Nội yêu cầu đánh giá độc tính bán trường diễn tác dụng điều trị bỏng thực nghiệm, kết cho thấy:  Về tác dụng điều trị bỏng thực. .. thương Các xét nghiệm vi thể thực Trung tâm Nghiên cứu phát sớm Ung thư (do PGS.TS Lê Đình Roanh đọc kết vi thể) 4 1.2.2 Ảnh hưởng toàn thân (độc tính bán trường diễn) CH170 1trên chuột cống... lần/1 vết bỏng 15 giây, đảm bảo thuốc phủ kín vết bỏng Thời điểm bôi thuốc: Khoảng cách lần bôi (vào thời điểm: 8h, 11h, 14h 17h) Chỉ số nghiên cứu: Tác dụng điều trị bỏng CH1701 mơ hình bỏng: 