BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TỐNG THỊ THANH VƯỢNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH CÁC ĐỘC TỐ GÂY TIÊU CHẢY ACID OKADAIC, DINOPHYSISTOXIN-1, DINOPHYSISTOXIN-2 TRONG MỘT SỐ NHUYỄN THỂ HAI MẢNH VỎ Ở BIỂN VIỆT NAM BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TỐNG THỊ THANH VƯỢNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH CÁC ĐỘC TỐ GÂY TIÊU CHẢY ACID OKADAIC, DINOPHYSISTOXIN-1, DINOPHYSISTOXIN-2 TRONG MỘT SỐ NHUYỄN THỂ HAI MẢNH VỎ Ở BIỂN VIỆT NAM BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 9720210 Người hướng dẫn khoa học: TS Lê Đình Chi PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo HÀ NỘI, NĂM 2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tống Thị Thanh Vượng i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành Luận án này, nhận giúp đỡ tận tình hiệu nhiều cá nhân tập thể, thầy cô giáo, đồng nghiệp, bạn bè gia đình Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: TS Lê Đình Chi, giảng viên mơn Hố phân tích – Độc chất, Trường Đại học Dược Hà Nội PGS.TS Lê Thị Hồng Hảo, Viện trưởng Việm Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia, hai người thầy, tận tình hướng dẫn, định hướng, giúp đỡ, cho kiến thức q báu động viên tơi tâm hồn thành luận án GS.TS Thái Nguyễn Hùng Thu, nguyên Hiệu phó, trưởng chuyên ngành Kiểm nghiệm thuốc Độc chất, Trường Đại học Dược Hà Nội người thầy động viên, dẫn đóng góp ý kiến quý báu cho tơi hồn thành luận án Ban Giám hiệu Trường Đại học Dược Hà Nội Ban Lãnh đạo Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án thời gian quy định Các thầy, Bộ mơn Hố phân tích – Độc chất Phòng Sau đại học, Trường Đại học Dược Hà Nội giúp đỡ tơi q trình học tập trường Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Gia đình người thân chia sẻ, động viên tơi có đủ nghị lực, tâm hoàn thành luận án Tác giả luận án Tống Thị Thanh Vượng ii MỤC LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ………………………………………………………………… CHƯƠNG TỔNG QUAN………………………………………………… 1.1 ĐỘC TỐ SINH VẬT BIỂN…………………………………………………… 1.1.1 Nguồn gốc……………………………………………………………… 1.1.2 Tóm tắt q trình nghiên cứu số nhóm độc tố tảo đơn bào gây độc cho người…………………………………………………… 1.2 NGUỒN GỐC, CẤU TRÚC HỐ HỌC, ĐỘC TÍNH VÀ QUY ĐỊNH KIỂM SỐT ĐỘC TỐ DSP………………………………………………………………… 1.2.1 Nguồn gốc độc tố DSP………………………………………… 1.2.2 Cấu trúc hoá học độc tố DSP…………………………………………… 1.2.3 Cơ chế tác dụng, độc tính độc tố DSP…………………………………… 10 1.2.4 Ngộ độc cho người độc tố DSP……………………………………… 11 1.2.5 Quy định kiểm soát độc tố DSP………………………………………… 12 1.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐỘC TỐ DSP…………………………… 16 1.3.1 Các phương pháp xử lý mẫu để chiết độc tố nhóm acid okadaic………… 16 1.3.1.1 Lựa chọn dung mơi để chiết độc tố nhóm OA từ nhuyễn thể… 17 1.3.1.2 Các phương pháp làm dịch chiết ban đầu………………………… 18 1.3.1.3 Các phương pháp thuỷ phân mẫu làm sau thuỷ phân………… 20 1.3.2 Các phương pháp sinh học để phân tích độc tố nhóm acid okadaic……… 21 iii 1.3.2.1 Các phương pháp định lượng sinh học in vivo………………………… 21 1.3.2.2 Các phương pháp định lượng qua gây độc tế bào……………………… 22 1.3.2.3 Các phương pháp hoá sinh …………………………………………… 23 1.3.3 Các phương pháp hố lý để phân tích độc tố nhóm acid okadaic……… 24 1.3.3.1 Sắc ký lỏng hiệu cao…………………………………… 24 1.3.3.2 Điện di mao quản…………………………………………………… 26 1.3.3.3 Sắc ký khí…………………………………………………… 27 1.4 ỨNG DỤNG SẮC KÝ KHỐI PHỔ TRONG PHÂN TÍCH ĐỘC TỐ NHĨM ACID OKADAIC………………………………………………… 27 1.4.1 Các đặc trưng khối phổ độc tố nhóm OA…………………………… 27 1.4.1.1 Khối phổ OA kỹ thuật EI CI…………………………… 27 1.4.1.2 Khối phổ OA kỹ thuật FAB………………………………… 28 1.4.1.3 Khối phổ OA kỹ thuật ESI………………………… 29 1.4.1.4 Khối phổ dạng ester OA………………………………… 34 1.4.2 Phân tích định tính, định lượng độc tố nhóm OA LC – MS/MS…… 36 1.4.2.1 Kỹ thuật ion hố……………………………………………………… 36 1.4.2.2 Lựa chọn phân tích khối……………………………………………… 37 1.4.2.3 Điều kiện sắc ký……………………………………………………… 38 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………………………………………… 43 2.1 NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ………………………………… 43 2.1.1 Dung mơi, hố chất chất chuẩn……………………………………… 43 2.1.1.1 Chất chuẩn…………………………………………………………… 43 iv 2.1.1.2 Dung mơi, hố chất…………………………………………………… 43 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ phân tích……………………………………………… 43 2.1.2.1 Thiết bị phân tích……………………………………………………… 43 2.1.2.2 Dụng cụ phân tích…………………………………………… 44 2.2 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU………………………………………………… 45 2.2.1 Mẫu nhuyễn thể lấy địa phương………………………………… 45 2.2.2 Mẫu thêm chuẩn………………………………………………………… 45 2.2.3 Mẫu chuẩn nhuyễn thể có chứa độc tố………………………………… 45 2.3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………………………… 46 2.3.1 Xây dựng phương pháp định lượng đồng thời OA, DTX1, DTX2 nhuyễn thể…………………………………………………………………… 46 2.3.1.1 Khảo sát xây dựng điều kiện khối phổ………………………………… 46 2.3.1.2 Khảo sát xây dựng điều kiện sắc ký…………………………………… 47 2.3.1.3 Khảo sát điều kiện chiết độc tố từ mẫu nhuyễn thể…………………… 48 2.3.1.4 Khảo sát điều kiện thuỷ phân để phân tích độc tố tồn phần……… … 48 2.3.1.5 Thẩm định phương pháp……………………………………………… 49 2.3.2 Lấy mẫu nhuyễn thể bảo quản mẫu……………………… ………… 51 2.3.2.1 Lựa chọn số lượng cá thể cho mẫu nhuyễn thể…………………… 51 2.3.2.2 Khảo sát điều kiện bảo quản mẫu nhuyễn thể………………………… 51 2.3.3 Phân tích độc tố mẫu nhuyễn thể biện giải kết quả…………… 51 2.3.3.1 Tiến hành phân tích mẫu thực…………………………………… 51 2.3.3.2 Các tiêu chí đánh giá kết phân tích độc tố nhuyễn thể……… 52 2.3.3.3 Các hướng biện giải, bàn luận kết quả………………………………… 52 v CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU…………………………………… 53 3.1 XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH OA, DTX1 VÀ DTX2… 53 3.1.1 Khảo sát thiết lập điều kiện phân tích OA, DTX1 DTX2 MS… 53 3.1.1.1 Điều kiện detector MS/MS……………………………… 53 3.1.1.2 Điều kiện sắc ký……………………………………………………… 59 3.1.2 Khảo sát thiết lập điều kiện xử lý mẫu để chiết OA, DTX1 DTX2 từ nhuyễn thể…………………………………………………………………… 65 3.1.2.1 Đồng mẫu……………………………………………………… 65 3.1.2.2 Lựa chọn dung môi chiết độc tố……………………………………… 65 3.1.2.3 Lựa chọn thể tích dung môi chiết……………………………………… 67 3.1.2.4 Khảo sát điều kiện làm dịch chiết……………………………… 68 3.1.2.5 Điều kiện xử lý mẫu để phân tích độc tố dạng tự do………………… 73 3.1.2.6 Khảo sát thiết lập điều kiện thuỷ phân để phân tích OA, DTX1 DTX2 tồn phần nhuyễn thể…………………………………………… 74 3.1.3 Khảo sát thiết lập điều kiện bảo quản nhuyễn thể……………… 79 3.1.3.1 Đánh giá độ ổn định độc tố nhuyễn thể số điều kiện nhiệt độ……………………………………………………………………… 79 3.1.3.2 Điều kiện bảo quản mẫu nhuyễn thể………………………………… 82 3.2 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH OA, DTX1 VÀ DTX2………… 82 3.2.1 Điều kiện phương pháp thẩm định……………………… 82 3.2.1.1 Phương pháp phân tích độc tố tự cột Cortecs………………… 82 3.2.1.2 Phương pháp phân tích độc tố tự toàn phần cột Zorbax…… 84 3.2.2 Thẩm định phương pháp phân tích độc tố cột Cortecs……………… 85 vi 3.2.2.1 Độ đặc hiệu…………………………………………………………… 85 3.2.2.2 Độ thích hợp hệ thống……………….……………………………… 87 3.2.2.3 Độ tuyến tính khoảng nồng độ làm việc………….……… 88 3.2.2.4 Độ xác.………………………………………………………… 88 3.2.2.5 Độ đúng……………………………………………………………… 91 3.2.2.6 Độ nhậy……………………………… 92 3.2.3 Thẩm định phân tích độc tố tự tồn phần cột Zorbax………… 94 3.2.3.1 Độ đặc hiệu……………………… 94 3.2.3.2 Độ thích hợp hệ thống………………………………………………… 96 3.2.3.3 Độ tuyến tính khoảng nồng độ làm việc………………………… 97 3.2.3.4 Độ xác phân tích độc tố tự do……………………………… 98 3.2.3.5 Độ xác xác định độc tố tồn phần…………………………… 101 3.2.3.6 Độ phân tích độc tố tự do…………………………………… 103 3.2.3.7 Độ phân tích độc tố tồn phần……………………………… 104 3.2.3.8 Độ nhậy……………………………………………………………… 104 3.3 PHÂN TÍCH OA, DTX1 VÀ DTX2 TRONG MẪU NHUYỄN THỂ………… 107 3.3.1 Lấy mẫu nhuyễn thể phân tích độc tố………………………………… 107 3.3.2 Kết phân tích độc tố mẫu nhuyễn thể………………………… 109 3.3.2.1 Kết phát độc tố tự do………………………………………… 109 3.3.2.2 Kết phát độc tố sau thuỷ phân…………………………… 111 3.3.3 Sự phân bố mẫu phát có độc tố………………………………… 113 3.3.3.1 Phân bố mẫu có độc tố theo loại nhuyễn thể……………………… 113 3.3.3.2 Phân bố mẫu có độc tố theo địa điểm lấy mẫu…………… 116 vii 3.3.3.3 Phân bố mẫu có độc tố theo thời điểm lấy mẫu…………………… 119 CHƯƠNG BÀN LUẬN…………………………………………………… 122 4.1 BÀN LUẬN PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐƯỢC XÂY DỰNG…………… 122 4.1.1 Điều kiện phân tích độc tố LC – MS/MS………………… 122 4.1.2 Điều kiện xử lý mẫu nhuyễn thể………………………………………… 126 4.1.2.1 Cỡ mẫu nhuyễn thể…………………………………………………… 126 4.1.2.2 Điều kiện xử lý mẫu để phân tích độc tố tự do………………… …… 126 4.1.2.3 Điều kiện xử lý mẫu để phân tích độc tố toàn phần…………………… 127 4.2 BÀN LUẬN KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ĐỘC TỐ TRONG NHUYỄN THỂ…… 129 4.2.1 Loại độc tố phát được, tỷ lệ xuất mức độ hàm lượng nhuyễn thể…………………………………………………………………… 129 4.2.2 Dao động xuất độc tố nhuyễn thể yếu tố ảnh hưởng………………………………………………………………………… 131 4.3 NGUY CƠ ẢNH HƯỞNG TỚI SỨC KHOẺ VÀ HƯỚNG KIỂM SOÁT ĐỘC TỐ NHÓM OA TRONG NHUYỄN THỂ TRONG TƯƠNG LAI………………… 140 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ……………………………………… 142 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC viii PHỤ LỤC KẾT QUẢ PHÂN TÍCH TRÊN MẪU THỰC 2.1 Tổng hợp kết phân tích độc tố mẫu nhuyễn thể thực Ghi chú: “-” không phát thấy, “+” phát thấy mức thấp LOQ STT Thời gian lấy mẫu Địa điểm lấy mẫu Nhóm nhuyễn thể Mã số mẫu Độc tố phát thấy Hàm lượng độc tố tự (ng/g) (TB ± SD, n =3) Hàm lượng độc tố toàn phần (ng/g) (TB ± SD, n =3) Tỷ lệ đáp ứng ion thứ cấp 563/255 (%) (TB ± SD, n = 3) 4/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0416-1 - - - - 4/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0416-2 OA - + 7,9 ± 0,6 4/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0416-3 - - - - 4/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0416-1 OA + + 8,0 ± 0,6 4/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0416-2 - - - - 4/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0416-3 - - - - 4/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0416-4 - - - - 4/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0416-5 - - - - 4/2016 Đà Nẳng Ngao NG-ĐN-0416-1 - - - - 10 4/2016 Đà Nẳng Ngao NG-ĐN-0416-2 - - - - 11 4/2016 Đà Nẳng Ngao NG-ĐN-0416-3 - - - - 12 4/2016 Đà Nẳng Vẹm VE-ĐN-0416-1 - - - - 13 4/2016 Đà Nẳng Vẹm VE-ĐN-0416-2 - - - - 14 4/2016 Đà Nẳng Vẹm VE-ĐN-0416-3 - - - - 15 4/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0416-1 - - - - 16 4/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0416-2 - - - - 17 4/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0416-3 - - - - 18 4/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0416-4 - - - - 19 4/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0416-5 - - - - 20 4/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0416-1 - - - - 21 4/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0416-2 OA + + 8,3 ± 0,4 22 4/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0416-3 - - - - 23 4/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Hàu HA-VT-0416-1 - - - - 24 4/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Hàu HA-VT-0416-2 - - - - 25 4/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Hàu HA-VT-0416-3 - - - - 26 4/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Vẹm VE-VT-0416-1 - - - - 27 4/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Vẹm VE-VT-0416-2 - - - - 28 4/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Vẹm VE-VT-0416-3 - - - - 29 5/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0516-1 - - - - 30 5/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0516-2 - - - - 31 5/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0516-3 - - - - 32 5/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0516-1 - - - - 33 5/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0516-2 - - - - 34 5/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0516-3 - - - - 35 6/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0616-1 - - - - 36 6/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0616-2 OA + + 8,1 ± 0,7 37 6/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0616-3 - - - - 38 6/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0616-4 - - - - 39 6/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0616-5 - - - - 40 6/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0616-1 - - - - 41 6/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0616-2 - - - - 42 6/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0616-3 - - - - Thanh Hóa Hàu HA-TH-0716-1 - - - - 43 7/2016 44 7/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0716-2 - - - - 45 7/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0716-3 - - - - 46 7/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0716-1 - - - - 47 7/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0716-2 - - - - 48 7/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0716-3 - - - - 49 8/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0816-1 - - - - 50 8/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0816-2 - - - - 51 8/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0816-3 - - - - 52 8/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0816-1 - - - - 53 8/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0816-2 - - - - 54 8/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0816-3 - - - - 55 9/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-0916-1 - - - - 56 9/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-0916-2 - - - - 57 9/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-0916-3 - - - - 58 9/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0916-1 - - - - 59 9/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0916-2 - - - - 60 9/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0916-3 OA 3,1 ± 0,2 4,9 ± 0,3 8,3 ± 0,6 61 9/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0916-1 OA 4,7 ± 0,2 9,7 ± 0,3 8,5 ± 0,3 62 9/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0916-2 - - - - 63 9/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0916-3 - - - - 64 9/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0916-1 - - - - 65 9/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0916-2 - - - - 66 9/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0916-3 - - - - 67 9/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0916-4 - - - - 68 9/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0916-5 - - - - 69 9/2016 Đà Nẳng Ngao NG-ĐN-0916-1 - - - - 70 9/2016 Đà Nẳng Ngao NG-ĐN-0916-2 - - - - 71 9/2016 Đà Nẳng Ngao NG-ĐN-0916-3 - - - - 72 9/2016 Đà Nẳng Vẹm VE-ĐN-0916-1 - - - - 73 9/2016 Đà Nẳng Vẹm VE-ĐN-0916-2 - - - - 74 9/2016 Đà Nẳng Vẹm VE-ĐN-0916-3 - - - - 75 9/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0916-1 - - - - 76 9/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0916-2 - - - - 77 9/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-0916-3 - - - - 78 9/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0916-1 - - - - 79 9/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0916-2 OA - + 8,2 ± 0,4 80 9/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-0916-3 - - - - 81 9/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Hàu HA-VT-0916-1 - - - - 82 9/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Hàu HA-VT-0916-2 - - - - 83 9/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Hàu HA-VT-0916-3 OA + + 8,4 ± 0,4 84 9/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Vẹm VE-VT-0916-1 - - - - 85 9/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Vẹm VE-VT-0916-2 - - - - 86 9/2016 Bà Rịa-Vũng Tàu Vẹm VE-VT-0916-3 - - - - 87 10/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1016-1 - - - - 88 10/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1016-2 - - - - 89 10/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1016-3 - - - - 90 10/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1016-1 - - - - 91 10/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1016-2 - - - - 92 10/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1016-3 - - - - 93 10/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1016-1 - - - - 94 10/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1016-2 OA 3,1 ± 0,2 5,1 ± 0,3 8,5 ± 0,5 95 10/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1016-3 - - - - 96 10/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1016-1 - - - - 97 10/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1016-2 - - - - 98 10/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1016-3 - - - - 99 11/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1116-1 - - - - 100 11/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1116-2 - - - - 101 11/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1116-3 - - - - 102 11/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1116-1 - - - - 103 11/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1116-2 OA + + 8,3 ± 0,6 104 11/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1116-3 - - - - 105 11/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1116-1 OA 9,5 ± 0,1 10,7 ± 0,4 8,6 ± 0,4 106 11/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1116-2 OA 5,1 ± 0,1 8,2 ± 0,3 8,3 ± 0,3 107 11/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1116-3 - - - - 108 11/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1116-4 - - - - 109 11/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1116-5 - - - - 110 11/2016 Bình Định Ngao NG-BĐ-1116-1 - - - - 111 11/2016 Bình Định Ngao NG-BĐ-1116-2 - - - - 112 11/2016 Bình Định Ngao NG-BĐ-1116-3 - - - - 113 11/2016 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-1116-1 OA + + 8,5 ± 0,5 114 11/2016 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-1116-2 - - - - 115 11/2016 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-1116-3 - - - - 116 11/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1116-1 - - - - 117 11/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1116-2 - - - - 118 11/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1116-3 - - - - 119 12/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1216-1 - - - - 120 12/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1216-2 - - - - 121 12/2016 Nam Định Ngao NG-NĐ-1216-3 - - - - Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1216-1 OA 3,9 ± 0,1 11,3 ± 0,7 8,8 ± 0,3 122 12/2016 123 12/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1216-2 - - - - 124 12/2016 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-1216-3 - - - - 125 12/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1216-1 - - - - 126 12/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1216-2 - - - - 127 12/2016 Thanh Hóa Hàu HA-TH-1216-3 - - - - 128 12/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-1216-1 - - - - 129 12/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-1216-2 - - - - 130 12/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-1216-3 - - - - 131 12/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-1216-4 OA + + 8,2 ± 0,3 132 12/2016 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-1216-5 - - - - 133 12/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-1216-1 OA - 2,9 ± 0,3 8,6 ± 0,3 134 12/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-1216-2 - - - - 135 12/2016 Bình Định Vẹm VE-BĐ-1216-3 - - - - 136 12/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1216-1 OA - + 8,7 ± 0,6 137 12/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1216-2 - - - - 138 12/2016 Phú Yên Vẹm VE-PY-1216-3 - - - - 139 1/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0117-1 - - - - 140 1/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0117-2 - - - - 141 1/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0117-3 - - - - 142 1/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0117-1 OA + + 8,6 ± 0,7 143 1/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0117-2 - - - - 144 1/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0117-3 - - - - 145 1/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0117-1 - - - - 146 1/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0117-2 - - - - 147 1/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0117-3 - - - - 148 1/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0117-1 - - - - 149 1/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0117-2 - - - - 150 1/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0117-3 - - - - 151 2/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0217-1 - - - - 152 2/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0217-2 - - - - 153 2/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0217-3 - - - - 154 2/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0217-1 - - - - 155 2/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0217-2 - - - - 156 2/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0217-3 - - - - 157 2/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0217-1 OA 4,3 ± 0,1 10,4 ± 0,3 8,8 ± 0,5 158 2/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0217-2 - - - - 159 2/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0217-3 DTX2 4,4 ± 0,1 5,2 ± 0,3 8,5 ± 0,5 160 2/2017 Bình Định Ngao NG-BĐ-0217-1 - - - - 161 2/2017 Bình Định Ngao NG-BĐ-0217-2 - - - - 162 2/2017 Bình Định Ngao NG-BĐ-0217-3 - - - - 163 2/2017 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-0217-1 - - - - 164 2/2017 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-0217-2 - - - - 165 2/2017 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-0217-3 - - - - 166 2/2017 Bình Định Sò huyết SH-BĐ-0217-4 - - - - 167 2/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0217-1 - - - - 168 2/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0217-2 - - - - 169 2/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0217-3 - - - - 170 3/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0317-1 - - - - 171 3/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0317-2 - - - - 172 3/2017 Nam Định Ngao NG-NĐ-0317-3 - - - - 173 3/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0317-1 - - - - 174 3/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0317-2 - - - - 175 3/2017 Nam Định Sò huyết SH-NĐ-0317-3 OA + + 8,5 ± 0,8 176 3/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0317-1 DTX2 6,4 ± 0,3 10,3 ± 0,6 8,4 ± 0,4 177 3/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0317-2 - - - - 178 3/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0317-3 OA + + 8,7 ± 0,9 179 3/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0317-4 - - - - 180 3/2017 Thanh Hóa Hàu HA-TH-0317-5 - - - - 181 3/2017 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0317-1 - - - - 182 3/2017 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0317-2 - - - - 183 3/2017 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0317-3 - - - - 184 3/2017 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0317-4 - - - - 185 3/2017 Thanh Hóa Sò lơng SL-TH-0317-5 - - - - 186 3/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0317-1 - - - - 187 3/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0317-2 - - - - 188 3/2017 Phú Yên Vẹm VE-PY-0317-3 - - - - 2.2 Một số sắc ký đồ phân tích mẫu nhuyễn thể thực 2.2.1 Mẫu hàu có chứa OA (STT105 bảng 2.1) Sắc ký đồ ion m/z 255 chuẩn hỗn hợp Sắc ký đồ ion m/z 255 mẫu hàu Sắc ký đồ ion m/z 563 mẫu hàu 2.2.2 Mẫu hàu có chứa DTX2 (STT176 bảng 2.1 Sắc ký đồ với ion m/z 255 mẫu hàu Sắc ký đồ với ion m/z 563 mẫu hàu 2.2.3 Mẫu vẹm có chứa OA (STT21 bảng 2.1) Sắc ký đồ ion m/z 255 chuẩn hỗn hợp Sắc ký đồ ion m/z 255 mẫu vẹm Sắc ký đồ ion m/z 563 mẫu vẹm 2.2.4 Mẫu sò huyết có chứa OA (STT 122 bảng 2.1) Sắc ký đồ ion m/z 255 chuẩn hỗn hợp Sắc ký đồ ion m/z 255 mẫu sò huyết Sắc ký đồ ion m/z 563 mẫu sò huyết ... NỘI TỐNG THỊ THANH VƯỢNG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH CÁC ĐỘC TỐ GÂY TIÊU CHẢY ACID OKADAIC, DINOPHYSISTOXIN- 1, DINOPHYSISTOXIN- 2 TRONG MỘT SỐ NHUYỄN THỂ HAI MẢNH VỎ Ở BIỂN VIỆT NAM BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI... CÁC ĐỘC TỐ GÂY TIÊU CHẢY ACID OKADAIC, DINOPHYSISTOXIN- 1, DINOPHYSISTOXIN- 2 TRONG MỘT SỐ NHUYỄN THỂ HAI MẢNH VỎ Ở BIỂN VIỆT NAM BẰNG SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ” thực nghiên cứu với mục tiêu sau: Mục tiêu. .. pháp định lượng độc tố gây tiêu chảy acid okadaic, dinophysistoxin- 1, dinophysistoxin- 2 phương pháp sắc ký lỏng khối phổ Mục tiêu 2: Xác định hàm lượng độc tố kể số nhóm nhuyễn thể hai mảnh vỏ