ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN HẢI YẾN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT HỌC, MÃ VẠCH DNA CỦA CÂY ĐẬU NHO NHE (Vigna umbellata) THU TẠI TỈNH YÊN BÁI VÀ LAI CHÂU LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THÁI NGUYÊN - 2018 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN HẢI YẾN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT HỌC, MÃ VẠCH DNA CỦA CÂY ĐẬU NHO NHE (Vigna umbellata) THU TẠI TỈNH YÊN BÁI VÀ LAI CHÂU Ngành: Di truyền học Mã ngành: 8.42.01.21 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Hữu Quân THÁI NGUYÊN - 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu tơi Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố Thái Nguyên, tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Hải Yến i LỜI CẢM ƠN Lời em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới TS Nguyễn Hữu Quân, giảng viên Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên tận tình hướng dẫn, bảo tạo điều kiện giúp đỡ em q trình nghiên cứu hồn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn giúp đỡ Trần Thị Hồng, kỹ thuật viên Phòng thí nghiệm Cơng nghệ tế bào thực vật, Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Ngun q trình làm thí nghiệm Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Bộ môn Sinh học đại Giáo dục sinh học, Bộ phận Sau đại học thuộc Phòng Đào tạo, Trường Đại học Sư phạm Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho em trình học tập hoàn thành luận văn Em xin cảm ơn hơ trợ kinh phí từ đề tài nhiệm vụ bảo tồn lưu giữ quỹ gen cấp Bộ năm 2017 “Nghiên cứu bảo tồn nguồn gen nhóm đậu địa phương thu thập từ tỉnh thuộc miền Bắc Việt Nam” Mã số B2017-TNA-10-QG Em xin bày tỏ lời biết ơn đến gia đình, bạn bè động viên, khuyến khích giúp đỡ em tiến trình học tập hoàn thành luận văn Thái Nguyên, tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Hải Yến ii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH vi MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược đậu Nho nhe 1.1.1 Hệ thống phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái đậu Nho nhe 1.1.3 Thành phần dinh dưỡng đậu Nho nhe 1.1.4 Giá trị sử dụng đậu Nho nhe 1.2 Nghiên cứu sử dụng mã vạch DNA phân loại thực vật 1.3 Tình hình nghiên cứu nhóm họ đậu 10 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Vật liệu, hóa chất thiết bị 14 2.1.1 Vật liệu 14 2.1.2 Hóa chất 14 2.1.3 Thiết bị 14 2.1.4 Địa điểm nghiên cứu 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm hình thái 15 iii 2.2.2 Phương pháp giải phẫu thực vật 16 2.2.3 Xác định hoạt tính α-amylase 16 2.2.4 Xác định hoạt tính protease 17 2.2.5 Ðịnh lượng protein tan 19 2.2.6 Xác định sinh trưởng thân mầm rễ mầm 19 2.2.7 Xác định hàm lượng isoflavone từ mầm đậu Nho nhe 19 2.2.8 Phương pháp sinh học phân tử 21 2.2.9 Phương pháp xử lý phân tích kết 22 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 23 3.1 Đặc điểm hình thái, giải phẫu mẫu đậu Nho Nhe 23 3.2 Đặc điểm hóa sinh mẫu đậu Nho nhe 27 3.2.1 Hàm lượng protein tan tổng số 27 3.2.2 Hoạt tính α-amylase từ mầm đậu Nho nhe 27 3.2.3 Hoạt tính protease từ mầm đậu Nho nhe 27 3.2.4 Hàm lượng isoflavone từ mầm hạt đậu Nho nhe 28 3.3 Đặc điểm vùng gen ITS phân lập từ mẫu đậu Nho Nhe 30 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 36 KẾT LUẬN 36 KIẾN NGHỊ 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO 37 TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT 37 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 37 iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tên tiếng Anh Nghĩa tiếng Việt Amplified Fragments Length AFLP bp Đa hình độ dài đoạn khếch đại Polymorphism Base pair Cặp bazơ nitơ cDNA Complementary DNA DNA Deoxyribonucleic acid EDTA ITS DNA sợi đôi tổng hợp từ mRNA nhờ enzyme phiên mã ngược Deoxyribonucleic Axit (DNA) Ethylene diamine tetraa acid cetic Etylen diamin tetraxetic Axit Internal transcribed space Vùng gen ITS matK matK maturase Gen matK mRNA Messenger RNA Nicotinamide NADP PCR RAPD RFLP ARN thông tin adenine Coenzym sử dụng phản dinucleotide phosphate ứng đồng hóa Polymerase chain reaction Phản ứng chi polymerase Random Amplification Đa hình DNA nhân ngẫu nhiên of Polymorphic DNA Restriction Fragment Length Polymorphism Đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn RNA Ribonucleic acid Ribonucleic Axit rRNA RNA ribosome riboxom RNA Simple Sequence Repeats Đa hình đoạn lặp lại đơn giản SSR DANH MỤC CÁC BẢNG Trang 3.2 Đặc điểm hóa sinh mẫu đậu Nho nhe 3.2.1 Hàm lượng protein tan tổng số Nghiên cứu hàm lượng protein tan tổng số nhằm xác định giá trị dinh dưỡng đậu Nho nhe kiểm tra khác biệt đặc điểm hóa sinh liên quan tới điều kiện thổ nhưỡng Kết cho thấy, hàm lượng protein tan tổng số mẫu đậu Nho nhe NN01-YB thu tỉnh Yên Bái đạt 30,3 mg/100g hạt; mẫu đậu Nho nhe NN10-LC thu tỉnh Lai Châu đạt 29,1 mg/100g hạt Như vậy, hàm lượng protein tan hạt đậu Nho nhe NN10-LC thấp so với NN01-YB Nghiên cứu Nguyễn Vũ Thanh Thanh Nguyễn Văn Tuân (2007) hàm lượng protein tan tổng số 11 giống đậu xanh thu tỉnh Hòa Bình, Lai Châu, Thái Ngun, Cao Bằng dao động từ 20,99-26,75% Như vậy, hàm lượng protein đậu Nho nhe nghiên cứu khác so với kết cơng bố 3.2.2 Hoạt tính α-amylase từ mầm đậu Nho nhe α-amylase enzyme tham gia thuỷ phân tinh bột tạo thành đường Đường tạo thành có vai trò làm tăng áp suất thẩm thấu tế bào, từ làm tăng tính chống chịu thực vật với yếu tố cực đoan từ mơi trường, giúp non phát triển bình thường Hoạt tính α-amylase từ mầm hạt đậu Nho nhe NN01-YB giai đoạn 2-3 ngày tuổi đạt 1,0; 1,2 U/mg Hoạt tính α-amylase từ mầm hạt đậu Nho nhe NN10-LC giai đoạn 2-3 ngày tuổi đạt 1,0; 1,14 U/mg Như vậy, mầm hạt đậu Nho nhe nghiên cứu có khả sinh α-amylase So sánh hoạt tính α-amylase từ mầm đậu Nho nhe nghiên cứu với nghiên cứu Nguyễn Vũ Thanh Thanh Nguyễn Văn Tuân (2007) đậu xanh thu tỉnh Hòa Bình, Lai Châu, Thái Ngun, Cao Bằng sau ngày Kết nhận thấy, hoạt tính α-amylase từ mầm đậu Nho nhe nghiên cứu cao so với đậu xanh thu tỉnh Hòa Bình, Lai Châu, Thái Nguyên, Cao Bằng hoạt tính enzyme dao động từ 0,573-0,941 U/mg protein 3.2.3 Hoạt tính protease từ mầm đậu Nho nhe Protease enzyme đóng vai trò quan trọng q trình nảy mầm hạt, phát triển non có liên quan đến khả chịu nước tế bào Nghiên cứu hoạt tính protease từ mầm đậu Nho nhe nhằm đánh giá mối liên quan với hàm lượng protein có hạt Kết khảo sát nhận thấy, hoạt tính protease thời gian hạt nảy mầm 2-3 ngày tuổi đạt 2,0 2,2 U/mg ứng với đậu Nho nhe trồng Yên Bái NN01-YB Hoạt tính protease hạt nảy mầm 2-3 ngày tuổi đạt 1,4 2,0 U/mg đậu Nho nhe trồng Lai Châu NN10-LC Kết nghiên cứu thể mối tương quan với hàm lượng protein tổng số có hạt liên quan tới tốc độ nảy mầm hạt 3.2.4 Hàm lượng isoflavone từ mầm hạt đậu Nho nhe Isoflavone polyphenol không màu thuộc lớp flavonoid Isoflavone đậu tương gồm daidzein, genistein glycitein tổng hợp thông qua đường phenypropanoid với tham gia nhiều enzyme, có hai loại enzyme quan trọng tham gia tổng hợp isoflavone biết đến chalcone isomerase isoflavone synthase Các chất khác nguyên tử hydro nhóm hydroxyl Genistein khác daidzein nhóm hydroxyl liên kết với carbon số Daidzein genistein chất isoflavone phổ biến nhất, có cấu trúc hóa học đặc trưng Bảng 3.2 Hàm lượng isoflavone hạt nảy mầm ngày tuổi mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC (µg/100g hạt) (mg/100g hạt) Daidzein 3,190,22 4,210,05 Genistein 0 Isoflavone (daidzein + genistein) 3,19 41,28 Isoflavone Sử dụng kỹ thuật phân tích HPLC định lượng daidzein genistein chiết từ hạt đậu Nho nhe nảy mầm ngày tuổi từ sắc ký đồ hình 3.5 phương trình đường chuẩn kết phân tích HPLC thể bảng 2.3 Kết bảng 3.2 cho thấy, mẫu đậu Nho nhe NN10-LC, hạt nảy mầm ngày tuổi có hàm lượng daidzein đạt 4,21 mg/100g hàm lượng genistein khơng có Trong khi, mẫu đậu Nho nhe NN01-YB hàm lượng daidzein nhỏ, hàm lượng đạt 3,19 µg/100g hạt hàm lượng genistein khơng có Hàm lượng daidzein genistein mẫu đậu Nho nhe có khác biệt mức ý nghĩa  = 0,001 Như vậy, qua phân tích cho thấy isoflavone mầm hạt đậu Nho nhe Lai Châu Hà Giang có nhóm chất daidzein 0.15 AU 0.10 0.05 0.00 5.00 10.00 Minutes 15.00 20.00 15.00 20.00 A 0.40 AU 0.30 0.20 0.10 0.00 0.00 5.00 10.00 Minutes B Hình 3.5 Sắc ký đồ phân tích daidzein genistein từ mầm hạt đậu Nho nhe sau ngày tuổi A: Nho nhe NN01-YB; B: Nho nhe NN10-LC Kết phân tích tiêu hóa sinh mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC cho thấy hàm lượng protein, hoạt tính α-amylase, protease hàm lượng isoflavone mẫu có khác thể bảng 3.3 Bảng 3.3 Đặc điểm hóa sinh 02 mẫu đậu Nho nhe 3.3 Đặc điểm vùng gen ITS phân lập từ mẫu đậu Nho Nhe Mẫu đậu Nho nhe thu tỉnh Yên Bái tỉnh Lai Châu nhận diện dựa vùng gen ITS Tiến hành tách DNA tổng số từ mầm đậu Nho nhe kiểm tra chất lượng phương pháp điện di gel agarose đo quang phổ, kết DNA thu đảm bảo chất lượng cho phản ứng nhân gen Hình 3.6 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR từ khuôn DNA tổng số 1: Vùng gen ITS từ đậu Nho nhe NN01-YB, 2: Vùng gen ITS từ đậu Nho nhe NN10-LC, M: DNA marker Vùng gen ITS từ đậu Nho nhe phân lập phản ứng PCR từ DNA hệ gen sử dụng cặp mồi đặc hiệu bảng 2.3 Sau điện di kiểm tra, sản phẩm PCR thu có kích thước khoảng 460 bp (Hình 3.6) ứng với vùng gen ITS từ đậu Nho nhe thu tỉnh Yên Bái Lai Châu A B Hình 3.7 Trình tự vùng gen ITS đậu Nho nhe NN01-YB (A) NN10-LC (B) Trình tự vùng gen ITS đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC xác định trình tự nucleotide máy giải trình tự tự động ABI PRISM 3100 Avant Gentic Analyzer có kích thước 458 nucleotide (Hình 3.7) A B Hình 3.8 Kết phân tích tương đồng trình tự vùng gen ITS mẫu đậu Nho nhe NN10-LC (A) NN01-YB (B) với số trình tự vùng ITS GenBank BLAST NCBI Bằng phần mềm BLAST NCBI cho thấy, vùng gen ITS phân lập từ mẫu đậu Nho nhe NN10-LC NN01-YB Việt Nam có tỷ lệ tương đồng 100% 99% so với trình tự vùng gen ITS lồi Vigna umbellata GenBank có mã số KX087818 (Hình 3.8) A B Hình 3.9 Trình tự nucleotit vùng gen ITS từ mẫu đậu Nho nhe NN10-LC (A) NN01-YB (B) với trình tự vùng gen ITS mang mã số KX087818 GenBank Như vậy, kết so sánh BLAST NCBI khẳng định trình tự đoạn DNA phân lập từ hai mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC trình tự nucleotit vùng gen ITS từ loài đậu Nho nhe Vigna umbellata Việt Nam Kết so sánh trình tự nucleotit vùng gen ITS hai mẫu đậu Nho nhe với trình tự vùng gen ITS mang mã số KX087818 trình bày Hình 3.9 So sánh trình tự vùng gen ITS mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC, nhận thấy trình tự vùng gen ITS mẫu có độ tương đồng 99,6%; có khác trình tự nucleotide 02 vị trí số 30 (T thay A) số 37 (G thay C) Tiến hành phân tích mối quan hệ lồi đậu thuộc chi Vigna dựa trình tự nucleotit vùng gen ITS công bố GenBank phần mềm MegAlign, kết xác định hệ số tương đồng, hệ số phân ly sơ đồ hình mối quan hệ đậu Nho nhe Việt Nam với loài thuộc chi Vigna giới Các trình tự vùng gen ITS sử dụng phân tích thống kê gồm lồi V umbellata (KX087818.1), V angularis (JF421525.1), V Glabrescens (KX087721.1), V hirtella (KX087729.1) V reflexopilosa (KX087791.1) Kết cho thấy hệ số tương đồng cặp so sánh dao động từ 96,6-99,6%; hệ số phân ly dao động từ 0,2-3,3% Hai trình tự vùng gen ITS mẫu NN01-YB NN10-LC có hệ số tương đồng 99,6%; tương đồng 98,6-99,1% với loài đậu Nho nhe V umbellata (Bảng 3.4) Bảng 3.4 Hệ số tương đồng hệ số phân ly dựa trình tự vùng gen ITS từ mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC với trình tự vùng gen ITS GenBank Mối quan hệ di truyền mẫu đậu Nho nhe dựa trình tự vùng gen ITS loài GenBank thể hình 3.10 Như vậy, mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC nghiên cứu có tên khoa học Vigna umbellata Hình 3.10 Sơ đồ phân loại dựa trình tự nucleotit vùng gen ITS từ mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC với trình tự vùng gen ITS GenBank KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Nghiên cứu xác định đặc điểm hình thái rễ, thân, lá, hoa, quả, hạt đặc điểm giải phẫu rễ, thân, mẫu đậu Nho nhe NN01-YB thu tỉnh Yên Bái NN10-LC thu tỉnh Lai Châu giống Hàm lượng protein tan tổng số mẫu đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC đạt 30,3 mg/100g hạt 29,1 mg/100g hạt Hoạt tính α-amylase có mầm hạt đậu Nho nhe mẫu NN01-YB NN10-LC đạt 1,0-1,2 1,01,14 U/mg Hoạt tính protease mầm hạt đậu Nho nhe mẫu NN01-YB NN10-LC đạt 2,0-2,4 1,4-2,0 U/mg Isoflavone mầm mẫu đậu hạt đậu Nho nhe NN01-YB NN10-LC ngày tuổi chứa daidzein (NN01-YB đạt 3,19 µg/100g hạt, NN10-LC đạt 4,21 mg/100g) khơng có genistein Vùng gen ITS phân lập giải trình tự có độ dài 458 nucleotit khẳng định mẫu đậu nho nhe thu Yên Bái Lai Châu thuộc loài Vigna umbellata KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu sâu đặc điểm sinh học giống đậu Nho nhe Yên Bái Lào Cai để cung cấp đầy đủ thông tin giống TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Tiến Bân (2013), Danh sách loài thực vật Việt Nam, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây Cỏ Việt Nam, Nxb trẻ, Tp Hồ Chí Minh, 1, tr.597 Nguyễn Thị Lang (2007), “Nghiên cứu đa dạng di truyền số giống đậu nành thị phân tử RAPD SSR”, Tạp chí cơng nghệ sinh học, 5(2), tr 233-245 Phạm Thị Ngọc, Nguyễn Quốc Trung, Vũ Văn Liết (2016), “Phân tích đa dạng di truyền mẫu giống đậu Cơ ve thị hình thái thị phân tử SSR”, Tạp chí KH Nơng nghiệp Việt Nam, 14 (12), tr 1874-1885 Hồng Thị Sản, Nguyễn Phương Nga (2008), “Hình thái - giải phẫu học thực vật”, Nxb Đại học Sư phạm Hà Nội, Tr 14 Vũ Thanh Trà (2012), “Đánh giá đa dạng di truyền 50 giống đậu tương Việt Nam có phản ứng khác bệnh gỉ sắt thị SSR”, Tạp chí Sinh học, 34(2), tr 235-240 Lê Quang Vĩnh (2009), “Theo dõi phát triển số loại phân xanh họ đậu trồng xen với trồng lâm nghiệp vùng gò đồi trại Hương Vân, huyện Hương Trà, tỉnh Thừa Thiên Huế”, Tạp chí khoa học, Đại học Huế, 55, tr.123-129 TÀI LIỆU TIẾNG ANH Anson M L (1938), The estimation of pepsin, trypsin, papain and cathepsin with hemoglobin, J Gen Physiol., 22, pp 79-89 Ba FS, Remy SP, Paul G 2004 Genetic diversity in cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] as revealed by RAPD markers Genetic Resources and Crop Evolution 51: 539-550 10 Chen H, Chen X, Tian J, Yang Y, Liu Z, Hao X, et al (2016) Development of Gene-Based SSR Markers in Rice Bean (Vigna umbellata L.) Based on Transcriptome Data PLoS ONE 11(3): e0151040 doi:10.1371/journal.pone.0151040 11 Chen SL, Yao H, Han JP, Liu C, Song JY, Shi LC, Zhu YJ, Ma XY, Gao T, Pang XH, et al 2010 Validation of the ITS2 Region as a Novel DNA Barcode for Identifying Medicinal Plant Species PLoS One (1) doi:Artn E8613 12 Gopalan C, Ramasastri BV and Balasubramanian SC 1991 Nutritive value of Indian foods Revised and Updated by National Institute of Nutrition, ICMR, Hyderbad p 47 13 Group CPW, Hollingsworth PM, Forrest LL, Spouge JL, Hajibabaei M, Ratnasingham S, van der Bank M, Chase MW, Cowan RS, Erickson DL, et al 2009 A DNA barcode for land plants Proceedings of the National Academy of Sciences 106: 12794-12797 14 Igbedioh SO, Shaire S and Aderiye BJI 1995 Effects of Processing on Total Phenols and Proximate Composition of Pigeonpean {Cajanus cajan) and Climbing Bean (Vigna umbellata) Journal of Food Science and Technology 32(6): 497-500 15 Kang JH, McRoberts J, Shi F, Moreno JE, Jones AD, Howe GA (2014), “The flavonoid biosynthetic enzyme chalcone isomerase modulates terpenoid production in glandular trichomes of tomato”, Plant Physiology, 164, pp.11611174 16 Katoch R 2011 Morpho-physiological and nutritional characterization of rice bean (Vigna umbellata) Acta Agronomica Hungarica 59(2): 125 17 Khabirruddin M, Gupta SN and Tyagi CS 2002.Nutritional composition of some improved genotypes of rice bean (Vigna umbellata) Forage Research 28(2): 104-104 18 Kochhar S and Hira CK 1997 Nutritional and cooking quality evaluation of green gram (Vigna radiata L.) cultivars Journal of Food Science and Technology 34(4): 328-330 19 Miller G L., (1959), Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugars, Anal Chem., 31, pp 426-428 20 Negi A, Boora P and Kheteapaul N 2001 Starch and protein digestibility of newly released moth bean cultivars : effect of soaking , dehulling , germination and pressure cooking Nahrung/Food 45(4): 251-254 21 Priya Smriti 2005 Biochemical characterization of promising rice bean (Vigna umbellata) germplasm./W.Sc Thesis Deptt of Chemistry and Biochemistry, CSK HPKV Palampur.p 40 22 Raiger HL, Bhandari BC and Phogat BS 2010 Annual report of All India Coordinated Research Network on Under-utilized crops NBPGR, New Delhi.p.408 23 Raveendar S, Lee JR, Park JW, Lee GA, Jeon YA, Lee WH, Cho GT, Ma KH, Lee SY, Chung JW 2015 Identification of Genus Vigna using ITS2 and matK as a Two-Locus DNA Barcode Plant Breed Biotech 3(2):153-159 24 Sadana B, Hira CK, Singal N and Gerwal H 2006 Nutritional evaluation of rice bean (Vigna umbellata) strains Journal of Food Science and Technology 43(5): 516-518 25 Saharan K, Khetarpaul N and Bishnoi S 2004 Contents and digestibility of carbohydrates of rice bean and fababean as affected by simple inexpensive processing method Nutrition and Food Science 34 (1): 13-16 26 Saikia P, Sarkar CR and Borua I 1999 Chemical composition, anti-utritional factor and effect of cooking on nutritional quality of rice bean [Vigna umbellata (Thunb) Ohwi and Ohashi] Food Chemistry 50(4): 347-352 27 Sharma P 2002 Effect of incorporation of full fat and defatted legume flours on the acceptability and nutritional quality of maize products M.Sc Thesis Depff of Food Sciences and Nutrition, CSK.HPKV, Palampur (H.P) 28 Srivastava RP, Srivastava GK and Gupta RK 2001 Nutritional quality of rice bean [Vigna umbellate (Thunb) Ohwi and Ohashi] Indian Journal of Agricultural Biochemistry 14(1/2): 55-56 29 Velazquez ER, Silva L, Alvaro P 2010 Legumes: a healthy and ecological source of flavonoids Curr Nutr Food Sci 6: 109-144 ... THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN HẢI YẾN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT HỌC, MÃ VẠCH DNA CỦA CÂY ĐẬU NHO NHE (Vigna umbellata) THU TẠI TỈNH YÊN BÁI VÀ LAI CHÂU Ngành: Di truyền học Mã ngành:... gen đậu Nho nhe địa phương, tiến tới ứng dụng chọn tạo giống đậu Nho nhe phù hợp với nhu cầu thực tiễn Xuất phát từ sở tiến hành đề tài: Nghiên cứu đặc điểm thực vật học, mã vạch DNA đậu Nho nhe. .. (Vigna umbellata) thu tỉnh Yên Bái Lai Châu Mục tiêu nghiên cứu Phân tích so sánh đặc điểm hình thái, giải phẫu, hóa sinh trình tự vùng gen ITS từ mẫu đậu Nho nhe thu c tỉnh Yên Bái Lai Châu Nội