BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ PHƯỢNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ GEL CHỨA TIỂU PHÂN NANO LIPID VITAMIN E KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2013 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ PHƯỢNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ GEL CHỨA TIỂU PHÂN NANO LIPID VITAMIN E KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Ngô Thị Thu Trang Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế HÀ NỘI – 2013 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến ThS Ngô Thị Thu Trang Là người thầy, người chị tận tình hướng dẫn, bảo, giúp đỡ suốt thời gian thực hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô anh chị kỹ thuật viên Bộ mơn Bào chế nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho q trình thực khóa luận Tơi xin cảm ơn Ban giám hiệu, phòng ban, thầy giáo cán nhân viên trường đại học Dược Hà Nội – người dạy bảo, giúp đỡ dẫn cho suốt năm học tập mái trường thân yêu Cuối cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người bạn ln bên, chia sẻ, động viên giúp đỡ suốt trình học tập rèn luyện Mặc dù cố gắng khóa luận tơi khơng thể tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận thơng cảm góp ý thầy bạn Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2013 Sinh viên Nguyễn Thị Phượng Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID RẮN 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Một số tính chất SLNs 1.1.3 Cơ chế giải phóng khả kiểm sốt giải phóng dược chất 1.1.4 Hạn chế SLNs 1.1.5 Độ ổn định SLNs 1.1.6 Ứng dụng SLNs dùng da 1.2 ĐẠI CƯƠNG VỀ GEL 1.2.1 Khái niệm gel 1.2.2 Ứng dụng gel giải phóng thuốc 10 1.2.3 Một số nghiên cứu gel chứa SLNs dùng 10 1.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ VITAMIN E 11 1.3.1 Cơng thức hóa học danh pháp 11 1.3.2 Tính chất vật lý 11 1.3.3 Độ ổn định 12 1.3.4 Đặc tính dược lý 12 1.3.5 Các nghiên cứu vitamin E dùng da 13 Chương NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ 16 2.1.1 Nguyên vật liệu 16 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 16 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 17 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.3.1 Phương pháp bào chế 17 2.3.2 Phương pháp đánh giá hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E 19 2.3.3 Phương pháp đánh giá gel chứa hệ tiểu phân nano vitamin E 23 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ NHẬN XÉT 26 3.1 Đường chuẩn biểu thị mối quan hệ nồng độ vitamin E mật độ quang ……………………………………………………………………………… 26 3.2 Đường chuẩn biểu thị mối quan hệ nồng độ vitamin E diện tích pic ………………………… 26 3.3 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố tá dược đến kích thước tiểu phân tỷ lệ vitamin E giải phóng từ hệ tiểu phân nano lipid rắn 27 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng chất mang lipid 27 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng chất diện hoạt thân nước 31 3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng chất diện hoạt thân dầu 35 3.4 Khảo sát ảnh hưởng thời gian siêu âm đến kích thước phân bố kích thước tiểu phân nano vitamin E 37 3.5 Đánh giá số đặc tính hệ tiểu phân nano vitamin E bào chế 39 3.5.1 Định lượng hàm lượng vitamin E hệ tiểu phân nano lipid rắn 39 3.5.2 Đánh giá giải phóng vitamin E từ hệ tiểu phân nano 39 3.5.3 Hình thái kích thước tiểu phân nano vitamin E 40 3.5.4 Kích thước phân bố kích thước hệ tiểu phân 41 3.6 Bào chế gel từ hệ tiểu phân nano chứa vitamin E 42 3.7 Đánh giá số tính chất gel bào chế từ hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E 42 3.7.1 Định lượng hàm lượng vitamin E gel bào chế từ hệ tiểu phân nano 42 3.7.2 Khả giải phóng vitamin E từ gel chứa hệ tiểu phân nano vitamin E 42 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CDH : Chất diện hoạt HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) kl/kl : Khối lượng/khối lượng KTTP : Kích thước tiểu phân PDI : Chỉ số đa phân tán (Polydispersity index) SLN : Tiểu phân nano lipid rắn (Solid lipid nanoparticle) SLNs : Hệ tiểu phân nano lipid rắn (Solid lipid nanoparticles) TEM : Kính hiển vi điện tử truyền qua (Transmission electron microscopy) DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Nguyên vật liệu sử dụng trình thực nghiệm .16 Bảng 3.1 Mật độ quang dãy dung dịch chuẩn vitamin E bước sóng 286 nm .26 Bảng 3.2 Diện tích pic dãy dung dịch chuẩn vitamin E 27 Bảng 3.3 Cơng thức SLNs vitamin E có chất mang loại lipid khác kết đo kích thước tiểu phân .28 Bảng 3.4 Cơng thức SLNs vitamin E có hỗn hợp lipid khác với kết đo KTTP thử giải phóng 29 Bảng 3.5 Công thức SLNs vitamin E có tỷ lệ alcol cetylic Suppocire khác với kết đo KTTP thử giải phóng .30 Bảng 3.6 Công thức SLNs có loại chất diện hoạt thân nước khác với kết đo KTTP thử giải phóng .31 Bảng 3.7 Công thức SLNs có tỷ lệ chất diện hoạt thân nước khác với kết đo KTTP thử giải phóng .33 Bảng 3.8 Cơng thức SLNs có loại chất diện hoạt thân dầu khác với kết đo KTTP thử giải phóng .35 Bảng 3.9 Cơng thức SLNs có tỷ lệ chất diện hoạt thân dầu khác kết đo KTTP .36 Bảng 3.10 Kết thử giải phóng mẫu SLNs CT22, CT23, CT24, CT25 (%) 37 Bảng 3.11 KTTP PDI mẫu SLNs bào chế theo CT21 thời gian siêu âm khác 38 Bảng 3.12 Diện tích pic mẫu chuẩn, mẫu thử hàm lượng vitamin E so với lý thuyết mẫu SLNs bào chế theo CT21 39 Bảng 3.13 Tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 .39 Bảng 3.14 Diện tích pic mẫu chuẩn, mẫu thử hàm lượng vitamin E so với lý thuyết mẫu gel chứa SLNs bào chế theo CT21 42 Bảng 3.15 Tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 (%) .43 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình 1.1 Cấu trúc tiểu phân nano lipid rắn (SLN) .2 Hình 1.2 Các mơ hình kết hợp dược chất tiểu phân nano lipid Hình 2.1 Sơ đờ bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E .17 Hình 2.2 Sơ đờ bào chế gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E 19 Hình 3.1 Đường chuẩn biểu thị mối quan hệ nồng độ vitamin E mật độ quang 26 Hình 3.2 Đường chuẩn biểu thị mối quan hệ nờng độ vitamin E diện tích pic 27 Hình 3.3 Đờ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ mẫu SLNs CT5, CT6, CT7, CT8, CT9 (%) 30 Hình 3.4 Đờ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ mẫu SLNs CT14, CT15, CT16, CT17, CT18 (%) 33 Hình 3.5 Đờ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ mẫu SLNs CT19, CT20, CT21 (%) 35 Hình 3.6 Đờ thị biểu diễn thay đổi KTTP PDI SLNs theo thời gian siêu âm 38 Hình 3.7 Đờ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 (%) 40 Hình 3.8 Ảnh chụp hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) 41 Hình 3.9 Biểu đờ phân bố kích thước tiểu phân hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 41 Hình 3.10 Đờ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn (%) .43 ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, nhu cầu sử dụng mỹ phẩm để làm đẹp ngày tăng lên, vitamin E bật lên hoạt chất thiên nhiên có tác dụng chăm sóc sức khỏe sắc đẹp Vitamin E dùng theo đường uống đường ngồi da, dạng dùng ngồi da quan tâm nhiều Lợi ích bật vitamin E dùng da khả ngăn ngừa lão hóa da bảo vệ da khỏi tia UV Ngồi ra, vitamin E có tác dụng làm giảm xuất nếp nhăn, dưỡng ẩm cho da, giúp da trở nên mịn màng Nhưng vitamin E lại có nhược điểm dễ bị phân hủy ánh sáng, nhiệt độ ion kim loại Do đó, việc cải thiện tính ổn định cho vitamin E yếu tố quan trọng nhằm giúp dược chất ứng dụng rộng rãi chế phẩm dùng da Gần đây, hệ chất mang kích thước nano liên tục nghiên cứu ứng dụng như: hệ tiểu phân nano lipid rắn, nhũ tương nano, hỗn dịch nano, liposom, micel… nhằm cải thiện nhiều đặc tính dược chất đem đến tính chất Trong hệ tiểu phân nano lipid rắn quan tâm nghiên cứu năm 1990 ưu điểm triển vọng nó: tính thích ứng sinh học cao, bảo vệ dược chất khỏi mơi trường bên ngồi, làm giảm phân hủy dược chất, kiểm sốt giải phóng dược chất… Hiện giới, hệ tiểu phân nano lipid rắn nghiên cứu phát triển ngày nhiều làm chế phẩm dùng với dược chất như: fluconazol, vitamin E, vitamin K… Nhưng Việt Nam chưa có nghiên cứu bào chế hệ tiểu phân nano chứa vitamin E làm chế phẩm bơi ngồi da để phát huy ưu điểm hệ Do đề tài “Nghiên cứu bào chế gel chứa hệ tiểu phân nano lipid vitamin E” thực với mục tiêu: Bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E đánh giá số tính chất hệ Bào chế gel chứa hệ tiểu phân đánh giá số tính chất gel Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ HỆ TIỂU PHÂN NANO LIPID RẮN 1.1.1 Định nghĩa Hệ tiểu phân nano lipid rắn (SLNs – Solid Lipid Nanoparticles) hệ chất mang dạng keo, cấu tạo tiểu phân kích thước micro (từ 50 đến 1000 nm) phân tán nước dung dịch chất diện hoạt nước [9] Cấu trúc tiểu phân nano lipid rắn thể hình 1.1, gờm hai phần: phần lõi rắn dược chất hòa tan phân tán môi trường lipid rắn; phần vỏ lớp chất diện hoạt (đầu sơ nước phân tử chất diện hoạt gắn với phần lõi rắn) [23] Điểm khác biệt SLNs so với nano nhũ tương pha lipid nano nhũ tương thể lỏng pha lipid SLNs thể rắn, điều đem đến nhiều ưu điểm cho SLNs: tính ổn định hệ cao, kéo dài thời gian giải phóng dược chất thân dầu [9], [16] Hình 1.1 Cấu trúc tiểu phân nano lipid rắn (SLN) 1.1.2 Một số tính chất SLNs Việc xác định tính chất SLNs cần thiết để kiểm soát chất lượng đánh giá khả hoạt động hệ Một số tính chất điển hình SLNs gờm:  Kích thước tiểu phân zeta Kích thước tiểu phân phụ thuộc vào cấu trúc tiểu phân loại, nờng độ lipid chất diện hoạt [25] Đường kính tiểu phân thường xác định phương pháp quang phổ tương quan photon (PCS - Photon correlation spectroscopy) Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 36 Nhận xét: Mẫu CT19, CT20 sau bào chế chất lỏng, màu trắng đục, KTTP nhỏ PDI cao Sau 24 giờ, mẫu CT20 tách lớp: lớp váng dầu trắng đục, không đồng nhất, lớp dung dịch nước xanh Mẫu CT19 sau 72 bắt đầu phân lớp tương tự mẫu CT20 Trái lại, mẫu CT21 lại chất lỏng, màu xanh trì sau ngày, KTTP sau ngày 179,8 nm, PDI = 0,208 Tỷ lệ vitamin E giải phóng mẫu CT21 (46,06% sau giờ) cao mẫu CT19 (40,25%) CT20 (38,60%) Có thể giải thích Cremophor A6 A25 chất thân dầu, chất rắn nhiệt độ phòng nên tính linh động kém, khó kết hợp với Tween 80 để làm bền vững lớp vỏ tiểu phân lipid Còn Span 80 chất lỏng nhiệt độ phòng nên dễ dàng kết hợp với Tween 80 để trì lớp vỏ có cấu trúc micel tiểu phân lipid Mặt khác, CDH thân dầu, Cremophor A25 gây phân lớp cho hệ sau 24 tỷ lệ vitamin E giải phóng CDH (38,60% sau giờ) Do vậy, tiếp tục nghiên cứu thay đổi tỷ lệ với CDH thân dầu Cremophor A6 Span 80 3.3.3.2 Ảnh hưởng tỷ lệ chất diện hoạt thân dầu Cremophor A6 Span 80 phối hợp vào công thức với tỷ lệ 1,8% (kl/kl), kết đo KTTP thử giải phóng cho bảng 3.9 3.10 Bảng 3.9 Cơng thức SLNs có tỷ lệ chất diện hoạt thân dầu khác kết đo KTTP STT 5.1 5.2 Nguyên liệu Vitamin E (g) Alcol cetylic (g) Suppocire (g) Tween 80 (g) Cremophor A6 (g) Span 80 (g) Nước cất vừa đủ (g) KTTP (nm) PDI CT22 100 98,72 0,137 CT23 1,8 100 114,4 0,171 CT24 100 72,12 0,140 CT25 1,8 100 81,57 0,186 37 Bảng 3.10 Kết thử giải phóng mẫu SLNs CT22, CT23, CT24, CT25 (%) Thời gian giải phóng (phút) 30 60 120 180 CT22 3,97 6,82 13,03 23,21 CT23 5,15 10,19 19,57 33,04 CT24 4,31 15,56 21,70 29,61 CT25 5,83 10,71 20,14 38,32 Nhận xét: Từ kết thấy: nói chung, lượng chất diện hoạt thân dầu tăng lên KTTP khả giải phóng dược chất tăng lên KTTP tỷ lệ dược chất giải phóng từ hệ chứa Span 80 cao hệ chứa Cremophor A6 hai tỷ lệ 1% 1,8% Về thể chất: Cremophor A6, mẫu CT22 (1%) sau 24 thấy xuất váng dầu trắng đục bề mặt (KTTP tăng lên 238,4 nm; PDI tăng lên 0,502) mẫu CT23 (1,8%) trì thể chất đờng Nhưng sau 72 mẫu CT23 bắt đầu phân lớp với lớp dầu trắng đục phía (KTTP = 140,7 nm; PDI = 0,361) Đối với Span 80, mẫu CT24 CT25 trì thể chất lỏng, đồng nhất, xanh sau ngày, KTTP có tăng nhẹ: mẫu CT24 174,3 nm; PDI = 0,280 mẫu CT25 197,7 nm; PDI = 0,211 Kết cho thấy khả trì ổn định thể chất cho hệ tiểu phân nano Cremophor A6 nhiều so với Span 80, đồng thời khả giải phóng dược chất Và đem so sánh mẫu CT21 (1,4% Span 80) có giá trị KTTP 88,17 nm PDI 0,218 tương đương mẫu CT24 (3%) CT25 (5%) tỷ lệ vitamin E giải phóng từ hệ lại cao (46,06%) Do chất diện hoạt thân dầu lựa chọn công thức SLNs vitamin E Span 80 với tỷ lệ 1,4% để tiến hành nghiên cứu tiếp 3.4 Khảo sát ảnh hưởng thời gian siêu âm đến kích thước phân bố kích thước tiểu phân nano vitamin E SLNs bào chế theo CT21 theo phương pháp trình bày mục 2.3.1.1 Trong trình siêu âm, lấy mẫu thời điểm 2, 5, 7, 10, 15, 20, 25, 30 phút để đem đo kích thước tiểu phân nhằm xác định ảnh hưởng thời gian siêu âm đến kích thước tiểu phân Kết cho bảng 3.11 hình 3.6 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 38 Bảng 3.11 KTTP PDI mẫu SLNs bào chế theo CT21 thời gian siêu âm khác 400 0,5 300 0,4 0,3 200 0,2 100 PDI Kích thước tiểu phân (nm) Thời gian (phút) 10 15 20 25 30 349,6 255,5 216,5 168,7 123,9 99,16 87,72 82,17 KTTP (nm) 0,459 0,413 0,301 0,287 0,268 0,218 0,236 0,231 PDI 0,1 0 10 15 20 Thời gian siêu âm (phút) KTTP 25 30 PDI Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn thay đổi KTTP PDI SLNs theo thời gian siêu âm Nhận xét: Kết cho thấy, kích thước tiểu phân hệ giảm dần thời gian siêu âm tăng lên, giá trị PDI hệ giảm dần (từ – 20 phút) Có thể giải thích thời gian siêu âm dài tức thời gian tác động lực phân cắt vào tiểu phân lớn, kết hợp khuấy trộn gia nhiệt làm cho tiểu phân bị phá vỡ dần thành cấu trúc nhỏ đồng Ở phút đầu giá trị PDI giảm mạnh, sau giảm sau 20 phút giá thị PDI lại có xu hướng tăng lên Có thể giải thích ban đầu tiểu phân có kích thước lớn nên dễ bị phân chia lực siêu âm, làm giảm nhanh kích thước, kích thước nhỏ dần tiểu phân có kích thước nhỏ bị phân chia tiểu phân có kích thước lớn Đến tiểu phân đạt đến kích thước nhỏ định số tiểu phân khơng thể nhỏ tiểu phân khác tiếp tục bị phân cắt nhỏ nên làm 39 cho phân bố kích thước tiểu phân tăng lên Do thời gian siêu âm lựa chọn 20 phút để đạt KTTP PDI phù hợp cho mẫu 3.5 Đánh giá số đặc tính hệ tiểu phân nano vitamin E bào chế Từ kết khảo sát trên, lựa chọn công thức SLNs vitamin E CT21 chất ổn định, kích thước tiểu phân nhỏ khả giải phóng dược chất tốt để tiến hành nghiên cứu đánh giá số đặc tính hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E: Vitamin E 1,00 g Alcol cetylic 2,00 g Suppocire 3,00 g Tween 80 4,00 g Span 80 1,40 g Nước cất vừa đủ 100 g SLNs vitamin E bào chế theo phương pháp mục 2.3.1.1, thời gian siêu âm 20 phút Mẫu bào chế xong chất lỏng, màu trắng xanh lam, đục mờ (Phụ lục) 3.5.1 Định lượng hàm lượng vitamin E hệ tiểu phân nano lipid rắn Định lượng vitamin E hệ tiểu phân phương pháp HPLC mục 2.3.2.3 Kết cho bảng 3.12 Hình ảnh sắc ký đờ: Phụ lục Bảng 3.12 Diện tích pic mẫu chuẩn, mẫu thử hàm lượng vitamin E so với lý thuyết mẫu SLNs bào chế theo CT21 Mẫu Diện tích pic (mAU.s) Hàm lượng vitamin E (%) Chuẩn (222 μg/ml) 677,9 590,9 Thử 93,14 3.5.2 Đánh giá giải phóng vitamin E từ hệ tiểu phân nano Tiến hành hành thử giải phóng với điều kiện mục 2.3.2.2, lấy mẫu thời điểm 0,5; 1; 2; 3; 4; Kết thể bảng 3.13 hình 3.7 Bảng 3.13 Tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 Thời gian giải phóng (giờ) 0,5 Tỷ lệ vitamin E giải phóng (%) 8,11 13,72 30,41 45,03 53,67 59,22 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi Tỷ lệ vitamin E giải phóng (%) 40 70 60 50 40 30 20 10 53,67 59,22 45,03 30,41 8,11 0,5 13,72 Thời gian giải phóng (giờ) Hình 3.7 Đồ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 (%) Nhận xét: Vitamin E giải phóng từ hệ cách đặn, tăng dần theo thời gian Trong đầu dược chất giải phóng với tốc độ nhanh, đờ thị dốc hơn, sau tốc độ giải phóng giảm chút Có thể giải thích ban đầu mơi trường giải phóng chứa dược chất nên tốc độ khuếch tán dược chất từ ngăn cho sang mơi trường giải phóng lớn, tốc độ giải phóng dược chất tăng nhanh Nhưng sau mơi trường giải phóng hòa tan lượng định dược chất tốc độ khuếch tán dược chất vào ngăn nhận giảm đi, tốc độ giải phóng dược chất từ hệ giảm theo Từ kết thử giải phóng cho thấy triển vọng hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E để ứng dụng vào chế phẩm bơi ngồi da: dược chất giải phóng đặn vào da trì giải phóng thời gian dài 3.5.3 Hình thái kích thước tiểu phân nano vitamin E Đánh giá hình thái kích thước tiểu phân theo phương pháp mục 2.3.2.4 Một số hình ảnh hệ tiểu phân nano CT21 thể hình 3.8 Nhận xét: Ảnh chụp cho thấy tiểu phân có dạng hình cầu gần cầu, bắt màu đen, KTTP nhỏ đồng Cho thấy công thức phương pháp bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E nghiên cứu có triển vọng để tạo hệ 41 tiểu phân nano vitamin E, ứng dụng dược phẩm mỹ phẩm Hình 3.8 Ảnh chụp hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) 3.5.4 Kích thước phân bố kích thước hệ tiểu phân Đánh giá kích thước phân bố kích thước mẫu CT21 theo điều kiện mục 2.3.2.5 Kết đo kích thước phân bố kích thước thể hình 3.9 Hình 3.9 Biểu đồ phân bố kích thước tiểu phân hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 42 Nhận xét: Kết cho thấy tiểu phân hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E bào chế theo CT21 có kích thước nhỏ mức nano: KTTP = 98,72 nm phân bố kích thước nhỏ PDI = 0,137; với độ rộng đáy pic 44,64 nm Cho thấy tiểu phân có kích thước đờng đều, 100% tiểu phân có kích thước 1000 nm 3.6 Bào chế gel từ hệ tiểu phân nano chứa vitamin E Qua tham khảo tài liệu [2] kết hợp trình khảo sát sơ tỷ lệ Carbopol 940 đảm bảo độ mềm thích hợp sử dụng da, thành phần gel chứa hệ tiểu phân nano vitamin E lựa chọn sau: SLNs vitamin E (CT21) 50,0 g Carbopol 940 0,5 g Triethanolamin 0,5 g Glycerin 5,0 g Nước cất vừa đủ 100 g Gel chứa thành phần bào chế theo phương pháp mục 2.3.1.2 chất mềm mịn, màu trắng đục, không mùi (Phụ lục) 3.7 Đánh giá số tính chất gel bào chế từ hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E 3.7.1 Định lượng hàm lượng vitamin E gel bào chế từ hệ tiểu phân nano Gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E định lượng phương pháp HPLC mục 2.3.3.2 Kết cho bảng 3.14 Bảng 3.14 Diện tích pic mẫu chuẩn, mẫu thử hàm lượng vitamin E so với lý thuyết mẫu gel chứa SLNs bào chế theo CT21 Mẫu Diện tích pic (mAU.s) Chuẩn (222 μg/ml) 677,9 Thử 263,7 Hàm lượng vitamin E (%) 79,75 3.7.2 Khả giải phóng vitamin E từ gel chứa hệ tiểu phân nano vitamin E Gel đem thử giải phóng điều kiện mục 2.3.3.1 Lấy mẫu thời điểm 0,5; 1; 2; 3; 4; Kết thể bảng 3.15 hình 3.10 43 Bảng 3.15 Tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn bào chế theo CT21 (%) Thời gian giải phóng (giờ) 0,5 Tỷ lệ vitamin E giải phóng (%) Tỷ lệ vitamin E giải phóng (%) 7,93 12,02 22,76 32,16 41,56 48,65 60 48,65 50 41,56 40 32,16 30 22,76 20 7,93 10 12,02 0 0,5 Thời gian giải phóng (giờ) Hình 3.10 Đồ thị tỷ lệ vitamin E giải phóng theo thời gian từ gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn (%) Nhận xét: Gel chứa hệ tiểu phân nano vitamin E có khả giải phóng dược chất đặn theo thời gian, đồ thị gần đường thẳng Mức độ giải phóng dược chất gel có hệ tiểu phân nano lipid rắn (mục 3.5.3) kết giải phóng sau cao (48,65%), đặc biệt dạng gel phát huy tính chất trì giải phóng dược chất thời gian dài hệ tiểu phân nano Do dạng bào chế gel hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E có triển vọng để tạo dạng chế phẩm thuốc dùng da chứa vitamin E mới, phát huy ưu điểm hệ tiểu phân nano lipid rắn Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 44 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN Sau q trình nghiên cứu đánh giá, rút số kết luận sau: Bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E đánh giá số tính chất hệ  Bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E phương pháp siêu âm kết hợp khuấy từ Thời gian siêu âm tăng KTTP PDI giảm 20 phút  Đã khảo sát ảnh hưởng loại tỷ lệ lipid, CDH đến thể chất, KTTP khả giải phóng dược chất Công thức lựa chọn là: lipid gồm alcol cetylic 2%, Suppocire 3%; CDH thân nước: Tween 80 4%; CDH thân dầu Span 80 1,4%  Đánh giá số tính chất hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E:  Hình thức: Mẫu bào chế có dạng lỏng, màu trắng xanh lam, đục mờ  Hình dạng tiểu phân: cầu gần cầu, bắt màu đậm chụp TEM  Kích thước tiểu phân trung bình 98,72 nm, PDI = 0,137; 100% tiểu phân có đường kính 1000 nm  Hàm lượng vitamin E tương đối cao, đạt 93,14% so với lý thuyết  Tỷ lệ vitamin E giải phóng từ hệ tiểu phân sau đạt 59,22% Bào chế gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E đánh giá số tính chất gel  Hình thức: gel chất mềm, mịn, màu trắng đục, đờng  Hàm lượng vitamin E có gel tương đối cao, đạt 79,75% so với lý thuyết  Tỷ lệ vitamin E giải phóng từ gel sau cao, đạt 48,65% ĐỀ XUẤT Một số đề xuất cần tiếp tục nghiên cứu để hồn thiện thêm đề tài này:  Nghiên cứu tính thấm qua da vitamin E từ gel chứa hệ tiểu phân nano  Đánh giá độ ổn định gel chứa hệ tiểu phân nano vitamin E TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Bộ Y Tế (2007), Dược lý học, tập 2, NXB Y học, Hà Nội, tr 257-260 Phạm Thị Phương Dung (2011), Nghiên cứu bào chế gel chứa tiểu phân nano Vitamin K1, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học khóa 2006 - 2011, Trường ĐH Dược Hà Nội, Hà Nội TÀI LIỆU TIẾNG ANH Almdal K., Dyre J., Hvidt S and Kramer O (1993), "Towards a phenomenological definition of the term ‘gel’", Polymer Gels and Networks, 1(1), pp 5-17 Aulton M E and Wells T (2002), Pharmaceutics: The science of dosage form design, Churchill Livingstone, Edinburgh, pp 85-86 Beck R (2011), Nanocosmetics and Nanomedicines: New Approaches for Skin Care, Springer, Verlag, pp 69-122 British Pharmacopoeia Commission (2013), British Pharmacopoeia, Monograph all-rac-a-Tocopherol, database on the Internet, available from: http://www.pharmacopoeia.co.uk/ Charcosset C., El-Harati A and Fessi H (2005), "Preparation of solid lipid nanoparticles using a membrane contactor", Journal of Controlled Release, 108(1), pp 112-120 Dingler A., Blum R., Niehus H., Muller R and Gohla S (1999), "Solid lipid nanoparticles (SLN/Lipopearls) a pharmaceutical and cosmetic carrier for the application of vitamin E in dermal products", Journal of Microencapsulation, 16(6), pp 751-767 Ekambaram P., Sathali A A H and Priyanka K (2012), "Solid lipid nanoparticles: A review", Scientific Reviews & Chemicals Communications, 2(1), pp 80-102 10 Fangueiro J., Macedo A., Jose S., Garcia M., Souto S and Souto E (2012), "Thermodynamic behavior of lipid nanoparticles upon delivery of Vitamin E Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi derivatives into the skin: in vitro studies", Journal of Thermal Analysis and Calorimetry, 108(1), pp 275-282 11 Garud A., Singh D and Garud N (2012), "Solid Lipid Nanoparticles (SLN): Method, Characterization and Applications", International Current Pharmaceutical Journal, 1(11), pp 384-393 12 Gašperlin M and Gosenca M (2011), "Main approaches for delivering antioxidant vitamins through the skin to prevent skin ageing", Expert Opinion on Drug Delivery, 8(7), pp 905-919 13 Gulrez S K., Al-Assaf S and Phillips G O (2011), "Hydrogels: Methods of Preparation, Characterisation and Applications", Progress in Molecular and Environmental Bioengineering - From Analysis and Modeling to Technology Applications, 1(1), pp 117-150 14 Hagerstrom H (2003), Polymer gels as pharmaceutical dosage forms: rheological performance and physicochemical interactions at the gel-mucus interface for formulations intended for mucosal drug delivery, Uppsala University, Uppsala, pp 9-12 15 Jenning V., Gysler A., Schafer-Korting M and Gohla S H (2000), "Vitamin A loaded solid lipid nanoparticles for topical use: occlusive properties and drug targeting to the upper skin", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 49(3), pp 211-218 16 Kamboj S., Bala S and Nair A B (2010), "Solid lipid nanoparticles: An effective lipid based technology for poorly water soluble drugs", International Journal of Pharmaceutical Sciences Review And Research, 5(2), pp 78-90 17 Khan S (2012), "Solid Lipid Nanoparticles: A review", World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 1(1), pp 96-115 18 Ma Q., Wang Y., Lin X., Luo D and Gu N (2007), Preparation, Characterization and Photoprotection of Tocopherol Loaded Nanostructured Lipid Carriers, IEEE, Nanjing, pp 203-208 19 Mukherjee S., Ray S and Thakur R (2009), "Solid lipid nanoparticles: A modern formulation approach in drug delivery system", Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, 71(4), pp 349-358 20 Muller R H., Mader K and Gohla S (2000), "Solid lipid nanoparticles (SLN) for controlled drug delivery–a review of the state of the art", European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 50(1), pp 161-177 21 Muller R H and Wissing S (2003), "SLN and Lipopearls for Topical Delivery of Active Compounds and Controlled Release", Drugs and the Pharmaceutical Sciences, 126(1), pp 571-588 22 Nastruzzi C (2005), Lipospheres in drug targets and delivery: approaches, methods, and applications, CRC Press, London, pp 127-139 23 Ramteke K., Joshi S and Dhole S (2012), "Solid Lipid Nanoparticle: A Review", IOSR Journal of Pharmacy, 2(6), pp 34-44 24 Singhal G B., Patel R P., Prajapati B and Patel N A (2011), "Solid lipid nanoparticles and nano lipid carriers: as novel solid lipid based drug carrier", International Research Journal of Pharmacy, 2(2), pp 40-52 25 Sinha V R., Srivastava S., Goel H and Jindal V (2010), "Solid lipid nanoparticles (SLN’S)–trends and implications in drug targeting", International Journal of Advances in Pharmaceutical Sciences, 1(3), pp 212238 26 Sweetman S (2009), Martindale 36: The Complete Drug Reference, Pharmaceutical Press, London, pp 1992-1995 27 Thassu D., Deleers M and Pathak Y V (2007), Nanoparticulate drug delivery systems, Informa Healthcare, New York, pp 213-233 28 Trombino S., Cassano R., Muzzalupo R., Pingitore A., Cione E and Picci N (2009), "Stearyl ferulate-based solid lipid nanoparticles for the encapsulation and stabilization of β-carotene and α-tocopherol", Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 72(2), pp 181-187 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 29 USP 36 – NF31 (2013), Monograph Vitamin E, database on the Internet, available from: http://www.uspnf.com 30 Wissing S and Muller R (2001), "A novel sunscreen system based on tocopherol acetate incorporated into solid lipid nanoparticles", International Journal of Cosmetic Science, 23(4), pp 233-243 31 Yenilmez E and Yazan Y (2010), "Release of vitamin E from different topical colloidal delivery systems and their in vitro-in vivo evaluation", Turkish Journal of Pharmaceutical Sciences, 7(2), pp 167-188 PHỤ LỤC Hình ảnh hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E CT21 Hình ảnh gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi Sắc ký đồ định lượng vitamin E mẫu SLNs bào chế theo CT21 DAD1A, Sig=284,4Ref=off (PHUONGA3\VITAMINE000008.D) 10.986 mAU 16 14 12 10 2.705 9.275 0.737 0.921 0 10 12 ... Hệ tiểu phân nano lipid rắn Hình 2.1 Sơ đồ bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa vitamin E Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 18 Bào chế hệ tiểu phân nano lipid. .. thước tiểu phân khả giải phóng dược chất từ hệ tiểu phân nano Đánh giá số tính chất hệ tiểu phân nano  Bào chế gel chứa hệ tiểu phân nano lipid rắn vitamin E  Đánh giá số tính chất gel chứa hệ tiểu. .. chứa vitamin E làm chế phẩm bơi ngồi da để phát huy ưu điểm hệ Do đề tài Nghiên cứu bào chế gel chứa hệ tiểu phân nano lipid vitamin E thực với mục tiêu: Bào chế hệ tiểu phân nano lipid rắn chứa