BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI VŨ THỊ NGỌC THÚY NGHIÊN CỨU THU NHẬN GELATIN TỪ VẢY CÁ TRÁP VÂY VÀNG (SPARUS LATUS HOUTTUYN) SỬ DỤNG ALCALASE THƯƠNG MẠI Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học : TS TRẦN THỊ PHƯƠNG LIÊN TS CAO THỊ HUỆ HÀ NỘI - 2017 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận này, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến hai cô TS Trần Thị Phương Liên TS Cao Thị Huệ, tận tình hướng dẫn em suốt trình thực viết luận văn Em xin chân thành cảm ơn quý Thầy, Cô khoa Sinh - KTNN tận tình truyền đạt kiến thức năm em học tập Với vốn kiến thức tiếp thu trình học khơng tảng cho q trình nghiên cứu khóa luận mà hành trang qúy báu để em bước vào đời cách vững tự tin Em chân thành cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện sinh hóa biển – Viện hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam cho phép tạo điều kiện thuận lợi để em thực thí nghiệm nghiên cứu khoa học đề tài Cuối em kính chúc q Thầy, Cơ dồi sức khỏe thành cơng nghiệp cao q Đồng kính chúc Cơ, Chú, Anh, Chị Viện sinh hóa biển – Viện hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam dồi sức khỏe, đạt nhiều thành công tốt đẹp công việc Tác giả Vũ Thị Ngọc Thúy LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, có hỗ trợ từ Giáo viên hướng dẫn TS Trần Thị Phương Liên TS Cao Thị Huệ Các nội dung nghiên cứu kết luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu trước Hà Nội, ngày….tháng….năm 2017 Tác giả Vũ Thị Ngọc Thúy MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu đề tài 3 Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa thực tiễn ý nghĩa lý luận đề tài NỘI DUNG CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Tình hình phát triển ngành thủy sản Việt Nam tiềm nguồn phụ phẩm chế biến cá chứa collagen 1.2 Một số đặc điểm sinh học, tiềm đánh bắt nuôi trồng cá tráp vây vàng Việt Nam 1.3 Cấu tạo, thành phần, tính chất khả ứng dụng gelatin 1.3.1 Cấu tạo gelatin 1.3.2 Tính chất gelatin 11 1.3.3 Ứng dụng gelatin 13 1.4 Tình hình nghiên cứu nước giới phương pháp thu nhận gelatin từ nguồn nguyên liệu thủy sản Sử dụng enzym sản xuất gelatin 15 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 15 1.4.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 20 CHƯƠNG II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Vật liệu nghiên cứu 23 2.1.1 Mẫu vảy cá 23 2.1.2 Hóa chất dụng cụ thí nghiệm 23 2.1.2.1 Hóa chất 23 2.1.2.2 Thiết bị, dụng cụ thí nghiệm 23 2.2 Phương pháp nghiên cứu 24 2.2.1 Phương pháp xử lý vảy cá enzym chiết xuất collagen từ vảy cá 24 2.2.2 Các phương pháp phân tích 26 2.3 Xử lý số liệu 30 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Thành phần dinh dưỡng vảy cá tráp vây vàng 31 3.2 Nghiên cứu thu nhận gelatin từ vảy cá tráp vây vàng sử dụng alcalase thương mại 32 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng pH nồng độ enzym alcalase đến trình thủy phân 32 3.2.2 Nghiên cứu chiết xuất collagen từ vảy cá xử lý qua enzym alcalase 34 3.2.3 Quy trình sản xuất gelatin từ vẩy cá tráp vây vàng 37 3.3 Kết nghiên cứu chất lượng gelatin thành phẩm 41 3.3.1 Chỉ tiêu cảm quan gelatin 41 3.3.2 Thành phần dinh dưỡng gelatin 42 3.3.3 Thành phần axit amin gelatin 44 3.3.4 Sự phân bố trọng lượng phân tử gelatin 46 3.3.5 Đặc tính lý-hóa gelatin 47 KẾT LUẬN 51 KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình Cá tráp vây vàng Sparus latus Houttuyn Hình Vảy cá tráp vây vàng Hình Cấu trúc gelatin 10 Hình 3.1 Sự phụ thuộc protein hòa tan vào pH nồng độ alcalase 33 Hình 3.2 Sự phụ thuộc độ nhớt động học dịch gelatin lỏng vào thời gian nhiệt độ chiết lần thứ 35 Hình 3.3 Sự phụ thuộc độ nhớt động học dịch gelatin lỏng vào thời gian nhiệt độ chiết lần thứ hai 36 Hình 3.4 Gelatin thành phẩm 41 Hình 3.5 Sự phân bố khối lượng phân tử gelatin: 47 Hình 3.6 Độ trương phồng gelatin 49 Sơ đồ Quy trình thu nhận gelatin quy mơ phòng thí nghiệm 38 DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng Thành phần hóa học gelatin 10 Bảng 3.1 Thành phần dinh dưỡng vảy cá 31 Bảng 3.2 Chỉ tiêu cảm quan gelatin 42 Bảng 3.3 Thành phần dinh dưỡng gelatin 43 Bảng 3.4 Thành phần hàm lượng axit amin gelatin từ vảy cá tráp vây vàng 45 Bảng 3.5 Tính chất lý hóa gelatin 48 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Việt Nam có nguồn thủy hải sản phong phú, ngành chế biến thủy sản đóng vai trò quan trọng việc phát triển kinh tế nước ta Hàng năm, Việt Nam khai thác xuất số lượng lớn thủy hải sản, có hàm lượng lớn cá biển Cá biển Việt Nam có khoảng 2.038 lồi với nhóm sinh thái chủ yếu: nhóm cá khoảng 260 lồi, nhóm cá gần tầng đáy khoảng 930 lồi, nhóm cá đáy khoảng 502 lồi nhóm cá san hơ khoảng 304 lồi Nhìn chung, nguồn lợi cá biển có thành phần lồi đa dạng, kích thước cá thể nhỏ, tốc độ tái tạo nguồn lợi nhanh Trong lồi cá biển có khoảng 130 lồi có giá trị thương mại cao, 30 loài thường xuyên đánh bắt với trữ lượng 4,2 triệu tấn/năm, sản lượng khai thác tối đa bền vững đạt 1,7 triệu tấn/năm, vịnh Bắc Bộ có trữ lượng 681.200 tấn, khả cho phép khai thác 272.500 tấn/năm tập trung tỉnh Hải Phòng, Quảng Ninh [6] Gelatin chế phẩm tạo từ q trình thủy phân khơng tồn phần collagen từ da, xương động vật thủy sản [3][14][31][38] Gelatin coi loại protein gần nguyên chất (hàm lượng protein tổng chiếm 80% khối lượng khô) Gelatin số peptit phân lập từ dịch thủy phân biết đến có nhiều hoạt tính sinh học đáng quý kháng khuẩn, chống oxi hóa, kháng vi sinh vật kiểm định, ức chế men chuyển angiotensin [31][38] Ngoài ra, thành phần hóa học đặc tính lý hóa đặc biệt, gelatin ứng dụng rộng rãi công nghiệp thực phẩm (công nghệ sản xuất sữa, kem, chế biến thịt, cá, làm màng bao bọc thực phẩm ) Gelatin có nhiều ứng dụng công nghiệp dược, mỹ phẩm nhiếp ảnh [36][43][52][53][55] Một ứng dụng đáng kể gelatin dùng sản xuất bao nhộng cứng mềm [53] Qua tài liệu tham khảo cho thấy, vấn đề sản xuất ứng dụng gelatin nước ta khoảng cách xa so với giới Trên giới có nhiều nghiên cứu gelatin collagen nguồn gốc thủy sản, đặc biệt từ da xương cá [15][28][50][54] Ở Việt Nam, nghiên cứu gelatin manh mún, chưa mang tính hệ thống liên tục, chủ yếu dừng lại lý thuyết chưa đưa sản phẩm gelatin thương mại khả ứng dụng vào thực tiễn hạn chế Có thực tế nhà máy chế biến thủy sản Việt Nam chưa khai thác sử dụng phế phụ phẩm chế biến cá nói chung vẩy cá nói riêng, bán lại cho thương lái Trung Quốc với cho không nhập lại gelatin từ họ với chất lượng không đảm bảo, tiêu biểu mẫu gelatin không rõ nguồn gốc xuất xứ bày bán thị trường, chí có mẫu ghi nhãn mác sản xuất Nga, Pháp, Đức [2][24][39][59] Nhận thấy nhu cầu lớn gelatin Việt Nam năm gần đây, thêm vào nguồn nguyên liệu phụ phẩm chế biến cá để sản xuất gelatin nước ta dồi dào, ổn định, giá rẻ nên chọn hướng nghiên cứu sản xuất gelatin với mong muốn phục vụ nhu cầu nước, góp phần nâng cao hiệu kinh tế cho doanh nghiệp thủy sản giảm thiểu ô nhiễm môi trường [1][27][31] Cá tráp vây vàng (Sparus latus Houttuyn, 1782) lồi có giá trị kinh tế cao Thịt cá thơm ngon, giàu chất dinh dưỡng, người tiêu dùng ưa chuộng Cá có tốc độ sinh trưởng nhanh, có tiềm ni trồng lớn, ni mật độ cao ao đất lồng bè Sau tháng ni đạt trọng lượng 0,5-0,8 kg/con Hiện nay, cá tráp vây vàng trở thành lồi cá có giá trị thương mại cao, nhân rộng nuôi tỉnh ven biển Bắc Việt Nam (Hải Phòng) ngun nhân dẫn đến hàm lượng cao imino axit gelatin cá tráp vây vàng nghiên cứu so với vài loài khác Do không chứa tryptophan nên gelatin từ vảy cá không coi protein dinh dưỡng lý tưởng so với protein cô lập từ đậu nành, hạt dền [25] hay protein có nguồn gốc động vật trứng gà Tuy nhiên, thành phần gelatin protein, đặc biệt hàm lượng proline hydroxyproline gelatin thu từ lồi cá tương đối cao, ảnh hưởng tích cực đến số đặc tính lý hóa quan trọng như: độ bền gel, độ nóng chảy gel, độ nhớt dung dịch, khả giữ nước, khả liên kết với chất béo nên gelatin ứng dụng nhiều lĩnh vực khác chế biến thực phẩm y dược 3.3.4 Sự phân bố trọng lượng phân tử gelatin Mẫu gelatin bao gồm chuỗi chính: chuỗi α (bao gồm α1 α2) chuỗi β Hai chuỗi α1 α2 có khối lượng phân tử tương ứng khoảng 120 100 kDa Chuỗi β có khối lượng phân tử khoảng 200 kDa Kết nghiên cứu chứng minh rằng, hai chuỗi α β bị thủy phân trình xử lý o alcalase trình chiết xuất collagen nhiệt độ 60 C Có xuất của số chuỗi có trọng lượng phân tử cao (> 200 kDa) mẫu gelatin Ngoài ra, thành phần gelatin từ cá tráp vây vàng chứa số mảnh nhỏ có trọng lượng phân tử khoảng 65-85 kDa Shyni cộng (2014) cơng bố có mặt số phân mảnh có khối lượng phân tử < 100 kDa gelatin thu nhận từ da cá trôi Ấn Độ, cá ngừ cá mập [57] Điều giải thích thủy phân phần chuỗi α, β γ; gelatin lẫn lượng nhỏ thành phần protein phi collagen Sự xuất số phân mảnh có khối lượng phân tử nhỏ gelatin từ cá tráp vây vàng ảnh hưởng q trình thủy phân enzym Alcalase® 2.4 L trước chiết xuất H nh 3.5 Sự phân bố khối lượng phân tử gelatin: Dải 1: Marker, Dải 2: Mẫu gelatin từ cá tráp vây vàng (FG-Y) 3.3.5 Đặc tính lý-hóa gelatin Trong khuôn khổ luận văn này, nghiên cứu số tính chất lý hóa gelatin: pH dung dịch, độ trong, độ nhớt dung dịch (Bảng 3.5) tính trương phồng (Hình 3.6) pH dung dịch gelatin Giá trị pH dung dịch gelatin 1% (w/w) đạt 5,02 Qua tài liệu tham khảo cho thấy, gelatin chiết xuất từ loài cá khác có phổ pH rộng (2,0-8,0): cá tuyết (2,7-3,9) [39], cá vược Thổ Nhĩ Kỳ (5,5) [28] Sự khác pH dung dịch gelatin kết trình chiết axit bazơ [56] Ở đề tài này, sau xử lý alcalase, collagen chiết xuất nước cất (bổ sung axit citric để pH pha lỏng đạt 4,0±0,2) Theo Tiêu chuẩn Châu Âu [32] Tiêu chuẩn xây dựng Viện Nghiên cứu Gelatin Mỹ [33], gelatin thu nhận từ vảy cá tráp vây vàng thuộc loại A (pH khoảng 3,8-5,5) Bảng 3.5 Tính chất lý hóa gelatin Đặc tính lý hóa Mẫu gelatin từ vẩy cá tráp pH, 1% (w/w) Độ dung dịch, 5% (w/w) Độ nhớt, cPs vây vàng 5,02 ± 0,05 83,6 ± 3,2 8,52 ± 0,34 Độ dung dịch gelatin Độ trong tính chất vật lý quan trọng dung dịch gelatin Mẫu gelatin thu từ vảy cá tráp vây vàng có độ cao, khoảng 83,6% ± 3,2% (đối với dung dịch gelatin 5%, w/w) Thông thường công nghệ chiết xuất gelatin từ nguyên liệu có nguồn gốc gia súc, phân đoạn chiết có độ khác phân đoạn sau, dịch gelatin lỏng chứa nhiều tạp chất [30] Ở đề tài này, phân đoạn chiết lần I lần II gom lại cho kết tốt chứng tỏ hiệu ứng trình xử lý vảy cá trước chiết gelatin trình tinh sau chiết Dịch gelatin lỏng chủ yếu protein nguồn gốc collagen có lẫn tạp chất khơng đáng kể Một số nghiên cứu trước đây, gelatin chiết xuất từ da cá basa Việt Nam, cá măng Volga [23][24] vảy cá nước [29] cho độ cao Độ nhớt Độ nhớt thông số quan trọng việc đánh giá chất lượng gelatin Theo kết nghiên cứu bảng cho thấy gelatin từ vảy cá tráp vây vàng có độ nhớt cao so với loài cá khác nghiên cứu trước [28][41][59] Với giá trị này, gelatin ứng dụng cơng nghiệp dược để làm viên nang cứng mềm Tính trương phồng gelatin H nh 3.6 Độ trương phồng gelatin Gelatin có khả trương phồng nước lạnh, nhiên trương phồng có giới hạn Sự trương phồng xảy 35-40 phút, nhanh 15-20 phút đầu sau xảy chậm dần (Hình 3.6) Q trình trương phồng hợp chất cao phân tử nhờ solvat hóa, thể tích tồn hệ co ngót phân tử dung mơi xếp có trật tự lớp solvat, sau hợp chất cao phân tử trương nở mạnh nhờ khuếch tán chiều dung môi vào pha cao phân tử Độ trương phồng mẫu gelatin thời gian 40 phút đạt 365% Tính trương phồng gelatin có ý nghĩa q trình sản xuất phim ảnh hòa tan bao nhộng dược phẩm [60] KẾT LUẬN Trong khuôn khổ luận văn này, thực nội dung mục tiêu đề ra: đưa quy trình thu nhận gelatin từ vảy cá tráp vây vàng, đánh giá thành phần hóa học tính chất lý hóa sản phẩm Vảy cá tráp vây vàng chứa hàm lượng lớn protein (32,37%), xem nguồn ngun liệu triển vọng để sản xuất gelatin Sơ đồ quy trình thu nhận gelatin từ vảy cá tráp vây vàng bao gồm giai đoạn sau: Rã đơng, cắt nhỏ, xử lý với enzym, chiết gelatin lỏng, tinh gelatin lỏng thô, cô đặc, sấy khô Điều kiện hợp lý để xử lý vảy cá với enzym alcalase sau: pH 9,0-10,0; nhiệt độ 40°С, tỷ lệ enzym/cơ chất 1%, tỷ lệ nước cất/vảy cá 4:1 Điều kiện thích hợp để trích ly collagen nước cất: pH 4,0±0,2, nhiệt độ 60°С, tỷ lệ nước cất/vảy cá 2:1 (ở hai lần chiết), thời gian chiết giờ/lần Hiệu suất thu nhận gelatin đạt 270g sản phẩm/2kg nguyên liệu, đạt 13,5% Gelatin thành phẩm chứa 1,52% muối khoáng, 7,44% độ ẩm khơng chứa lipit, 90,61% protein có loại axit amin không thay (13,9%) Kết đánh giá thành phần đặc tính lý hóa gelatin cho thấy sản phẩm gelatin thu nhận từ vảy cá tráp vây vàng có chất lượng tốt, đáp ứng yêu cầu Dược điển Việt Nam, có khả ứng dụng chế biến thực phẩm y dược Những nghiên cứu sâu tính chất lý hóa, tính chất chức gelatin ứng dụng gelatin lĩnh vực công nghiệp thực phẩm công nghiệp dược thực nghiên cứu KIẾN NGHỊ Đề tài cần nghiên cứu mức độ sâu tính chất lý hóa, tính chất chức gelatin khả ứng dụng sản phẩm lĩnh vực cụ thể ngành công nghiệp thực phẩm công nghiệp dược TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Cao Thị Huệ, Nguyễn Thị Minh Hằng, Lê Nguyễn Thành, Nguyễn Văn Hùng, Razymovskaya R.G (2014) Nghiên cứu thu nhận gelatin từ vảy cá mối thường Saurida tumbil (Bloch, 1975) phương pháp hóa học Tuyển tập Hội nghị Khoa học toàn quốc Sinh học biển Phát triển bền vững lần thứ NXB Khoa học Công nghệ, Tr 325-327 Cao Thị Huệ, Nguyễn Thị Minh Hằng, Lê Nguyễn Thành, Nguyễn Văn Hùng, Razumovskaya R.G (2014) Nghiên cứu thu nhận gelatin từ vảy cá mối thường (Saurida Tumbil Bloch) phương pháp hóa học Tuyển tập Hội nghị KH toàn quốc Sinh học biển Phát triển bền vững lần thứ II NXB Khoa học Công nghệ, 642-649 Cao Thi Huệ, Vũ Thị Ngọc Thúy, Trần Thị Phương Liên Một số tính chất lý hóa gelatin thu nhận từ vảy cá tráp vây vàng Tạp chí khoa học trẻ, số (143), 2017, 119-122 (Tiếng Nga) Dược điển Việt Nam IV (2009) Nhà xuất Hà Nội, Bộ Y tế, 1492 tr ĐLVN 139-2004 - Nhớt Kế Mao Quản Thủy Tinh Đo Độ Nhớt Động Học - Quy Trình Kiểm Định Hiện trạng thủy sản Việt Nam http://www2.hcmuaf.edu.vn/data/nvantu/file/B%C3%A0i%20gi%E1%B A%A3ng%20TSDC/TSDC%202- Hien%20trang%20Thuy%20san %20Viet%20Nam.pdf) Mạc Xn Hòa, Trần Bích Lam (2012) Tối ưu hóa quy trình thu nhận protein hydrolysates có hoạt tính liên kết canxi từ phế phẩm cá tra (Pang asiidae) Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nơng thơn, (8) Một số lồi cá biển có giá trị kinh tế Việt Nam http://s1.downloadmienphi.net/file/downloadfile8/293/1322754.pdf Nguyễn Đỗ Quỳnh Nguyễn Lê Anh Đào, 2015, Nghiên cứu sản xuất Gelatin từ da cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) theo quy trình mới, Tạp chí khoa học trường đại học Cần Thơ, 40, (1) 47-52) 10 Nguyễn Thị Mỹ Hương (2012) Sản xuất sản phẩm thủy phân protein từ đầu cá ngừ vây vàng protease thương mại Tạp chí Khoa học – Cơng nghệ Thủy sản, 2, 25-30 11 TNCTVV Tiềm cá tráp vây vàng, http://thuysanvietnam.com.vn/tiem-nang-ca-trap-vay-vang-article5740.tsvn, truy cập ngày 20/8/2016) 12 Thái Thanh Dương (2007) Các loài cá thường gặp Việt Nam Hà Nội, NXB Bộ Thủy sản 13 Thuysanvietnam.com 14 Trần Duy Phong (2006), Nghiên cứu hồn thiện quy trình thu nhận gelatin từ da cá Basa, Đồ án tốt nghiệp, Trường Đại Học Nha Trang, Nha Trang 15 Trần Thị Huyền cs (2012) Tách chiết collagen từ da cá tra (Pangasius hypophthamus) phương pháp hóa học Tạp chí Khoa học - Công nghệ Thủy sản, 2, 31-36 16 Vũ Trần Tùng (2005), Nghiên cứu thu nhận gelatin từ da cá Basa, đồ án tốt nghiệp, trường Đại Học Thủy Sản, Nha Trang 17 http://vasep.com.vn/1192/OneContent/tong-quan-nganh.htm Tài liệu nước 18 Andrusenko, P I (1988) Low-waste and non-waste technology in fish product processing Moscow, Publishing house "Food Industry", 112 p (in Russian) 19 Antipova L V., Glotov I A., Rogov I A (2004) Methods of analysis of meat and meat products Moscow, Kolos, 571 tr 20 AOAC (2000) Official methods of analysis Arlington: Association of Official Analytical Chemists Inc 21 Arnesen J A., & Gildberg, A (2007) Extraction and characterisation of gelatine from Atlantic salmon (Salmo salar) skin Bioresource Technology, 98, 53-57 22 Bae I., Osatomi K., Yoshida A., Osako K., Yamaguchi A., & Hara K (2008) Biochemical properties of acid-soluble collagens extracted from the skins of underutilised fishes Food Chemistry, 108, 49-54 23 Cao Thi Hue (2012) Preparation of natural amendment production from fish skin PhD dissertation summary VNIRO, Moscow, Russia, 24 p 24 Cao Thi Hue, Dyachenko E P Patent Russia 2487152 (2012) Method of producing gelatin 25 Cao Thi Hue, Nguyen Thi Minh Hang, Karapun M.Yu (2016) Fish scale as source of edible gelatin Journal of young scientist, 23 (127), 113-115 (in Russian) 26 Cao Thi Hue, Nguyen Thi Minh Hang, Le Nguyen Thanh, & Alekseeva E.I., Nguyen Van Hung (2014) Study on preparation and characterization of protein hydrolysate from amaranth seed using a commercial protease Vietnam journal of Science and Technology, 53(2E), 1-8 27 Cao Thi Hue, Razumovskaya R G., Nguyen Van Hung (2012) Patent Russia 2457229 Method of producing gelatin 28 Dinỗer M., Aỗay ệ., Sargin H., & Bayram H (2015) Functional properties of gelatin recovered from scales of farmed sea bass (Dicentrarchus labrax) Turkish Journal of Veterinary & Animal Sciences, 39, 102-109 29 Do Le Huu Nam (2012) Preparation of gelatin from collagen-containing fish materials using enzymes PhD dissertation summary Varonhez, Russia, 24 p (in Russian) 30 Dzhafarov A F Gelatin production Moscow, Russia, Publishing House “AgroIndustry”, 1990, 284 p 31 Gelatin Russian National Standards (GOST 11293-89) 32 GME (2008) Standard methods for the testing of edible gelatin Gelatin Monograph Gelatin Manufacturers of Europe 33 GMIA (2002) Gelatin Manufacturers Institute of America, http://www.gelatin-gmia.com/images/GMIA_Gelatin_Manual_2012.pdf 34 Gómez-Guillen M C (2002) Extraction of gelatin from skins by high pressure treatment Food Hydrocolloids, 19 (5), 923-928 35 Gómez-Guillén M C., & Montero M P (2001) Extraction of gelatin from megrim (Lepidorhombus bosci) skins with several organic acids Journal of Food Science, 66(2), 213-216 36 Gómez-Guillén M C., Giménez B., López-Caballero M E., & Montero M P (2011) Functional and bioactive properties of collagen and gelatin from alternative sources: A review Food Hydrocolloids, 25(8), 18131827 37 Gómez-Guillén M C., Turnay J., Fernández-D az M D., Ulmo N., Lizarbe M A., & Montero P (2002) Structural and physical properties of gelatin extracted from different marine species: A comparative study Food Hydrocolloids, 16, 25-34 38 Gudmundsson M (2002) Rheological properties of fish gelatins Journal of Food Science, 67, 2172-2176 39 Gudmundsson M., & Hafsteinsson H (1997) Gelatin from cod skins as affected by chemical treatments Journal of Food Science, 62, 37-39 40 Ikoma T., Kobayashi H., Tanaka J., Walsh D., & Mann S (2003) Physical properties of type I collagen extracted from fish scales of Pagrus major and Oreochromis niloticas Int J Biol Macromol., 32, 199-204 41 Jamilah B., & Harvinder K G (2002) Properties of gelatins from skins of fish-black tilapia (Oreochromis mossambicus) and red tilapia (Oreochromis nilotica) Food Chemistry, 77, 81-84 42 Jung W K et al (2004) Preparation of hoki (Johnius belengerii) bone oligophosphopeptide with a high affinity to calcium by carnivorous intestine crude protease Food Chemistry, 91, 333-340 43 Karim A A., & Bhat R (2009) Fish gelatin: Properties, challenges, and prospects as an alternative to mammalian gelatins Food Hydrocolloids, 23, 563-576 44 Le Thi Minh Thuy, Okazaki E., & Osako K (2014) Isolation and characterization of acid-soluble collagen from the scales of marine fishes from Japan and Vietnam Food Chemistry, 149, 264-270 45 Le Thi Thu Huong et al (2012) Optimization of conditions for extraction of collagen from the skin of Pangasius hypophthalmus by nd response surface methodology The International Engineering Symposium, Japan 46 Morimura S., Nagata H., Uemura Y., Fahmi A., Shigematsu T., & Kida K (2002) Development of an effective process for utilization of collagen from livestock and fish waste Process Biochemistry, 37(12), 1403-1412 47 Nomura Y., Sakai H., Ishii Y., & Shirai K (1996) Preparation and some properties of type I collagen from fish scales Bioscience, Biotechnology, Biochemitry, 60, 2092-2094 48 Ogawa M., Portier R J., Moody M W., Bell J., Schexnayder M A., & Losso J N (2004) Biochemical properties of bone and scale collagens isolated from the subtropical fish black drum (Pogonia cromis) and sheepshead seabream (Archosargus probatocephalus) Food Chemistry, 88, 495-501 49 Patent FR 2787968 (2000) Process for preparing fish gelatin 50 Patent RU 2068866 (1996) Dolganova N.V et al Method of producing gelatin 51 Patent US 20050124034 Method for producing fish gelatin peptide 52 Pollack S V (1990) Silicone, fibrel, and collagen implantation for facial lines and wrinkles Journal of Dermatology and Surgical Oncology, 16, 957-961 53 Rao K P (1995) Recent developments of collagenbased materials for medical applications and drug delivery systems Journal of Biomaterials Science, Polimer Edition, 7, 623-645 54 Razumovskaya R G., Cao Thi Hue, Nguyen Van Hung (2011) Patent № 2457229 Method of producing gelatin 55 Saddler J M & Horsey P J (1987) The new generation gelatins A review of their history, manufacture and properties Anesthesia, 42, 9981004 56 Shyni K., Hem G S., Ninan G., Mathew S., Joshy C.G., & Lakshmanan P.T (2014) Isolation and characterization of gelatin from the skins of skipjack tuna (Katsuwonus pelamis), dog shark (Scoliodon sorrakowah), and rohu (Labeo rohita) Food Hydrocolloids, 39, 68-76 57 Sinthusamran S., Benjakul S., Hemar Y., & Kishimura H (2017) Characteristics and properties of gelatin from seabass (Lates calcarifer) swim bladder: Impact of extraction temperatures Waste Biomass Valorization: Ahead of Print 58 Telishevskaya L Y (2000) Protein hydrolysate: Preparation, composition and use Moscow, Russia, Publishing House "Food Industry", 295 p (in Russian) 59 Tu Z C., Huang T., Wang H., Sha X M., Shi Y., Huang X Q., Man Z Z., & Li D J (2015) Physico-chemical properties of gelatin from bighead carp (Hypophthalmichthys nobilis) scales by ultrasound-assisted extraction Journal of Food Science and Technology, 52, 2166-2174 60 Veis А Molecular chemistry of gelatin Мoscow, Russia, Publishing house “Food industry”, 1971, 478 p (in Russian) 61 Wang L., An X., Yang F., Xin Z., Zhao L., & Hu Q (2008) Isolation and characterisation of collagens from the skin, scale and bone of deepsea redfish (Sebastes mentella) Food Chemistry, 108, 616-623 62 Yakubova O S (2006) Preparation of gelatin from fish scales PhD dissertation summary Varonhez, Russia, 24 p (in Russian) 63 Yazenkova D S., & Sibizova M E (2012) Fermentation of fish raw materials as one of stages of structure-forming agent manufacture from the bone tissue Vestnik of Astrakhan State Technical University Seria "Fishing Industry", 1, 207-213 (in Russian) 64 Zhang F, Xu S., Wang Z (2011) Pre-treatment optimization and properties of gelatin from freshwater fish scales Food Bioprod Process, 89 (3), 185-193 ... QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Thành phần dinh dưỡng vảy cá tráp vây vàng 31 3.2 Nghiên cứu thu nhận gelatin từ vảy cá tráp vây vàng sử dụng alcalase thương mại 32 3.2.1 Nghiên. .. lớn vảy cá chưa khai thác [13] H nh Cá tráp vây vàng Sparus latus Houttuyn Do lựa chọn thực đề tài: Nghiên cứu thu nhận gelatin từ vảy cá tráp vây vàng Sparus latus Houttuyn sử dụng Alcalase thương. .. thương mại Mục tiêu đề tài Tận dụng nguồn phụ phẩm chế biến cá chưa sử dụng (vẩy cá tráp vây vàng) để thu nhận gelatin chất lượng cao Nghiên cứu thu nhận đánh giá chất lượng gelatin từ vảy cá tráp