Đang tải... (xem toàn văn)
Giới thiệu về bệnh hemophilia a
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC & KĨ THUẬT MÔI TRƯỜNG ĐỀ TÀI TIỂU LUẬN HEMOPHILIA Giáo viên hướng dẫn: Lại Đình Biên TP.HCM, tháng 04 năm 2017 Tên thành viên MỞ ĐẦU Bệnh Hemophilia hay gọi bệnh máu khó đơng Đây bệnh di truyền thiếu hụt hay bất thường chức yếu tố đông máu huyết tương, yếu tố VIII, IX hay XI Bệnh đặc trưng thời gian đông máu kéo dài tăng nguy chảy máu Đặc điểm xuất huyết đám máu bầm da, tụ máu cơ, chảy máu khớp Hemophilia bệnh di truyền lặn liên quan đến giới tính, gen bệnh nằm nhiễm sắc thể X Tỷ lệ mắc nước khác tần suất chung khoảng 30100/1.000.000 dân Trên giới có nhiều nghiên cứu bệnh Hemophilia dự kiến có khoảng 550.000 người bị bệnh Hemophilia vào năm 2020 Hiện nay, Việt Nam có khoảng 6000 bệnh nhân có 30% phát điều trị Có loại Hemophilia, giảm yếu tố VIII gây bệnh hemophilia A, thiếu hụt yếu tố IX gây Hemophilia B bất thường yếu tố XI gây bệnh Hemophilia C Trong Hemophilia A chiếm 80-85%, Hemophilia B chiếm 15-20%, Hemophilia C chiếm tỉ lệ ít, phổ biến chủ yếu người Do Thái với tỉ lệ mắc đồng hợp tử khoảng 1-3‰ người Do Thái Việt Nam quốc gia có tỉ lệ mắc bệnh Hemophillia A cộng đồng cao Theo nghiên cứu Đỗ Trung Phấn cộng năm 1996 tỷ lệ mắc bệnh khoảng 25– 60/1.000.000 người Các nghiên cứu khẳng định dạng đột biến khác gây kiểu hình đặc trưng khác Với tiến kỹ thuật sinh học phân tử, nhà khoa học phân tích DNA người bệnh để xác định xác tổn thương gen gây bệnh Hemophilia A, kiểm soát bệnh tốt nhờ phát người phụ nữ mang gen bệnh tư vấn di truyền trước hôn nhân, tăng hiệu việc phòng ngừa bệnh tật đồng thời nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe cộng đồng Do vậy, đề tài thực với ba mục tiêu: Giới thiệu bệnh Hemophilia A Các nguyên nhân gây bệnh Hemophilia A Các phương pháp điều trị bệnh Hemophilia A CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ BỆNH HEMOPHILIA 1.1.1 Lịch sử nghiên cứu bệnh Hemophilia Từ thời kỳ cổ đại loài người biết đến bệnh máu khó đơng, nhiên khơng có tên gọi thức cho Bệnh máu khó đơng nhận thấy có tính di truyền hàng trăm năm qua hệ gia đình Vào năm 1880 người ta phát bệnh máu khó đơng di truyền liên kết với giới tính, nhà khoa học nhận thấy có nam giới mắc bệnh khơng có khả truyền bệnh cho trai, người mẹ mang gen bệnh truyền cho trai Bệnh Hemoliphia biết đến nhờ bệnh hồng gia nữ hồng Anh Victoria (1838-1901) mang gen bệnh truyền bệnh cho nhiều Hoàng Gia khác Xu hướng chảy máu bệnh ưa chả máu ban đầu cho thành mạch yếu, dễ bị vỡ tổn thương Vào năm 30 kỉ XX, bất thường tiểu cầu cho nguyên nhân có khả gây bệnh ưa chảy máu 1.1.2 Khái niệm Hemophilia rối loạn chảy máu làm chậm q trình đơng máu Những người có bị bệnh thường có tình trạng chảy máu kéo dài rỉ sau chấn thương, phẫu thuật, nhổ Trong trường hợp nặng bệnh hemophilia, chảy máu liên tục xảy sau chấn thương nhẹ chí trường hợp khơng chấn thương (chảy máu tự phát) Biến chứng nghiêm trọng dẫn đến chảy máu vào khớp, bắp, não, quan nội tạng khác Hình thức nhẹ bệnh hemophilia không thiết liên quan đến chảy máu tự phát, tình trạng khơng trở nên rõ ràng chảy máu bất thường xảy sau phẫu thuật chấn thương nghiêm trọng Hình 1: Qúa trình đơng máu bị suy giảm bệnh Hemophilia 1.1.3 Các loại bệnh Hemophilia Các loại bệnh bệnh bệnh Hemophilia A (còn gọi thiếu máu cổ điển thiếu yếu tố VIII) bệnh Hemophilia B (còn gọi bệnh Giáng sinh thiếu hụt yếu tố IX) Mặc dù hai loại có dấu hiệu triệu chứng giống nguyên nhân chúng đột biến gen khác Những người có biểu bệnh Hemophilia B bất thường , biết đến chứng bệnh Hemophilia B Leyden, trải qua đợt chảy máu mức trẻ em có vấn đề chảy máu sau tuổi dậy 1.1.4 Đại cương đơng máu • Khái niệm Đơng máu trình máu chuyển từ thể lỏng thành thể đặc, chuyển fibrinogen thành fibrin không hòa tan Các sợi fibrin trùng hợp với tạo mạng lưới fibrin giam giữ thành phần máu máu đông lại Cục máu đông hình thành có tác dụng bịt kín chỗ tổn thương Bình thường máu mơ có chất gây đông chất chống đông, chất gây đông dạng tiền chất không hoạt động nên máu không đông Khi mạch máu bị tổn thương hoạt hóa yếu tố đơng máu làm cho máu đơng lại • Các yếu tố đơng máu Hội nghị quốc tế năm 1959 đông máu, quy định tên gọi yếu tố đông máu chữ số La mã Có 12 yếu tố đơng máu: - Yếu tố I: Fibrinogen - Yếu tố II: Prothrombin - Yếu tố III: Prothrombin mô yếu tố mô - Yếu tố IV: Ion canxi - Yếu tố V: Proaccelerin (yếu tố không ổn định) - Yếu tố VII: Proconvectin (yếu tố ổn định) - Yếu tố VIII: Yếu tố chống Hemophilia A - Yếu tố IX: Yếu tố chống Hemophilia B (yếu tố Christmas) - Yếu tố X: Yếu tố Stuart - Yếu tố XI: Yếu tố tiền thromboplastin huyết tƣơng (Yếu tố chống Hemophilia C) - Yếu tố XII: Yếu tố Hageman- yếu tố chống Hemophilia D Gần đây, phát hai protein huyết tương xếp vào nhóm yếu tố đông máu huyết tương: - Prekallikrein - Kininogen trọng lượng phân tử cao Q trình đơng máu huyết tương kết hợp hai đường đông máu nội sinh đông máu ngoại sinh Các hoạt động enzym chuỗi phản ứng nối tiếp dẫn tới hình thành thrombin chuyển fibrinogen thành fibrin, yếu tố VIII tham gia nhờ đồng yếu tố Hình 2: Sơ đồ đơng máu 1.2 BỆNH HỌC VỀ HEMOPHILIA A 1.2.1 Khái niệm Bệnh Hemophilia A bệnh rối loạn đông máu di truyền, máu người bị bệnh khơng đông cách, khiếm khuyết gen tổng hợp yếu tố VIII dẫn đến giảm nồng độ hoạt tính yếu tố VIII máu.Tùy thuộc vào lượng VIII bị mất, bệnh Hemophilia A phân loại nhẹ, trung bình nặng Khoảng số 10 người mắc chứng bệnh Hemophilia A có biểu nghiêm trọng Hình 3: So sánh đơng máu người bình thường người bị bệnh 1.2.2 1.2.2.1 Nguyên nhân gây bệnh Hemophilia A Do tính di truyền Hemophilia A bệnh di truyền lặn liên kết với giới tính X khơng có alen tương ứng NST Y Tỷ lệ mắc bệnh 1/5000 nam giới giới Đa số trường hợp Hemophilia A có tiền sử gia đình mắc bệnh Khoảng 30% đột biến phát sinh trình tạo giao tử bố mẹ.Tỉ lệ đột biến gây bệnh Hemophilia xảy x 10 gen giao tử hệ Tỷ lệ đột biến xảy tế bào mầm sinh dục nam cao 3,6 lần so với tế bào mầm sinh dục nữ Gần người ta chứng minh tần suất đột biến theo giới tùy thuộc vào loại đột biến Tỷ lệ đảo đoạn intron 22 tế bào mầm sinh dục nam nhiều 15 lần tế bào mầm sinh dục nữ Đối với đột biến điểm tế bào sinh dục nam cao gấp – 10 lần, đột biến đoạn cao lần so với tế bào mầm sinh dục nữ Hiện tượng giải thích cho vắng mặt nhiễm sắc thể thứ hai tạo điều kiện thuận lợi cho tượng đảo đoạn trình phân bào giảm nhiễm nam Hemophilia A bệnh rối loạn đông máu di truyền hay gặp Theo thống kê tổ chức Hemophilia giới, có khoảng 250.000 bệnh nhân mắc bệnh Hemophilia A có khoảng 50.000 điều trị đặc hiệu • Sơ đồ mắc bệnh máu khó đơng chung: Hình 4: Sơ đồ khả truyền Hemophilia bố bị bệnh, mẹ bình thường Trường hợp gặp: bố bị Hemophilia, mẹ người mang gen bệnh Trường hợp sinh gái bị Hemophilia mang nhiễm sắc thể X bệnh Hình 5: Sơ đồ khả truyền Hemophilia mẹ mang gen bệnh Trường hợp bố bị Hemophilia mẹ bình thường sinh tất gái người mang gen bệnh tất trai khơng bị Hemophilia (sơ đồ) Tất gái người mang gen bệnh Tất trai bình thường khơng bị hemophilia 1.2.2.2 Thiếu yếu tố FVIII Khi bị chảy máu thể xảy hàng loạt phản ứng, giúp máu đơng lại Q trình gọi thác đơng máu Nó liên quan đến protein đặc biệt, gọi đông máu yếu tố đông máu Nếu thiếu yếu tố nhiều chức chúng khơng hoạt động bình thường, dẫn đến bệnh Hemophilia Hemophilia A rối loạn chảy máu di truyền thiếu máu đông máu yếu tố FVIII Nếu khơng có đủ yếu tố FVIII, máu đông máu cách để kiểm sốt chảy máu 1.2.2.3 Do đột biến gen Nhiều mơ hình đột biến khác chịu trách nhiệm cho Hemophilia A thể nặng, nhiên dạng đột biến thường gặp đảo đoạn intron 22 intron gen F8 • Đảo đoạn nhiễm sắc thể (NST): đảo đoạn intron 22 xảy tái tổ hợp vùng int22h1 (vùng lặp lại gồm 9,5 kb) thuộc intron 22 với hai vùng đồng nằm telomere vùng int22h2, int22h3, vị trí 400 kb đầu 5’ gen F8 Hiện tượng đảo đoạn dẫn đến đứt gãy gen F8 hậu gây thể bệnh nặng cho bệnh nhân Đột biến chiếm 45-50% bệnh nhân Hemophilia A thể nặng Đảo đoạn intron xảy tương tự, tái tổ hợp vùng int1h1thuộc intron (kích thước 900 bp) nằm vị trí 140 kb đầu 5’ gen F8 với int1h2 nằm gen F8 Đột biến gặp so với đảo đoạn intron 22, chiếm khoảng 1,5% bệnh nhân nặng • Đột biến đoạn chèn đoạn lớn: đột biến đoạn lớn chiếm 2-5% bệnh nhân Hemophilia A thể nặng Có thể exon tồn gen • Đột biến điểm: hầu hết bệnh nhân nặng đột biến thay nucleotid Đột biến vô nghĩa (nonsense) tạo mã kết thúc đột biến nucleotid gây lệch khung dịch mã dẫn đến không tổng hợp tổng hợp protein chức 1.3 CHUẨN ĐỐN BỆNH HEMOPHILIA A 1.3.1 Chuẩn đốn lâm sàng • Tiền sử gia đình có người mắc bệnh • Ở trẻ đặc điểm bật bệnh ưa chảy máu, xảy vào lúc đẻ, thường xuất trẻ tập đi, lúc trẻ xuất nốt điểm tụ máu Một số triệu chứng như: Trong thể xuất huyết nhẹ, chảy máu khó cầm vết thương ví dụ: đứt tay, đứt chân, nhổ răng… Chảy tụ máu khớp chiếm tỷ lệ 70% đến 80% vị trí thường chảy máu với đặc điểm thường tụ máu khớp vận động chịu lực khớp gối, khớp cổ chân, khớp vai Chảy máu niêm mạc biểu như: đái máu, máu, chảy máu chân răng… 10 Ngồi ra, vị trí chảy máu nguy hiểm đe dọa tính mạng chảy máu não, xuất huyết tiêu hóa Chảy máu vị trí xuất tự nhiên sau chấn thương, ví dụ: ngã đập đầu vào vật cứng Chảy máu xảy sau chấn thương tiêm vacxin (Hình 6.1) Tổn thương nhẹ thành mạch nhỏ dẫn đến xuất huyết não mơ mềm (Hình 6.2) dẫn đến biến chứng nghiêm trọng Hình 6.1 Hình 6.2 Hình 6: Hiện tượng trẻ bị mắc bệnh Hemophilia Ở người trưởng thành: xuất huyết đặc trưng bệnh Bệnh nặng triệu chứng xuất huyết xuất sớm Bệnh nhân chảy máu từ 20 – 30 lần/ năm; chảy máu tự phát sau chấn thương nhỏ Chảy máu từ vết cắt vết trầy xước cầm máu tương đối nhanh chóng Tuy nhiên, vấn đề bệnh nhân chảy máu nội tạng hay diện máu ổ khớp dễ dẫn đến viêm màng hoạt dịch cấp tính Các trường hợp chảy máu lặp lặp lại nhiều lần ổ khớp vượt khả loại bỏ xâm nhập đại thực bào dẫn đến màng hoạt dịch bị phá hủy tiến tới hỏng khớp 1.3.2 Chuẩn đoán thể bệnh Hemophilia A theo mức độ yếu tố VIII Bình thường nồng độ FVIII người 200 ng/ml Trường hợp bị bệnh, lượng yếu tố VIII giảm 30% Hemophilia A chia làm ba thể: nặng, trung bình nhẹ Thể nặng: hoạt tính FVIII 1%, bệnh nhân thường bị chảy máu vài lần tháng 11 Thể trung bình: hoạt tính FVIII từ 1-5%, bệnh nhân bị chảy máu sau chấn thương nhẹ Thể nhẹ: hoạt tính FVIII từ 5-30% so với mức bình thường, người bị chảy máu sau phẫu thuật chấn thương nặng, sau động tác mạnh chơi thể thao • Hemophilia mắc phải Cơ chế bệnh sinh: thể người trưởng thành sinh tự kháng thể gây bất hoạt FVIII • Bệnh gặp độ tuổi trung niên, gặp nam nữ Biểu xuất huyết da mơ mềm; đái máu, xuất huyết dày-ruột, xuất huyết hậu sản kéo dài; gặp xuất huyết khớp Xét nghiệm: APTT kéo dài, FVIII thấp 30%, có chất ức chế • FVIII theo thời gian; số lượng tiểu cầu bình thường Giải thích yếu tố xét nghiệm Những rối loạn di truyền khác gây kéo dài APTT: bao gồm giảm yếu tố XI, XII, prekallikrein kininogen trọng lượng phân tử cao, phân biệt dựa vào định lượng yếu tố VIII, IX Bệnh lý lưu hành kháng yếu tố VIII yếu tố IX: số bệnh tự miễn (lupus) APTT kéo dài, nồng độ yếu tố VIII, IX giảm Phân biệt cách trộn huyết tương bệnh nhân với huyết tương người bình thường, APTT khơng cải thiện trường hợp có kháng đơng lưu hành Rối loạn đơng máu tăng tiêu thụ yếu tố đông máu: gặp nam nữ, thường biểu rối loạn đông máu số bệnh khác nhiễm trùng, chấn thương nặng, giảm yếu tố VIII, yếu tố khác giảm tăng tiêu thụ 1.3.3 Chuẩn đoán thể bệnh Hemophilia A theo bệnh học phân tử • Bệnh học phân tử Hemophilia A thể nặng Nhiều mơ hình đột biến khác chịu trách nhiệm cho Hemophilia A thể nặng, nhiên dạng đột biến thường gặp đảo đoạn intron 22 intron gen F8 Đảo đoạn nhiễm sắc thể (NST): đảo đoạn intron 22 xảy tái tổ hợp vùng int22h1 (vùng lặp lại gồm 9,5 kb) thuộc intron 22 với hai vùng đồng nằm telomere vùng int22h2, int22h3; vị trí 400 kb đầu 5’ gen F8 Hiện tượng đảo đoạn dẫn đến đứt gãy gen F8 hậu gây thể bệnh nặng cho bệnh nhân Đột biến chiếm 45-50% bệnh 12 nhân Hemophilia A thể nặng Đảo đoạn intron xảy tương tự, tái tổ hợp vùng int1h1thuộc intron (kích thước 900 bp) nằm vị trí 140 kb đầu 5’ gen F8 với int1h2 nằm gen F8 Đột biến gặp so với đảo đoạn intron 22, chiếm khoảng 1,5% bệnh nhân nặng Đột biến đoạn chèn đoạn lớn: đột biến đoạn lớn chiếm 2-5% bệnh nhân Hemophilia A thể nặng Có thể exon toàn gen Cơ chế phân tử dạng đột biến kết luận trình tái tổ hợp tượng lặp lại Alu Đột biến chèn đoạn lớn tượng Alu làm đứt gãy gen F8 gây Hemophilia A thể nặng Đột biến điểm: hầu hết bệnh nhân nặng đột biến thay nucleotid Đột biến vô nghĩa (nonsense) tạo mã kết thúc đột biến nucleotid gây lệch khung dịch mã dẫn đến khơng tổng hợp tổng hợp protein khơng có chức Đột biến vị trí nối intron exon tác giả công bố Mất đoạn chèn đoạn nhỏ thường thấy Hemophilia A thể nặng, thay đổi từ 1-55 nucleotid Phổ biến chèn nucleotid A vào exon14, thường xảy vùng từ c.3637 đến c.4379 • Bệnh học phân tử hemophilia A thể vừa nhẹ Đột biến điểm gây lệch khung dịch mã đột biến thay nucleotid (missense) chế gây bệnh Hemophilia A thể vừa nhẹ, chiếm 90-95% bệnh nhân Đột biến vị trí nối vùng promoter gen phát số bệnh nhân Hiện tượng lặp đoạn exon 13 mô tả bệnh nhân hemophilia A thể nhẹ 1.3.4 Chẩn đoán trước sinh • Chẩn đốn trước sinh định cân nhắc đình thai nghén • thai bị mắc Hemophilia A Các phương pháp chẩn đoán trước sinh: + Lấy mẫu lông thai sinh thiết phương pháp chẩn đốn trước sinh thực vào tuần thứ 10-11 thai kì + Phương pháp chọc ối tiến hành vào tuần thứ 12-15 thai kì + Phương pháp lấy mẫu máu thai nhi qua tĩnh mạch rốn để định lượng yếu tố VIII tiến hành vào tuần thứ 18 • Tất phương pháp can thiệp để chẩn đốn trước sinh gây chảy máu cho mẹ thai Vì cần định lượng yếu tố VIII cho thai phụ trước 13 tiến hành thủ thuật Nếu nồng độ 50% cần bổ sung yếu tố dự phòng chảy máu cho mẹ • Phải sống chung đời với bệnh, thường đau đớn đơi đe dọa tính mạng làm cho bệnh nhân khó khăn mặt tài chính, hạn chế số lĩnh vực sống Chính Hemophilia A cần sàng lọc trước sinh 1.4 YẾU TỐ ĐÔNG MÁU FVIII 1.4.1 Vị trí cấu trúc gen FVIII - Vị trí: Gen quy định tổng hợp FVIII nằm vị trí Xq28 NST giới tính X - Vị trí phân tử : 154835788 đến 155022723 cặp nhiễm sắc thể X Hình 7: Vị trí gen FVIII 1.4.2 Chức gen FVIII Yếu tố FVIII glycoprotein lớn có chức đồng yếu tố cần thiết cho kích hoạt phân giải protein yếu tố X kích hoạt yếu tố IX đường đông máu nội sinh Các yếu tố đông máu VIII tế bào gan tạo Protein lưu thông máu dạng không hoạt động ràng buộc với phân tử gọi yếu tố von Willebrand, bị tổn thương máu chảy Để đối phó với chấn thương, yếu tố đơng máu VIII kích hoạt tách từ yếu tố von Willebrand Kích hoạt protein (đôi viết yếu tố đông máu VIIIa) thêm yếu tố đông máu gọi yếu tố IX tương tác gây loạt phản ứng hóa chất bổ sung, hình thành cục máu đơng FVIII bình thường có hoạt tính: điều chỉnh thời gian đơng huyết tương đặc trưng VIII: C; bị tủa kháng thể dị loại đặc biệt, hoạt tính mang tên VIII 14 - R: Ag (Factor VIII Related Antigen: kháng nguyên liên quan yếu tố VIII); điều chỉnh thời gian chảy máu người bị Willerbrand gọi hoạt tính VIII – R: WF (Factor VIII Related Willebrand) Càng ngày yếu tố VIII coi chất trung gian quan trọng phản ứng tiểu cầu thành mạch, có vai trò gây xơ vữa động mạch Hoạt tính VIII: C ứng với yếu tố gọi kháng Hemophilia A yếu tố kiểm soát gen nằm thể nhiễm sắc X Đây yếu tố thu hoạch tủa lạnh, giúp vào việc hoạt hóa yếu tố X yếu tố IXa đông máu nội sinh, yếu tố bị trung hòa kháng thể lưu hành có số người bị hemophilia A Hoạt tính VIII – R: Ag tiêm FVIII tinh khiết vào người Hemophilia A tạo kháng thể chống VII: C Ở người bị bệnh Hemophilia A kháng nguyên VIII – R: Ag bình thường, hoạt tính VIII: C, VIII – R: Ag khơng có cấu trúc protein Người ta cho tổng hợp VIII – R: Ag kiểm soát gen nằm thể nhiễm sắc thường Hoạt tính Von – Willebrand hay yếu tố VIII – R: WF yếu tố huyết tương mà thiếu coi thiếu hụt tiểu cầu thành mạch Cả yếu tố tạo thành phức hệ đại phân tử, dùng enzym để phân lập tách thành đơn vị có hoạt tính VIII – R: Ag, VIII – R: WF VIII : C lượng Đối với Hemophilia A người ta biết người bệnh vị trí kháng ngun yếu tố VIII bình thường phản ứng với kháng thể vị trí hoạt tính tổng hợp khơng bình thường, acid amin thiếu bị thay bị ức chế 1.5 PHƯƠNG PHÁP ĐIỀU TRỊ BỆNH HEMOPHILIA A 1.5.1 Liệu pháp thay yếu tố Cách điều trị ưa thích cho bệnh Hemophilia liệu pháp thay yếu tố Hemophilia điều trị cách tiêm yếu tố protein bị thiếu vào tĩnh mạch người bị bệnh Việc tiêm làm cho yếu tố có sẵn máu thể kích hoạt để tiếp tục dòng chảy đơng máu ngăn chặn chảy máu 15 Hình 8: Liệu pháp thay giúp làm ngừng cản trở chạy máu Có hai loại sản phẩm sử dụng để điều trị bệnh hemophilia ngày nay: Sản phẩm có nguồn gốc từ Plasma Đây yếu tố cô đặc tạo từ máu người Máu có chứa Plasma, chứa protein, kháng thể, albumin yếu tố đơng máu Các sản phẩm có nguồn gốc từ Plasma tạo với huyết tương hiến máu sàng lọc cẩn thận Trong trình sản xuất, protein chiết xuất từ Plasma qua loạt bước khử trùng mở rộng để loại bỏ virut chất gây nhiễm khác Hình 9: Hình ảnh tiêm yếu tố protein bị thiếu vào tĩnh mạch người bị bệnh 16 Nồng độ yếu tố tái tổ hợp Các sản phẩm sản xuất cách sử dụng tế bào chuột Hamster Các nhà sản xuất tiêm tế bào chuột hamster với gen nhân tố để tạo lượng lớn protein nhân tố Vì protein chiết xuất từ tế bào động vật, chúng không chứa vi rút người Một số sản phẩm tập trung vào yếu tố ổn định albumin người, số khác lại ổn định sucrose 1.5.2 Phương pháp phát dạng đột biến • Phương pháp PCR phát đột biến exon PCR phương pháp kinh điển đơn giản để chẩn đoán bệnh di truyền Phản ứng PCR sử dụng cặp mồi đặc hiệu để khuếch đại đoạn gen đặc hiệu từ phân tử DNA tế bào Ứng dụng chẩn đoán bệnh Hemophilia A: Các tác giả thiết kế sử dụng cặp mồi đặc hiệu để khuếch đại exon gen F8 phản ứng PCR, sau điện di gel agarose, mẫu bệnh nhân tiến hành song song với mẫu đối chứng Nếu mẫu đối chứng xuất vạch DNA tương ứng với kích thước exon khuếch đại, mẫu bệnh nhân không xuất vạch bệnh nhân bị đột biến đoạn exon Nếu mẫu lên đầy đủ vạch DNA sản phẩm PCR tinh để chuẩn bị cho bước giải trình tự tồn exon 1.5.3 Liệu pháp gen số phương pháp khác Các nhà nghiên cứu nghiên cứu phương pháp để thay yếu tố hoạt động tốt gen VIII vào tế bào người bị bệnh Hemophilia A để máu họ đông máu tốt Hy vọng liệu pháp gen dẫn đến bệnh nhân có đợt chảy máu Liệu pháp gen giúp người mắc bệnh Hemophilia A bắt đầu sản sinh yếu tố đông máu riêng họ, làm giảm nhu cầu giảm số lần truyền hàng tuần Với tiến này, tồn tiềm cho người bị bệnh Hemophilia A nặng có triệu chứng nhẹ đáng kể Một số thử nghiệm nghiên cứu liệu pháp gen thực người với kết khác Tương lai liệu pháp gien bệnh hemophilia tiếp tục mức vừa phải Có nhiều dự án tiếp tục mơ hình động vật Cải thiện biểu lâu 17 dài gen đòi hỏi phát triển vectơ tốt (các phương tiện truyền gen vào tế bào Một số công nghệ thực để điều trị bệnh hemophilia Những công nghệ này, sử dụng để tiêu diệt virut máu, thành công việc loại bỏ nguy nhiễm HIV viêm gan C từ yếu tố đông máu ngày Công ty dược phẩm tiếp tục điều tra lựa chọn thay sản phẩm sản xuất gen có nguồn gốc từ khơng có sản phẩm máu người Sản phẩm phát triển với độ tinh khiết cao so với trước TÀI LIỆU THAM KHẢO Moss P, Hoffbrand AV, Pettit JE, (2006), Coagulation Disorders, Essential Haematology Đỗ Trung Phấn cộng sự, (1996), Chăm sóc bệnh nhân Hemophilia, Hội thảo thành lập Hội Hemophilia, Viện Huyết học truyền máu Hà Nội Pettit JE, Hoffbrand AV, (1993), Coagulation Disorder, Essential Hematology third Edi Anne Goodeve, (2008), Molecular Genetic Testing of Hemophilia A Thrombosis and hemostasis Phạm Quang Vinh, (2006), Bệnh Hemophilia A, Bài giảng Huyết học -truyền máu, Nhà xuất y học Nguyễn Anh Trí, (2000), Sinh lý q trình đơng máu, Đơng máu ứng dụng lâm sàng, Nhà xuất y học Dahlback, (2005), Blood coagulation and its regulation by anticoagulant pathways: genetic pathogenesis of bleeding and thrombotic diseases, J Intern Med Linas A, Mulder K, (2004), The target joint, Haemophilia Joan CG, Jay EM, Robert RM, (1995), Preparation and clinical use of plasma and plasma fractions, William hematology 10 Rusel L, (2001), Transfusion of cryoprecipitate - Between risk and benefit, Transfusion - Clinique Biologique 11 Kaan Kavakli, (2001), Treatment of inhibitor patients in developing countries, Comprehensive Haemophilia care in developing counties 12 https://www.hemophilia.org/ (17/03/2017) 13 http://emedicine.medscape.com/article/779434-overview (11/03/2016) 18 14 http://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/hemophilia/basics/definition/con- 20029824 (26/9/2014) 15 https://ghr.nlm.nih.gov/condition/hemophilia 16 http://www.hemophiliafed.org/bleeding-disorders/hemophilia/treatment 17 https://medlineplus.gov/hemophilia.html 19 ... gây bệnh Hemophilia A Do tính di truyền Hemophilia A bệnh di truyền lặn liên kết với giới tính X khơng có alen tương ứng NST Y Tỷ lệ mắc bệnh 1/5000 nam giới giới a số trường hợp Hemophilia A. .. joint, Haemophilia Joan CG, Jay EM, Robert RM, (1995), Preparation and clinical use of plasma and plasma fractions, William hematology 10 Rusel L, (2001), Transfusion of cryoprecipitate - Between... học Dahlback, (2005), Blood coagulation and its regulation by anticoagulant pathways: genetic pathogenesis of bleeding and thrombotic diseases, J Intern Med Linas A, Mulder K, (2004), The target