Đang tải... (xem toàn văn)
Báo cáo thí nghiệm sinh học đại cương, đại học bk hcm, đại học bách khoa, đinh quốc chín, ân là chín, thí nghiệm sinh học đại cương, làm bể 1 cái cốc thủy tinh mà không đền Báo cáo thí nghiệm sinh học đại cương đh bk đại học bách khoađại học bách khoađại học bách khoađại học bách khoa
ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG Báo cáo thí nghiệm GVHD: Nguyễn Minh Thiện Hoàng Đức Tuấn Anh – MSSV: 1610041 Nhóm – Lớp: DT03 BÀI KÍNH HIỂN VI I VẼ HÌNH, CHÚ THÍCH ĐẦY ĐỦ CÁC BỘ PHẬN CỦA KÍNH HIỂN VI MƠ TẢ CHỨC NĂNG CỦA TỪNG BỘ PHẬN Cấu tạo chức năng: Kính hiển vi gồm có phận cấu thành cụ thể * Các phận quang học : - Vật kính: Quyết định khả nhìn rõ mẫu vật Trên thị kính có khắc độ phóng đại vật kính (x4, x10, x40 x100) Vật kính x100 thường sử dụng với đầu soi kính - Thị kính: Gắn đầu ống kính Thị kính có cấu tạo đơn giản vật kính Trên thị kính có độ phóng đại x5, x6, x10 x15 - Bộ phận tụ quang: Được sử dụng để thu thập tập trung ánh sáng từ đèn chiếu sáng lên mẫu vật Nó nằm bàn sa trượt, thường kết hợp với màng chắn sáng - Nguồn sáng: Thường đèn gương, nhằm tạo ánh sáng để chiếu sáng mẫu vật * Các phận học: - Thân kính: Gắn với phần thân đế nâng đỡ đầu kính hiển vi - Bàn sa trượt: Là nơi đặt mẫu vật cần quan sát - Ốc thứ cấp, vi cấp: cho phép điều chỉnh độ cao mẫu vật để lấy nét trình tạo ảnh - Núm dịch chuyển bàn sa trượt: Cho phép dịch chuyển mẫu vật theo chiều ngang để quan sát phần khác theo ý muốn - Nút chỉnh cường độ sáng : Điều chỉnh cường độ sáng nguồn sáng - Núm điều chỉnh tụ quang: Di chuyển tụ quang lên xuống II VẼ HÌNH, CHÚ THÍCH VÀ MÔ TẢ ĐẶC ĐIỂM CỦA TỪNG LOẠI TẾ BÀO QUAN SÁT ĐƯỢC LƯU Ý: CẦN CHÚ THÍCH CÁC THÀNH PHẦN CỦA TẾ BÀO (VÁCH, MÀNG NGUYÊN SINH CHẤT, NGUYÊN SINH CHẤT, NHÂN) 2.1 Tế bào động vật: Tế bào mô miệng Thực hành Thí nghiệm tế bào biểu mơ miệng: - Dụng cụ: + Kính hiển vi quang học + Lam kính lamen( kính) + Ống nhỏ giọt + Tăm tre - Tiến hành thí nghiệm: Dùng tărm tre cạo nhẹ lên niêm mạc miệng nhúng đầu tăm vào giọt Lugol lame sau đậy lamelle quan sát kính hiển vi vật kính x40 - Kết thu được: Hình : Tế bào biểu mơ miệng Nhận xét : Qua thí nghiệm tế bào biểu mơ miệng kết cho thấy tế đa giác có hình dạng khác xếp chồng lên Khơng có thành tế bào, khơng có thành xenlulozơ Có trung thể có nhân vị trí gần tế bào 2.2 Tế bào thực vật: Tế bào vảy hành tím tượng co nguyên sinh - Dụng cụ: + Kính hiển vi quang học + Lam kính lamen( kính) + Dao lam, kính lưỡi mác, ống nhỏ giọt giấy thấm + Nước cất dung dịch muối Nacl 0.8% - Tiến hành thí nghiệm: + Dùng dao lam tách vài mảnh biểu bì vảy củ hành tím lấy phần biểu bì màu tím khơng lấy phần biểu bì màu trắng để tiện cho việc quan sát + Chọn vài mảnh nhỏ hành đặt lên lam nhỏ giọt nước cất sau lấy miếng lamelle đặt lên miếng hành , ý trình đặt lên tránh tượng tạo bọt khí tạo sức ép lớn lên miếng hành để tránh miếng hành bị phá hoại mô tế bào tác dụng thành phần học + Quan sát vật kính hiển vi vật kính x10 x40 - Kết : Hình : Tế bào vảy hành tím nước cất * Vảy tế bào hành giai đoạn co nguyên sinh: - Dùng giấy thấm rút nước lamelle, nhỏ 1-2 giọt Nacl 8% vào cạnh lamelle quan sát kính hiển vi vật kính x 40 - Kết : Hình : Tế bào vảy hành tím dung dịch Nacl 8% * Vảy tế bào hành giai đoạn phản co nguyên sinh: - Dùng giấy thấm rút hết dung dịch Nacl 8% lamelle, nhỏ 1-2 giọt nước cất vào cạnh lamelle quan sát kính hiển vi vật kính x 40 - Kết : Hình : Tế bào vảy hành tím nước cất (phản co nguyên sinh) Nhận xét: - Do tượng thẩm thấu nước nên lúc ban đầu tế bào hành tím gặp nước tế bào bị no nước (trương nước) nên dẫn đến lỗ khí mở làm cho màng tế bào đẩy sát bên với thành tế bào - Khi cho dung dịch muối NaCL 8%, mơi trường bên xem ưu trương so với môi trường bên tế bào, kết nước bị hút từ tế bào ⇒ tế bào bị co lại, gọi co nguyên sinh.(diện tích màu tím nhỏ lại) - Sau dùng giấy thấm muối cho -2 nước cất, mơi trường bên ngồi xem nhược trương so với môi trường bên tế bào, kết nước bị hút vào tế bào ⇒ tế bào phình (nhưng khơng so với lúc ban đầu lúc chưa hút nước muối hết nên tế bào giai đoạn co nguyên sinh), tế bào thực vật có lớp vỏ cellulose bao ngồi, nên phình mức độ định, gọi phản co nguyên sinh 2.3 Vẽ hình, thích mơ tả đặc điểm vi sinh vật (vi nấm) Thực hành Thí nghiệm vi nấm: - Dụng cụ: + Kính hiển vi quang học + Cốc chứa nấm men (men bánh mì) + Lam kính lamen( kính) + Ống nhỏ giọt - Tiến hành thí nghiệm: + Nhỏ giọt canh trường nấm lên lame đậy lamelle sau quan sát vật kính hiển vi - Kết thu được: Hình : Tế bào nấm men Nhận xét : Qua thí nghiệm hạt tinh bột kết cho thấy tế bào tinh bột vòng tròn có màu trắng lục li ti xếp chồng lên theo quy luật không định vi sinh vật nên khơng có nhân tế bào 2.4 Vẽ hình, thích mơ tả đặc điểm hạt tinh bột Thực hành Thí nghiệm hạt tinh bột: - Dụng cụ: + Kính hiển vi quang học + Lam kính lamen( kính) + Dao lam, kính lưỡi mác, ống nhỏ giọt + Nước cất - Tiến hành thí nghiệm: + Dùng kim mũi giáo cạo nhẹ lát khoai tây Đặt bột cạo lên lame, nhỏ giọt nước vào khoai tây sau dùng lamelle đậy lên khoai tây (trong trình đậy tránh tạo bột khí ép mặt để giảm trình thí nghiệm cho kết khơng ) Sau quan sát vật kính hiển vi thị kính x10 x40 Lắc nhẹ ốc vi cấp thấy kết rõ - Kết thu được: Hình : Tế bào khoai tây nước cất Nhận xét : Qua thí nghiệm hạt tinh bột kết cho thấy tế bào tinh bột vòng tròn trơn đồng tâm hạt sỏi sạn xếp chồng lên theo quy luật không định trình đặt tinh bột vào lame hạt tinh bột không xếp nên vị trí có hạt tinh bột có vòng tròn đồng tâm ngược lại khơng có tế bào khoai tây tế bào thực vật nên khơng có nhân tế bào BÀI MÀNG NGUYÊN SINH CHẤT I QUY TRÌNH THỰC HIỆN THÍ NGHIỆM Vật liệu: - Vật liệu tươi Củ dền đỏ - Hoá chất Cồn tuyệt đối * Thực hành ảnh hưởng nhiệt độ dung môi hữu tính thấm màng tế bào - Cắt củ dền thành miếng có kích thước cm x cm x 0,5 cm Cho miếng củ dền vào becher rửa dòng nước chảy vài phút để lôi tất sắc tố từ tế bào bị vỡ (dừng nước rửa khơng sắc tố), sau ngâm mẫu vào nước - Ghi ống nghiệm từ → 7: + Ống - 6: 15 ml nước cất/ống + Ống : 15 ml cồn tuyệt đối (đậy miệng ống nghiệm nylon) - Xử lý nhiệt: xử lý nhiệt miếng củ dền nhiệt độ 40, 50, 70, 100 - 10°C Cách xử lý nhiệt: cho miếng củ dền vào túi nylon nhỏ, bấm miệng túi nylon kim bấm nhúng vào nước có nhiệt độ định 10 phút Lưu ý: đuổi hết khơng khí túi để miếng củ dền ép sát vào túi nylon - Cho mẫu vào ống nghiệm: ngâm miếng củ dền sau xử lý nhiệt vào ống nghiệm đánh số: + Ống 1: cho miếng củ dền không qua xử lý nhiệt (ống chuẩn) + Ống 2: cho vào miếng dền xử lý 40°C + Ống 3: cho vào miếng dền xử lý 50°C + Ống 4: cho vào miếng dền xử lý 70°C + Ống 5: cho vào miếng dền xử lý 100°C + Ống 6: cho vào miếng dền xử lý 5°C (Nước đá) + Ống 7: cho miếng củ dền không qua xử lý nhiệt - Tất ống nghiệm đặt vào giá, để yên 15 phút Sau vớt bỏ miếng dền ra, lắc đều, so sánh màu dung dịch ống nghiệm so với ống chuẩn Lưu ý: + Kích thước mẫu phải GIỐNG + Thời gian xử lý nhiệt phải GIỐNG + Thời giang ngâm mẫu ống nghiệm phải GIỐNG II KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM Ống nghiệm 1(nhiệt phòng) 2(40°C ) 3(50°C ) 4(70°C ) 5(100°C ) 5°C 7(cồn ) Cường độ màu 1+ 2+ 3+ 4+ 5+ 3+ 4+ Hình 1: thể màu sắc lọ chứa củ dềnh nhiệt độ khác Nhận xét : - Tác dụng nhiệt độ lên khuếch tán: + Nhiệt đô từ nhiệt độ phòng (khoảng 30o C) đến 100o C: Ở nhiệt độ cao khuếch tán tăng nên màu dung dịch đậm, nhiệt độ cao làm giảm tính bền màng protein Mặt khác khuếch tán phụ thuộc vào nhiệt độ nhiệt độ làm gia tăng khuếch tán cách tăng tốc độ va chạm ác phân tử + Ở nhiệt độ 5o C la tác dụng nhiệt độ lạnh làm thay đổi tính lỏng màng tế bào, gây cho màng tế bào chức sinh học Vì ống có màu sắc đậm ống (nhiệt độ phòng) ống (40o C) + Tác dụng dung môi hữu cơ: ống nghiệm chứa Cồn màu sắc đậm ống nghiệm 40o C 50o C tác dụng dung môi hữu ( methanol) vào sắc tố tính thấm dung mơi hữu cao so với nước nhiệt độ Mặt khác khả tan sắc tố dung môi hữu tốt so với nước BÀI THÀNH PHẦN HĨA HỌC CỦA TẾ BÀO I THÍ NGHIỆM VỚI TINH BỘT Tiến hành thí nghiệm Chuẩn bị ống nghiệm: - Ống 1: nghiền mẫu khoai tây nhỏ với 10 ml nước cất, loại bỏ bã vải lọc Cho dịch lọc vào ống nghiệm - Ống 2: chứa 10 ml nước cất Nhỏ vào ống nghiệm giọt Lugol Lắc Quan sát ghi nhận tượng Hiện tượng xảy sau phản ứng: Hình 1: Kết nhỏ lugol vào tinh bột nước cất - Ống : từ màu trắng đục chuyển sang màu xanh tím nhạt - Ống : từ màu trắng chuyển sang màu vàng nhạt Giải thích tượng phản ứng: - Ống : + Ở tinh bột có phân tử amilozo có cấu trúc dạng xoắn theo kiểu lò xo, vòng xoắn giữ lại nhờ phân tử hidro nhóm OH + Thành phần thuốc thử lugol có chứa Iốt Kali Iốt (KI) + Ở nhiệt độ thường (trong phòng thí nghiệm) tinh bột tác dụng với lugol, logul có sẵn thành phần Iốt nên làm cho amilozo không phân nhánh xoắn thành dạng hình trụ, phân tử Iốt len vào nằm phía ống trụ tạo hợp chất bọc có màu xanh tím - Ống : Thuốc thử lugol gặp nước không sinh phản ứng nên có màu vàng nhạt màu thuốc thử lugol gặp nước bị phai màu II THÍ NGHIỆM ĐƯỜNG KHỬ Tiến hành thí nghiệm: - Giã nát 20 mầm đậu xanh cối Thêm vào 20 ml nước, cà Để lắng 10 phút, lọc qua vải lọc Làm tương tự với 20 hột đậu xanh ngâm nước - Chuẩn bị ống nghiệm: Ống nghiệm Dung dịch Fehling (ml) Nước cất (ml) Dịch lọc từ mầm giá (ml) (đối chứng) 3 - - - - 3 - - Dịch lọc từ hạt đậu xanh (ml) Đặt ống nước sôi phút Quan sát tượng xảy ống nghiệm Hiện tượng xảy sau phản ứng: o Khơng có nhiệt độ xúc tác: Hình 2: Kết nhỏ Fehling vào nước cất, mầm giá đậu xanh chưa qua nhiệt - Ống : Có màu xanh dương - Ống : Có màu xanh dương - Ống : Có màu xanh dương o Sau có nhiệt độ xúc tác: Hình 3: Kết nhỏ Fehling vào nước cất, mầm giá đậu xanh qua nhiệt - Ống : Có màu xanh lam - Ống : Màu vàng có màu đỏ đáy ống nghiệm - Ống : Màu xanh đậm nhiều so với trước chưa có nhiệt độ xúc tác có màu đỏ đáy ống nghiệm Giải thích tượng phản ứng: - Ống : Fehling hỗn hợp CuSO4+ NaOH + seignet dùng để nhận biết gốc Andehit (-CHO).Vì ống khơng có tinh bột nên khơng có nhóm –CHO nên khơng có đường khử khơng có phản ứng xảy với Fehling CuSO4+ NaOH � Na2SO4 + Cu(OH)2 (dung dịch có màu xanh lam) - Ống : + Trong mần giá tinh bột bị thủy phân thành glucose trình sinh trưởng Glucose loại đường đơn chức có (hoa,lá ,rễ cây) nên có chứa nhóm –CHO nhiệt độ đun sơi gặp fehling phản ứng xảy ra, lúc cấu trúc monosacharide có chứa nhóm C=O Fehling khử Cu2+ Cu+ + Màu vàng màu Cu(OH) nên có màu vàng có màu đỏ màu kết tủa Cu2O phần lắng đáy ống nghiệm.Phản ứng cho thấy dường giá mầm gần hoàn thành tinh bột bị xúc tác gần thành đường khử phản ứng xảy mạnh C6H12O6+ 2Cu(OH)2 � C6H12O7 + Cu2O ( kết tủa đỏ gạch) + 2H2O - Ống : Hạt đậu xanh thành phần chủ yếu tinh bột nên gặp Fehling xảy phản ứng phức biure-Cu III THÍ NGHIÊM LIPID Tiến hành thí nghiệm: Chuẩn bị ống nghiệm: - Ống 1: chứa ml nước cất - Ống 2: chứa ml dầu ăn Nhỏ vào ống nghiệm giọt soudan III Quan sát tượng ống nghiệm Hiện tượng xảy sau phản ứng: Hình 4: Kết nhỏ Soudan III vào nước cất dầu thực vật - Ống :từ màu trắng nước cất chuyển sang màu đỏ màu thuốc thử soudan III - Ống : từ màu vàng chuyển sang màu cam đậm Giải thích tượng phản ứng: - Ống : + Thuốc thử soudan III gặp nước không sinh phản ứng nên có màu đỏ màu thuốc thử soudan III + Ống : + Trong dầu ăn có chứa nhiều axit béo, gặp soudan III dung môi hữu phản ứng tạo phức có màu cam IV THÍ NGHIỆM PROTEIN a) Thực vật: Tiến hành thí nghiệm: - Đặt lát cắt dày hột đậu trắng ngâm nước lên gương tròn bị lõm Nhỏ giọt CuSO4 Sau 10 phút nhỏ giọt NaOH Quan sát màu xuất lát cắt Hiện tượng xảy sau phản ứng: Hình 5: Kết nhỏ CuSO4 NaOH vào hạt đậu nành Nhỏ giọt CuSO4 vào hạt đậu chưa thấy tượng xảy ra, sau cho giọt NaOH vào xuất màu xanh tím vết cắt hạt đậu Giải thích tượng phản ứng: + Xuất màu xanh tím kết phản ứng phức biure- Cu b) Động vật: Tiến hành thí nghiệm: Chuẩn bị ống nghiệm: - Ống 1: chứa ml dung dịch lòng trắng trứng - Ống 2: chứa ml sữa - Ống 3: chứa ml nước cất Nhỏ vào ống nghiệm giọt CuSO4, để yên phút, cho vào giọt NaOH Lắc nhẹ Quan sát thay đổi màu sắc Hiện tượng xảy sau phản ứng: Hình 6: Kết nhỏ CuSO4 NaOH vào nước cất, lòng trắng trứng, sữa - Ống 1: có màu xanh tím đậm - Ống 2: có màu xanh tím nhạt (nhạt ống 1) - Ống 3: có màu xanh lam Giải thích tượng phản ứng: - Ống 1: có màu xanh tím đậm hàm lượng protein trứng có nhiều nhiều so với Sửa nên tham gia phản ứng phức biuret- Cu có màu tím đậm - Ống 2: có màu xanh tím nhạt hàm lượng protein Sửa có so với lòng trắng trứng nên tham phản ứng phức biure- Cu có màu tím nhạt - Ống 3: có màu xanh lam khơng có hàm lượng protein nên khơng có ứng phức biuret- Cu xảy màu kết tủa Cu(OH) BÀI ENZYME I Vật liệu tươi Đậu xanh lên mầm II Hóa chất - Dung dịch tinh bột 0,2 % - Thuốc thử Lugol III Thực hành Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ lên hoạt tính amylase: Ly trích amylase Giã nát 20 hạt đậu xanh lên mầm, thêm vào 20 ml nước, dùng chày cà cối Lọc, chứa ống nghiệm Chất lọc chứa enzyme amylase Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ hoạt tính amylase Chuẩn bị ống nghiệm ghi số 1, 2, 3, Cho vào ống nghiệm ml dung dịch tinh bột Xử lý nhiệt: - Ống 1: nước đá tan (khoảng 5°C) - Ống 2: nhiệt độ phòng - Ống 3: nước 50°C - Ống 4: nước sôi (100oC) Sau 10 phút, thêm vào ống ml dung dịch có chứa amylase tiếp tục để ống nhiệt độ thí nghiệm 15 phút Sau đó, lấy ống nghiệm để vào giá (lưu ý: đặt ống vào ly nước để làm nguội) Dùng thuốc thử Lugol (1 giọt) trắc nghiệm có mặt tinh bột ống nghiệm Lưu ý: Thuốc thử Lugol nhỏ vào ống nghiệm CÙNG LÚC Lắc đọc kết NGAY LẬP TỨC - Hiện tượng - Ống 1: nước đá tan (khoảng 5°C) có màu trắng đục - Ống 2: nhiệt độ phòng màu nâu đất nhạt - Ống 3: nước 50°C màu lugol - Ống 4: nước sơi (100oC) xanh tím đậm Giải thích: Ống 1: nhiệt độ thấp, khả hoạt hóa enzym yếu nên tượng xảy chậm, dung dịch tinh bột thay đổi màu không đáng kể Ống 2: tượng diễn cách từ từ nhiệt độ tăng lên nên phần tinh bột bị enzym thủy phân, phần lại chưa thủy phân nên có màu nâu đất nhạt Ống 3: trình diễn cách mạnh mẽ nhiệt đọ tăng lên làm tốc độ phản ứng tăng lên, va chạm nhiều phức chất enzym chất hình thành nhiều Nhiệt độ ống đạt tới nhiệt độ tối thích nên phân hủy hầu hết dung dịch tinh bột nên ống có màu vàng Phương trình: m(C6H10O5)n tinh bột (C6H10O5)m + nH2O C12H22O11 + H2O Mantozo n(C 6H10O5)m (m