Phân tích curcumin trong nghệ

57 16 0
  • Loading ...
1/57 trang

Thông tin tài liệu

Ngày đăng: 05/11/2018, 16:01

Bài tiểu luận Phân tích curcumin nghệ I/ Tổng quan nghệ vàng a Thực vật học Giới Plantea Ngành Magnoliophyta Lớp Liliopsida Bộ Zingiberales Họ Zingiberaceae Chi Curcuma Loài Curcuma longa L 2/ Cấu tạo củ nghệ: Các lớp tế bào của nghệ 3/ Thành phần hóa học: Curcuminoid ( 3% – 6%) : - Thành phần hóa học quan trọng - Thành phần tạo nên màu vàng cho nghệ - Tinh bột calcium oxalate - Chất béo - Nước 8% - 10% - Tinh bột nhựa 40% – 50% - Chất vô 6% - 8% (Calcium, Sodium, … ) - Và số thành phần hóa học khác Tinh dầu ( 3% - 5%) : - Màu vàng nhạt, mùi thơm đặc trưng - Ngồi có carbua terpenic (25%), kentone sesquiterpenic (65%), zingiberen, … 4/ Ứng dụng đời sống: II/ Tổng quan curcumin  Cây nghệ loại thực vật cấy rộng rãi số nước châu Á như: Ấn Độ, Trung Quốc, …và củ nghệ biết đến thứ thuốc cách 5.000 năm Tại Ấn Độ, củ nghệ dùng loại thuốc dân gian để bơi lên vết thương cho chóng lên da non, điều trị bệnh dày giải độc cho máu.Để giữ cho da mịn màng, nếp nhăn, phụ nữ Ấn độ thường pha bột nghệ với sữa đắp lên mặt vào tối  Theo PubMed, cơng trình nghiên cứu hoạt chất curcumin có chứa củ nghệ tác động đến nồng độ cholesterol máu chuột được các nhà khoa học Ấn Độ tiến hành vào năm 1970  Từ đến nay, củ nghệ trở thành đối tượng quan tâm nhiều nhà khoa học có nhiều cơng trình nghiên cứu đặc tính chữa bệnh củ nghệ Theo PubMed thuộc National library of Medicine(Mỹ), năm 2000 có 100 nghiên cứu hoạt chất curcumin có chứa củ nghệ năm 2005 có 300 nghiên cứu về đề tài 1/ Giới thiệu chung  Curcumin hoạt chất nghệ, cơng thức hóa học xác định Nó là phẩm màu thực phẩm tự nhiên có ký hiệu E100(i) dùng để nhuộm màu cho nhiều loại thực phẩm khác dầu, mỡ, nhũ tương mỡ, kem, sản phẩm rau quả, bánh kẹo, bánh mì, thịt, cá, trứng sản phẩm từ thịt, cá, trứng, gia vị, súp, Màu vàng củ nghệ vàng tổ hợp chất màu vàng nhóm curcuminoid, chất màu curcumin, demethoxycurcumin bisdemethoxycurcumin Cây Cây nghệ nghệ Củ Củ nghệ nghệ ∗ Các bước tiến hành: • Bước 1: Hoạt hóa silica gel cách sấy mỏng nhiệt độ 110oC giờ, sau để cân ẩm bình hút ẩm 30 phút • Bước 2: Chấm chất cần phân tích lên mỏng:  Hòa tan mẫu curcumin vào lượng vừa đủ acetone  Vuốt ống mao quản lửa đèn cồn, rửa ống mao quản lần acetone  Dùng ống mao quản, hút lượng mẫu hòa tan chấm lên mỏng Khoảng cách vết chấm đến bờ khoảng 1cm, vết chấm cách hai bờ hai bên 1cm cách 1cm Độ lốn vết chấm nhỏ, tách tốt ∗ Các bước tiến hành • Bước 3: Triển khai mỏng:  Chuẩn bị bình sắc ký: rửa sạch, sấy khơ, lót giấy lọc xung quanh thành  Pha hệ dung mơi khai triển cho vào bình, bão hòa khí bình từ 15 – 20 phút  Đặt mỏng vào bình, đậy nắp bình  Theo dõi vạch dung môi chạy đến cách đầu 1cm, dùng kẹp gắp mỏng  Sấy nhẹ mỏng để đuổi hết dung mơi • Bước 4: Phát vết tính trị số Rf:  Phát vết qua màu sắc tự nhiên vết  Phun thuốc thử H2SO4 10% C2H5OH  Tính trị số Rf Gọi x: khoảng cách từ điểm xuất phát đến trung tâm vết y: khoảng cách từ điểm xuất phát đến mức dung môi Sắc ký mỏng (TLC): (A) Triển khai mỏng; (B) Cách đo khoảng cách mỏng sau triển khai để tính giá trị Rf c/ Sắc ký cột (CC):  • Ngun tắc: Sắc ký hấp thụ tiến hành cột thủy tinh thẳng đứng với chất hấp thụ đóng vai trò tướng tĩnh, dung mơi rửa cột đóng vai trò tướng động chảy qua chất hấp thụ ảnh hưởng trọng lực • Đối với chất riêng biệt hỗn hợp cần tách, tùy theo khả hấp thụ khả hòa tan dung mơi rửa cột lấy trước sau  • • • • • Hóa chất, dụng cụ: Cột đường kính 13cm Silica gel 60 F254 (Merck) 0.063 – 0.200mm Dichloromethane 99.8% Methanol 99.9% Cát biển (Merck) 0.1 – 0.315 mm Các bước thực hiện:  Bước 1: Chuẩn bị: • Sấy silica gel 110oC 1h, cân ẩm bình hút ẩm 30 phút Ngâm qua đêm với dung mơi chạy cột (dichloromethane) • Cột rửa sạch, sấy khơ, cho bơng gòn vào đáy, kẹp thẳng góc giá  Bước 2: Nhồi cột: • Cho dung môi vào đến nửa chiều cao cột, mở van, từ từ nhồi liên tịc silicagel vào cột hết lượng silica gel cần nhồ • Cho dung môi lên đầy cột, cho dung môi chạy tuần hoàn khoảng -4 để nén lớp silica gel ổn định cột.Chú ý khô để mực dung môi xuống thấp mực silica gel để tránh tượng khơ cột • Cho lớp cát biển khoảng 0.5 – cm lên lớp silica gel để bảo vệ bề mặt cột   • Bước 3: Đưa chất phân tích vào cột: Có nhiều phương pháp nạp mẫu cần phân tích vào cột Cách 1: Hòa tan hoàn toàn mẫu cầm nạp dichloromethane nạp hết lượng dung dịch sau hòa tan vào cột • Cách 2: Hòa tan hồn tồn lượng ,mẫu cần nạp aceton, cho từ từ lượng vừa đủ bột silicagel khô vào → trộn → cô đuổi dung mơi → nạp vào cột  • • Tuy áp dung cách bước thực theo trình tự sau: Hạ mức dung mơi cột xuống ngang mặt lớp cát Khóa van cột Dùng Pasteur pipet (đối với mẫu nạp lỏng) đũa khuấy (đối với mẫu nạp rắn) từ từ nhẹ nhàng nạp lớp mẫu lên bề mặt cột mà không làm xáo trộn bề mặt • Mở van cột, tiếp tục cho dung môi vào để mẫu hấp thụ vào silicagel  • • Bước 4: Triển khai cột: Dung môi dùng để rửa giải hệ dichloromethane Đầu tiên, dùng hệ 100% dichloromethane Sau theo thời gian tăng dần độ phân cực dung mội cách pha thêm vào dung môi lượng tăng dần methanol: (99.5:0.5); (99:1); (98:2); …  • • Bước 5: Hứng kiểm tra phân đoạn: Dung môi chạy qua cột hứng phân đoạn thề tích v=10ml Kiểm tra phân đoạn sắc ký mỏng với hệ dung mơi thích hợp Ví dụ sử dụng hệ dung môi chạy mỏng dichloromethane:methanol (98:2)  • Bước 6: Thu hồi định lượng phân đoạn: Các phân đoạn có kết kiểm tra TLC gom lại cô quay chân không, hút chân không cân định lượng Các bước thực sắc ký cột: (A) nhồi cột; (B) nạp mẫu; (C) hứng phân đoạn d/ Xác định cấu trúc:  • • Phổ UV – Vis: Mục đích: xác định bước sóng hấp thụ cực đại kiểm tra độ tinh khiết sản phẩm Nguyên tắc: phân tử hấp thụ xạ tử ngoại khả kiến electron hóa trị bị kích thích chuyển từ trạng thái lên trạng thái kích thích thu phổ tử ngoại khả biến (Ultraviolet and visible Spectra, UV –Vis) • Phương pháp thực hiện: pha mẫu curcumin tinh, DMC tinh, BDMC tinh với nồng độ 0.6x10 Vis • Máy đo: 6505 UV – Vis Spectrophotometer JENWAY  • • Đo điểm chảy: Mục đích: xác định độ tinh khiết curcumin, DMC, BDMC thu Máy đo: Electrothermal 9100 -5 mol/l Tiến hành phổ UV – Phổ UV-Vis BDMC Phổ Uv-Vis DMC Phổ UV-Vis Curcumin  • Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) Mục đích: Khảo sát thành phần curcuminoid ban đầu, curcumin sau kết tinh xác định độ tinh khiết curcumin, DMC, BDMC tách từ sắc ký cột • Nguyên tắc: Dựa tương tác khác chất với pha tĩnh, pha tĩnh với pha động, chất với pha động • Phương pháp thực hiện:  Chuẩn bị mẫu thử nghiệm: Cân m(g) mẫu thử Chuyển phần mẫu thử vào bình định mức 10ml Định mức acetonitrile, lắc Đánh siêu âm khoảng phút Pha loãng mẫu 20 lần Lọc qua giấy lọc 0.45μm Dung dịch sau lọc tiêm vào máy  Tiến hành phân tích HPLC:      Cột sắc ký: cột pha đảo C18 (250x4.6mm, 5cm) o Nhiệt độ cột 40 C Pha động: ACN:H PO 0.05%/55:45 Tốc độ dòng 0.8ml/ phút Bước sóng cài đặt cho đầu dò UV – Vis 422 nm IV/ Hoạt tính sinh học curcumin:  Hoạt tính sinh học chủ yếu curcuminoid kháng oxy hóa, kháng khuẩn, kháng virus kháng số loại ung thu  Nhiều cơng trình nghiên cứu thử nghiệm nước giới khẳng định từ lâu hoạt chất curcumin có tác dụng hủy diệt tế bào ung thư vào loại mạnh Tại Mỹ, Đài Loan, người ta tiến hành thử lâm sàng dùng curcumin điều trị ung thư kết luận curcumin kìm hãm phát tác tế bào ung thư da, dày, ruột, vòm họng, bàng quang  Từ năm 1993, nhà khoa học thuộc Đại học Harvard (Mỹ) cơng bố chất có tác dụng kìm hãm tế bào HIV – 1, HIV- –RT ba chất curcuminCurcumin có giá trị hoạt tính sinh học cao công thức cấu tạo curcumin có nhóm hoạt tính sau: Cơng thức cấu tạo Curcumin    Nhóm parahydroxyl: hoạt tính chống oxy hóa Nhóm ceton: kháng viêm, kháng ung thư, chống đột biến tế bào Nhóm liên kết đơi: kháng viêm, kháng ung thư, chống đột biến tế bào Tổng kết phương pháp thực thu nhận Curcumin từ Nghệ vàng: Chưng cất nước Dùng dung môi hữu Dùng chất lưỡng cực Bột Curcuminoid Kết tinh Sắc ký mỏng Sắc ký cột Thu nhận Curcumin Tài liệu tham khảo: Luận án tiến sĩ kỹ thuật: “Nghiên cứu quy trình tách triết, tổng hợp dẫn xuất xác định tính chất, hoạt tính curcumin từ nghệ vàng “, TH.S Phan Thị Hoàng Anh, Đại học Bách Khoa, HCM Nghiên cứu khoa học: “Tách, tổng hợp khảo sát hoạt tính sinh học dẫn xuất curcumin từ bột curcuminoid thương phẩm”, TH.S Hoàng Thị Hảo, Đại học Lạc Hồng, TP HCM Đề tài Th S Phạm Đình Tỵ Phan Thị Hoàng Anh, Lê Xuân Tiến, Nguyễn Thị Mạc Phưong, Trần Thị Việt Hoa, Trần Văn Sung, Phan Thanh Sơn Nam, “Nghiên cứu phân lập thành phần hoạt tính curcuminoit trích từ củ nghệ vàng (Curcuma longa L.)” www.curcumin.net https://vi.wikipedia.org/wiki/Curcumin ... gia vị, súp, Màu vàng củ nghệ vàng tổ hợp chất màu vàng nhóm curcuminoid, chất màu curcumin, demethoxycurcumin bisdemethoxycurcumin Cây Cây nghệ nghệ Củ Củ nghệ nghệ  Curcumin chất chống oxy... dẫn xuất curcuminoid: • Curcuminoid dẫn xuất dicinnamoylmethane, gồm thành phần chính: Curcumin (77%); desmethoxycurcumin (DMC, 17%) bis - desmethoxycurcumin (BDMC, 3%) • Trong đó, Curcumin hợp... xác.  III/ Thu nhận Curcumin: Trích ly Bơt Curcuminoid Kết tinh lại Bột curcumin kết tinh Sắc ký mỏng Sắc ký cột Thu nhận Curcumin 1/ Các phương pháp trích ly Curcuminoid từ Nghệ vàng: • Phương
- Xem thêm -

Xem thêm: Phân tích curcumin trong nghệ, Phân tích curcumin trong nghệ

Từ khóa liên quan

Gợi ý tài liệu liên quan cho bạn

Nhận lời giải ngay chưa đến 10 phút Đăng bài tập ngay