qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfg hjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcv CÔNG NGHỆ bnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqw SẢN XUẤT VACCINE ertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuio pasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwe rtyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiop asdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvb nmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwe rtyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiop asdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghj klzxcvbnmrtyuiopasdfghjklzxcvbnmq wertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyui opasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfg hjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcv bnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqw CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE (Lớp 52CNSH) Chủ đề 1: Đại cƣơng vaccine Chủ đề 2: Phân loại chế hoạt động vaccine Chủ đề 3: Công nghệ sản xuất vaccine Chủ đề 4: Công nghệ sản xuất kháng thể Chủ đề 5: An toàn hiệu lực chế phẩm CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE Khái niệm Vaccine Nguồn gốc tên gọi Lịch sử phát triển Tiêm chủng Hạn chế vaccine Nội dung tự tìm hiểu KHÁI NIỆM VỀ VACCINE Vaccine chế phẩm sinh học có tính nhằm tăng (c) (a) dùng để tạo thể nhiều (b) , (d) cụ thể Một số thuật ngữ: - Vaccinology/Vaccinomics (Vaccine học): ngành học nghiên cứu phát triển vaccine - Vaccine (n)/Vaccination (n) - Immunise (v)/Immunisation (n) - Vaccine vs antigene (kháng nguyên) NGUỒN GỐC TÊN GỌI VACCINE - Vaccine = Variola vaccinia : bệnh đậu bò – cow-pox - Edward Jenner, Bệnh đậu mùa (smallpox), Bệnh đậu bò gái vắt sữa bò: o Quan sát ghi nhận Jenner o Thí nghiệm Jenner LỊCH SỬ PHÁT TRIỂN - Thời kỳ trƣớc Jenner o 120 - 63 BC, câu chuyện vua Mithridates VI o Thế kỷ VII, câu chuyện thầy tu Ấn Độ o Thế kỷ XVII, Trung Quốc cách phòng bệnh đậu mùa o 1758, bác sỹ Francis Home dịch sởi o …… CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE - Thời kỳ sau Jenner o Louis Pasteur bệnh dịch tả gà o Louis Pasteur vaccine dại - Lịch sử vaccine gắn liền với lịch sử bệnh học - WHO công nhận: tiêm vaccine phƣơng pháp bảo vệ hiệu quả, giúp nhân loại tránh đƣợc bệnh truyền nhiễm - Nhờ có vaccine, nhiều bệnh nguy hiểm đe dọa tính mạng ngƣời nhƣ đe dọa kinh tế (bệnh đối tƣợng nông nghiệp/thủy sản) đƣợc đẩy lùi - Công nghệ sx vaccine có bƣớc tiến vƣợt bậc nhiều thành tích đáng kể - Tuy nhiên, nghiên cứu sản xuất vaccine đối mặt với o Thách thức, bệnh dịch không ngừng tăng o Vũ khí sinh học CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE TIÊM CHỦNG 4.1 Tiêm chủng - Phạm vi tiêm chủng đƣợc quy định tuỳ theo tình hình dịch tể bệnh - Lý thuyết, tiêm chủng rộng tốt - Thực tế: thực - Lý do: ????? - Các đối tƣợng khác tiêm phòng loại bệnh khác Lịch tiêm chủng Australia 4.2 Chƣơng trình tiêm chủng mở rộng (tại Việt Nam) - 1974 - WHO phát động chƣơng trình TCMR cho loại vaccines - 1985 – Việt Nam bắt đầu có chƣơng trình TCMR với bệnh - 1997 bổ sung vaccine viêm gan B - 2010 bổ sung vaccine Hib Chương trình TCMR Quốc gia Việt Nam (trẻ < tuổi) Lưu ý: HBV cần tiêm nhiều mũi có mũi tiêm nằm CTTCMR CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE Chương trình TCMR Quốc gia Việt Nam (trẻ >1 tuổi) Thay đổi lượng kháng thể thai kỳ trẻ sau sinh 4.3 Các bệnh chƣơng trình tiêm chủng mở rộng (sinh viên trình bày seminar) CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE HẠN CHẾ CỦA VACCINE 5.1 Tính hiệu - Khó đánh giá xác (xác xuất) - Đáp ứng miễn dịch khơng thích hợp o Hệ miễn dịch đối tƣợng khác o Khả nhớ miễn dịch o Loại đáp ứng miễn dịch không phù hợp o Thay đổi tác nhân gây bệnh - Khơng có đáp ứng miễn dịch o Khơng có tá chất ??? o Kháng ngun bị biến đổi (virus tiến hóa nhanh ) 5.2 Các phản ứng tiêm chủng - Nhiễm bệnh - Bệnh miễn dịch - Phản ứng phụ 5.3 Thử nghiệm vaccine ngƣời động vật - Độ xác - Chủ đề đạo đức 5.4 Quản lý chất lƣợng sản phẩm - Một số sai sót q trình sản xuất vaccine đƣợc ghi nhận o 12.12.2007, Merck Mỹ thông báo khoảng 1,2 triệu liều vaccine 13 lô hàng có tên thƣơng mại PedvaxHIB Comvax o 22.12.2009 FDA cho biết chi nhánh công ty dƣợc AstraZeneca thu hồi 4,7 triệu liều vaccine cúm A/H1N1 chất lƣợng (vaccine cúm khơng có hiệu phòng bệnh) o Cơ quan y tế Anh thu hồi 21.000 liều vaccine viêm màng não C (Meningitis C) dùng cho trẻ, nhập từ Thụy Sĩ, xét nghiệm Meningitis C cho kết dƣơng tính với khuẩn tụ cầu Staphylococcus aureus) o Các ca tai biến sau tiêm vaccine ngừa dại Fuenzalida (sản xuất Nha Trang từ mơ não chuột) CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE o Viện Vệ sinh dịch tễ T.Ƣ đề xuất lộ trình ngừng sử dụng văcxin VN năm 2008 vs WHO khuyến cáo nên ngừng dùng từ năm 1996? 5.5 Thách thức số bệnh HIV - Vai trò tế bào T-CD4 đáp ứng miễn dịch - Tế bào đích HIV - Khó khăn đáp ứng miễn dịch tạo vaccine??? - Virus HIV (sinh viên tự tìm hiểu) - CD4: cell marker found on the surface of TH and macrophages; acts as a receptor for HIV - CCR5 CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE - Vaccine tái tổ hợp Gp120 thất bại - Đáp ứng miễn dịch tế bào không đáp ứng miễn dịch dịch thể? - Tc (T-CD8) - V520 (Merk) CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE Bệnh tự miễn Ví dụ: S pyogenes - Liên cầu khuẩn (G+) - Gây bệnh viêm họng - Gây bệnh tự miễn  Gặp nhiều khó khăn việc sản xuất vaccine  Xác định kháng nguyên không tƣơng đồng với protein tế bào chủ để tạo vaccine??? - M protein cấu trúc bề mặt S.pyrogenes có cấu trúc tƣơng đồng với cấu trúc fibrillar proteins CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ  Kiểm tra hoạt tính kháng thể dịch  Loại muối:  Thẩm tích  Sắc ký lọc gel CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 81 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ o Sắc ký lực  Protein G protein A CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 82 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 83 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 84 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ o Sắc ký trao đổi ion  0.01M Tris-Cl pH 8.6  0.5M NaCl/0.01M Tris-Cl pH 8.6 - Đối với sản phẩm kháng thể dùng điều trị bệnh có nguồn gốc từ động vật, Fc đƣợc cắt bỏ Tùy theo quy trình khác mà việc cắt bỏ Fc đƣợc tiến hành công đoạn khác - Đối với sản phẩm kháng thể dùng chẩn đoán test-kit phát kháng nguyên/kháng thể, đoạn Fc đƣợc gắn thêm enzyme o HRP, alkaline phosphatase o Biotin/Streptavidin CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 85 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ o Fluorescent dyes o Tandem dyes 2.4 Kiểm tra chất lƣợng Abs - Kiểm tra độ tinh sạch: o OD280 o PAGE SDS-PAGE - Kiểm tra tính hiệu lực o ELISA, WB,… o Thử nghiệm động vật CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 86 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ 2.5 Phối trộn, đóng gói - Các chất bảo quản o Cresol o sodium azide o Kháng sinh CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 87 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 88 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ SẢN XUẤT KHÁNG THỂ IgY TỪ TRỨNG GÀ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 89 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ SẢN XUẤT KHÁNG THỂ ĐƠN DỊNG CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 90 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ 3.1 Dung hợp tế bào - Tác nhân o Vật lý o Hóa học o Sinh học - Các dạng tế bào dung hợp đƣợc tạo CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 91 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ 3.2 Sàng lọc tế bào sau dung hợp - Mơi trƣờng ni cấy tế bào động vật có bổ sung HAT (Hypoxanthine Aminopterin Thymidine Medium) 3.3 Tạo dòng tế bào đơn 3.4 Xác định đặc điểm - Bắt đặc hiệu kháng nguyên (Western Blot ; Immunoprecipitation) - Lớp kháng thể (ELISA) CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 92 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 93 CHỦ ĐỀ 4: SẢN XUẤT KHÁNG THỂ NỘI DUNG TỰ TÌM HIỂU So sánh vaccine kháng huyết So sánh miễn dịch chủ động miễn dịch bị động So sánh kháng thể đơn dòng kháng thể đa dòng Nguyên tắc hoạt động kit xác định nhóm máu Nguyên tắc hoạt động que thử thai Trong sản xuất kháng thể đa dòng/đơn dòng từ tế bào lympho B (từ lách tế bào động vật), tế bào B cần đƣợc dung hợp với tế bào ung thƣ Giải thích cần có dung hợp ? Giải thích nguyên tắc việc sử dụng mơi trƣờng ni cấy có chứa HAT (hypoxanthine-aminopterin-thymidine) sản xuất kháng thể đơn dòng/đa dòng có nguồn gốc từ tế bào B dung hợp với tế bào ung thƣ CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 94 TÀI LIỆU ĐỌC THÊM: (do G/v cung cấp) VACXIN HỌC – NHỮNG CHỦ ĐỀ CƠ BẢN, PGS.TS Lê Văn Hiệp, NXB Y học VACCINE IMMUNOLOGY, in GENERAL ASPECTS OF VACCINATION, Claire-Anne Siegrist IMMUNOLOGICAL MECHANISMS OF VACCINATION, Bali Pulendran and Rafi Ahmed REVIEW : DESIGN AND PRODUCTION OF RECOMBINANT SUBUNIT VACCINES, Marianne Hansson, Per-Ake Nygren and Stefan Sta/ hl A REVIEW OF PRODUCTION TECHNOLOGIES FOR INFLUENZA VIRUS VACCINES, AND THEIR SUITABILITY FOR DEPLOYMENT IN DEVELOPING COUNTRIES FOR INFLUENZA PANDEMIC PREPAREDNESS, World Health Organization, Initiative for Vaccine Research CRITICAL STEPS IN THE PRODUCTION OF POLYCLONAL AND MONOCLONAL ANTIBODIES: EVALUATION AND RECOMMENDATIONS, Marlies Leenaars and Coenraad F M Hendriksen PRODUCTION OF ANTIBODIES IN CHICKENS, Mojca Narat CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 95 ... VACCINE Quy trình chung sản xuất vaccine Tá chất Một số quy trình sản xuất vaccine cụ thể Nội dung tự tìm hiểu QUY TRÌNH CHUNG TRONG SẢN XUẤT VACCINE CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng... hỗn hợp vaccine ? 10 Loại vaccine gây đáp ứng miễn dịch tạo kháng thể IgA đƣờng ruột CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page 26 CHỦ ĐỀ 3: SẢN XUẤT VACCINE CHỦ ĐỀ 3: SẢN XUẤT VACCINE. .. Vũ khí sinh học CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT VACCINE _ GVHD: Văn Hồng Cầm Page CHỦ ĐỀ 1: ĐẠI CƢƠNG VỀ VACCINE TIÊM CHỦNG