BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PHYTOSOME CAO BẠCH QUẢ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PHYTOSOME CAO BẠCH QUẢ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 8720202 Người hướng dẫn khoa học : TS Nguyễn Thị Kim Thu TS Vũ Thị Thu Giang HÀ NỘI 2018 LỜI CẢM ƠN Trong dòng đầu tiên, tơi xin phép gửi lời cảm ơn sâu sắc tới: TS Nguyễn Thị Kim Thu TS Vũ Thị Thu Giang Là người thầy tận tình hướng dẫn, bảo, hết lòng giúp đỡ trực tiếp hướng dẫn suốt q trình nghiên cứu, thực luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn đến PGS TS Phạm Thị Minh Huệ tồn thể thầy cơ, anh chị kỹ thuật viên môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội, giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài Nhân đây, xin gửi lời cảm ơn thầy Ban giám hiệu, phòng ban, thầy cô giáo cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội - người dạy bảo tơi, giúp đỡ tơi q trình học tập trường Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè - người giúp đỡ, động viên tơi q trình học tập nghiên cứu vừa qua Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Học viên Vũ Thị Quỳnh MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .1 Chương TỔNG QUAN 1.1 Cao bạch .2 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Dược động học 1.1.4 Tác dụng dược lý 1.1.5 Chỉ định 1.1.6 Tác dụng không mong muốn 1.1.7 Liều dùng 1.1.8 Một số chế phẩm chứa cao bạch lưu hành thị trường 1.1.9 Kiểm nghiệm cao bạch 1.2 Phytosome 1.2.1 Khái niệm phytosome 1.2.2 Thành phần phytosome 1.2.3 Ưu nhược điểm phytosome 1.2.4 Phương pháp bào chế phytosome .11 1.2.4.1 Các phương pháp bào chế phytosome 11 1.2.4.2 Phương pháp bốc dung môi 12 1.2.5 Đánh giá phytosome 12 1.2.5.1 Đánh giá tương tác hoạt chất phospholipid phytosome 12 1.2.5.2 Đánh giá hiệu suất phytosome hóa 12 1.2.5.3 Đánh giá hệ số phân bố dầu - nước (log P) 13 1.2.6 Một số nghiên cứu bào chế phytosome 14 1.2.6.1 Nghiên cứu bào chế phytosome Việt Nam 14 1.2.6.2 Nghiên cứu bào chế phytosome từ cao dược liệu giới 16 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu, nguyên vật liệu, thiết bị nghiên cứu 19 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.2 Nguyên vật liệu, hóa chất, dung môi nghiên cứu .19 2.1.3 Thiết bị nghiên cứu 20 2.2 Nội dung nghiên cứu 20 2.3 Phương pháp nghiên cứu 21 2.3.1 Phương pháp xác định độ tan flavonoid tồn phần CBQ, PBQ dung mơi khác 21 2.3.2 Phương pháp bào chế phytosome cao bạch phương pháp bốc dung môi 21 2.3.3 Phương pháp định lượng hàm lượng flavonoid toàn phần PBQ phương pháp HPLC 22 2.3.4 Phương pháp đánh giá khả tạo phức CBQ PL phytosome 24 2.3.5 Phương pháp đánh giá hiệu suất phytosome hóa .24 2.3.6 Phương pháp xác định hệ số phân bố (distribution coefficient, log D) 25 2.3.7 Nghiên cứu độ ổn định 26 2.3.8 Phương pháp xử lý số liệu 26 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .27 3.1 Xây dựng thẩm định quy trình định lượng flavonoid toàn phần PBQ phương pháp HPLC 27 3.1.1 Độ đặc hiệu 27 3.1.2 Khảo sát tính thích hợp hệ thống sắc ký 28 3.1.3 Tính tuyến tính 28 3.1.4 Độ lặp lại 31 3.1.5 Độ 32 3.2 Khảo sát độ tan flavonoid toàn phần CBQ dung môi khác 34 3.3 Nghiên cứu bào chế phytosome cao bạch 35 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ CBQ so với lecithin đến hiệu suất phytosome hóa35 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng số thơng số quy trình bào chế đến hiệu suất phytosome hóa 38 3.3.2.1 Ảnh hưởng thời gian tạo phức đến hiệu suất phytosome hóa .38 3.3.2.2 Ảnh hưởng nhiệt độ tạo phức đến hiệu suất phytosome hóa 39 3.3.3 Nâng cấp quy mô bào chế 41 3.4 Đánh giá số đặc tính phytosome cao bạch 44 3.4.1 Độ tan flavonoid toàn phần PBQ dung môi khác 44 3.4.2 Hệ số phân bố (distribution coefficient, logD) 44 3.5 Chứng minh hình thành phức hợp cao bạch lecithin PBQ 46 3.5.1 Phổ hấp thụ hồng ngoại (IR) .46 3.5.2 Phổ nhiệt lượng vi sai quét (Differential Scanning Calorimetry - DSC) 48 3.6 Nghiên cứu độ ổn định phytosome cao bạch 49 Chương BÀN LUẬN 51 4.1 Về nghiên cứu bào chế phytosome cao bạch 51 4.1.1 Về phương pháp bào chế 51 4.1.2 Về xây dựng công thức quy trình bào chế 51 4.1.3 Về nâng cấp quy mô bào chế 53 4.2 Về đánh giá hiệu suất phytosome hóa 53 4.3 Về đánh giá hệ số phân bố (log D) phytosome cao bạch .54 4.4 Về chứng minh hình thành phức hợp 55 4.5 Về độ ổn định phytosome cao bạch 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT STT Viết tắt Từ/cụm từ viết tắt AUC Diện tích đường cong (area under the curve) CBQ Cao bạch DĐVN DSC HPLC HSPC IR Phổ hồng ngoại (infrared spectroscopy) kl Khối lượng KTTP Kích thước tiểu phân 10 NSX Nhà sản xuất 11 PBQ Phytosome cao bạch 12 PC Phosphatidylcholin 13 PDI Chỉ số đa phân tán (polydispersity index) 14 PL Phospholipid 15 RRT Thời gian lưu tương đối (relative standard) 16 RSD Độ lệch chuẩn tương đối 17 SKD Sinh khả dụng 18 Spic Diện tích pic sắc ký 19 TB Trung bình 20 TKPT Tinh khiết phân tích 21 TKSK Tinh khiết sắc ký 22 tt 23 XRD Dược điển Việt Nam Nhiệt lượng vi sai quét (differential scanning calorimetory) Sắc kí lỏng hiệu cao (high performance liquid chromatography) Phosphatidylcholin đậu nành hydrogen hóa (hydrogennated soy phosphatidylcholine) Thể tích Phổ nhiễu xạ tia X (X-ray diffraction) DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU STT Tên bảng Bảng 1.1 Thành phần hóa học cao bạch chuẩn hóa EGb761 Trang 2 Bảng 1.2 Một số chế phẩm chứa CBQ lưu hành thị trường Bảng 2.1 Nguyên liệu 19 Bảng 3.1 Kết khảo sát tính thích hợp hệ thống sắc kí 28 Bảng 3.2 Tương quan nồng độ quercetin diện tích pic 29 Bảng 3.3 Tương quan nồng độ kaempferol diện tích pic 29 Bảng 3.4 Tương quan nồng độ isorhamnetin diện tích pic 30 Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại 31 Bảng 3.6 Kết khảo sát độ hệ thống sắc kí 32 10 Bảng 3.7 Độ tan flavonoid tồn phần CBQ dung mơi 34 11 Bảng 3.8 Hiệu suất phytosome hóa thay đổi tỷ lệ CBQ/lecithin 36 12 Bảng 3.9 Hiệu suất phytosome hóa thay đổi thời gian tạo phức 38 13 Bảng 3.10 Hiệu suất phytosome hóa thay đổi nhiệt độ tạo phức 40 14 Bảng 3.11 Hiệu suất phytosome hóa đặc tính PBQ bào chế quy mô khác 42 15 Bảng 3.12 Độ tan flavonoid toàn phần CBQ PBQ dung môi 44 16 Bảng 3.13 Hệ số phân bố log D CBQ PBQ 45 17 Bảng 3.14 Số sóng nhóm -OH flavonoid CBQ, N+(CH3)3, PO2- phospholipid lecithin 46 18 Bảng 3.15 Hiệu suất phytosome hóa đặc tính PBQ bảo quản điều kiện khác 50 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ STT Tên hình vẽ Hình 1.1 Cấu trúc hóa học flavonol glycosid chủ yếu CBQ Hình 1.2 Cấu trúc phytosome Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn tương quan nồng độ quercetin diện tích pic Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn tương quan nồng độ kaemprerol diện tích pic Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn tương quan nồng độ isorhamnetin diện tích pic Hình 3.3 Mẫu PBQ thay đổi các tỷ lệ CBQ/lecithin Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng tỷ lệ CBQ/lecithin đến hiệu suất phytosome hóa Trang 29 30 31 36 37 Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng thời gian tạo phức đến hiệu suất phytosome hóa 39 Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng nhiệt độ tạo phức đến hiệu suất phytosome hóa 40 10 Hình 3.7 Mẫu PBQ trước sau nghiền, rây quy mơ 940 g/mẻ 42 11 Hình 3.8 Sơ đồ quy trình bào chế phytosome cao bạch quy mơ 940 g/mẻ 43 12 Hình 3.9 Phổ IR (I): CBQ; (II): Lecithin; (III): Hỗn hợp vật lý; (IV): PBQ 46 13 Hình 3.10 Phổ nhiệt lượng vi sai quét mẫu (I): CBQ (II): lecithin 48 14 Hình 3.11 Phổ nhiệt lượng vi sai quét mẫu PBQ 49 ĐẶT VẤN ĐỀ Cao bạch (Ginkgo biloba) chứa flavonoid terpen trilacton thành phần quan trọng cao mang lại tác dụng sinh học, chúng có tác dụng chống oxy hóa, loại bỏ gốc tự do, ức chế tác nhân chống kết tập tiểu cầu, bảo vệ chức ty thể chống lại apoptosis [15], [20] Tuy nhiên, nhược điểm lớn chế phẩm chứa cao bạch sinh khả dụng đường uống thấp cụ thể với thành phần flavonoid Nguyên nhân theo hệ thống phân loại sinh dược học, flavonoid cao bạch xếp vào nhóm III: tan tốt nước tính thấm kém, khó hấp thu qua niêm mạc đường tiêu hóa theo chế khuếch tán thụ động [29], [45] Liều uống chế phẩm từ cao bạch cao (trên 120 mg/ngày) Như vậy, nghiên cứu cải thiện tính thấm, tăng khả hấp thu, nâng cao sinh khả dụng đường uống cho thành phần flavonoid nói riêng cao bạch nói chung yêu cầu có tính khoa học cần thiết Nhiều phương pháp với mục tiêu cải thiện sinh khả dụng đường uống cho cao bạch nghiên cứu bao gồm hệ phân tán rắn, hệ tự nhũ hóa đặc biệt phức hợp với phospholipid (phytosome) Phytosome phức hợp hoạt chất tinh khiết (chủ yếu polyphenol) có nguồn gốc dược liệu hoạt chất cao dược liệu chuẩn hóa, có nhiều ưu điểm bật tăng khả hấp thu, tăng sinh khả dụng đường uống cho hoạt chất khó tan nước tính thấm kém, giảm liều sử dụng, tăng thời gian lưu thông hoạt chất tuần hoàn, dẫn đến tăng tác dụng hoạt chất [22], [42] Đây hướng nghiên cứu đầy hứa hẹn nghiên cứu phát triển sản phẩm chăm sóc sức khỏe có nguồn gốc từ tự nhiên Để góp phần nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ phytosome cho cao bạch quả, đề tài “Nghiên cứu bào chế phytosome cao bạch quả” thực với mục tiêu chính: Bào chế phytosome cao bạch phương pháp bốc dung môi Nghiên cứu độ ổn định phytosome cao bạch carboxylic…và thành phần tạp khác Trong lecithin, thành phần phosphatidylcholin chiến tỷ lệ cao (khoảng 50,9%) có loại phospholipid khác số thành phần tạp chất khác Chính vậy, phổ IR cao bạch lecithin xuất đỉnh pic lạ, không đặc trưng hay phổ DSC CBQ xuất nhiều pic Với phổ IR: xảy dịch chuyển số sóng đặc trưng nhóm chức OH phenol flavonoid CBQ nhóm phosphat PL lecithin số sóng thấp cho thấy có tương tác nhóm chức đó, hình thành liên kết hydro nhóm OH phenol flavonoid phosphat PL [7] Phổ IR hỗn hợp vật lý CBQ/lecithin (1:4 kl/kl) không xảy dịch chuyển đáng kể số sóng đặc trưng cho nhóm chức nên khơng xảy tương tác flavonoid PL Phổ IR hỗn hợp vật lý tổng hợp hai phổ IR nguyên liệu Trên phổ IR PBQ xuất số sóng đặc trưng cho cấu trúc flavonoid CBQ nhóm ceton liên hợp, cấu trúc nhân thơm hay cấu trúc PL nhóm amin bậc 4, nhóm alken hydrocarbon khơng no, nhóm ester liên kết acid béo glycerol Vì vậy, tạo phức CBQ lecithin khơng làm thay đổi cấu trúc thành phần tham gia Nhược điểm phương pháp phân tích phổ IR bước đầu dự đoán tương tác nhóm chức OH - phenol nhóm phosphat hình thành liên kết phức hợp thông qua liên kết hydro, chưa thể khẳng định chắn thành phần flavonoid CBQ tham gia liên kết số thành phần khác cao tham gia tạo phức, đồng thời khơng xác định xác nhóm OH - phenol phân tử flavonoid tham gia liên kết Với phổ DSC: dựa thay đổi hay pic thu nhiệt nguyên liệu so với PBQ để đánh giá tương tác CBQ lecithin Trên phổ DSC PBQ, pic xuất phổ DSC CBQ lecithin hoàn tồn biến Như vậy, có tương tác xảy thành phần CBQ lecithin Nhược điểm phương pháp cho biết xảy tương tác thành phần tham gia khơng kết luận xác tương tác có phải tạo phức flavonoid CBQ phospholipid lecithin hay không 56 * Như vậy: thơng qua phân tích phổ IR DSC bước đầu đưa kết luận hình thành phức hợp thành phần flavonoid CBQ với PL lecithin nhờ liên kết hydro nhóm OH - phenol nhóm phosphat Kết tương tự với kết nghiên cứu Huizhen Wang cộng (2014) phức hợp PL flavonoid (isorhamnetin, kaempferol quercetin) cao hắc mai biển (Hippophae rhamnoiedes) [46] Để khẳng định chắn hình thành phức hợp PBQ cần áp dụng thêm phương pháp khác cộng hưởng từ hạt nhân, nhiễu xạ tia X, phổ khối… 4.5 Về độ ổn định phytosome cao bạch Khó khăn bào chế phytosome đảm bảo độ ổn định sản phẩm thời gian dài Trong nghiên cứu bào chế PBQ, đề tài lựa chọn lecithin đậu nành cho công thức bào chế PBQ nguồn ngun liệu rẻ, sẵn có, phù hợp bào chế phytosome sử dụng đường uống Tuy nhiên có nguồn gốc từ tự nhiên, cấu trúc đuôi acid béo phân tử PL có nhiều liên kết đơi dễ bị oxy hóa tác dụng ánh sáng nhiệt độ, ảnh hưởng tới độ ổn định phytosome thu Bên cạnh đó, thành phần flavonoid với cấu trúc nhiều liên kết đôi liên hợp, nhiều nhóm OH - phenol dễ bị oxy hóa, phân hủy đặc biệt tác động nhiệt độ cao tác nhân oxy hóa [10] Đề tài tiến hành đánh giá độ ổn định PBQ bào chế hai điều kiện: điều kiện thực phòng thí nghiệm (nhiệt độ 25 - 350C, độ ẩm tương đối 55 - 85 %) điều kiện lão hóa cấp tốc (nhiệt độ 400C ± 20C, độ ẩm 75 ± %) PBQ có ổn định hiệu suất phytosome hóa hàm lượng flavonoid tồn phần bảo quản điều kiện thực tháng Tuy nhiên điều kiện lão hóa cấp tốc, PBQ ổn định hiệu suất phytosome hóa, hàm lượng flavonoid tồn phần có thay đổi cảm quan Sự thay đổi q trình phân hủy lecithin flavonoid tác động lâu dài ẩm nhiệt độ cao Do hạn chế thời gian nghiên cứu, đề tài tiến hành đánh giá độ ổn định PBQ sau tháng Trong nghiên cứu tiếp tục đánh giá độ ổn định PBQ có biện pháp cải thiện độ ổn định cho PBQ thêm thành phần chống oxy hóa cơng thức bào chế Một khó khăn khác q trình bảo quản PBQ sản phẩm dễ hút ẩm tiếp xúc với khơng khí độ ẩm cao, làm thay đổi thể chất sản phẩm bào chế từ 57 lecithin Vì vậy, cần bảo quản PBQ bao bì kín, khơng thấm ẩm khí Duy trì hàm ẩm cho phytosome cao bạch khó khăn cần trọng khắc phục nghiên cứu ứng dụng PBQ vào dạng thuốc rắn (viên nén, viên nang) 58 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ  Kết luận: Đề tài đạt mục tiêu đề ra: Đã bào chế phytosome cao bạch phương pháp bốc dung môi với yếu tố thuộc công thức quy trình bào chế: dung mơi tạo phức ethanol tuyệt đối, tỷ lệ cao bạch (tính theo hàm lượng flavonoid toàn phần) so với lecithin 1: (kl/kl); thời gian tạo phức giờ; nhiệt độ tạo phức 500C Hiệu suất phytosome hóa đạt cao 95,40 ± 0,98 % Khả hình thành phức hợp bước đầu chứng minh qua phân tích phổ IR DSC Phức hợp thu có hệ số phân bố log D pH 4,5; 6,8; 7,4 tăng so với cao nguyên liệu Đã tiến hành nâng cấp quy mô bào chế PBQ (940 g/mẻ) đạt hiệu suất phytosome hóa hàm lượng flavonoid tồn phần tương tự với quy mơ phòng thí nghiệm Đã tiến hành nghiên cứu độ ổn định PBQ điều kiện bảo quản: lão hóa cấp tốc điều kiện thực Mẫu PBQ ổn định bảo quản điều kiện thực sau tháng Hàm lượng flavonoid toàn phần hiệu suất phytosome hóa giảm nhẹ mẫu PBQ bảo quản điều kiện lão hóa cấp tốc sau tháng  Kiến nghị Để hoàn thiện nghiên cứu, đề tài nêu số kiến nghị: Tiếp tục nghiên cứu độ ổn định cải thiện độ ổn định cho phytosome cao bạch Nghiên cứu ứng dụng phytosome cao bạch vào dạng thuốc rắn (viên nén viên nang) 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Bộ Y Tế (2011), Dược liệu học - Tập I, tr 259-289, NXB Y học, Hà Nội Bộ Y Tế (2015), Dược điển Việt Nam IV (bản bổ sung DĐVN IV), tr 1157- 1159, NXB Y học, Hà Nội Vũ Thị Thu Hà (2016), Nghiên cứu bào chế phytosome quercetin phương pháp kết tủa dung mơi, Khố luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Phạm Thị Minh Huệ, Bùi Văn Thuấn, Đặng Việt Hùng (2015), "Nghiên cứu bào chế phytosome curcumin", Tạp chí dược học, tập (số 3), tr 14-18 Phạm Thị Minh Huệ, Nguyễn Thanh Hải (2017), Liposome, Phytosome Phỏng sinh học bào chế, tr 86-106, NXB Đại học Quốc Gia Hà Nội, Hà Nội Cồ Thị Oanh (2017), Nghiên cứu bào chế phytosome quercetin, Luận văn Thạc sĩ dược học, Trường đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Đình Thành (2011), Cơ sở phương pháp phổ ứng dụng hóa học, tr 72-142, NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Thị Thúy, Đào Thị Hồng Bích, Nguyễn Việt Anh, Vũ Đức Lợi (2016), "Nghiên cứu thành phần điều chế phytosome saponin toàn phần củ Tam thất (Panax notoginseng) trồng Tây Bắc Việt Nam", Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, tập 33 (số 1), tr 18-24 Đào Bá Hoàng Tùng (2016), Nghiên cứu bào chế phytosome quercetin phương pháp bốc dung mơi, Khố luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Tài liệu Tiếng Anh 10 Agrawal Vipin K., Gupta A., et al (2012), "Improvement in bioavailability of class-III drug: Phytolipid delivery system," International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 14(1), pp 37-42 11 Ahmad Hafsa, Arya Abhishek, et al (2016), "Rutin phospholipid complexes confer neuro-protection in ischemic-stroke rats", RSC Advances, 6(99), pp 9644596454 12 Andrés Axel, Rosés Martí, et al (2015), "Setup and validation of shake-flask procedures for the determination of partition coefficients (log D) from low drug amounts", European Journal of Pharmaceutical Sciences, 76, pp 181-191 13 Bhattacharyya Sauvik, Ahammed S Milan, et al (2013), "The gallic acid - phospholipid complex improved the antioxidant potential of gallic acid by enhancing its bioavailability", AAPS PharmSciTech, 14(3), pp 1025-1033 14 British Pharmacopoeia (2016), Volume IV, pp 206-213 15 Chan P C., Xia Q., et al (2007), "Ginkgo biloba leave extract: biological, medicinal, and toxicological effects", Journal of Environmental Science and Health Part C, 25(3), pp 211-244 16 Chen Feng, Li Li, et al (2013), "Systemic and cerebral exposure to and pharmacokinetics of flavonols and terpene lactones after dosing standardized Ginkgo biloba leaf extracts to rats via different routes of administration", British Journal of Pharmacology, 170(2), pp 440-457 17 Chen Zhi-peng, Sun Jun, et al (2010), "Comparative pharmacokinetics and bioavailability studies of quercetin, kaempferol and isorhamnetin after oral administration of Ginkgo biloba extracts, Ginkgo biloba extract phospholipid complexes and Ginkgo biloba extract solid dispersions in rats", Fitoterapia, 81(8), pp 1045-1052 18 Cheng W., Li X., Zhang C., Chen W., Yuan H., et al (2017), "Preparation and in vivo, in vitro evaluation of polydatin - phospholipid complex with improved dissolution and bioavailability", International Journal of Drug Development and Research, 9(1), pp 39-43 19 Das Malay K., Kalita B (2014), "Design and evaluation of phyto - phospholipid complexes (phytosomes) of rutin for transdermal application ", Journal of Applied Pharmaceutical Science, 4(10), pp 51-57 20 Eckert A., Keil U., et al (2003), "Effects of EGb 761® Ginkgo biloba extract on mitochondrial function and oxidative stress", Pharmacopsychiatry, 36(S1), pp 15-23 21 European Medicine Acency/Committee on Herbal Medicinal Products (2014), Assessment report on Ginkgo biloba L., folium 22 Ghanbarzadeh Babak, Babazadeh Afshin, et al (2016), "Nano - phytosome as a potential food-grade delivery system", Food Bioscience, 15, pp 126-135 23 Gnananath K., Sri Nataraj K., et al (2017), "Phospholipid complex technique for superior bioavailability of phytoconstituents", Advanced pharmaceutical bulletin, 7(1), pp 35-42 24 Hecker Helke, Johannisson Reiner, et al (2002), "In vitro evaluation of the cytotoxic potential of alkylphenols from Ginkgo biloba L", Toxicology, 177(2), pp 167-177 25 Herrschaft Horst, Nacu Anatol, et al (2012), "Ginkgo biloba extract EGb 761® in dementia with neuropsychiatric features: A randomised, placebo-controlled trial to confirm the efficacy and safety of a daily dose of 240 mg", Journal of Psychiatric Research, 46(6), pp 716-723 26 Jena Sunil Kumar, Singh Charan, et al (2014), "Development of tamoxifen - phospholipid complex: Novel approach for improving solubility and bioavailability", International Journal of Pharmaceutics, 473(1), pp 1-9 27 Khan Junaid, Alexander Amit, et al (2013), "Recent advances and future prospects of phyto - phospholipid complexation technique for improving pharmacokinetic profile of plant actives", Journal of Controlled Release, 168(1), pp 50-60 28 Li Jing, Wang Xuling, et al (2015), "A review on phospholipids and their main applications in drug delivery systems", Asian Journal of Pharmaceutical Sciences, 10(2), pp 81-98 29 Li Li, Yuansheng Zhao, et al (2012), "Intestinal absorption and presystemic elimination of various chemical constituents present in GBE50 extract, a standardized extract of Ginkgo biloba leaves", Current Drug Metabolism, 13(5), pp 494-509 30 Liu Xin-Guang, Wu Si-Qi, et al (2015), "Advancement in the chemical analysis and quality control of flavonoid in Ginkgo biloba", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 113, pp 212-225 31 Marczylo Timothy H., Verschoyle Richard D., et al (2007), "Comparison of systemic availability of curcumin with that of curcumin formulated with phosphatidylcholine", Cancer Chemotherapy and Pharmacology, 60(2), pp 171-177 32 Mark Gibson (2009), Pharmaceutical preformulation and formulation: A practical guide from candidate drug selection to commercial dosage form, pp 22-24, Informa Healthcare, USA 33 Organization for economic co-operation and development (OECD) guidelines for the testing of chemicals (1995), Test No 105: Water solubility, OECD publishing, Paris 34 Organization for economic co-operation and development (OECD) guidelines for the testing of chemicals (1995), Test No 107: Partition coefficient (noctanol/water): Shake flask method, OECD publishing, Paris 35 Pharmacopoeia of the people's republic of China (2015), Volume Ia, pp 2064- 2067 36 Pretsch E Buhlmann P., Badertscher M (2009), Structure determination of organic compounds: Tables of spectral data, pp 269-335, Springer 37 Saoji Suprit D., Raut Nishikant A., et al (2016), "Preparation and evaluation of phospholipid - based complex of standardized Centella extract (SCE) for the enhanced delivery of phytoconstituents", The AAPS Journal, 18(1), pp 102-114 38 Semalty Ajay, Semalty Mona, et al (2010), "Supramolecular phospholipids – polyphenolics interactions: The PHYTOSOME® strategy to improve the bioavailability of phytochemicals", Fitoterapia, 81(5), pp 306-314 39 Singh Anupama, Saharan Vikas Anand, et al (2011), "Phytosome: Drug delivery system for polyphenolic phytoconstituents", Iranian Journal of Pharmaceutical Sciences, 7(4), pp 209-219 40 Tan M S., Yu J T., et al (2015), "Efficacy and adverse effects of Ginkgo biloba for cognitive impairment and dementia: a systematic review and metaanalysis", Journal of Alzheimer's Disease, 43(2), pp 589-603 41 The United States Pharmacopeia and National Formulary (USP 40 - NF 35) (2017), Volume IV, pp 7003-7012 42 Udapurkar Prachi, Bhusnure Omprakash, et al (2016), "Phyto - phospholipid complex vesicles for phytoconstituents and herbal extracts: A promising drug delivery system ", International Journal of Herbal Medicine, 4(5), pp 14-20 43 Van Beek Teris A., Montoro P (2009), "Chemical analysis and quality control of Ginkgo biloba leaves, extracts, and phytopharmaceuticals", Journal of Chromatography A, 1216(11), pp 2002-2032 44 Vora Amisha, Londhe Vaishali, et al (2015), "Preparation and characterization of standardized pomegranate extract - phospholipid complex as an effective drug delivery tool", Journal of Advanced Pharmaceutical Technology & Research, 6(2), pp 75-80 45 Waldmann S., Almukainzi M., et al (2012), "Provisional biopharmaceutical classification of some common herbs used in Western medicine", Molecular pharmaceutics, 9(4), pp 815-822 46 Wang Huizhen, Cui Yuqing, et al (2015), "A phospholipid complex to improve the oral bioavailability of flavonoids", Drug Development and Industrial Pharmacy, 41(10), pp 1693-1703 47 Yuan Qiuju, Wang Chong-wen, et al (2017), "Effects of Ginkgo biloba on dementia: An overview of systematic reviews", Journal of Ethnopharmacology, 195, pp 1-9 48 Yue Peng-Fei, Yuan Hai-Long, et al (2010), "Process optimization, characterization and evaluation in vivo of oxymatrine phospholipid complex", International Journal of Pharmaceutics, 387(1), pp 139-146 PHỤ LỤC Phụ lục Hình ảnh sắc ký đồ Hình PL 1.1 Sắc ký đồ hỗn hợp chuẩn quercertin, kaempferol isohamnetin nồng độ chất chuẩn 50 µg/ml Hình PL 1.2 Sắc ký đồ mẫu thử phytosome cao bạch Hình PL 1.3 Sắc ký đồ mẫu trắng Phụ lục Phổ IR cao bạch quả, lecithin, hỗn hợp vật lý cao bạch lecithin; phytosome cao bạch Hình PL 2.1 Phổ IR cao bạch Hình PL 2.2 Phổ IR lecithin Hình PL 2.3 Phổ IR hỗn hợp vật lý cao bạch lecithin tỷ lệ 1:4 (kl/kl) Hình PL 2.4 Phổ IR phytosome cao bạch Phụ lục Phổ DSC cao bạch quả, lecithin, phytosome cao bạch Figure: Crucible:Al 100 µl Experiment:CAO Atmosphere:Ar 13/03/2018 Procedure: RT-250 oC 5C.min-1 (Zone 2) DSC131 Mass (mg): 31.28 HeatFlow/mW Exo -2 -4 -6 -8 Peak :175.0070 °C Onset Point :172.8693 °C Enthalpy /J/g : 6.0207 (Endothermic effect) -10 Peak :71.8548 °C Onset Point :67.0076 °C Enthalpy /J/g : 4.3746 (Endothermic effect) -12 -14 Peak :112.8068 °C Onset Point :64.4641 °C Enthalpy /J/g : 216.9053 (Endothermic effect) -16 50 75 100 125 150 175 200 Furnace temperature /°C Hình PL 3.1 Phổ DSC cao bạch Figure: Crucible:Al 100 µl Experiment:Lecithin 14/03/2018 Procedure: RT-250 oC 5C.min-1 (Zone 2) DSC131 Atmosphere:Ar Mass (mg): 20.35 HeatFlow/mW -0.5 Exo -1.0 -1.5 -2.0 -2.5 Peak :43.3351 °C Onset Point :32.6534 °C Enthalpy /J/g : 11.8267 (Endothermic effect) -3.0 -3.5 -4.0 -4.5 Peak :144.1710 °C Onset Point :138.4639 °C Enthalpy /J/g : 12.5932 (Endothermic effect) -5.0 -5.5 40 60 80 100 120 140 Hình PL 3.2 Phổ DSC lecithin Furnace temperature /°C Figure: Experiment:Tinh PBQ che Crucible:Al 100 µl 13/03/2018 Procedure: RT-250 oC 5C.min-1 (Zone 2) DSC131 Atmosphere:Ar Mass (mg): 28.13 HeatFlow/mW 14 Exo 12 10 Cp Delta : -4.458 J/g.K Tg : 137.337 °C -2 -4 -6 -8 25 50 75 100 125 150 175 200 Furnace temperature /°C Hình PL 3.3 Phổ DSC phytosome cao bạch ... chế phytosome cao bạch quả thực với mục tiêu chính: Bào chế phytosome cao bạch phương pháp bốc dung môi Nghiên cứu độ ổn định phytosome cao bạch Chương TỔNG QUAN 1.1 Cao bạch 1.1.1 Định nghĩa Cao. .. có nghiên cứu cao bạch Vì vậy, để góp phần nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ phytosome với cao dược liệu chuẩn hóa nói chung cao bạch nói riêng chúng tơi tiến hành đề tài Nghiên cứu bào chế phytosome. .. 1.2.6.1 Nghiên cứu bào chế phytosome Việt Nam 14 1.2.6.2 Nghiên cứu bào chế phytosome từ cao dược liệu giới 16 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu, nguyên