BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI THÁI KHOA BẢO CHÂU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC GIẢM ĐAU CHỐNG VIÊM TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG LC-MS/MS LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI THÁI KHOA BẢO CHÂU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC GIẢM ĐAU CHỐNG VIÊM TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG LC-MS/MS LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Thị Kiều Anh NCS ThS Đào Thị Cẩm Minh HÀ NỘI 2018 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đề tài Luận văn thạc sĩ cách hoàn chỉnh, hướng dẫn nhiệt tình q Thầy Cơ, động viên ủng hộ gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt thời gian học tập nghiên cứu nguồn động lực lớn lao quý giá Đầu tiên, xin chân thành bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Thị Kiều Anh NCS Ths Đào Thị Cẩm Minh, người trực tiếp hướng dẫn, tận tình bảo tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực hồn thành Luận văn Đặc biệt, cho phép gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS TS Phạm Thị Thanh Hà động viên, nhiệt tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình thực Xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn đến tồn thể q Thầy Cô Trường Đại học Dược Hà Nội đặc biệt q Thầy Cơ Bộ mơn Hóa phân tích – Độc chất, tận tình truyền đạt kiến thức quý báu tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Tôi xin gởi lời cảm ơn đến Ban lãnh đạo anh chị cán Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia – Trường Đại học Dược Hà Nội Trung tâm giám định ma túy – Viện Khoa học hình – Bộ Cơng an không ngừng hỗ trợ thiết bị tạo điều kiện tốt cho suốt thời gian nghiên cứu thực Luận văn Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn anh chị đồng nghiệp Khoa Dược – Trường Đại học Y Dược Huế động viên, hỗ trợ cho tơi nhiều suốt q trình học tập thực đề tài Mặc dù có nhiều cố gắng suốt trình thực đề tài, song có mặt hạn chế, thiếu sót Tơi mong nhận ý kiến đóng góp dẫn thầy giáo anh chị đồng nghiệp Hà Nội, ngày 14 tháng 05 năm 2018 Thái Khoa Bảo Châu MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tình hình trộn trái phép thuốc giảm đau chống viêm chế phẩm đông dược 1.1.1 Trên giới 1.1.2 Tại Việt Nam 1.2 Tổng quan thuốc nghiên cứu 1.2.1 Nhóm thuốc glucocorticoid 1.2.2 Nhóm thuốc giảm đau, chống viêm không steroid 1.3 Tổng quan sắc ký lỏng khối phổ 11 1.3.1 Sắc ký lỏng hiệu cao 12 1.3.2 Khối phổ 13 1.4 Một số nghiên cứu phát nhóm thuốc giảm đau chống viêm 16 1.4.1 Trên giới .16 1.4.2 Tại Việt Nam .20 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Đối tượng phương tiện nghiên cứu 24 2.1.1 Hóa chất – chất chuẩn 24 2.1.2 Máy móc – trang thiết bị 25 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 25 2.2 Phương pháp nghiên cứu 27 2.2.1 Thu thập mẫu .27 2.2.2 Xử lý mẫu 28 2.2.3 Xây dựng phương pháp định lượng LC-MS/MS 28 2.2.4 Thẩm định phương pháp phân tích xây dựng 28 2.2.5 Ứng dụng phân tích mẫu thu thập 29 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 29 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .30 3.1 Xây dựng phương pháp phân tích 30 3.1.1 Chuẩn bị dung dịch 30 3.1.2 Khảo sát lựa chọn điều kiện khối phổ 30 3.1.3 Khảo sát lựa chọn điều kiện xử lý mẫu 43 3.2 Thẩm định quy trình phân tích 52 3.2.1 Độ phù hợp hệ thống .52 3.2.2 Độ đặc hiệu 53 3.2.3 Khoảng nồng độ tuyến tính 55 3.2.4 Độ độ xác .57 3.2.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng 61 3.3 Ứng dụng quy trình phân tích mẫu thực .65 CHƯƠNG BÀN LUẬN 70 4.1 Về xử lý mẫu .70 4.2 Về phương pháp phân tích 71 4.3 Về thẩm định phương pháp 72 4.4 Về ứng dụng phương pháp 73 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết tối ưu hóa điều kiện khối phổ chất phân tích Phụ lục 2: Sắc ký đồ khảo sát khoảng nồng độ tuyến tính Phụ lục 3: Sắc ký đồ kết định danh mẫu dương tính Phụ lục 4: Danh mục mẫu chế phẩm đơng dược phân tích Phụ lục 5: Hình ảnh mẫu dương tính Phụ lục 6: Cơng thức thuốc chọn làm mẫu Phụ lục 7: Hình ảnh mẫu DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt ACN AOAC AR BETA CE COX DEXA ESI HPLC HPTLC HYRO ICH INDO KETO LC-MS/MS LOD LOQ m/z MeOH MRM MS NSAID PA PARA PIRO PREL PREN RSD S/N SIM SRM TFA TLC TOF TPCN Tiếng anh tên khoa học Tiếng việt Acetonitril Association of Official Analytical Hiệp hội nhà hóa phân tích Chemists thống Analytical Reagent Thuốc thử phân tích Betamethason Collision Energy Năng lượng bắn phá phân mảnh Cyclooxygenase Dexamethason acetat Electrospray Ionizaton Ion hóa phun điện tử High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatography High Performance Thin Layer Sắc ký lớp mỏng hiệu cao Chromatography Hydrocortison acetat International Conference on Hội nghị hòa hợp Quốc tế Harmonisation Indomethacin Ketoprofen Liquid chromatography – Mass Sắc ký lỏng hai lần khối phổ Spectrometry/Mass Spectrometry Limit of Detection Giới hạn phát Limit of Quantitation Giới hạn định lượng Khối lượng/điện tích Methanol Multiple Reaction Monitoring Mass Spectrometry Khối phổ Non-Steroidal Anti-Inflammatory Thuốc chống viêm không Drug steroid Pure Analysis Tinh khiết phân tích Paracetamol Piroxicam Prednisolon Prednison Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối Signal/noise Tín hiệu/nhiễu Selected Ion Monitoring Selected Reaction Monitoring Trifluoroacetic Acid Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng Time Of Flight Thời gian bay Thực phẩm chức DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tình hình trộn lẫn thuốc tân dược vào chế phẩm đông dược Việt Nam Bảng 1.2 Cấu trúc, tính chất vật lý thuốc glucocorticoid nghiên cứu Bảng 1.3 Cấu trúc, tính chất vật lý thuốc giảm đau, chống viêm không steroid nghiên cứu .10 Bảng 1.4 Các phương pháp phân tích số thuốc giảm đau chống viêm mẫu chế phẩm đông dược 17 Bảng 2.1 Các nguyên vật liệu dùng nghiên cứu .24 Bảng 3.1 Các thông số máy khối phổ 31 Bảng 3.2 Điều kiện khối phổ chất nghiên cứu 31 Bảng 3.3 Điều kiện khảo sát pha động theo chế độ gradient 38 Bảng 3.4 Kết khảo sát dung môi loại béo chất màu .44 Bảng 3.5 Kết khảo sát dung môi chiết 46 Bảng 3.6 Kết khảo sát thời gian siêu âm 48 Bảng 3.7 Kết khảo sát giai đoạn làm dịch chiết 50 Bảng 3.8 Kết đánh giá độ phù hợp hệ thống LC-MS/MS 52 Bảng 3.9 Sự phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic chất nghiên cứu .56 Bảng 3.10 Kết đánh giá độ độ xác N1 58 Bảng 3.11 Kết đánh giá độ độ xác N2 59 Bảng 3.12 Kết đánh giá độ độ xác N3 60 Bảng 3.13 Kết LOD LOQ mẫu N1, N2 N3 .65 Bảng 3.14 Kết ứng dụng phân tích mẫu thực 68 Bảng 3.15 Kết đánh giá mẫu thực dương tính 69 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ hệ thống LC-MS/MS 12 Hình 1.2 Sơ đồ máy sắc ký lỏng hiệu cao .13 Hình 1.3 Sơ đồ tạo ion nguồn ESI 14 Hình 1.4 Tứ cực chập ba gập cong hệ máy LC-MS/MS Bruker 15 Hình 2.1 Máy sắc ký Bruker EVOQ Qube 25 Hình 3.1 Phổ khối paracetamol 32 Hình 3.2 Phổ khối piroxicam 32 Hình 3.3 Phổ khối ketoprofen 33 Hình 3.4 Phổ khối indomethacin .33 Hình 3.5 Phổ khối dexamethason acetat 34 Hình 3.6 Phổ khối betamethason .34 Hình 3.7 Phổ khối hydrocortison acetat 35 Hình 3.8 Phổ khối prednisolon 35 Hình 3.9 Phổ khối prednison .36 Hình 3.10 Sắc ký đồ khảo sát cột sắc ký 37 Hình 3.11 Sắc ký đồ khảo sát tỷ lệ pha động 39 Hình 3.12 Sắc ký đồ khảo sát tốc độ dòng .41 Hình 3.13 Sắc ký đồ chất phân tích điều kiện LC-MS/MS lựa chọn .42 Hình 3.14 Kết khảo sát dung mơi loại béo chất màu N1 45 Hình 3.15 Kết khảo sát dung môi chiết N1 47 Hình 3.16 Kết khảo sát thời gian siêu âm N1 .49 Hình 3.17 Kết khảo sát giai đoạn làm dịch chiết N1 51 Hình 3.18 Quy trình xử lý mẫu 51 Hình 3.19 Sắc ký đồ khảo sát độ đặc hiệu N1 54 Hình 3.20 Sắc ký đồ khảo sát độ đặc hiệu N2 54 Hình 3.21 Sắc ký đồ khảo sát độ đặc hiệu N3 55 Hình 3.22 Sắc ký đồ chất phân tích nồng độ LOQ mẫu N1 62 Hình 3.23 Sắc ký đồ chất phân tích nồng độ LOQ mẫu N2 63 Hình 3.24 Sắc ký đồ chất phân tích nồng độ LOQ mẫu N3 64 Hình 3.25 Kết định danh paracetamol mẫu VNN156 66 Hình 3.26 Sắc ký đồ mẫu dương tính VNN156 .67 ĐẶT VẤN ĐỀ Sử dụng thuốc thực phẩm chức (TPCN) có nguồn gốc từ đông dược thay cho chế phẩm có nguồn gốc tổng hợp hóa dược xu phổ biến Theo Tổ chức Y tế Thế giới có đến 80% người dân nước phát triển sử dụng thường xuyên thuốc cổ truyền chăm sóc sức khỏe Ở Châu Âu, doanh thu đem lại từ sản phẩm thuốc có nguồn gốc thảo dược lên đến 3,7 tỷ Euro năm [38] Chế phẩm đơng dược có nguồn gốc từ thực vật, động vật khoáng vật Vốn coi có nguồn gốc tự nhiên, kinh tế an toàn, loại chế phẩm thường nhiều người ưa chuộng Tuy nhiên chế phẩm đông dược thường định điều trị kéo dài với số lượng lớn Nhằm hấp dẫn khách hàng, số nhà sản xuất sở khám chữa bệnh tư nhân trộn không công bố vào chế phẩm đông dược số loại thuốc tân dược để cải thiện tác dụng rút ngắn thời gian điều trị [35], [37] Điển hình nhóm thuốc tân dược hay trộn nhóm thuốc giảm glucose máu, thuốc chống viêm nhóm glucocorticoid, thuốc giảm đau, chống viêm không steroid, thuốc hạ huyết áp, thuốc giảm béo, thuốc ức chế phosphodiesterase-5 [62], [64] Trong đó, chiếm tỷ lệ cao nhóm thuốc giảm đau chống viêm [60], [65] Các trường hợp phát tập trung phần lớn Trung Quốc [34], [46], Singapore [50], Pakistan [25], Ấn Độ [51] Nam Phi [67] Dùng chế phẩm đơng dược có trộn lẫn tân dược nhóm giảm đau chống viêm với liều lớn kéo dài với chế phẩm đông dược thông thường gây nhiều biến chứng tác dụng phụ nguy hiểm buồn nôn, nôn, xuất huyết dày, phản ứng da nghiêm trọng, rối loạn huyết học, suy thượng thận… [39], [42] Nhiều trường hợp sử dụng chế phẩm đông dược điều trị bệnh xương khớp bệnh trở nên trầm trọng tác dụng phụ dùng kéo dài thuốc giảm đau chống viêm trộn lẫn [40] Để đảm bảo an tồn cho người sử dụng, bên cạnh việc tăng cường biện pháp xử lý quan quản lý Nhà nước việc nghiên cứu phát thuốc giảm đau chống viêm trộn trái phép vào chế phẩm đông dược quan kiểm nghiệm việc làm cần thiết Hiện Việt Nam có số cơng trình nghiên cứu phát thuốc giảm đau chống viêm trộn trái phép vào chế phẩm đông dược phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC) [14], [15], sắc ký lớp mỏng hiệu cao (HPTLC) [18], sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) [9], [12], [21] Tuy nhiên với mẫu chế phẩm đơng dược có tính chất phức tạp, phương pháp cho kết luận âm tính giả dương tính giả Hiện nay, phương pháp phân tích sắc ký lỏng hai lần khối phổ (LC-MS/MS) phương pháp phân tích đại Việt Nam, bước ứng dụng rộng rãi phân tích kiểm nghiệm thuốc Tập hợp khả phân tách chất sắc ký lỏng (LC) khả phát hiện, định lượng khối phổ (MS), phương pháp cho độ nhạy độ đặc hiệu cao, phù hợp phân tích mẫu phức tạp chế phẩm đông dược Đây xem phương pháp quy chiếu, thường dùng so sánh, đối chiếu với phương pháp khác việc phát thuốc tân dược trộn lẫn chế phẩm đông dược [38], [54] Từ thực tế trên, nhằm phát triển phương pháp phân tích xác định đồng thời nhiều tân dược trộn trái phép chế phẩm đông dược nồng độ thấp với độ tin cậy cao, góp phần vào cơng tác kiểm tra phát xác định tân dược trộn lẫn đông dược, tiến hành đề tài: “Xây dựng phương pháp xác định số thuốc giảm đau chống viêm trộn trái phép chế phẩm đông dược LC-MS/MS” Với mục tiêu: Xây dựng phương pháp xác định đồng thời paracetamol, piroxicam, indomethacin, ketoprofen, betamethason, dexamethason acetat, hydrocortison acetat, prednisolon prednison trộn lẫn chế phẩm đông dược phương pháp LC-MS/MS Ứng dụng phương pháp LC-MS/MS để xác định paracetamol, piroxicam, indomethacin, ketoprofen, betamethason, dexamethason acetat, hydrocortison acetat, prednisolon prednison (nếu có) trộn lẫn chế phẩm đơng dược lưu hành thị trường 3.3 Mẫu VNN156 Hình PL3.6 Kết định danh paracetamol mẫu VNN156 3.4 Mẫu HCH175 Hình PL3.7 Sắc ký đồ mẫu dương tính HCH175 Hình PL3.8 Kết định danh dexamethason acetat mẫu HCH175 3.5 Mẫu HCH176 Hình PL3.9 Sắc ký đồ mẫu dương tính HCH176 Hình PL3.10 Kết định danh dexamethason acetat mẫu HCH176 Hình PL3.11 Kết định danh paracetamol mẫu HCH176 Phụ lục 4: Danh mục mẫu chế phẩm đơng dược phân tích Bảng PL4.1 Danh mục mẫu chế phẩm đông dược phân tích STT Mã SP BN001 Tên thuốc Mẫu gửi kiểm nghiệm (Bột) VEH009 Cốt thoái vương (Viên nén) HCH016 Đỗ trọng đau lưng hoàn (Hoàn cứng) VNH018 Độc hoạt tang ký sinh (Viên nang) VNH020 Dưỡng cốt khang (Viên nang) VNH023 Gân cốt hoàn (Viên nang) BN051 Thuốc đặc trị chữa bệnh (Bột) VNH058 Thấp niệu nang Tâm Bình (Viên nang) Số lô, hạn dùng, nơi sản xuất Số lô: Không có Hạn dùng: Khơng có SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Khơng có Số lơ: 021216 Hạn dùng: 06/12/2019 SĐK: 25778/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH Tư vấn Y Dược Quốc Tế (IMC) Số lơ: Khơng có Hạn dùng: 07/05/2019 SĐK: 383/GCN-BYT Nhà sản xuất: Cơ sở Dân Lợi Số lơ: 0316 Hạn dùng: 11/05/2019 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: FITO Pharma Số lô: 03-150715 Hạn dùng: 14/07/2018 SĐK: 18666/14/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: TC Pharma Số lô: 00121 Hạn dùng: 06/2019 SĐK: 884/2010/YT-CNTC Nhà sản xuất: Cơ sở Kim Hòa Số lơ: Khơng có Hạn dùng: 10/2018 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Thuốc đơng y gia truyền Số lô: 12072016 Hạn dùng: 12/07/2019 SĐK: 8961/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH SX & TM Dược phẩm Tâm Bình Liều dùng lần/ngày gói/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần 3-4 lần/ngày 4-6 viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày gói/lần lần/ngày viên/lần STT Mã SP TLN062 Tên thuốc Trà Xương khớp Traly (Trà) 10 VEH063 Tuệ Đức Hoàn nguyên cốt (Viên nén) 11 VEH064 Tuệ Đức Khớp nữ (Viên nén) 12 BNN066 Viêm thấp khớp (Bột) 13 VEH067 Viên bổ khớp Xukoda (Viên nén) 14 VNH081 Xương khớp PV (Viên nang) 15 VNH087 Viên khớp Tâm Bình (Viên nang) 16 HCH096 Gout NQT (Hồn cứng) Số lô, hạn dùng, nơi sản xuất Số lô: 240615 Hạn dùng: 13/08/2018 SĐK: 22206/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH TM DP Trang ly Số lô: 010716 Hạn dùng: 01/07/2019 SĐK: 27306/2013/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Đông y Tuệ Đức Số lô: 011216 Hạn dùng: 27/12/2019 SĐK: 16874/2016/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH Dược phẩm Tuệ Đức Số lô: Không có Hạn dùng: Khơng có SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Thuốc gia truyền Số lô: 851216 Hạn dùng: 20/12/2019 SĐK: 21182/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty Dược phẩm Thương mại Phương Đông Số lô: 020516 Hạn dùng: 12/05/2019 SĐK: 13315/2013/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty CP Dược thảo Phúc Vinh Số lô: 08042016 Hạn dùng: 08/04/2019 SĐK: 8957/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH SX & TM Dược phẩm Tâm Bình Số lơ: Khơng có Hạn dùng: 05/07/2020 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Nhà thuốc YHCT Ngơ Quý Thích Liều dùng lần/ngày túi/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày gói/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày 15 viên/lần Tên thuốc STT Mã SP 17 VNN112 Gai cột sống (Viên nang) 18 VNH113 Phong Thấp Hoàng T.A.M (Viên nang) 19 VNN116 Dưỡng khớp linh (Viên nang) 20 HCN117 Thần kinh tọa thống hoàn (Hoàn cứng) 21 HCN118 Thấp khớp hoàn (Hoàn cứng) 22 VNN128 Tisore- Khu phong hóa thấp Xuân Quang (Viên nang) 23 VNN145 Viên xương khớp sutong (Viên nang) 24 HCN149 Độc hoạt ký sinh hồn (Hồn cứng) Số lơ, hạn dùng, nơi sản xuất Liều dùng Số lô: Z2017-01 Hạn dùng: 04/2020 SĐK: 5367/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty CP dược phẩm Tâm Anh Minh Số lô: AL0215-01 Hạn dùng: 08/2018 SĐK: 25831/2014/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty CP dược phẩm Tâm Anh Minh Số lô: 01/02/2016 Hạn dùng: 28/02/2019 SĐK: 32121/2015/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH KingPharm Số lô: 050417 Hạn dùng: 29/04/2019 SĐK: V66-H12-16 Nhà sản xuất: Cơ sở Linh Trung Số lô: 010317 Hạn dùng: 01/03/2019 SĐK: V118-H12-18 Nhà sản xuất: Cơ sở Linh Trung Số lô: 061116 Hạn dùng: 08/11/19 SĐK: V706-H12-10 Nhà sản xuất: Công ty TNHH Đông Dược Xuân Quang Số lô: 32/2016 Hạn dùng: 01/07/2019 SĐK: 11855/2015/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH Giai Cảnh Số lơ: Khơng có Hạn dùng: Khơng có SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Phước Thiên Đường – Nha Trang 2-3 lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần 30 viên/lần 30 viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần 3-5 viên/lần lần/ngày STT 25 Mã SP HCH155 Tên thuốc Viên xương khớp Linh Chi (Hoàn cứng) 26 VNN156 Gai cốt hoàn (Viên nang) 27 VNN160 Tuyết liên phong thấp linh (Viên nang) 28 VNN166 Hoạt lạc vương (Viên nang) 29 HCH175 Thuốc đặc trị chữa viêm đa khớp, thấp, cấp, gút (Hoàn cứng) 30 HCH176 Thuốc trị tận gốc bệnh đau nhức, mỏi khớp, gân, (Hồn mềm) Số lơ, hạn dùng, nơi sản xuất Số lô: 00604016 Hạn dùng: 07/04/2019 SĐK: 31692/2015/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH Đông Dược Vĩnh Xn Số lơ: Khơng có Hạn dùng: 01/04/2021 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: TA Ang Pharmaceutical, Hong Kong Số lơ: 5717 Hạn dùng: 05/01/2020 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: WeLip Pharma Số lô: 010816 Hạn dùng: 16/08/2019 SĐK: 17492/2016/ATTP-XNCB Nhà sản xuất: Công ty TNHH Tiêu Dao Số lơ: Khơng có Hạn dùng: 08/2019 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Hiệu thuốc gia truyền đời Quảng Thái Long, Thanh Hóa Số lơ: Khơng có Hạn dùng: 01/12/2019 SĐK: Khơng có Nhà sản xuất: Khơng có Liều dùng 2-3 lần/ngày 4-5 viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày viên/lần lần/ngày 2-3 viên/lần lần/ngày 20 viên/lần lần/ngày gói/lần Phụ lục 5: Hình ảnh mẫu dương tính Hình PL5.1 Mẫu dương tính VNN156 Hình PL5.2 Mẫu dương tính HCH176 Hình PL5.3 Mẫu dương tính HCH175 Hình PL5.4 Mẫu dương tính BN51 Hình PL5.5 Mẫu dương tính BN01 Phụ lục 6: Cơng thức thuốc chọn làm mẫu 6.1 Nền N1: Viên nang Độc hoạt tang ký sinh thang Bảng PL6.1 Công thức thuốc Độc hoạt tang ký sinh thang STT Thành phần Tên khoa học Khối lượng Độc hoạt Radix Angelicae pubescentis 12 g Tang ký sinh Herba Loranthi 8g Thục địa Radix Rehmanniae glutinosae praeparata 8g Đỗ trọng Cortex Eucommiae 8g Ngưu tất Radix Achyranthis bidentatae 8g Tế tân Radix et Rhizoma Asarii 8g Tần giao Radix Gentianae macrophyllae 8g Bạch linh Poria 8g Quế tâm Cortex Cinnamomi 8g 10 Phòng phong Radix Saposhnikoviae divaricatae 8g 11 Xuyên khung Rhizoma Ligustici wallichii 8g 12 Đảng sâm Radix Ginseng 8g 13 Cam thảo Radix Glycyrrhizae 8g 14 Đương quy Radix Angelicae sinensis 8g 15 Bạch thược Radix Paeoniae lactiflorae 8g 6.2 Nền N2: Bột Tam tý thang Bảng PL6.2 Công thức thuốc Tam tý thang STT Thành phần Tên khoa học Khối lượng Đảng sâm Codonopsis pilosula 24 g Hoàng kỳ Radix Astragali membranacei 36 g Bạch linh Poria 36 g Cam thảo Radix Glycyrrhizae 18 g Đương quy Radix Angelicae sinensis 36 g Xuyên khung Rhizoma Ligustici wallichii 36 g Bạch thược Radix Paeoniae lactiflorae 36 g Sinh địa Radix Rehmanniae glutinosae 48 g Đỗ trọng Cortex Eucommiae 30 g 10 Ngưu tất Radix Achyranthis bidentatae 48 g STT Thành phần Tên khoa học Khối lượng 11 Tục đoạn Radix Dipsaci 48 g 12 Tế tân Radix et Rhizoma Asarii 12 g 13 Quế tâm Cortex Cinnamomi 24 g 14 Tần giao Radix Gentianae macrophyllae 36 g 15 Độc hoạt Radix Angelicae pubescentis 36 g 16 Phòng phong Radix Saposhnikoviae divaricatae 30 g 6.3 Nền N3: Viên nén Đại tần giao thang Bảng PL6.3 Công thức thuốc Đại tần giao thang STT Thành phần Tên khoa học Khối lượng Tần giao Radix Gentianae macrophyllae 8g Thạch cao Gypsum Fibrosum 8g Đương quy Radix Angelicae sinensis 4g Bạch thược Radix Paeoniae lactiflorae 4g Xuyên khung Rhizoma Ligustici wallichii 4g Sinh địa Radix Rehmanniae glutinosae 4g Thục địa Radix Rehmanniae glutinosae praeparata 4g Bạch truật Rhizoma Atractylodis macrocephalae 4g Bạch linh Poria 4g 10 Cam thảo chích Radix Glycyrrhizae praeparata 4g 11 Hồng cầm Radix Scutellariae 4g 12 Phòng phong Radix Saposhnikoviae divaricatae 4g 13 Khương hoạt Rhizoma et Radix Notopterygii 4g 14 Độc hoạt Radix Angelicae pubescentis 4g 15 Bạch Radix Angelicae dahuricae 4g 16 Tế tân Radix et Rhizoma Asarii 2g Phụ lục 7: Hình ảnh mẫu Hình PL7.1 Nền mẫu N1 – Viên nang Độc hoạt tang ký sinh thang Hình PL7.2 Nền mẫu N2 – Bột Tam tý thang Hình PL7.3 Nền mẫu N3 – Viên nén Đại tần giao thang ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI THÁI KHOA BẢO CHÂU XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC GIẢM ĐAU CHỐNG VIÊM TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƯỢC BẰNG LC- MS/ MS LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN... dược, tiến hành đề tài: Xây dựng phương pháp xác định số thuốc giảm đau chống viêm trộn trái phép chế phẩm đông dược LC- MS/ MS” Với mục tiêu: Xây dựng phương pháp xác định đồng thời paracetamol,... Việt Nam xây dựng phương pháp phát thuốc giảm đau chống viêm trộn trái phép chế phẩm đơng dược Một số nhóm nghiên cứu tiến hành phát thuốc giảm đau chống viêm chế phẩm đơng dược dạng thuốc bột,