BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI THÚ Y ********* KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT TỶ LỆ DƯƠNG TÍNH VIRUS PCV2 TRÊN HEO BỊ BỆNH HƠ HẤP VÀ TỶ LỆ CÓ KHÁNG THỂ KHÁNG PCV2 TRÊN HEO KHỎE TRÊN ĐỊA BÀN TP.HỒ CHÍ MINH Sinh viên thực hiện: TRẦN HỮU NGHĨA Lớp: DH06TY Ngành: Thú y Niên khóa: 2006 – 2011 Tháng 08 / 2011 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NUÔI – THÚ Y ********* TRẦN HỮU NGHĨA KHẢO SÁT TỶ LỆ DƯƠNG TÍNH VIRUS PCV2 TRÊN HEO BỊ BỆNH HƠ HẤP VÀ TỶ LỆ CĨ KHÁNG THỂ KHÁNG PCV2 TRÊN HEO KHỎE TRÊN ĐỊA BÀN TP.HỒ CHÍ MINH Khố luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Bác sỹ thú y Giáo viên hướng dẫn TS LÊ ANH PHỤNG ThS HUỲNH THỊ THU HƯƠNG Tháng 08/2011 i XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên thực tập: Trần Hữu Nghĩa Tên khóa luận: “Khảo sát tỷ lệ dương tính virus PCV2 heo bệnh hô hấp tỷ lệ dương tính kháng thể kháng PCV2 heo khỏe địa bàn Tp.Hồ Chí Minh” Đã hồn thành sửa chữa luận văn theo yêu cầu giáo viên hướng dẫn ý kiến nhận xét, đóng góp Hội đồng chấm thi tốt nghiệp Khoa Chăn Nuôi – Thú Y ngày Giáo viên hướng dẫn TS LÊ ANH PHỤNG ii Lời Cảm Ơn Kính dâng cha mẹ Cha mẹ sinh thành, nuôi dưỡng suốt đời hi sinh để có ngày hơm Thành kính ghi ơn TS Lê Anh Phụng tận tình hướng dẫn động viên tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp Chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu Trường Đại Học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh Ban chủ nhiệm Khoa Chăn Nuôi Thú Y – Bộ Môn Vi Sinh – Truyền Nhiễm Cùng tồn thể q thầy, q tận tình giúp đỡ, dạy truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm q báu cho tơi suốt thời gian học tập Chân thành biết ơn Toàn thể cô anh chị Trạm chẩn Đoán Xét Nghiệm Điều Trị thuộc Chi Cục Thú Y Tp.Hồ Chí Minh Bs Nguyễn Thị Lệ Hằng, Ths Huỳnh Thị Thu Hương toàn thể anh chị kỹ thuật viên mơn Virus Huyết Thanh tận tình giúp đỡ cho suốt thời gian thực tập tốt nghiệp Cám ơn Tất bạn lớp Thú Y 32 lớp động viên giúp đỡ suốt thời gian học tập thực đề tài iii TÓM TẮT LUẬN VĂN Đề tài “Khảo sát tỷ lệ dương tính virus PCV2 heo bị bệnh hơ hấp tỷ lệ có kháng thể kháng PCV2 heo khỏe địa bàn Tp.Hồ Chí Minh” tiến hành trạm Chẩn Đoán Xét Nghiệm Điều Trị thuộc Chi Cục Thú Y Tp.HCM Qua thời gian thực nghiên cứu từ tháng 12/2010 đến tháng 6/2011, số hộ, sở chăn nuôi với quy mô khác thuộc địa bàn thành phố Hồ Chí Minh Chúng tơi khảo sát 38 mẫu bệnh phẩm ca heo bệnh có triệu chứng đường hô hấp nghi nhiễm virus PCV2 kỹ thuật Realtime RT-PCR để phát diện virus PCV2 607 mẫu huyết heo khỏe mạnh chưa tiêm phòng vaccine PCV2 kỹ thuật ELSIA để phát diện kháng thể kháng PCV2 Kết nghiên cứu sau: (1) Các ca heo bệnh hô hấp nghi nhiễm virus PCV2 gửi phòng thí nghiệm để xác định virus có tỷ lệ dương tính thấp (2 Heo khỏe số hộ, sở chăn nuôi thuộc địa bàn thành phố Hồ Chí Minh khảo sát chứa kháng thể kháng virus PCV2 tương đối cao (76,94 %) (3) Kháng thể kháng PCV2 xuất hầu hết hộ, sở chăn nuôi khảo sát địa bàn thành phố Hồ Chí Minh (4) Sự diện kháng thể kháng virus PCV2 hộ, sở chăn ni có quy mơ cơng nghiệp tập trung cao (91,7 %) (5) Kháng thể kháng virus PCV2 phát hạng heo nái với tỷ lệ cao (93,57%) hạng heo theo dõi trình nghiên cứu iv MỤC LỤC TRANG Trang tựa i Xác nhận giáo viên hướng dẫn ii Lời cảm ơn iii Tóm tắt luận văn iv Mục lục v Danh sách chữ viết tắt ix Danh sách bảng x Danh sách hình xi Danh sách sơ đồ biểu đồ xii Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu Chương TỔNG QUAN 2.1 Đặc điểm virus PCV2 2.1.1 Đặc điểm phân loại hình thái 2.1.2 Nuôi cấy 2.1.3 Sức đề kháng 2 Dịch tễ học 2.2.1 Phân bố bệnh 2.2.1.1 Phân bố giới 2.2.1.2 Lịch sử phân bố Việt Nam 2.2.2 Động vật cảm thụ bệnh 2.2.3 Chất có mầm bệnh v 2.2.4 Đường xâm nhập lây lan 2.2.5 Cơ chế sinh bệnh 2.2.6 Tính sinh miễn dịch Triệu chứng bệnh tích 2.3.1 Triệu chứng 2.3.2 Bệnh tích 2.3.2.1 Bệnh tích đại thể 2.3.2.2 Bệnh tích vi thể Chẩn đoán 2.4.1 Chẩn đoán lâm sàng 2.4.2 Chẩn đốn phòng thí nghiệm 10 2.4.2.1 Xét nghiệm tìm kháng thể chống lại virus PCV2 10 2.4.2.2 Xét nghiệm tìm virus PCV2 10 2.5 Các kỹ thuật sữ dụng nghiên cứu 11 2.5.1 Kỹ thuật PCR 11 2.5.1.1 Nguyên tắc chung 11 2.5.1.2 RT – PCR 12 2.5.1.3 Ứng dụng phương pháp PCR thú y nghiên cứu PCV2 13 2.5.2 Kỹ thuật ELISA 14 2.5.2.1 Nguyên tắc 14 2.5.2.2 Các phương pháp ELISA 14 2.5.2.3 Một số ứng dụng ELISA thú y nghiên cứu PCV2 16 2.6 Các biện pháp quản lý ngăn ngừa bệnh 16 2.7 Các nghiên cứu bệnh Porcine circovirus Việt Nam năm gần 18 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 Thời gian địa điểm 20 3.1.1 Thời gian 20 3.1.2 Địa điểm 20 vi 3.2 Vật liệu 20 3.2.1 Mẫu xét nghiệm 20 3.2.2 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm 20 3.3 Nội dung nghiên cứu 21 3.4 Phương pháp nghiên cứu 21 3.4.1 Bố trí cách lấy mẫu 21 3.4.1.1 Bố trí lấy mẫu 21 3.4.1.2 Cách lấy mẫu bệnh phẩm 22 3.4.1.3 Cách lấy mẫu huyết 22 3.4.2 Phương pháp pháp virus PCV2 mẫu 23 3.4.2.1 Sơ đồ chẩn đoán 23 3.4.2.2 Các bước tiến hành xét nghiệm 24 3.4.2.3 Phân tích kết 26 3.4.3 Phương pháp pháp kháng thể PCV2 mẫu huyết 26 3.4.3.1 Nguyên tắc 26 3.4.3.2 Cơ chế phản ứng 27 3.4.2.3 Tiến hành xét nghiệm 28 3.4.2.4 Đọc kết công thức tính tốn 29 3.5 Các tiêu theo dõi 30 3.6 Xử lý số liệu 30 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 4.1 Tỷ lệ heo phát virus 31 4.2 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 33 4.3 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo khu vực 34 4.4 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo quy mô chăn nuôi 36 4.5 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo hạng heo 38 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 40 5.1 Kết luận 40 5.2 Đề nghị 40 vii TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 PHỤ LỤC 49 viii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT PCV: Porcine Circovirus Ctv: Cộng tác viên DNA: Acid Deoxyribo Nucleic PCV1: Porcine Circovirus type PCV2: Porcine Circovirus type PMWS: Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome - Hội chứng còi heo cai sữa ORF: Open Reading Frame – khung đọc mở PK15: Pig Kidny Cell Line 15 - Tế bào thận heo PDNS: Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome - Hội chứng viêm da viêm thận PRRS: Porcine Reproductive & Respiratory Syndrome - Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp heo PCR: Polymerase Chain Reaction ELISA: Enzyme Linked Immunosorbent Assay IHC: Immunocytochenistry - Kỹ thuật mơ hóa miễn dịch tế bào ISH:in situ hybridisisation - Kỹ thuật lai mô RT – PCR: Reverse Transcriptase – Polymerase Chain reaction Ag: Antigen – kháng nguyên (KN) Ab: Antibody – kháng thể (KT) IFA: Immuno Fluorescent Assay - miễn dịch huỳnh quang Tp.HCM: thành phố Hồ Chí Minh CCTY Tp.HCM: Chi Cục Thú Y thành phố Hồ Chí Minh ix Bảng 4.4 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo quy mô Quy mô Số mẫu huyết Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Hộ gia đình 236 142 60,17 Bán CN 130 104 80 CN tập trung 241 221 91,7 TỔNG 607 467 76,94 P < 0,05 Từ Bảng 4.4 cho thấy kháng thể virus PCV2 xuất nhóm quy mơ chăn ni Tỷ lệ mẫu huyết có chứa kháng thể virus PCV2 thấp nhóm chăn ni hộ gia đình với 60,17 % (142/136), thứ hai nhóm chăn ni bán cơng nghiệp với 80 % (104/130), cao nhóm chăn ni cơng nghiệp tập trung với 91,7 % (221/241) Kết tương đồng với nhận định tác giả Lê Tiến Dũng (2006) cho trại có quy mơ chăn ni lớn tỷ lệ diện virus PCV2 cao Bởi quy mô quy mô lớn điều kiện trại có mầm bệnh PCV2 thải lan truyền mầm bệnh qua tiếp xúc, qua khí dung dễ Biểu đồ 4.2 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo quy mô 37 Đồng thời, Phân tích trắc nghiệm χ2 mẫu huyết heo có chứa kháng thể kháng virus PCV2 khảo sát theo quy mô chăn nuôi phân tích χ2 mẫu huyết heo có chứa kháng thể kháng virus PCV2 khảo sát theo tùng cặp quy mô chăn nuôi cho thấy khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Điều chứng tỏ diện virus PCV2 phụ thuộc vào quy mô chăn ni trại Trại có quy mơ lớn lưu hành virus PCV2 cao Bằng thực nghiệm, Dewey (2000) cho biết đường lây virus PCV2 chủ yếu qua hơ hấp Tác giả nhận định trại chăn nuôi công nghiệp, với quy mô chăn nuôi lớn, dãy chuồng dài mật độ đơng mầm bệnh PCV2 lan truyền từ heo sang heo khác dễ xảy và bệnh virus PCV2 gây có nguy phát triển nhiều yếu tố gây stress tác động 4.5 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo hạng heo Trong nghiên cứu, tiến hành chia heo thành hạng: nái, nọc, thịt Kết xét nghiệm huyết heo chứa kháng thể kháng virus PCV2 tổng số mẫu huyết khảo sát theo hạng heo trình bày Bảng 4.5 Bảng 4.5 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo hạng heo Hạng heo Số mẫu huyết Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Nái 280 262 93,57 Nọc 98 70 71,43 Thịt 229 135 58,95 TỔNG 607 467 76,94 38 P < 0,05 Biểu đồ 4.3 Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng PCV2 theo hạng heo Từ Bảng 4.5, cho thấy kháng thể kháng virus PCV2 xuất hạng heo Tỷ lệ mẫu huyết heo chứa kháng thể kháng virus PCV2 thấp heo thịt với 58,95 % (135/229), thứ hai heo nọc với 71,43 % (70/98), cao heo nái với 93,57 % (262/280) Heo nái nọc có tỷ lệ nhiễm cao heo nái heo nọc có thời gian sống lâu nên hội tiếp xúc với virus cao heo thịt Phân tích χ2 mẫu huyết heo khỏe mạnh có chứa kháng thể virus PCV2 khảo sát theo hạng heo cho thấy khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê sinh học nhóm hạng heo (P < 0,05) Đồng thời, phân tích χ2 mẫu huyết heo có chứa kháng thể kháng virus PCV2 khảo sát theo tùng cặp hạng heo cho thấy khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Điều chứng tỏ diện virus PCV2 phụ thuộc vào hạng heo Heo thời gian sống lâu khả nhiễm virus PCV2 cao Nhận định phù hợp với số tác giả nghiên cứu PCV2 hội chứng PMWS Harding (1997), Tregaskis ctv (2005)… nhiễm virus PCV2 có khác biệt theo độ tuổi 39 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua thời gian thực nghiên cứu từ tháng 12/2010 đến tháng 6/2011, tổng số hộ, sở chăn nuôi với quy mô chăn nuôi khác quận, huyện thuộc địa bàn thành phố Hồ Chí Minh Chúng khảo sát 38 mẫu bệnh phẩm ca heo bệnh có triệu chứng đường hơ hấp nghi nhiễm virus PCV2 607 mẫu huyết heo khỏe mạnh chưa tiêm phòng vaccine PCV2 Chúng rút kết luận sau: (1) Khi chẩn đốn virus PCV2 vào triệu chứng lâm sàng đường hơ hấp chưa đủ xác (2) Tình hình heo khỏe chứa kháng thể kháng virus PCV2 quận, huyện có heo khảo sát thuộc địa bàn thành phố Hồ Chí Minh tương đối cao (76,94 %) (3) Kháng thể kháng PCV2 xuất hầu hết hộ, sở chăn nuôi heo khảo sát quận, huyện thuộc địa bàn thành phố Hồ Chí Minh (4) Sự diện kháng thể kháng virus PCV2 hộ, sở chăn ni có quy mơ cơng nghiệp tập trung cao (91,7 %) Điều chứng tỏ trại có quy mơ lớn tỷ lệ dương tính cao (5) Kháng thể kháng virus PCV2 phát hạng heo nái với tỷ lệ cao (93,57 %) hạng heo chia trình theo dõi nghiên cứu 5.2 Đề nghị Đối với quan thú y: Khuyến cáo sử dụng kỹ thuật realtime RT-PCR kỹ thuật ELISA công tác chẩn đốn virus PCV2 kỹ thuật mang lại xác cao Hai kỹ thuật tốn nhiều kinh phí nên sử dụng chúng cơng tác chuẩn đốn phải tính tốn kỹ kinh tế 40 Đối với hộ, sở chăn nuôi: virus PCV2 có tính chất lây lan mạnh gây thiệt hại nề kinh tế nên trại chăn nuôi cần áp dụng biện pháp tiêm phòng vaccine virus PCV2 biện pháp an toàn sinh học, khống chế yếu tố gây stress, chọn lọc giống, cải thiện công tác quản lý, điều kiện vệ sinh chăn nuôi nhằm khống chế lây nhiễm virus PCV2 Đối với tác giả nghiên cứu PCV2: Tiếp tục khảo sát với số lượng mẫu lớn nhiều đối tượng heo, nhiều tỉnh thành nước, theo mùa vụ năm nhằm nắm rõ dịch tễ đề xuất hướng phòng kiểm sốt mầm bệnh PCV2 Khảo sát phân bố virus PCV2 nguồn tinh heo, dịch tiết hô hấp, nước tiểu, phân, máu… để có định hướng kiểm sốt nguồn virus đàn heo khỏe mang trùng PCV2 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang, 1999 Di truyền phân tử Nhà xuất Nông Nghiệp Chi Cục Thú Y Tp.HCM, 2009 Tập Huấn Lấy Mẫu Chi Cục Thú Y Tp.HCM, 2010 Quy trình xét nghiệm Lê Tiến Dũng, 2006 Phát virus PCV2 kĩ thuật PCR phân lập định danh vi khuẩn gây bệnh hô hấp heo nghi mắc hội chứng còi cọc sau cai sữa Luận văn thạc sĩ Chăn Nuôi – Thú Y Tủ sách đại học Nông Lâm Tp.HCM Hồ Huỳnh Thùy Dương, 2002 Sinh Học Phân Tử Nhà xuất Giáo Dục Nguyễn Tiến Hà, 2008 Ghi nhận tình hình nhiễm, phân lập giám định Porcine Circovirus Type (PCV2) heo số tỉnh phía nam Luận văn thạc sĩ nông nghiệp Đại học Nông Lâm Tp.HCM Nguyễn Thị Thu Hồng, Phan Hoàng Dũng, Đặng Hùng, Nguyễn Tiến Hà Chris Morrissy, 2006 Bước đầu khảo sát tình hình nhiễm PCV2 đàn heo ni số tỉnh thành phía Nam Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập XIII, số 3-2006, trang 67-69 42 Lâm Thị Thu Hương Đường Chi Mai, Trần Hoàng Vũ, 2005 Bước đầu ghi nhận diện porcine circovirus type heo biểu còi số trại heo cơng nghiệp thành phố Hồ Chí Minh vùng lân cận Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Nơng Lâm nghiệp, số 3/2005, trang 107-109 Đường Chi Mai, 2006 Phát PCV2 heo còi sau cai sữa kĩ thuật PCR Tủ sách đại học Nông Lâm Tp.HCM 10 Nguyễn Minh Nam, 2010 Giáo trình kĩ thuật ELISA nâng cao Khoa CNSH đại học Nông Lâm Tp.HCM 11 Nguyễn Đức Nhân, 2009 Đánh giá hiệu việc phòng hội chứng còi cọc sau cai sữa heo biện pháp tiêm phòng vaccin cho nái Luận văn thạc sĩ Chăn Nuôi – Thú Y Tủ sách đại học Nông Lâm Tp.HCM 12 Lê Đức Trình, 2001 Sinh học phân tử tế bào NXB khoa học kỹ thuật Tài liệu tiếng Anh 13 Allan G M., McNeilly F., Meehan B M., et al., 1999a Isolation and characterisation of circoviruses from pigs with wasting syndromes in Spain, Denmark and Norther Ireland Vet Microbiol 66: 115– 123 14 Beilage G E., Brakmann B., Hinrichs U., Opitz C., Tegeler R and Blaha T., 2003 The limited possibility to use results from routine diagnostics for epidemiological analyses of the PCV2-infection in swine herds 4th International symposium on emerging and re-emerging pig diseases, Rome, June – july 2003, p.168-169 43 15 Buhk H J., Tischer I., Koch M A., 1985 Cloning and sequencing of porcine circovirus (PCV) genome Zentralbe Bakteriol Org A., p.260:465 16 Calsamiglia M., Segales J., Quintana J., Rosell C and Domingo M., (2001) Detection of porcine circovirus types and in serum an tissue samples of pigs with and without postweaning multisystemic wasting syndrome J Clin Microbiol 40: 1848-1850 17 Charreyre C., Beseme S., Brun A., Bublot M., Sierra P and Vaganay A., 2005 Vaccination strategies for the control of circoviral diseases in pigs Intern Conf on Animal Circoviruses and Associated diseases, Queen’s University, Belfast, Nth ireland, UK, Keynote 9: 26-30 18 Darwich C., Strokappe J., Martin K and Meehan B., 2002 Post- weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS): Current European situation In Proceedings of the swine disease conference for swine practitioners 9: 142 – 155 19 Clark E G., 1997 Post-weaning multisystemic wasting syndrom Proc Am Assoc Swine Pract., 27th Annu Meet., p 499 – 501 20 Dewey C., 2000 Risk factors associated with postweaning multisystemic syndrome of swine (PMWS) www.gov.mb.ca/ca/agriculture/sesearch 21 Ellis J., Hassard L., Clark E., Harding J., Allan G., Willson P., Strokappe J., Martin K., Meehan B and Haines D., 1998 Isolation of circovirus from lesions of pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome Canadian Veterinary Journal 39: 44-51 44 22 Fenaux M., Halbur G P., Haqshenas G., Royer R., Thomas P., Gill M and Meng J X., 2002 Cloned genomic DNA of type porcine circovirus is infectious when injected directly into the liver and lymph nodes of pigs: characterization of clinical disease, disease, virus distribution and pathologic lesions Journal of virology 28:541-551 23 Harding J C., 1997 Post-weaning multisystemic wasting disease syndrome (PMWS): preliminary epidemiology and clinical presentation Proc Am Assoc Swine Pract., 27th Annu Meet., Quebec City, Canada, p.502-503 24 Harm P A., Halbur P G and Den S D., 2002 Three cases of porcine respiratory disease complex associated with porcine circovirus type infection J Swine Health Prod 10: 27-30 25 Harmel A.L., Lin L.L and Nayar G.P.S., 1998 Nucleotide sequence of porcine circovirus associated with posweaning multisystemic wasting syndrome in pigs J Virol 72(6): 5262-5267 26 Kawashima K., Tsunemitsu H and Katsuda K., 2003 Epidemiological situation of PMWS in Asia Bulletin of the National of the Institute of animal health 109: 9-16 (summary in English) 27 Kim J., Chung H K., Jung T., Cho W S., Choi C., Chae C., 2002 Post-weaning multisystemic wasting syndrome of pigs in Korea: prevalence, microscopic lesions and coexisting microorganisms J Vet Med Sci 64: 57-62 28 Krakowka S., Ellis J A., Rings M D and Allan G M., 2001 Activation of the immune system is the pivotal event in the production of wasting disease in pigs infected with PCV2 Vet Pathol 38: 31-46 45 29 Lekcharoensuk P., Morozov I., Paul S P and Meng J X., 2004 Epitope Mapping of the major capsid protein of type porcine circovirus by using chimeric PCV1 and PCV2 Journal of Virology 36: 8135-8145 30 Liu Q., Wang L., Willson P and Babiuk L A., 2000 Quantitative, competitive PCR analysis of porcine circovirus DNA in serum from pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome J Clin Microbiol 38: 34743477 31 Lukert P., Boer G F., Dale J L., Keese P., Randle J W and Tischer I., 1995 The circoviridae In virus taxonomy (Eds: F A Murphy, C M Fauquet, D H L Bishop, S A Ghabrial, A W Jarvis and M D Summers) Vienna and New York: Springer-Verlag, pp.166-168 32 Lyoo K S., Park B K., 2001 Prevalence of porcine reproductive and respiratory syndrome virus, porcine circovirus type and porcine parvovirus from aborrted fetuses and pigs with respiratory problems in Korea J Vet Sc (3): 201 – 207 33 Madec F., Rose N., Grasland B., Cariolet R., Jestin A., 2006 Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS) in pigs Why did it emerge? A call for better integration of knowledge French Food Safety Agency, Zoopole Les Croix, Ploufragan, France 34 Magar R., Larochelle R., Thibault S and Lamontagne L., 2000 Experimental transmission of porcine circovirus type in weaned pigs: a sequential study J Comp Pathol 123:258-269 46 35 Mahe D., Blanchard P., Truong C., Madec F and Jestin A., 2000 Differential recognition of ORF2 protein from type and type porcine circoviruses and identification of immunorelevant epitopes J Gen Virol 81: 1815-1824 36 Meehan B M., Creenlan J L., McNulty M S and Todd D., 1997 Sequence of porcine circovirus DNA: affinities with plant circovirus Journal of General Virology 78: 221-227 37 Misinzo G., Delputte P L., Meerts P., Lefebvre D J and Nauwynck H J., 2006 Porcine circovirus uses heparan sulfate and chondroitin sulfate B glycosaminoglycans as receptors for its attachment to host cells J virol 80(7): 3487-3494 38 Mori B., Sanchez R E., Nauwynck H J., Allan G M and Pensaert M B., 2001 Porcine circovirus infection in swine foetuses inoculated at different stages of gestation J Veterinary Microbiology 83(2): 169-176 39 Muirhead M., 2002 Postweaning multisystemic wasting syndrome and porcine dermatitis nephropathy syndrome http://www.thepigsite.com 40 Nawagitgul P., Morozov I., Bolin R S., Harm A P and Sorden D., 2000 Open reading frame of porcine circovirus type encodes a major capsid protein J Gen Virol 81: 2281-2287 41 Neumann E J., Sorden S D and Halbur P., 2002 Pork health fact sheetcircovirus infection in swine National Pork Board, American association of swine veterians 42 Ouardani M., Wilson L and Montpetit C., 1999 Multiplex PCR for detection and typing of circoviruses J Clin Microbiol 37 (12): 3917-3924 47 43 Pernek D., Halbur G P, Randle J W and Tischer I., 2002 Postweaning multisystemic wasting syndrome J Pig International 32 (2): 14-15 44 Royer R L., Nawagitgul P., Halbur P G et al., 2001 Susceptibility of porcine circovirus type to commercial and laboratory disinfectants J Swine Health Prod 9(6): 281-284 45 Segales J.M and Morvan H., 2004 PMWS: How to diagnose the herd case, in PCV2 disease from research back to the field 5th issue of the Merial White Book, 2004, Merial SAS 46 Stevenson W G., 2000 Porcine circovirus associated disease: lesions, concurrent infectious agents, efficacy of diagnostic tests in clinical samples and tissues and comparison of genomic homology Purdue University, India, NPPC project # 98-230 47 Tregaskis L P., McNeilly F., McNair I., McKay K., Duffy C and Allan G., 2005 Immunological longitudianal PMWS cohort study Deparment of Agriculture and Rural Development, Veterinary Sciences Division, Stormont, Belfast 48 Vigre H., Baekbo P., Jorsal S E and Botner A., 2005 Spatial and temporal patterns of pig herds diagnosed with PMWS during the first two years of its occurrence in Denmark J Vet Microbiol 100: 17-26 49 Synbiotics, Pháp, version n05, 08/04/2008 SCIRCO1.NA 48 PHỤ LỤC 1.Chi-Square Test: Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng virus PCV2 theo khu vực DUONG TI 90 85.40 AM TINH 21 25.60 Total 111 97 103.86 38 31.14 135 280 277.74 81 83.26 361 Total 467 140 607 Chi-Sq = 0.248 0.454 0.018 DF = 2, P-Value + 0.827 + + 1.513 + + 0.061 = 3.121 = 0.210 2.Chi-Square Test: Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng virus PCV2 theo quy mô chăn nuôi DUONG TI 104 100.02 AM TINH 26 29.98 Total 130 221 185.42 20 55.58 241 142 181.57 94 54.43 236 Total 467 140 607 Chi-Sq = 0.159 6.829 8.623 DF = 2, P-Value + 0.529 + + 22.781 + + 28.764 = 67.685 = 0.000 2.1 Chi-Square Test: bán công nghiệp công nghiệp tập trung DUONG TI 104 113.88 AM TINH 26 16.12 Total 130 221 211.12 20 29.88 241 Total 325 46 371 Chi-Sq = 0.857 + 6.058 + 0.462 + 3.268 = 10.645 DF = 1, P-Value = 0.001 49 2.2 Chi-Square Test: bán công nghiệp hộ gia đình DUONG TI 104 87.38 AM TINH 26 42.62 Total 130 142 158.62 94 77.38 236 Total 246 120 366 Chi-Sq = 3.162 + 6.483 + 1.742 + 3.571 = 14.958 DF = 1, P-Value = 0.000 2.3 Chi-Square Test: hộ gia đình cơng nghiệp tập trung DUONG TI 221 183.40 AM TINH 20 57.60 Total 241 142 179.60 94 56.40 236 Total 363 114 477 Chi-Sq = 7.707 + 24.542 + 7.871 + 25.062 = 65.183 DF = 1, P-Value = 0.000 Chi-Square Test: Tỷ lệ huyết heo chứa kháng thể kháng virus PCV2 theo hạng heo dt 262 215,42 at 18 64,58 Total 280 70 75,40 28 22,60 98 135 176,18 94 52,82 229 Total 467 140 607 Chi-Sq = 10,072 0,386 9,627 DF = 2, P-Value + 33,597 + + 1,289 + + 32,111 = 87,082 = 0,000 50 3.1 Chi-Square Test: nái nọc dt 262 245,93 at 18 34,07 Total 280 70 86,07 28 11,93 98 Total 332 46 378 Chi-Sq = 1,051 + 7,583 + 3,002 + 21,665 = 33,300 DF = 1, P-Value = 0,000 3.2 Chi-Square Test: nái thịt dt 262 218,39 at 18 61,61 Total 280 135 178,61 94 50,39 229 Total 397 112 509 Chi-Sq = 8,709 + 30,870 + 10,648 + 37,745 = 87,972 DF = 1, P-Value = 0,000 3.3 Chi-Square Test: nọc thịt dt 70 61,44 at 28 36,56 Total 98 135 143,56 94 85,44 229 Total 205 122 327 Chi-Sq = 1,193 + 2,005 + 0,511 + 0,858 = 4,568 DF = 1, P-Value = 0,033 51 ... HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI – THÚ Y ********* TRẦN HỮU NGHĨA KHẢO SÁT TỶ LỆ DƯƠNG TÍNH VIRUS PCV2 TRÊN HEO BỊ BỆNH HÔ HẤP VÀ TỶ LỆ CÓ KHÁNG THỂ KHÁNG PCV2 TRÊN HEO KHỎE TRÊN ĐỊA BÀN TP.HỒ CHÍ MINH. .. “KHẢO SÁT TỶ LỆ DƯƠNG TÍNH VIRUS PCV2 TRÊN HEO BỊ BỆNH HƠ HẤP VÀ TỶ LỆ CÓ KHÁNG THỂ KHÁNG PCV2 TRÊN HEO KHỎE TRÊN ĐỊA BÀN TP.HỒ CHÍ MINH 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích Đánh giá tỷ lệ dương. .. thực đề tài iii TÓM TẮT LUẬN VĂN Đề tài Khảo sát tỷ lệ dương tính virus PCV2 heo bị bệnh hô hấp tỷ lệ có kháng thể kháng PCV2 heo khỏe địa bàn Tp.Hồ Chí Minh tiến hành trạm Chẩn Đoán Xét Nghiệm